大鼠 腺切除后垂体前叶GAP—43免疫阳性神经纤维的发芽过程

目的 阐明大鼠双侧肾上腺切除理体前叶生长相关蛋白４３（ＧＡＰ－４３）免疫阳性神经纤维表达的量与术后时间点的关系,即轴芽的时间过程。方法 免疫组织化学ＡＢＣ法。结果 大鼠双侧肾上腺切除术后第４日垂体前叶ＧＡＰ－４３阳性表达显著增多,第２周有所下降,至第４周基本降至正常水平。结论大鼠在双侧肾上腺切除后,垂体前叶出现肽能神经纤维发芽,并围绕在腺细胞周围,该发芽过程于出现肽能神经纤维发芽,并围绕在腺细胞周     

大鼠坐骨神经损伤中GAP—43免疫电镜初步观察

目的：进一步研究ＧＡＰ－４３（生长相关蛋白４３）在周围神经损伤和再生中的表达部位及其作用。方法：采用免疫电镜技术对６只大鼠坐骨神经损伤和再衙的ＧＡＰ－４３表达情况作初步观察。结果：电镜观察发现大鼠腰骶髓神经元、背根神经节神经元、胶质细胞等胞浆和胞核表密集的ＧＡＰ－４３免疫反应颗粒沉积。结论：据结果和笔者筠有的ＧＡＰ－４３免疫组化研究，发现周围神经损伤和再生中，可引起ＧＡＰ－４３较广泛斩表达；其表达     

GAP—43免疫组化和AChE染色在大鼠坐骨神经损伤和再生实验中的…

采用ＰＡＰ免疫组化和ＡＣｈＥ染色技术对２５只大鼠坐骨神经损伤后不同时间的近段和远段神经的生长相关蛋白（ＧＡＰ－４３）表达和再生情况作了观察，结果显示：（１）坐骨神经切断损伤后产生免疫反应阳性，近段神经以７ｄ组染色最强，远段神经以１４ｄ组最强；（２）神经切断处和近切口处的远段神经ＡＣｈＥ染色有逐渐增强趋势，单位面积阳性纤维数从７ｄ后逐渐增加。根据结果，本对ＧＡＰ－４３的表达规律和ＡＣｈＥ染色的应用     

GAP－43免疫组化和AChE染色在大鼠坐骨神经损伤和再生实验中的应用

采用ＰAP免疫组化和ＡＣｈＥ染色技术对２５只大鼠坐骨神经损伤后不同时期的近段和远段神经的生长相关蛋白（ＧＡＰ－４３）表达和再生情况作了观察。结果显示：（１）坐骨神经切断损伤后产生免疫反应阳性，近段神经以７ｄ组染色最强，远段神经以１４ｄ组最强；（２）神经切断处和近切口处的远段神经ＡＣｈＥ染色有逐渐增强趋势，单位面积阳性纤维数从７ｄ后逐渐增加。根据结果，本文对ＧＡP－４３的表达规律和ＡＣｈＥ染色的应用及其意义进行探讨。     

白细胞介素-8样免疫阳性物质在大鼠垂体前叶中的存在和分布

目的：检测白细胞介素-8（IL－8）样免疫阳性物质在大鼠垂体前叶中的存在和分布．方法：用抗入IL－8多克隆抗体行ABC免疫组织化学染色．结果：正常大鼠垂体前叶存在IL－8样免疫阳性物质；阳性细胞主要位于大鼠垂体前叶的浅层区域；大鼠出生3d内已有免疫阳性物质存在，在15d左右形成其分布规律；IL－8样免疫阳性物质主要存在于GH细胞．结论：正常大鼠垂体前叶稳定性存在IL－8样免疫阳性物质，提示IL－8可能影响垂体前叶细胞增殖和（或）激素分泌，从而在神经内分泌免疫网络中发挥一定的作用。     

背根神经节组织中GAP-43基因克隆

目的：克隆新生大鼠背极神经节组织中生长相关蛋白－４３（ＧＡＰ－４３）基因。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ法,从新生大鼠背根神经节组织ｍＲＮＡ中扩增ＧＡＰ－４３基因ＣＤＳ区片段,克隆入Ｔ载体,并经序列测定。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出一特异产物与预期长度７７８ｂｐ相符,Ｔ载体克隆测序与ＧＡＰ－４３基因１００％同源。结论：采用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｔ载体技术获得了新生大鼠背根神经节组织中的ＧＡＰ－４３基因克隆。     

CGRP免疫反应神经纤维在大鼠胆总管与十二指肠连接处的分布

用免疫组织化学ＡＢＣ法，研究了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）免疫反应神经纤维在大鼠胆总管末端与十二指肠连接处的分布。大鼠的胆总管末端有较丰富的ＣＧＲＰ免疫反应神经纤维，它们多呈串珠（膨体）状，少数为无膨体的细长纤维。ＣＧＲＰ－ＩＲ纤维主要分布肌层及血管周围，在神经纤维的附近可见到含ＣＧＲＰ－ＩＲ阳性颗粒的肥大细胞。本实验为神经免疫调节机制的研究提供了形态学依据。     

半导体激光照射对大鼠神经损伤脊髓GAP—43表达的影响

研究１５ｍＷ半导体激光照射对大鼠损伤坐骨神经后脊髓中神经生长相关蛋白（ｇｒｏｗｔｈ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＡＰ－４３）表达的影响。方法９６只雄性ＳＤ大鼠制成坐骨神经损伤模型，１５ｍＷ半导体激光照射神经损伤部位，免疫组化方法观察脊髓内ＧＡＰ－４３表的变化。结果１ｗｋ内激光照射组和对照组无明显差异。第２周和４周时激光照射组脊髓内ＧＡＰ－４３表达明显高于对照组。第８周时激光照射组对照组     

白细胞介素—8样免疫阳性物质在鼠垂体前叶中的存在和分布

检测白细胞介素－８样免疫阳性物质在大鼠垂体前叶中的存在和分布。方法用抗人ＩＬ－８多克隆抗体行ＡＢＣ免疫组织化学染色。结果正常大鼠垂体前叶存在ＩＬ－８样免疫阳性物质阳性细胞主要位于大鼠垂体前叶的浅层区域；     

脑缺血再灌注后生长相关蛋白和突触素表达及其意义

（１）目的 研究脑缺血再灌注后生长相关蛋白－４３（ＧＡＰ－４３）和突触素ｐ３８表达的变化规律,探讨中枢神经损伤后修复的可塑性。（２）方法 成年健康雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３６只,随机分为实验组和对照组。采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注大鼠模型,应用免疫组织化学方法观察脑缺血再灌注后ＧＡＰ－４３和突触素ｐ３８的表达。（３）结果 脑缺血再灌注６ｈ后,ＧＡＰ－４３表达逐渐增高,第７天达高峰,以后逐渐降低,     

大鼠肾上腺切除后垂体前叶GAP-43免疫阳性神经纤维的发芽过程

目的　阐明大鼠双侧肾上腺切除后垂体前叶生长相关蛋白 43(GAP- 43)免疫阳性神经纤维表达的量与术后时间点的关系 ,即轴突发芽的时间过程 .方法　免疫组织化学ABC法 .结果　大鼠双侧肾上腺切除术后第 4日垂体前叶GAP- 43阳性表达显著增多 ,第 2周有所下降 ,至第 4周基本降至正常水平 .结论　大鼠在双侧肾上腺切除后 ,垂体前叶出现肽能神经纤维发芽 ,并围绕在腺细胞周围 ,该发芽过程于术后 4～ 7d达到高峰 ,第 2周开始下降 ,第 4周基本结束     

大鼠垂体前叶GAP-43样阳性神经纤维与腺细胞之间的关系

目的:在大鼠双侧肾上腺切除后,探讨垂体前叶内大量芽生的生长相关蛋白-43(GAP-43)样阳性(LI)神经纤维与各腺细胞之间的关系. 方法:将成年雄性SD大鼠15只随机分为5组(n=3),手术切除大鼠双侧肾上腺,1 wk后取垂体前叶标本分别进行抗GAP-43与抗促肾上腺皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)、黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、生长激素(GH)抗体的免疫组织化学双标染色,观察GAP-43-LI神经纤维与各腺细胞之间的关系. 结果:大鼠双侧肾上腺切除后,垂体前叶内GAP-43-LI神经纤维表达数量显著增加,提示垂体前叶内神经纤维正在进行活跃的芽生及突触改建,并与含ACTH、PRL、GH的细胞密切相关. 结论:垂体前叶内芽生的神经纤维与腺细胞密切相关,可能具有一定的特异性,为哺乳动物垂体前叶神经-体液双重调节假说提供了又一论据.     

Effects of NGF and TrkA on GAP-43^＋ nerve regeneration in rat autotransplanted splenic tissue

Objective：To study the time-course of the regeneration of GAP-43^＋ nerve, and the effects of NGF and TrkA on this process. Methods： Adult Wistar rats underwent splenectomy and splenic autotransplantation, or sham-operation. On day 7, 14, 30, 60, 90, 120, and 180 after surgery, the density of GAP-43^＋ nerve fibers in spleen tissues were measured with the immunohistochemistry followed by computer image analysis. The expressions of GAP-43, NGF and TrkA were determined with in situ hybrdization, and their mRNA levels were detected with RT-PCR and image analysis qualification. Results： （1） The GAP-43^＋ nerve fibers began their regeneration on 30 d after operation and extended from greater omentum into splenic autotransplants. Density of the nerve fibers gradually became greater and almost normal 180 d after operation. （2） In splenic autografts, the mRNA expression of GAP-43, NGF and TrkA appeared on day 30 after the operation, gradually reached the peak on day 90. Conclusion： The renascent GAP-43^＋ nerve fibers may come from the greater omentum packaging the splenic autografts and NGF and TrkA can promote the nerval regeneration in the autotransplant spleen tissues.     

脊髓内移植纤维蛋白胶包裹嗅粘膜固有层促进损伤轴突再生

目的：将富含嗅神经鞘细胞的大鼠嗅粘膜固有层(OLP)碎片裹以纤维蛋白胶(FG)，移植到脊髓全横断断端间隙内，观察对脊髓两断端连接及轴突再生的影响。方法：成年雄性SD大鼠24只，全横断胸10节段脊髓。分别于脊髓断端间隙内移植OLP(OLP组)、FG包裹的OLP(FG-OLP组)或等量的FG(FG组)，每组6只；另6只仅行脊髓横切（单纯全切组）。10wk后处死动物，取材观察四组大鼠脊髓断端的连接情况。再取损伤区2cm范围脊髓节段，行冰冻水平切片，免疫组化ABC法染色，观察神经丝（NF）和生长相关蛋白－43(GAP－43）免疫组化染色阳性神经纤维的分布与形态，同时行NF和GAP－43的免疫荧光双标染色，激光共聚焦显微镜下观察两者的相互关系及形态异同。结果：单纯全切组和OLP组脊髓两断端连接较差;FG组和FG－OLP组断端连接较好，少有空洞。单纯全切组和FG组损伤区可见少量NF及GAP－43免疫组化染色阳性纤维，分布弥散，纤维细小，排列方向凌乱。OLP组可见较多NF及GAP－43免疫组化染色阳性纤维，但未见跨越脊髓横切部位；而FG－OLP组损伤区内有大量NF及GAP－43免疫组化染色阳性纤维，并跨越脊髓横切部位。NF和GAP－43免疫荧光双标结果显示，二者在损伤区的分布相同。结论：脊髓断端间隙内移植FG包裹的OLP碎片可促进脊髓两断端的连接及轴突的再生。     

促进大鼠移植肝自主神经再生的实验研究

目的建立一个能促进大鼠原位肝移植后,移植肝自主神经再生的动物模型。方法180只SD大鼠分成普通同种异体原位肝移植组（Ⅰ组）、改良同种异体原位肝移植组（Ⅱ组）、改良同种异体原位肝移植＋局部注射睫状神经营养因子组（Ⅲ组）以及正常成年对照组（C组）：Ⅱ组在常规肝移植手术（Ⅰ组）的基础上,术中显微缝合右迷走神经的肝支,缝合肝十二指肠韧带,尽量减少剥离肝门部的结缔组织;Ⅲ组在Ⅱ组基础上,在迷走神经吻合口附近及肝门部结缔组织中注射1μg／ml的睫状神经营养因子共50μl。分别在术后3d、1周、2周、3周、4周、8周时间取大鼠肝组织、肝门部组织以及迷走神经肝支所在的韧带组织,分别采用生长相关蛋白（growth-associatedprotein-43,GAP-43）、NF200抗体进行免疫荧光整块组织染色,在体视学荧光显微镜下观察照相,并用Tiger图像分析软件进行图像分析,最后采用SPSS13．0对数据进行统计学分析。结果术后3d,Ⅱ组、Ⅲ组大鼠迷走神经肝支吻合VI可见大量GAP-43阳牲着色的再生神经纤维通过;术后7d,肝门部组织中可见GAP-43阳性着色的呈网状的再生神经纤维,顺胆总管方向排列;术后2～4周,肝组织中可见GAP-43、NF200阳性着色的神经纤维,8周时GAP-43染色转为阴性;Tiger图像分析系统统计2周、4周时1cm×1cm×0．1cm单位体积内再生神经纤维的长度,结果显示Ⅱ组、Ⅲ组显著高于Ⅰ组（P〈0．01）,Ⅲ组和Ⅱ组之间的差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论改良的同种异体原位肝移植手术,能促进移植肝自主神经再生。     

坐骨神经损伤后生长相关蛋白表达的免疫组化研究

目的：探讨周围神经在损伤后远侧端生长相关蛋白（GA9－43）的表达。方法：切除SD大鼠－侧坐骨神经5mm,造成坐骨神经缺损伤模型,两周后用免疫组化法检测损伤远侧端神经组织中GAP－43的表达,结果：损伤神经远侧端雪旺细胞表可见棕色阳性产物,而正常神经组织中未见阳性反应产物。结论：损伤神经远侧端雪旺细胞中可见GAP－43表达,在正常神经组织中GAP－43低表达或无表达。     

Effects of Continuous Sciatic Nerve Block by Tetrodotoxin on Growth Associated Protein-43 Expression in Dorsal Root Ganglions of Normal and Sciatic Nerve Injury Rats

Growth associated protein-43(GAP-43) is considered to be one of the most useful molecular markers for the neural development,nerve regeneration,and neuroplasticity     

Nogo-A基因敲除鼠视神经损伤后修复的实验研究

目的评价Nogo—A基因在视神经损伤后修复机制中的作用。方法Nogo-A基因敲除联合视神经损伤鼠为实验组（20只）,C57BL／6小鼠联合视神经损伤作为对照组（20只）。制备视网膜、视神经冰冻切片,采用免疫荧光技术检测视网膜神经节细胞和视神经中生长相关蛋白（GAP）43的表达。进行视网膜神经节细胞体外培养,进行GAP-43染色,采用图像分析系统计算细胞轴突长度。结果视神经中GAP-43表达：夹伤后1、3、7d对照组中表达少量GAP-43,实验组中GAP-43表达明显高于对照组（t=2．12,3．56、2．63,均P〈0．01）。GAP-43抗体染色可见着色在体外培养RGC轴突,实验组3d有较长轴突生长,对照组3d有较短轴突生长。RGC于培养1、3及7d,经自动图像分析系统处理,得出细胞突起长度,实验组突起长度明显高于对照组（F=41．36、31．23,均P〈0．01）。结论Nogo—A基因在抑制视神经损伤后轴突再生机制中起重要作用。     

眼镜蛇毒神经生长因子对去部分背根猫脊髓背角内GAP-43表达的影响

目的观察眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子(NGF)对去部分背根猫脊髓背角内生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。方法对45只成年雄性家猫切除一侧L1-L5、L7-S2背根节,保留L6背根及背根节为备用背根,按给药剂量将动物分成小剂量NGF组(1μg/kg)、大剂量NGF组(2μg/kg)和生理盐水对照组,每组15只,术后分别存活3、6、12d,对L6节段脊髓作GAP-43免疫组织化学检测。结果术后术侧GAP-43阳性反应产物主要分布在脊髓、、板层的神经终末;中央管室管膜细胞呈阳性反应;脊髓前角神经毯呈阳性反应,整个脊髓板层未见阳性反应的神经元。术后3d,三组术侧、、板层即有GAP-43阳性神经纤维的表达;术后6d,三组GAP-43阳性神经纤维数量明显增多,至术后第12d,神经纤维数量增加达高峰,治疗组神经终末数量增加明显,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),不同时间段均以大剂量组的增多尤为显著。结论蛇毒NGF能有效诱导脊髓损伤修复过程中神经元GAP-43的合成而促进保留背根的侧支出芽,其密度与蛇毒神经生长因子的治疗剂量有关。