端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸抑制肺癌细胞端粒酶活性和诱导细胞凋亡

目的 研究端粒酶逆转录酶（hTERT)基因反义寡核苷酸（ASODN）对肺癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法 实验分为ASODN组、正义寡核苷酸（SODN）组和空白对照组,所用ASODN和SODN的浓度分别为10μmol/L,脂质体为16mg/L,采用端粒重复扩增法、逆转录－聚合酶链反应、Western Blot及流式细胞术分别观察各组端粒酶活性、hTERP mRNA和蛋白质表达以及细胞凋亡。结果 ASODN组显著下调或抑制肺癌细胞端粒酶活性和hTERT表达,但直到第21天才出现细胞凋亡增多。结论 端粒酶活性与hTERT表达密切相关。     

姜黄素对卵巢癌细胞凋亡的影响

目的观察姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将SKOV3随机分为空白组、顺铂组、姜黄素组、联合组。除空白组外,顺铂组加入终浓度为2.5μmol/mL的顺铂、姜黄素组加入终浓度为10μmol/mL的姜黄素、联合组加入顺铂2.5μmol/mL和姜黄素10μmol/mL,均作用24 h。采用RT-PCR检测各组细胞中表皮生长因子受体(EGFR),用流式细胞术分析细胞周期、凋亡率。结果与空白组相比,顺铂组、姜黄素组、联合组细胞中EGFR表达明显下降,P均<0.01,顺铂组、姜黄素组、联合组细胞凋亡率、G0/G1期细胞增高,G2/M期细胞降低(P均<0.05);联合组EGFR相对表达量低于、细胞凋亡率和G0/G1期细胞高于顺铂组和姜黄素组(P均<0.05),顺铂组与姜黄素组EGFR表达、细胞凋亡率及G0/G1期细胞相近(P均>0.05)。结论姜黄素能有效促进卵巢癌细胞凋亡,其机制与下调细胞中EGFR表达有关;与单独用药比较,姜黄素联合顺铂的抑瘤作用明显增强。     

罗哌卡因对人结肠癌顺铂耐药细胞株顺铂敏感性的增强作用及其机制

目的 观察罗哌卡因对人结肠癌顺铂耐药细胞株顺铂敏感性的增强作用，并进一步探讨其作用机制。方法通过浓度递增法将人结肠癌LOVO细胞暴露于顺铂中诱导顺铂耐药株LOVO/DDP形成。将LOVO和LOVO/DDP两种结肠癌细胞株分别分为罗哌卡因联合顺铂组、罗哌卡因组、顺铂组、对照组。对照组加入细胞培养液，顺铂组加入细胞培养液和1.0μmol/L浓度顺铂，罗哌卡因联合顺铂组加入细胞培养液后再同时加入1.0μmol/L浓度顺铂及1 mmol/L浓度罗哌卡因培养。培养14 d，采用平板克隆实验观察细胞增殖能力。培养48 h后，采用Transwell和流式细胞术观察细胞迁移、凋亡情况；JC-1和ROS实验测定细胞线粒体膜电位和活性氧（ROS）;Western blotting法、免疫荧光法检测细胞株中MMP-9及铁死亡相关蛋白GPX4、Nrf-2、SLC7A11；亚铁离子染色法检测结肠癌细胞株中亚铁离子。结果 LOVO细胞中，与对照组比较，顺铂组LOVO细胞株克隆体的形成减少、迁移细胞株数减少、MMP-9蛋白水平降低、凋亡率升高、存活率降低，罗哌卡因组克隆体形成数、迁移细胞株数、MMP-9蛋白水平、细...     

端粒酶在整倍体与非整倍体细胞中的表达差异

目的探讨端粒酶在HCT116整倍体细胞与非整倍体细胞中的表达差异及其端粒酶抑制剂,叠氮脱氧胸苷(AZT)对整倍体和非整倍体细胞h TERT基因表达及端粒酶活性变化的影响。方法取HCT116细胞加入盐酸强力霉素16 h后撤药,设为非整倍体组;另取HCT116细胞不作任何处理,称为整倍体组;在撤药后第11天,分别采用0、100、250μmol/L的AZT处理两组细胞72 h,分别设立空白对照组和AZT处理组。采用染色体滴定法对两组细胞的染色体进行计数。采用Western blot检测撤药后第3、6、11天MAD2L1蛋白的表达。运用RT-PCR法检测整倍体组、非整倍体组及AZT处理组h TERT基因的表达,端粒酶活性试剂盒检测端粒酶活性。结果盐酸强力霉素可以通过破坏MAD2L1诱导非整倍体,非整倍体率可达到78%;整倍体组和非整倍体组细胞在第6、8、11天h TERT mRNA基因的表达量分别为(1︰1.19±0.05、1︰1.21±0.02、1︰1.46±0.04),端粒酶活性分别为(2.87±0.01︰3.14±0.10、2.89±0.01︰3.25±0.03、2.79±0.03︰4.26±0.15),非整倍体组细胞的h TERT mRNA基因的表达量、端粒酶活性明显高于整倍体,两组细胞在第6、8、11天比较具有统计学差异(P0.05);整倍体组细胞在100、250μmol/L处的h TERT mRNA基因下降率分别为5%、32%,端粒酶活性下降率为14.69%、25.40%;非整倍体组细胞在100、250μmol/L处的h TERT mRNA基因下降率分别为38.46%、51.28%,端粒酶活性下降率为17.00%、74.59%。两组细胞h TERT mRNA基因下降率在100、250μmol/L处具有统计学差异(P0.05)。两组细胞端粒酶活性下降率在250μmol/L处具有统计学差异(P0.05)。结论盐酸强力霉素可以诱导非整倍体形成,非整倍体细胞的端粒酶活性及h TERT基因表达高于整倍体细胞,AZT可以抑制整倍体细胞和非整倍体细胞h TERT基因的表达及端粒酶活性,非整倍体细胞对AZT更敏感。     

异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联用对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的观察异常黑胆质成熟剂总酚（简称总酚）与顺铂、多西他赛联用对体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期HeLa细胞接种于96孔板,加入0、50、75、100、125μg/ml总酚,然后加入0.1、1、5μg/ml顺铂或5、10、20μg/ml多西他赛,培养24、48、72 h,每孔设只加相同浓度顺铂或多西他赛的对照孔和只加培养液的对照孔。用MTT法检测细胞增殖抑制率。取对数生长期的HeLa细胞接种到培养瓶中,分别加入5μg/ml顺铂、20μg/ml多西他赛、50μg/ml总酚、5μg/ml顺铂＋50μg/ml总酚、20μg/ml多西他赛＋50μg/ml总酚,并设对照组,培养48 h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光倒置显微镜下观察细胞生长情况。结果用总酚联合顺铂、多西他赛培养的HeLa细胞与相同浓度顺铂、多西他赛培养者相比,细胞增殖抑制率和凋亡率更高（P均〈0.05）,形态学改变更明显。结论总酚与顺铂、多西他赛联用能显著抑制HeLa细胞的增殖,促进其凋亡。总酚与顺铂、多西他赛联用有协同作用。     

hTERT siRNA对宫颈癌Hela细胞增殖及化疗敏感性的影响

目的探讨靶向人端粒酶反转录酶（hTERT）siRNA对宫颈癌Hela细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法实验分为hTERT siRNA组、Control siRNA组、空载体组及空白细胞组,分别以hTERT siRNA、Control siRNA及空载体转染宫颈癌Hela细胞。采用real time-PCR法及Western blot法检测各组细胞hTERT mRNA及蛋白表达,MTT法检测24、487、29、6 h细胞增殖活性。并对上述各组细胞分别用不同浓度顺铂、博来霉素处理,MTT法检测细胞存活率及两种化疗药物的IC50。结果与其余各组相比,hTERT siRNA组hTERT mRNA及蛋白水平表达明显降低（P〈0.05）,细胞增殖受到抑制,顺铂、博来霉素的IC50显著下降。结论 hTERT siRNA可显著抑制宫颈癌Hela细胞中hTERT基因的表达,抑制细胞增殖,并提高细胞对化疗药物的敏感性。     

右美托咪定对多塞平诱导PC12细胞凋亡的影响

目的观察右美托咪定对多塞平诱导PC12细胞凋亡的影响。方法将PC12细胞接种于培养板中,采用随机数字表法分为4组,正常对照组不做任何处理;多塞平组培养液中加入多塞平,终浓度为120μmol/L;右美托咪定组培养液中加入右美托咪定,终浓度为1μmol/L;多塞平+右美托咪定组培养液中加入多塞平和右美托咪定,终浓度分别为120μmol/L和1μmol/L。各组孵育24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜下观察细胞形态并采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与正常对照组相比,多塞平组能够促进PC12细胞凋亡,并降低其存活率,差异具有统计学意义(P0.05),而右美托咪定组对PC12细胞无实际影响,多塞平加右美拉咪定组能够改善多塞平诱导细胞凋亡的现象,提高细胞存活率,与多塞平组相比差异显著(P0.01)。结论右美托咪定能明显改善多塞平诱导的PC12细胞凋亡。     

人参皂苷增加顺铂抗肺癌A549细胞活性的机理研究

目的观察人参皂苷与顺铂联合作用肺癌A549细胞的细胞毒作用,探索相关作用机制。方法 MTT实验检测人参皂苷、顺铂对人肺癌A549细胞的细胞毒作用;提取药物处理细胞总蛋白,Western blot检测细胞survivin蛋白的表达变化;Annexin V/PI双染、流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果人参皂苷和顺铂对肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)值分别为(43.26±3.27)和(2.34±0.15)μmol/L;20、40μmol/L人参皂苷与顺铂联合作用A549细胞,顺铂对A549细胞的IC50值减少为(1.42±0.33)、(0.61±0.04)μmol/L,P<0.01。Western blot检测显示人参皂苷剂量依赖性的降低肺癌A549细胞survivin蛋白的表达。流式细胞仪凋亡检测显示人参皂苷使顺铂诱导的细胞凋亡增加(P<0.01)。结论人参皂苷可以显著增加顺铂对肺癌A549细胞的致凋亡作用,下调survivin蛋白表达可能是其增敏的主要机制。     

健脾散结方对Lewis肺癌小鼠细胞相关凋亡蛋白及端粒酶活性的影响

目的观察健脾散结方对Lewis肺癌小鼠细胞相关凋亡蛋白及端粒酶活性的影响。方法选用C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌细胞建立动物模型,按实验分组分别干预21 d,观察肿瘤生长情况,采用SABC免疫组化法检测Survivin、c-myc表达,PCR-ELISA法检测端粒酶活性。结果健脾散结方组、顺铂组、联合组的抑瘤率分别为42.36%、57.38%、69.71%;与模型组比较,各药组均可降低Survivin与c-myc表达(P0.05或P0.01),且联合组最明显,健脾散结方与顺铂有协同作用;各药组端粒酶活性均低于模型组(P0.05),且健脾散结方组、顺铂组与联合组比较均有显著差异(P0.05)。结论健脾散结方抑制肿瘤作用可能与下调Survivin、c-myc表达,诱导细胞凋亡,抑制端粒酶活性有关。     

EZH2抑制剂联合顺铂对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨EZH2抑制剂UNC1999联合顺铂对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法传代培养人肺癌A549细胞系,取生长良好的传代细胞分为对照组、联合用药组、顺铂组和UNC1999组。所有组均给予RPMI 1640培养液及10%的胎牛血清培养,对照组不加药液,联合用药组分别加入10、20、40、80、160 nmol/L UNC1999药液及2.5、5、10、20、40μg/ml顺铂药液;顺铂组分别加入2.5、5、10、20、40μg/ml顺铂药液;UNC1999组分别加入10、20、40、80、160 nmol/L的UNC1999药液;采用MTT比色法检测各组细胞增殖抑制率中IC50及联合指数(CI)。Western印迹法检测各组相关凋亡蛋白及细胞外调节蛋白激酶(ERK)及p-ERK的表达水平。流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果与对照组相比,UNC1999组、顺铂组、联合用药组细胞增殖均受到不同程度抑制(P0.05)。各组细胞增殖抑制作用存在剂量-时间依赖关系,且UNC1999与顺铂存在协同作用。UNC1999组、顺铂组、联合用药组与对照组比较细胞凋亡差异显著(P0.05)。UNC1999组、顺铂组、联合用药组中凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达明显升高,p-ERK蛋白表达明显降低,联合用药组Bcl-2表达低于对照组(P0.05)。结论 EZH2特异性抑制剂UNC199可能通过抑制MAPK-ERK细胞通路起到抑制肺癌A549细胞增殖,促进其凋亡,与顺铂单药或联合均具有协同效应。     

LY-294002对人宫颈癌细胞株Bcl-2表达的影响

目的探讨不同浓度磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂(LY-294002)对人宫颈癌细胞株Bcl-2表达的影响。方法培养人宫颈癌Hela细胞,分为对照组和LY294002干预组,干预组再细分为4个亚组,分别以终浓度为5、10、20、40μmol/L的PI3K抑制剂LY294002处理人宫颈癌Hela细胞,作用48 h。Western印迹方法和RT-PCR方法检测各组人宫颈癌细胞株Bcl-2表达变化。结果 Western印迹方法检测发现,对照组宫颈癌细胞株有大量的Bcl-2阳性表达,与对照组相比在以终浓度为5μmol/L的LY294002处理48 h后,宫颈癌细胞株的Bcl-2阳性表达迅速降低(P<0.05),随着LY294002终浓度的升高,宫颈癌细胞株的Bcl-2阳性表达也随之降低。RT-PCR方法检测Bcl-2 mRNA时发现,Bcl-2 mRNA的表达也随着LY294002的终浓度的升高而降低。结论 LY-294002能够降低人宫颈癌细胞Bcl-2的表达。     

顺铂对食管癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的 研究顺铂对食管癌细胞周期和端粒酶活性的影响，为其临床应用提供理论依据。方法 用2μg/ml顺铂处理食管癌EC9706细胞，流式细胞仪分析细胞周期的改变，TRAP—ELISA法检测细胞端粒酶活性的改变。结果 顺铂可使食管癌细胞阻滞于S期，诱导细胞凋亡；同时降低食管癌端粒酶活性。结论 顺铂对食管癌有治疗作用，端粒酶活性可作为观察食管癌化疗疗效的一个指标。     

白藜芦醇对人喉鳞癌细胞增殖的影响及其机制探讨

目的观察白藜芦醇对喉鳞癌细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法用不同浓度（12.5、25、50、100、200、400μmol/L）的白藜芦醇处理人喉鳞癌Hep-2细胞24、48、72 h,为白藜芦醇组。对照组不加白藜芦醇。采用MTT法测算Hep-2细胞增殖抑制率,采用TRAP-ELISA法检测Hep-2细胞端粒酶活性,采用W estern b lot法检测Hep-2细胞中的人端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白。结果白藜芦醇组Hep-2细胞增殖明显受到抑制,且呈浓度依赖性;细胞端粒酶活性受到抑制,hTERT蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性。结论白藜芦醇可抑制喉鳞癌细胞增殖,与其下调癌细胞hTERT表达、抑制端粒酶活性有关。     

应用P38抑制剂降低结肠癌细胞AKT的表达

目的探讨P38抑制剂SB203580对顺铂杀伤作用及耐药性产生的影响。方法以结肠癌细胞HCT-116为实验对象。设定P38MAPK特异性抑制剂SB203580的浓度20 mg/L、顺铂的浓度100μmol/L,两者合用处理结肠癌HCT-116细胞株。MTT法和流式细胞术检测顺铂(Ⅰ组)和SB203580+顺铂(Ⅱ组)对结肠癌细胞株HCT-116生长及凋亡的影响,RT-PCR检测顺铂和SB203580+顺铂在转录水平上AKT的表达。结果顺铂与SB203580联合后对HCT-116细胞增殖的抑制及致凋亡作用显著增强;顺铂与SB203580联合后可以显著降低AKT的表达水平。结论 SB203580提高顺铂对结肠癌细胞株HCT-116的杀伤效果及降低顺铂耐药性的产生。     

Tumstatin185～191对人肺腺癌细胞的抑制作用及其与蛋白激酶B和细胞外调节蛋白激酶活性的关系

目的 观察Tumstatin185～191对肺腺癌细胞增生与凋亡的影响,探讨其与蛋白激酶B(Akt)及细胞外调节蛋白激酶(ERK)活性的关系.方法 以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,分别给予不同浓度的Tumstatin185～191、顺铂及Tumstatin185～191联合顺铂进行干预,以四唑盐比色法测定A549细胞的增殖情况;流式细胞仪检测分析A549细胞凋亡的变化;Western blot检测细胞内磷酸化的Akt(p-Akt)及磷酸化的ERK(p-ERK)蛋白表达水平.结果 Tumstatin185～191对A549细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为73.7μmol/L,顺铂对A549细胞的IC_(50)为5.2μmol/L,当顺铂与20μmol/L或40μmol/L的Tumstatin185～191联合应用时,顺铂对A549细胞的IC_(50)分别下降为3.5 μmol/L和1.4μmol/L;两药联合使用时,A549细胞的早期凋亡率为(19.34±0.97)%,较顺铂[(12.5±2.1)%]和Tumstatin185～191单用[(9.6±1.6)%]的早期凋亡率显著增加(F=5.74,P<0.01);Western blot检测显示p-Akt及p-ERK在未经干预的A549细胞内均呈高表达状态,Tumstatin185～191可显著抑制p-Akt及p-ERK的表达,顺铂则无明显影响;Tumstatin185～191与顺铂联合使用并不增加Tumstatin185～191对p-Akt及p-ERK的抑制效应.结论 Tumstatin185～191单药或联合顺铂对于A549细胞均有显著抑制作用,Tumstatin185～191能够增加A549细胞对顺铂的敏感性;Tumstatin185～191可能通过下调A549细胞内p-Akt及p-ERK水平发挥其抑制细胞生长、促进细胞凋亡的作用.     

葛根素对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响及机制研究

目的分析葛根素对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响及其机制.方法取处于对数生长期的HeLa细胞,分别加入不同剂量为0、12.5、25、50μmol/L的葛根素,按照剂量分为四组,不加药物的正常细胞视为对照组.经处理2 d后采用MTT法和流式细胞术检测葛根素对HeLa细胞体外增殖抑制和诱导凋亡水平;采用Western blotting法检测葛根素对β-catenin、Wnt、p21、p53及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.结果在12.5~50μmol/L浓度范围的葛根素能抑制HeLa细胞增殖并促进细胞凋亡,呈良好的剂量依赖关系,促进Bax表达,减少β-catenin、Wnt、p21、p53及Bcl-2的表达,呈浓度依赖性.结论葛根素能够对宫颈癌HeLa细胞的增殖进行显著抑制并诱导HeLa细胞凋亡,其作用机制与抑制β-catenin/Wnt/p53信号通路有关.     

全硫代反义寡核苷酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响

目的 本研究探讨全硫代反义寡核苷酸( PS-ASODN)对乳腺癌MDA-MB-231细胞端粒酶活性及细胞生长、迁移、侵袭的影响.方法 本实验将PS-ASODN经脂质体转染作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞,将实验分为空白对照组、对照正义全硫代寡核苷酸(PS-SODN)组和不同剂量的PS-ASODN组;脂质体介导的PS-ASODN和PS-SODN作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞后,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附法(EUSA)、流式细胞术、Transwell小室迁移、侵袭实验检测细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡、细胞迁移、侵袭能力的影响.结果 终浓度为1、3及5 μmol/L的PS-ASODN对MDA-MB-231细胞端粒酶活性及细胞的增殖均有抑制作用,与空白对照组比较差异显著(P＜0.01),并呈一定剂量依赖性;ELISA法检测结果,1、3及5μmol/L的PS-ASODN对MDA-MB-231细胞作用72 h后端粒酶皆为阴性,表明端粒酶PS-ASODN能够抑制端粒酶活性,对照组端粒酶皆为阳性.1、3及5μmol/L的PS-ASODN作用24h可以明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力(P＜0.01).结论 PS-ASODN能有效抑制人乳腺癌MDA-MB -231细胞的生长、促进凋亡、抑制其侵袭和迁移能力,其机制可能是通过PS-ASODN降低端粒酶活性而实现.     

表没食子儿茶素没食子酸酯增强食管癌细胞对紫杉醇的敏感性

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体外增强紫杉醇对食管癌Ca Es-17细胞化疗敏感性的作用,探讨可能的作用机制。方法实验分为空白对照组、紫杉醇组(培养液中紫杉醇终浓度为360 nmol/L),EGCG组(培养液中EGCG终浓度为20 mg/L)、联合组(培养液中EGCG终浓度为20 mg/L,紫杉醇浓度为360 nmol/L),各组作用24 h,CCK-8法和细胞克隆形成法检测细胞增殖抑制率和存活率,金氏公式评价二药的协同效果;流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布;Transwell法检测细胞侵袭力;免疫印迹法检测P21蛋白表达水平。结果 EGCG、紫杉醇均可抑制Ca Es-17细胞增殖、诱导细胞凋亡、降低细胞存活率和侵袭力;减少S期细胞数量、阻断细胞周期于G1期,并能上调P21蛋白表达水平(P<0.05),二药联用上述作用效果更为显著(P<0.01)。结论 EGCG能够增强紫杉醇对食管癌Ca Es-17细胞的化疗敏感性,这种作用部分是通过上调P21蛋白实现的。     

蟾蜍灵联合顺铂对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨蟾蜍灵联合顺铂对舌鳞状细胞癌（以下简称舌鳞癌）Tca8113细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 培养人舌鳞癌Tca8113细胞株,取对数期细胞分为对照组、蟾蜍灵组、顺铂组、联合组。对照组加入RPMI 1640培养基;蟾蜍灵组分别加入10、20、40、80、160 nmol/L的蟾蜍灵;顺铂组分别加入2.5、5、10、20、40μg/m L的顺铂;联合组分别加入10、20、40、80、160 nmol/L的蟾蜍灵后按浓度对应加入2.5、5、10、20、40μg/m L的顺铂;MTT法检测各组细胞增殖抑制率,计算抑制细胞增殖50%的药物浓度（IC50）及联合指数（CI）。根据蟾蜍灵与顺铂48 h时的IC50选择三个药物组相应浓度亚组,即蟾蜍灵40 nmol/L组（蟾蜍灵亚组）,顺铂10μg/m L组（顺铂亚组）,蟾蜍灵40 nmol/L、顺铂10μg/m L组（联合亚组）,流式细胞术分析各亚组细胞凋亡情况,Western-Blot法检测各亚组Bax、Bcl-2、Caspase-3、细胞外调节蛋白激酶（Erk）及其磷酸化细胞外调节蛋白激酶状态（P-Erk）的表达。结果 与对照组相比,蟾蜍灵组、顺铂组、联合组细胞增殖受到抑制,且联合组增殖抑制率高于蟾蜍灵组与顺铂组,并呈时间-剂量依赖关系（P均〈0.05）。联合组联合指数（CI）均小于1。联合亚组细胞凋亡率高于蟾蜍灵亚组与顺铂亚组,三组与对照组相比,P均〈0.05。蟾蜍灵亚组、顺铂亚组、联合亚组Bax、Caspase-3蛋白表达高于对照组,其中联合亚组高于蟾蜍灵亚组和顺铂亚组;三个药物亚组P-Erk蛋白表达均低于对照组,其中联合亚组低于蟾蜍灵亚组和顺铂亚组;联合亚组Bcl-2表达低于对照组及蟾蜍灵亚组和顺铂亚组（P均〈0.05）。结论 蟾蜍灵与顺铂单用或联合应用均可抑制Tca8113细胞增殖,促进其凋亡,联用效果更强;其作用机制可能与调节细胞凋亡相关蛋白表达、抑制Erk信号通路有关。     

雷米普利对病毒性心肌炎后心肌细胞凋亡水平的影响

目的:探讨雷米普利对病毒性心肌炎后心肌细胞凋亡水平的影响。方法:采用CVB3感染BALB/c乳鼠原代心肌细胞,构建病毒性心肌炎模型。将细胞分为空白组、模型组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、AngⅡ+雷米普利组和雷米普利组。空白组正常培养心肌细胞72h。其余4组以CVB3 100PFU/cell的比例感染心肌细胞48h,构建病毒性心肌细胞模型,模型组于培养液中加入PBS,AngⅡ组于培养液中加入终浓度为100nmol/L的AngⅡ,AngⅡ+雷米普利组于培养液中加入终浓度为100nmol/L的AngⅡ和1μmol/L的雷米普利,雷米普利组于培养液中加入终浓度为1μmol/L的雷米普利。培养24h后,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)法检测细胞凋亡水平,Western blot法检测凋亡蛋白caspase-3的表达水平。结果:与空白组相比,模型组和AngⅡ组细胞的凋亡率和caspase-3的蛋白表达水平均显著升高(P均0.01);与模型组相比,雷米普利组细胞的凋亡率和caspase-3的蛋白表达水平均显著降低(P均0.01);与AngⅡ组相比,AngⅡ+雷米普利组细胞的凋亡率和caspase-3的蛋白表达水平均显著降低(P均0.01)。结论:雷米普利能降低病毒性心肌炎引起的细胞凋亡,其作用可能与AngⅡ有关。