三氧化二砷抗肝癌及其肾毒性的实验研究

探讨三氧化二砷 (Ａｓ2 Ｏ3)抗大鼠肝癌作用及其对肾脏的毒副作用。材料与方法1.药品及试剂 :Ａｓ2 Ｏ3(Ｓｉｇｍａ公司 ) ,顺铂 (齐鲁制药厂 ) ,二乙基亚硝胺(ｄｉｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｅ ,ＤＥＮ ,Ｓｉｇｍａ公司 ) ,小鼠ｂｃｌ 2 (ＩｇＧ1)单抗 ( 1∶5 0 ,ＳａｎｔａＣｒｕｚ)、小鼠抗大鼠增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)单抗( 1∶10 0 ,北京中山生物技术有限公司 )。ＨｉｓｔｏｓｔａｉｎＴＭ Ｐｌｕｓ免疫组化试剂盒 (Ｚｙｍｅｄ公司 )。ＡＰＯ ＢＲＤＵＴＭ凋亡定量检测试剂盒 (ＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ公司 )。2 .模型制…     

膀胱癌中抑癌基因p53、Rb、p16及p15表达的研究

抑癌基因 ｐ15、ｐ16是重要的周期蛋白依赖激酶抑制剂 (ＣＫＩｓ) ,我们应用ＳＰ法检测 5 4例膀胱移行细胞癌 (ＢＴＣＣ)中ｐ5 3、Ｒｂ、ｐ16及 ｐ15蛋白表达 ,从抑癌基因和ＣＫＩｓ两方面探讨ＢＴＣＣ的发生、发展机制。材料与方法　ＢＴＣＣ标本 5 4例 ,男45例 ,女 9例。年龄 41～ 79岁 ,平均 6 2岁。Ⅰ级 2 3例 ,Ⅱ级 15例 ,Ⅲ级 16例。浅表性ＢＴＣＣ(Ｔａ～Ｔ1) 2 4例 ,浸润性ＢＴＣＣ(Ｔ2 ～Ｔ4 ) 30例。 7例非癌膀胱粘膜作对照。ＳＰ法 ,一抗稀释度分别为 :ｐ5 3为 1∶40 ,Ｒｂ为 1∶80 ,ｐ16为 1∶5 0 ,ｐ15为 1∶5 0。显微镜下观察…     

钙粘附蛋白和二磷酸激酶在膀胱癌组织中的表达及意义

我们采用免疫组化ＳＡＢＣ方法对转移抑制基因Ｅ ｃａｄ和ｎｍ 2 3Ｈ1基因产物钙粘附蛋白 (Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ)和二磷酸激酶(ＮＤＰＫ)在膀胱癌组织中的表达进行了检测 ,报告如下。材料与方法　 1986至 1999年手术切除的膀胱癌石蜡组织切片 89例。男5 3例 ,女 3 6例。移行细胞癌 (ＴＣＣ) 5 6例 ,其中Ｇ116例 ,Ｇ2 2 0例 ,Ｇ32 0例 ;鳞癌 12例 ,腺癌 10例 ,未分化癌 11例。Ｔｉｓ～Ｔ116例 ,Ｔ2 ～Ｔ368例 ,Ｔ46例。在保留膀胱术式的 61例中 ,复发 2 8例 ,转移 2 0例。Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ染色结果按照Ｓｃｈｉｐｐｅｒ等[1] 方法评定。Ｎ…     

逆转录-聚合酶链反应检测增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸对BIU-87细胞mRNA表达的影响

我们试图通过基因转染技术将针对增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)的反义寡脱氧核苷酸转入ＢＩＵ 87细胞 ,与细胞ＰＣＮＡｍＲＮＡ形成ｍＲＮＡ ＲＮＡ杂交链 ,从而降低细胞的增殖水平 ,达到治疗肿瘤的目的。一、材料与方法1 .细胞培养和寡脱氧核苷酸的处理 :人膀胱移行细胞癌细胞株ＢＩＵ 87在含 1 0 %灭活小牛血清和双抗的ＲＰＭＩ1 640培养基 (ＧｉｂｃｏＢＲＬ公司 )、37℃、5 %ＣＯ2 恒温箱中培养 ,0 .2 5 %胰蛋白酶消化传代。我们采用与ＰＣＮＡｍＲＮＡＡＵＧ端互补的反义寡脱氧核苷酸 (Ａ ＳＯＤＮ)及正义寡脱氧核苷酸 (ＳＯＤＮ) ,序列如…     

膀胱移行细胞癌cyclin D1及Ki-67抗原表达及相关性的研究

细胞周期失控是肿瘤细胞呈无限制增殖的重要原因 ,ｃｙｃｌｉｎＤ1在细胞周期Ｇ1期和Ｇ1/Ｓ期转换处起重要的调控作用 ,Ｋｉ 6 7抗原能准确地评估肿瘤细胞的增殖活性。我们观察分析了ｃｙｃｌｉｎＤ1和Ｋｉ 6 7抗原在膀胱移行细胞癌 (ＴＣＣ)中的表达 ,并探讨二者的相关性。材料与方法　膀胱ＴＣＣ组 45例 ,男 35例 ,女 10例 ,平均年龄 5 8岁。ＵＩＣＣ临床分期 :浅表性肿瘤 (Ｔａ～Ｔ1)2 8例 ,浸润性肿瘤 (Ｔ2 ～Ｔ4 ) 17例 ;ＷＨＯ病理分级 :Ｇ12 0例 ,Ｇ2 15例 ,Ｇ3 10例 ;其中肿瘤初发 2 7例 ,复发 18例 ;肿瘤单发 32例 ,多发 13例。 12…     

肾盂输尿管癌组织Smad4及ki67表达的临床意义

我们采用免疫组化法对 34例肾盂输尿管癌组织标本中Ｓｍａｄ4及ｋｉ6 7的表达进行研究 ,现报告如下。材料与方法　收集我院 1982年 3月至 1994年 5月手术治疗肾盂输尿管癌标本 34例 ,均为移行细胞癌。男 19例 ,女 15例。年龄 2 1～ 78岁 ,平均 6 1岁。左侧 2 0例 ,右侧 14例。Ｇ1 6例 ,Ｇ217例 ,Ｇ311例。ＵＩＣＣ分期 :Ｔ1 10例 ,Ｔ214例 ,Ｔ38例 ,Ｔ42例。山羊抗Ｓｍａｄ4( 1∶2 0 )多克隆抗体由ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司提供 ,人抗ｋｉ6 7( 1∶5 0 )单克隆抗体及ＡＢＣ试剂盒由Ｚｙｍｅｄ公司提供。免疫组化研究采用ＳＡＢＣ法[1 ] 。光镜…     

增殖细胞核抗原在胃肠道平滑肌肿瘤中表达的临床意义

探讨增殖细胞核抗原表达与胃肠道平滑肌肿瘤的关系。方法 采用免疫组化Ｓ－Ｐ法检测８６例ＧＩＳＭＴ中ＰＣＮＡ的表达情况。结果 ＰＣＮＡ表达按正常胃肠道平滑肌组织，平滑肌瘤，平滑肌肉瘤Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级的依次明显递增，同时，ＰＣＮＡ的表达与肿瘤的性质，大小，中心有无坏死有明显关系。     

转化生长因子β受体在膀胱癌中的表达

采用免疫组织化学染色ＳＡＢＣ法检测膀胱肿瘤中转化生长因子 β(ＴＧＦ β)受体蛋白的表达情况 ,探讨其在膀胱肿瘤发生中的重要意义。材料与方法　 1996年 1月～ 1998年 11月手术切除的膀胱移行细胞癌石蜡标本 72例 ,其中初发癌 5 6例 ,复发癌16例。男 45例 ,女 2 7例。年龄 2 4～ 84岁 ,平均 46岁。肿瘤分期按ＵＩＣＣ及ＴＮＭ标准Ｔｉｓ Ｔ14 0例 ,Ｔ2 ～Ｔ4 32例。病理分级按ＷＨＯ方法Ｇ12 6例 ,Ｇ2 2 8例 ,Ｇ318例。正常膀胱组织 14例为对照组。采用免疫组织化学ＳＡＢＣ法 ,多克隆抗体 (ＴＧＦ βＲＩ、ＲＩＩ)及试剂盒由武汉博士德…     

MMP2、MMP9和TIMP1在膀胱癌中的表达及与预后的关系

采用免疫组化方法观察膀胱移行细胞癌 (ＴＣＣＢ)组织中ＭＭＰ2、ＭＭＰ9和ＴＩＭＰ1的表达 ,探讨其在ＴＣＣＢ浸润、转移中的作用及预后价值。材料和方法　ＴＣＣＢ标本 5 1例 ,男38例、女 13例 ,年龄 2 8～ 81岁 ,平均 5 1岁。肿瘤直径 0 .3～ 6 .5ｃｍ ,初发肿瘤40例 ,复发性肿瘤 11例 (2 4次 ) ,复发次数 2～ 6次。按ＴＮＭ分期 :Ｔｉｓ～Ｔ12 1例、Ｔ2 14例、Ｔ3 12例、Ｔ4 4例。按ＷＨＯ标准 :Ｇ118例、Ｇ2 2 3例、Ｇ3 10例。术后45例患者获随访 ,随访时间 6～ 6 2个月。免疫组化采用Ｓ Ｐ法 ,已知乳腺癌阳性切片作为阳性对照 ,正常膀…     

蛋白激酶A在转化生长因子β-1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖中的作用

目的：探讨蛋白激酶Ａ在转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）刺激增生性瘢痕和正常人皮肤皮纤维细胞（ＨＳ＿ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ）增殖中的信号转导作用。方法：利用＾３２Ｐ掺入底物法测定ＨＳ－ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性;使用直接计数法和ＭＴＴ法测定ＴＧＦ－β１和ｃＡＭＰ、Ｈ７等刺激两种细胞后增殖能力的变化。结果：ＮＳ－ＦＢ被ＴＧＦ－β１刺激后ＰＫＡ的活性短暂升高后很快恢复（３０ｍｉｎ内,但Ｐ〉０．０５）。ＨＳ－ＦＢ则在３０～６０ｍｉｎ降低（Ｐ〈０．０５）,１ｈ后恢复;ＨＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性比ＮＳ－ＦＢ低（但Ｐ〉０．０５）。ＴＧＦ－β１能强烈刺激两种细胞增殖（３０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,对ＨＳ－ＦＢ的刺激作用更强（刺激６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）。ｃＡＭＰ可抑制两种细胞增殖（６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,Ｈ７有拟ＴＧＦ－β１的刺     

增殖细胞核抗原和表皮生长因子受体在胆管癌组织中的表达及其临床意义

为了探讨胆管癌组织中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达及其临床意义,我们采用免疫组化方法（ＳＰ）对４１例胆管癌进行了检测,结果报道如下。材料和方法１．材料：经手术病理证实的胆管癌标本４１例。结石性胆囊炎１２例,先天性胆管囊肿８例作阴性对照。胆管癌病人年龄３８～７４岁,平均年龄５６－４岁。３３例获随访,随访时间２～１１年。２．方法：采用ＳＰ免疫组化染色。ＥＧＦＲ为ＯｎｃｏｇｅｎｅｓｃｉｅｎｃｅＣｏ公司产品。ＰＣＮＡ和ＳＰ试剂盒为ＤＡＫＯ公司产品。ＰＣＮＡ阳性为细胞核染成…     

ＴＧＦβ及ＰＣＮＡ在肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨肾细胞癌中转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）及增残细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及其价值。方法：采用免疫组织化学技术（ＳＰ法）对４６例肾细胞癌和１１例正常肾组织标本中ＴＧＦβ１、PCNA,结合临床资料进行分析,结果：肾癌组ＴＧＦβ１表达量较正常组高（Ｐ＜０．０５）;PCNA在肾癌组高表达（Ｐ＜０．０１）,且在高分期、高分级肾细胞癌中表达量较低分期,低分级肾细胞癌高（Ｐ＜０．０５）,TGFβ１表达量与ＰＣＮＡ表呈负相关关系（Ｐ＜０．０１）,ＴＧＦβ１表达量低及ＰＣＮＡ表达量高的肾癌患者预后差（Ｐ＜０．０５）,结论：ＴＧＦβ１对处于增残太怕肾细胞癌是一种重要负性调节因子,可抑制肾癌发展,ＴＧＦβ１及ＰＣＮＡ表达可作为判断肾细胞癌预后的指标。     

胰岛素样生长因子Ⅱ与结肠直肠癌患者预后的关系

目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）表达水平与癌细胞的增殖,凋亡及结肠直肠癌患者预后的关系。方法 结肠直肠腺癌患者１４２例,术前纤维结肠镜直视下采集肿和正常结肠直肠粘膜的组织标本。以Ｓ－Ｐ法检测ＩＧＦ－Ⅱ,多媒体图文分析系统定量阳性染色区灰度值。Ｓ－Ｐ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）,计算ＰＣＮＡ标记指数。ＴＵＮＥＬ法检测凋亡细胞,计算凋亡指数,患者均作随访,观察并记录无病生存时间和总生存时     

颌下腺缺血再灌注后细胞凋亡与增殖的研究中国医科大学第一临床学院整形外科

我们应用几种形态学方法观察大鼠颌下腺缺血及再灌注不同时相上皮细胞的凋亡与增殖特征 ,以揭示缺血再灌注颌下腺组织损伤与修复过程中细胞凋亡和增殖与颌下腺上皮细胞丧失的关系。一、材料和方法1.材料 :增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)单克隆抗体、免疫组织化学染色ＳＦＴＭ试剂盒和二氨基联苯胺 (ＤＡＢ)呈色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司 ) ,ＡＦ试剂盒 (ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司 )。2 .实验方法 :雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 30只 ,体重 180～ 2 5 0 ｇ ,随机分为对照组 (ＣＯＮ)、缺血组 (ＩＳＣ)和缺血再灌注组 (Ｉ/Ｒ ) …     

FAM联合化疗和α-干扰素联用抑制肝癌生长的研究

我们利用人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型 ,研究α 干扰素与ＦＡＭ 5 氟脲嘧啶 (5 Ｆｕ) +丝列霉素 (ＭＭＣ) +阿霉素(ＡＤＭ) ,联合化疗方案应用对肝癌生长的影响。一、材料与方法1 .实验材料 :人肝细胞癌Ｈ91 0 1瘤株由厦门大学抗癌研究中心提供。ＢＡＬＣ/Ｃ裸小鼠 5～ 6周龄 ,雌性 ,体重1 8～ 2 0 ｇ ,由厦门大学抗癌研究中心提供 ,饲养于ＳＰＦ级无菌饲养室。脱氧核苷末端转移酶介导的缺口末端标记法(ＴＵＮＥＬ法 )原位细胞凋亡检测试剂盒采用德国宝灵曼公司的ＩｎＳｉｔｕＣｅｌｌＤｅ ｔｅｃｔｉｏｎＫｉｐ,ＡＰ试剂盒。2 .人肝细胞癌裸鼠…     

膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原表达的研究

采用免疫组化ＬＳＡＢ法对４８例膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）进行检测，发现ＰＣＮＡ增殖指数随肿瘤分级的升高而增高，浸润生长肿瘤ＰＣＮＡ增殖指数明显高于乳头状生长者（Ｐ＜０．００１），ＰＣＮＡ高表达组（增殖指数＞５０％）预后明显差于ＰＣＮＡ低表达组（增殖指数≤５０％）。结果表明ＰＣＮＡ可作为膀胱移行细胞癌恶性程度及预后指标之一。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对肝癌血管形成的抑制作用

本研究旨在通过人工合成的血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)反义寡核苷酸片段 ,在细胞水平检测其对肝癌细胞ＶＥＧＦ表达的抑制作用 ,探求一种新的抑制肝癌血管形成的基因治疗方法。一、材料和方法1.寡核苷酸 (ＯＤＮ)为上海生物工程公司利用美国ＰＥ公司 391型ＤＮＡ自动合成仪合成 ,ＰＡＧＥ电泳纯化 ,碱基序列为 :反义ＯＤＮ 5′ ＧＣＡＧＴＡＧＣＴＧＣＧＣＴＣＡＴＡＧＣＧＣ 3′,正义ＯＤＮ5′ ＣＴＡＴＣＡＧＣＧＣＡＧＣＴＡＣＴＧＣ 3′ ;人肝癌细胞系 772 1由第四军医大学病理86 3课题组提供。2 .以 1ｇ/ＬⅣ型胶原酶 (Ｓｉｇｍａ公司…     

重组人生长激素促进烧伤病人创面愈合机制初探

目的观察严重烧伤病人接受重组人生长激素（ｒｈＧＨ）治疗后血清生长激素（ＧＨ）、胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）、创面ＤＮＡ合成。细胞增殖活性及表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达的变化，探讨生长激素促进烧伤创面愈合的机制。方法３３例严重烧伤病人随机分成ｒｈＧＨ组（１８例）和对照组（１５例）。ｒｈＧＨ组每晚１０点接受ｒｈＧＨ皮下注射（０．１ｍｇ· ｋｇ~(－１)），疗程 １４ｄ。ＥＬＩＳＡ检测血清 ＧＨ和 ＩＧＦ－１浓度；流式细胞计检测细胞 ＤＮＡ增殖指数（ＰＩ）和合成期细胞百分数（ＳＰＦ）；免疫组化学检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。ＥＧＦＲ、细胞角蛋白（ＣＫ）的表达。结果ｒｈＧＨ组血清ＧＨ、ＩＧＦ－１浓度较高，创面ＰＩ、ＳＰＦ明显高于用药前和对照组。免疫组化显示ＰＣＮＡ、ＥＧＦＲ、ＣＫ的表达明显增加。结论ｒｈＧＨ可以提高严重烧伤病人血清ＧＨ、ＩＧＦ－１水平，促进烧伤创面细胞ＤＮＡ合成和上皮细胞增殖，增加 ＥＧＦＲ表达，加速创面上皮化，促进烧伤创面愈合。     

肾缺血再灌注损伤时血小板衍化生长因子的表达及意义

20 0 0年 1月至 2 0 0 1年 3月 ,我们在建立肾缺血再灌注损伤动物模型的基础上 ,采用免疫组化方法检测血小板衍化生长因子 (ＰＤＧＦ Ａ)在肾脏的表达 ,观察其变化规律和作用 ,现报告如下。材料与方法　 1.动物实验 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 78只。体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ。分为 3组 :肾缺血再灌注损伤组 (实验组 )4 8只 ,切除右肾 ,左肾蒂夹闭 45ｍｉｎ后松开 ;假手术组 15只 ,暴露左右肾蒂即关腹 ;对照组 15只 ,单纯切除右肾。术后 1、3及 7ｄ处死动物 ,免疫组化ＳＰ法对各时相点标本分别行ＰＤＧＦ Ａ检测。一抗为兔抗鼠ＰＤＧＦ Ａ抗体。用…     

蛋白激酶拮抗剂对大鼠气道纤毛运动频率的影响

本研究应用选择性蛋白激酶Ａ(ＰＫＡ)拮抗剂Ｒｐ 8 Ｂｒ ｃＡＭＰＳ、选择性蛋白激酶Ｇ (ＰＫＧ )拮抗剂Ｒｐ 8 Ｂｒ ｃＧＭＰＳ以及竞争性蛋白激酶拮抗剂Ｈ 9作用于纤毛 ,以了解ＰＫＡ、ＰＫＧ被单独或同时阻断后ＣＢＦ的变化。表 1　各实验组ＣＢＦ的变化 (Ｈｚ,组织块数 =5 ,ｘ±ｓ)分组Ｔ0 (Ｈｚ)Ｔ5(Ｈｚ)Ｔ1 0 (Ｈｚ)Ｔ1 5(Ｈｚ)Ｔ2 0 (Ｈｚ)Ｔ2 5(Ｈｚ)ＰＢＳ 7 6 2± 1 14 7 70± 1 12 7 79± 1 337 93± 1 317 89± 1 387 95± 1 38Ｒｐ 8 Ｂｒ ｃＡＭＰＳ 7 6 7± 0 4 47 6 0± 0 4 6 7 57± 0 517 6 0± 0 517 6 6± 0 587 …