完全脾切除增加了小鼠胰岛对STZ的敏感性

目的: 探讨脾脏对链脲菌素(STZ)损伤胰岛β细胞是否具有保护作用。方法: 以外科手术切除小鼠全脾。60只脾切除小鼠随机分为3组,分别以80 mg/kg、160 mg/kg STZ给小鼠腹腔注射,另一组腹腔注射生理盐水。60只正常小鼠做同样分组及处理。1周后,测定各组小鼠空腹血糖、血清胰岛素水平,免疫组化分析各组胰岛β细胞总量,ELISA法分析胰岛细胞凋亡,Luminol化学发光法测定各组胰腺活性氧簇(ROS)水平。结果: 80 mg/kg STZ处理脾切除组空腹血糖浓度显著升高,血清胰岛素显著降低;同剂量STZ处理的正常小鼠血糖及胰岛素水平则正常;此外, 80 mg/kg STZ处理的脾切除小鼠β细胞总量、胰岛凋亡细胞核小体聚集值及胰腺组织ROS的产生与同剂量STZ处理的正常小鼠相比均有显著差异。结论: 脾可以阻止低剂量STZ对正常小鼠胰岛β细胞的破坏作用。完全脾切除增加了胰岛对STZ的敏感性,这一作用与胰腺组织ROS增加相关。     

番石榴叶总三萜对STZ诱导糖尿病大鼠的降糖作用与相关机制

目的探讨番石榴叶总三萜对STZ诱导糖尿病大鼠的降糖作用与相关机制。方法雄性SpragueDawley级大鼠60只,随机分为4组,各15只,及对照组,模型组(STZ组),阳性药组(二甲双胍组,10 mg/kg),番石榴叶总三萜组(TTPGL1组,100 mg/kg TTPGL),模型组和干预组均使用STZ法建模,并在模型稳定后使用灌胃方式进行药物干预,每日一次,连续干预6周。检测并比较四组患者的体重、血糖水平。使用CCK-8法检测每组大鼠胰岛细胞的细胞活力。使用流式细胞术检测细胞的凋亡率。使用Western blot检测AKT、ERK、caspase-3和Bcl-2蛋白水平。结果干预后二甲双胍组和TTPGL1组的血糖组的水平均显著降低并低于STZ组(P0.05)。HE染色结果显示。STZ组胰岛细胞大小不一,有些胰岛细胞出现空泡样变形,二甲双胍组和TTPGL1组的胰岛细胞损伤较STZ组轻。干预后二甲双胍组和TTPGL1组的胰岛细胞凋亡率凋亡率显著降低并低于STZ组(P0.05),二甲双胍组和TTPGL1组的相对细胞活力显著升高并显著高于STZ组(P0.05)。干预后,STZ组、二甲双胍组和TTPGL1组胰岛细胞中AKT、ERK、caspase-3和Bcl-2的表达水平均显著低于对照组(P0.05),而二甲双胍组和TTPGL1组四种蛋白的表达水平均显著高于STZ组(P0.05)。结论 TTPGL具有降低糖尿病大鼠血糖的作用,这可能由于TTPGL可以通过上调PI3K/Akt通路调节凋亡相关的表达,并抑制胰岛细胞凋亡。     

牛磺酸对STZ诱导大鼠胰岛细胞凋亡及BCL-xL和BAX表达变化的影响

目的观察牛磺酸(taurine)对链脲菌素(STZ)引起胰岛细胞凋亡及胰岛素分泌与BCL-xL和BAX蛋白表达变化的影响。方法用体外单层培养的方法,培养已存活3~5 d的W istar乳鼠的胰岛细胞,在瑞氏染液染色后光镜下分别检测STZ使用前后胰岛凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中NO2-/NO3-含量、NOS活性、胰岛素分泌以及BCL-xL和BAX的变化,并进一步观察牛磺酸对上述指标的影响。结果STZ可诱导胰岛细胞凋亡率明显增加,从(4.0±0.7)%升至(40.5±5.7)%,使DNA明显片段化、胰岛素分泌明显降低、BCL-xL表达下降、BAX表达增强(P<0.01)和NO2-/NO3-含量升高,但NOS活性变化不明显。牛磺酸能有效抑制STZ引起的上述指标(NO2-/NO3-含量除外)的变化,该效应具有一定的剂量依赖性。结论牛磺酸能够改善STZ诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与下调BAX/BCL-xL比例有关,而与NO2-/NO3-含量及NOS活性关系不大。     

亨廷顿蛋白相关蛋白1基因沉默对小鼠胰岛β细胞系NIT细胞凋亡的影响

目的探讨沉默亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)基因表达对小鼠胰岛β细胞株-NIT细胞凋亡的影响。方法化学合成针对小鼠HAP1基因的siRNA,转染NIT细胞,观察干扰效果;通过膜联蛋白V/碘化丙啶(AnnexinⅤ/PI)染色和原位末端核苷酸标记法(TUNEL),检测沉默HAP1表达后NIT细胞的凋亡;通过AnnexinⅤ/PI染色检测沉默HAP1表达后,链脲佐菌素(STZ)所诱导的NIT细胞凋亡。结果靶向HAP1的siRNA能有效抑制NIT细胞HAP1的表达;HAP1 siRNA实验组,NIT细胞凋亡数增多,凋亡率显著高于空白对照组(P0.01);STZ可明显诱导NIT细胞的凋亡,沉默HAP1的表达能增加STZ所诱导的NIT细胞凋亡。结论沉默HAP1的表达可以增加小鼠胰岛β细胞株NIT细胞的凋亡,同时也能促进凋亡诱导剂(STZ)所诱导的胰岛NIT细胞的凋亡。     

替米沙坦通过抑制胰岛内质网应激减少STZ致长期高脂喂养大鼠糖尿病的发生

目的:研究肾素血管紧张素Ⅱ受体阻断剂替米沙坦对长期高脂喂养大鼠链脲佐菌素(STZ)致糖尿病的发病率和胰岛β细胞功能的影响及其作用机制。方法:以高脂高热量饮食饲养Wistar大鼠,16周后以替米沙坦干预,24周后1次性给予小剂量STZ,注射STZ1周后行静脉胰岛素释放实验检测胰岛β细胞功能;采用反转录-聚合酶链反应及免疫组化法检测胰岛内质网应激因子及胰岛素的表达。结果:与高脂+STZ组相比,高脂+替米沙坦+STZ组大鼠糖尿病发病率明显下降,胰岛素最大分泌量增加了56.9%,早期胰岛素分泌指数(EISI)及急性胰岛素分泌反应(AIR)升高了1.98倍和0.88倍,β细胞内胰岛素表达量及胰岛素阳性表达细胞密度明显增加,胰岛β细胞内质网应激凋亡相关分子免疫球蛋白结合蛋白、C/EBP同源蛋白基因表达及Bax蛋白表达均显著下降。结论:肾素血管紧张素系统(RAS)阻断可以增强长期高脂喂养大鼠对STZ性糖尿病的抵抗性,减少β细胞内质网应激介导的凋亡因子的表达。减弱胰岛内质网应激可能是RAS阻断而改善β细胞功能、减少糖尿病发生的重要机制之一。     

携有胰岛素样生长因子1重组腺病毒对链脲佐菌素诱导胰岛β细胞损害的保护性研究

目的构建含有鼠胰岛素样生长因子-1(rIGF-1)重组腺病毒,研究rIGF-1在链脲佐菌素(STZ)诱导胰岛β细胞损害中的作用。方法构建重组腺病毒并感染RINm5F细胞,ELISA、Western blotting检测rIGF-1蛋白表达;STZ诱导细胞破坏,检测培养上清中NO水平,胰岛素释放试验进行功能测定,流式细胞检测细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率。结果成功构建含有rIGF-1基因重组腺病毒,病毒滴度为4.0×108pfu/ml,rIGF-1在细胞内外有效表达,并具有抑制STZ诱导胰岛β细胞凋亡和NO产生、保护细胞胰岛素分泌和促进细胞增殖的活性。结论胰岛β细胞局部表达IGF-1能够保护细胞功能,抑制NO产生,使胰岛β细胞免受诱导凋亡因子的损害,提高细胞存活率。STZ诱导胰岛β细胞凋亡可能与NO介导有关。     

采用去β细胞技术建立胰岛α细胞大鼠模型

目的 建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型.方法 12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析.结果 去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛丽积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升.NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%.结论 STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型.     

链脲佐菌素致动物胰岛的组织学变化

链脲佐菌素（STZ）对实验动物的胰岛B细胞具有高度选择性毒性作用,目前已较多使用STZ来建立糖尿病动物模型。本文拟就STZ致动物胰岛的组织学变化作一综述。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA表达的变化

目的：研究链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠胰岛β细胞的功能与外周血白细胞iNOS-mRNA表达的关系。方法：Wistar大鼠随机分为对照10只,实验15只。测定血糖、血浆胰岛素;用原位杂交方法检测外周血白细胞、肝、肺等组织中iNOS-mRNA表达,观察白细胞iNOS-mRNA阳性细胞率。结果：用STZ腹腔注射损伤胰岛β细胞并导致胰岛功能衰竭,3 d后血糖由(8.95±1.80) mmol·L^-1升高至(22.84±4.90) mmol·L^-1,血浆胰岛素由(81.76±2.12) mU·L^-1降至(58.92±18.20)mU·L^-1。正常大鼠外周血白细胞未见iNOS-mRNA表达,而STZ诱导的糖尿病大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA表达高度增强。结论：STZ诱导的胰岛β细胞损伤与白细胞的iNOS-mRNA表达存在正相关关系。本实验为检测外周血白细胞某些信号通路提供了简便易行的原位杂交试验方法。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠外周血白细胞iNOS—mRNA表达的变化

目的 :研究链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠胰岛 β细胞的功能与外周血白细胞iNOS -mRNA表达的关系。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组 10只 ;实验组 15只。测定血糖、血浆胰岛素 ;用原位杂交方法检测外周血白细胞、肝、肺等组织中iNOS -mRNA表达 ,观察白细胞iNOS -mRNA阳性细胞率。结果 :用STZ腹腔注射损伤胰岛β细胞并导致胰岛功能衰竭 ,3d后血糖由 ( 8 95± 1 80 )mmol·L-1升高至 ( 2 2 84± 4 90 )mmol·L-1,血浆胰岛素由 ( 81 76± 2 0 12 )mU·L-1降至 ( 5 8 92± 18 2 0 )mU·/L-1。正常大鼠外周血白细胞未见iNOS -mRNA表达 ,而STZ诱导的糖尿病大鼠外周血白细胞iNOS -mRNA表达高度增强。结论 :STZ诱导的胰岛 β细胞损伤与白细胞的iNOS -mRNA表达存在正相关关系。本实验为检测外周血白细胞某些信号通路提供了简便易行的原位杂交试验方法。