天南星果实对4株人白血病细胞株的体外抑瘤作用研究

目的观察天南星果实提取物对体外培养4株人白血病细胞生长的抑制作用,探讨天南星果实提取物对人白血病细胞的体外抗肿瘤活性。方法采用Alamar Blue法观察天南星果实提取物对4株人白血病细胞的生长抑制作用。结果果实总醇提取物对K562、HL-60、Raji、Jurkat细胞增殖均具有抑制作用,果实石油醚部分对K562、Raji、Jurkat细胞增殖具有抑制作用,果实乙酸乙酯、水部分对K562、HL-60、Jurkat细胞增殖具有抑制作用。结论天南星果实的提取物中具有抑制肿瘤生长的活性物质,值得进一步研究。     

蝎毒对3种人白血病细胞株的抑制作用

目的：采用3种人白血病细胞株（人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL-60、人红白血病细胞株K562）作为实验模型，用东亚钳蝎毒作为干预手段，观察其对人白血病细胞的生长抑制作用。方法：台盼蓝排染法细胞计数观察细胞生长，MTT法检测蝎毒对细胞的毒性、流式细胞术分析凋亡细胞。结果显示：蝎毒对Raji、HL-60、K5623种人白血病细胞具有明显的细胞毒性和生长抑制作用，并且其作用强度在一定范围内呈现对浓度和时间的依赖性。     

莪术油对白血病细胞体外净化作用的实验研究

目的观察莪术油(ZTO)在体外对3种白血病细胞株的抑制作用和刺激人造血祖细胞集落形成的作用。方法采用细胞培养方法,了解ZTO对急性早幼粒细胞白血病系(HL-60)、慢性粒细胞白血病系(K562)和急性红白血病系(U937)细胞株集落残存率的影响和对粒一单系造血祖细胞(CFU—GM)、红系造血祖细胞(CFU—E)和巨核系祖细胞(CFU—MK)的促增殖作用;采用RT—PCR方法,分析经ZTO作用后的白血病染色体易位产生的嵌合基因。结果ZTO对白血病HL-60、K562、U937细胞株均有不同程度的抑制作用,其中对HL-60的抑制作用最强。ZTO对CFU—GM、CFU—E、CFU—MK的集落产率有明显的刺激作用,其中对CFU—E的刺激作用最强。净化后,白血病HL-60、K562、U937细胞株的不同表达基因均有不同程度的减弱。结论ZTO具有抑制白血病细胞生长的作用,同时对正常造血细胞有一定的保护作用。     

MEK抑制剂联合三氧化二砷对髓系白血病细胞凋亡的研究

目的:研究MEK抑制剂PD98059联合三氧化二砷(As2O3)对髓系白血病细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:将PD98059、As2O3单独或联合作用于髓系白血病细胞系HL-60、K562细胞,用AnnexinV-FITC法检测细胞凋亡,用流式细胞术检测Bcl-2、Caspapse-3表达。结果:联合组与单用组相比,细胞凋亡率明显增高。Bcl-2在HL-60、K562细胞均高水平表达。As2O3明显抑制HL-60细胞Bcl-2表达,对K562细胞Bcl-2无明显抑制作用。单用PD98059、As2O3及两药合用在诱导HL-60、K562细胞凋亡过程中,活化caspapse-3均明显上升,两药合用较单用PD98059或As2O3活化caspapse-3明显升高。结论:PD98059联合As2O3同时抑制ERK/MAPK和Bcl-2,激活Caspase酶,对HL-60细胞有协同促凋亡效应。两药联合同时靶向作用ERK/MAPK和BCR/ABL,活化Caspase酶,协同诱导K562细胞凋亡。PD98059可增强As2O3对髓系白血病细胞的凋亡诱导作用。     

三氧化二砷与还原性谷胱甘肽联用诱导HL-60细胞株增殖与凋亡的研究

目的分析研究三氧化二砷与还原型谷胱甘肽联用对人急性髓性白血病HL-60细胞株增殖与凋亡的影响,并初步探讨其诱导HL-60细胞增殖与凋亡的机制。方法使用CCK8检测细胞存活率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果在实验条件下,随着浓度增加,三氧化二砷作用下HL-60细胞增殖有所下降,还原型谷胱甘肽作用下HL-60细胞增殖呈现先升高后降低的趋势。同步给药在相同三氧化二砷浓度下,随着还原型谷胱甘肽浓度增加,细胞存活率有所提高,说明还原型谷胱甘肽可以拈抗三氧化二砷对细胞的增殖抑制作用。由流式检测凋亡率结果提示,还原型谷胱甘肽提前给药增加三氧化二砷对HL-60细胞的促凋亡作用。结论还原型谷胱甘肽拮抗三氧化二砷对HL-60细胞的增殖抑制作用,而提前给药可增加其对三氧化二砷的促凋亡作用。     

天南星醇提取液诱导人K562细胞凋亡的实验研究

目的:探讨天南星醇提取物对人K562细胞的细胞凋亡作用.方法:采用四唑盐比色法(MTT)测定天南星醇提取物对人K562细胞的抑制作用,采用流式细胞术检测天南星醇提取液对人K562细胞凋亡的影响.结果:天南星醇提取液可明显抑制人K562细胞株的增殖,实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01).IC<,50>达到65.07 μg·mL<'-1>.流式细胞学检查发现天南星提取物处理后的人K562细胞出现凋亡现象,且有一定的量效和时效关系.结论:天南星醇提取液能抑制体外培养人K562细胞的增殖,可能是通过诱导K562细胞的凋亡来实现的.     

阿糖胞苷对白血病飚62细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨阿糖胞苷对诱导入白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响。方法采用噻唑蓝比色法（MTT）检测不同剂量的阿糖胞苷作用于K562细胞24h、48h、72h增殖影响,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。结果各浓度阿糖胞苷对K562细胞的生长具有明显抑制作用。在同一浓度下,抑制增殖作用随阿糖胞苷作用时间的延长而增强,呈现出剂量和时间效应关系。阿糖胞苷作用于K562细胞后,G0／G-期细胞所占比例随着阿糖胞苷作用时间的延长而增加,S期与G2／M期细胞所占比例则呈时间依赖性下降。阿糖胞苷作用于K562细胞后,凋亡的K562细胞所占比例随着药物浓度和作用时间的增加而增加,呈现对阿糖胞苷的时间．浓度依赖性。结论阿糖胞苷对人自血病细胞株K562细胞的增殖有明显的抑制作用,并可以时间和浓度依赖方式促进K562细胞的凋亡。     

广东省凤尾蕨属植物抗白血病药物研究

目的 探讨广东地区5种常见凤尾蕨属植物半边旗、剑叶凤尾蕨、刺齿凤尾蕨、蜈蚣草和井栏边草对白血病细胞生长的抑制作用.方法 用乙醇经索氏提取器分别提取5种植物的有效成分,以二甲基亚砜分别配制供试品溶液;将供试品溶液加入对数生长期的人早幼粒白血病HL-60细胞株(简称HL-60细胞)和人慢性髓样白血病K562细胞株(简称K5...     

乌骨藤提取物抑制慢性髓性白血病（K562）细胞增殖

目的提取乌骨藤中抗肿瘤成分,探讨其对慢性髓性白血病K562细胞增殖的抑制作用及机制。方法设计乌骨藤提取物浓度梯度、时间梯度干扰K562细胞增殖,通过显微镜观察细胞形态、MTT法检测增殖抑制率。结果随着浓度和时间梯度的递增,K562细胞增殖速度及细胞形态受到了明显的影响。结论乌骨藤提取物对慢性髓性白血病（K562）细胞增殖有明显的抑制作用。     

酸性丝氨酸蛋白酶ASP_(NJ)对K562白血病细胞的抑制与损伤作用研究

目的研究酸性丝氨酸蛋白酶ASPNJ单独用药及与多柔比星联合用药对体外培养的人慢性髓系白血病细胞株K562的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法应用MTT比色法、台盼蓝拒染法检测细胞增殖和细胞活力,倒置显微镜下观察细胞的动态变化,瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞的形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡。结果沙蚕丝氨酸蛋白酶ASPNJ有效抑制K562细胞的增殖和活力并呈浓度和时间依赖性,联合用药显示ASPNJ显著增加多柔比星的杀伤作用;K562细胞出现凋亡所具有的形态学变化,ASPNJ明显诱导K562细胞的凋亡。结论沙蚕丝氨酸蛋白酶ASPNJ对体外培养的K562细胞具有明显的抑制作用并能增强多柔比星的效应,其作用机制可能与直接的细胞毒性作用及诱导凋亡有关。     

复方木鸡冲剂对多种肿瘤细胞体外生长抑制作用的观察

目的研究复方木鸡冲剂在体外对不同组织来源肿瘤细胞的生长抑制作用。方法应用MTT法观察复方木鸡冲剂对多种肿瘤细胞的生长抑制作用，倒置显微镜观察细胞形态的变化，流式细胞术分析细胞凋亡。结果复方木鸡冲剂对不同组织来源的多种肿瘤细胞有明显的生长抑制作用，并能使HL-60和HepG2细胞的凋亡率增加。结论复方木鸡冲剂在体外对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用，初步认为是通过诱导细胞凋亡实现的。     

Riccardin D, a novel macrocyclic bisbibenzyl, induces apoptosis of human leukemia cells by targeting DNA topoisomerase II

We studied the effect of riccardin D, a macrocyclic bisbibenzyl, which was isolated from the Chinese liverwort plant, on human leukemia cells and the underlying molecular mechanism. Riccardin D had a significant antiproliferative effect on human leukemia cell lines HL-60, K562 and its multidrug resistant (MDR) counterpart K562/A02 cells, but showed no effect on the topoisomerase-II-deficient HL-60/MX2 cells, as measured by the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The pBR322 DNA relaxation assay revealed that riccardin D selectively inhibited the activity of topoisomerase II (topo II). The suppression of topo II activity by riccardin D was stronger than that of etoposide, a known topo II inhibitor. After treatment with riccardin D, nuclear extracts of leukemia K562 and K562/A02 cells left the majority of pBR322 DNA in a supercoiled form. Further examination showed that riccardin D effectively induced HL-60, K562 and K562/A02 apoptosis as evidenced by externalization of phosphatidylserine and formation of DNA ladder fragments. The activation of cytochrome c, caspase-9, caspase-3 and cleaved poly ADP-ribose polymerase (PARP) was also enhanced, as estimated by Western blot analysis. By contrast, riccardin D was unable to induce apoptosis in the topoisomerase-II-deficient HL-60/MX2 cells, indicating that the induction of apoptosis by riccardin D was due to the inhibition of topo II activity. In addition, riccardin D was able to significantly decrease P-glycoprotein (P-gp) expression in K562/A02 cells. Taken together, our data demonstrate that riccardin D is a novel DNA topo II inhibitor which can induce apoptosis of human leukemia cells and that it has therapeutic potential for both regular and MDR strains of leukemia cells.     

华蟾素诱导HL-60细胞凋亡及机制研究

目的：观察华蟾素（cinobufacini）对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用的机制。方法：以HL-60细胞为研究对象，采用MTT法观察细胞增殖作用；Annexin V-FITC／PI双染和吖啶橙／溴乙锭（AO／EB）荧光染色法检测细胞凋亡；罗丹明染色法检测线粒体膜电位；分光光度法检测Caspase-3活性。结果：在0．78～6．25μg&#183;ml^-1，华蟾素能明显的抑制HL-60细胞的增殖；华蟾素作用24h后，AnnexinV阳性的细胞从7．81％增加至66．02％，而且在荧光显微镜下可以明显观察到凋亡细胞；线粒体膜电位下降和Caspase-3活性升高。结论：华蟾素能够抑制HL-60细胞增殖，这种作用与其诱导细胞凋亡破坏线粒体功能和激活Caspase-3有关。     

二氢青蒿素下调粒系白血病细胞转铁蛋白受体表达

通过建立常铁HL60和K562细胞以及富铁K562细胞体外模型，研究二氢青蒿素对粒系白血病细胞转铁蛋白受体(transferrin receptor，TfR)的调控作用。采用流式细胞术检测二氢青蒿素对粒系白血病细胞TfR密度的调控作用，Western blotting和RT-PCR法检测二氢青蒿素对粒系白血病细胞TfR表达的调控作用，原子吸收分光光度法检测二氢青蒿素对常铁和富铁K562细胞铁含量的影响，以及MTT法和台盼蓝拒染法分析二氢青蒿素对粒系白血病细胞增殖的作用。结果显示，二氢青蒿素能显著降低常铁HL60和K562细胞TfR的密度和下调TfR蛋白的表达，且呈浓度和时间依赖性，并能有效地抑制细胞增殖，IC₅₀值分别为1.74和11.33 μmol·L^-1。二氢青蒿素对富铁K562细胞的TfR蛋白和mRNA表达能进一步增强下调作用，与常铁培养组比较，10 μmol·L^-1二氢青蒿素对富铁K562细胞TfR蛋白和TfR mRNA表达量分别下调了28.1%(P<0.01)和26.2%(P<0.05)，并能显著下降富铁K562细胞铁的含量(P<0.05)，更有效地抑制富铁K562细胞增殖。由此可见，二氢青蒿素能下调粒系白血病细胞TfR密度以及TfR蛋白和mRNA的表达，有效抑制常铁HL60和K562细胞的增殖，对富铁K562细胞增殖的抑制作用能进一步增强。     

二甲氧雌二醇对白血病细胞K562增殖、凋亡的作用及其机制

目的：研究二甲氧雌二醇（2-ME）对人白血病细胞l（562细胞的增殖、凋亡的作用及其机制。方法：分别以不同浓度的2-ME处理白血病细胞K562,通过MTT法检测K562细胞活力,应用AnnexinV和PI双染的流式细胞术检测K562细胞凋亡率,应用凝胶蛋白电泳迁移率分析法EMSA检测K562细胞核内NF．KB蛋白的结合活性变化情况。结果：随着2-ME浓度的升高,各项指标与对照组相比较的差异均有统计学意义（P〈0．01）;K562细胞增殖明显受到抑制;细胞凋亡率明显增加,且当2·ME浓度为8μmol·L-1时,细胞凋亡率达64．3％;同时K562细胞核内NF—kappaB的DNA结合活性明显降低。结论：2-ME可显著抑制人白血病细胞K562增殖并诱导其凋亡;2-ME诱导K562细胞凋亡的机制与NF—kappaB蛋白信号通路有关。     

Apoptosis-inducing effect of a new bisphosphonate,YM529, on various hematopoietic tumor cell lines

In recent years, it has been reported that bisphosphonates inhibited the cell cycle of myeloma cells to inhibit cell proliferation directly, and it was also reported that bisphosphonates induced apoptosis of myeloma cells in vitro. Recently, YM529 was developed as a new third-generation bisphosphonate. In our experiment, we investigated whether YM529 showed an antitumor effect on hematopoietic tumor cell lines other than myeloma, and we compared YM529 with YM175, which had a relatively more potent antitumor effect than that of existing bisphosphonates. We found that YM529 inhibited cell proliferation in various hematopoietic tumor cell lines (acute promyelocytic leukemia cell line HL-60, chronic myeloid leukemia cell line K562, histiocytic lymphoma cell line U937, lymphoblastic leukemia T cell line Jurkat, acute lymphoblastic leukemia T cell line MOLT-4, lymphoblastic leukemia B cell line CCRF-SB) including myeloma (myeloma cell line HS-Sultan) dose-dependently and time-dependently to a degree equivalent or superior to that in myeloma, and induced apoptosis at a lower concentration as compared with YM175. We confirmed many dead cells as well as apoptosis based on the detection of the nuclei with separate globular structure, the activation of caspase-3, and the decrease in mitochondrial transmembrane potential. Therefore, it is concluded that further utilization of YM529 can be expected against hematopoietic tumor cells in the future.