芬太尼对C6胶质瘤细胞增殖的影响

目的：检测临床常用麻醉镇痛药芬太尼对大鼠C6胶质瘤细胞增殖的影响。方法：通过流式细胞技术检测BrdU掺入DNA的标记细胞。结果：芬太尼及吗啡作用于大鼠C6胶质瘤细胞24h，BrdU标记率呈降低趋势，且不能被纳络翻所阻断。结论：芬太尼、吗啡通过阿片受体或其它膜受体途径抑制C6胶质瘤细胞增殖。     

黄芩素对喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的：探讨黄芩素对人喉癌Hep-2细胞的增殖抑制作用。方法：Hep-2细胞在含黄芩素（10~80μmol/L）的培养基中,分别培养24 h及48 h,用MTT法检测对细胞增殖的影响;用台盼兰染色法检测对细胞活力的影响;用吖啶橙染色法（AO染色法）检测对细胞形态的影响。结果：黄芩素呈时间-剂量依赖性的抑制Hep-2细胞的增殖,并可使细胞活力明显降低;AO染色法显示,黄芩素可诱导Hep-2细胞形态发生明显变化,呈凋亡形态。结论：黄芩素可抑制喉癌Hep-2细胞增殖,降低细胞活力,诱导喉癌Hep-2细胞呈典型的凋亡形态。     

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中TPH和GTPCH基因表达的影响

目的研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)、GTP环水化酶1(GTP cyclohydrolase1,GTPCH)基因表达的影响。方法剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,50只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、海洛因组(H)、海洛因补偿AMP+GMP组(HAG)、海洛因补偿AMP组(HA)、海洛因补偿GMP组(HG),每组10只。Real-timePCR法测定各组大鼠脑组织中TPH和GTPCH1基因的表达。结果与C组比较,H组大鼠脑组织中TPH基因表达下降71%(P0.05);与H组比较,HAG,HA和HG组大鼠脑组织中TPH基因表达分别升高60%,100%和150%(P0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中,GTPCH基因表达下降43%(P0.05);与H组比较,HAG,HA和HG组大鼠脑组织中GTPCH基因表达均有所升高,但差异不显著(P0.05)。结论海洛因给药使大鼠脑组织中TPH,GTPCH基因表达下调;嘌呤核苷酸补偿可以减弱海洛因对TPH和GTPCH基因表达的影响。     

姜黄素对喉癌Hep-2细胞增殖及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的探索姜黄素对喉癌细胞增殖的作用以及对细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法 Hep-2细胞暴露于含姜黄素(3-25μM)的培养基中,分别培养24h及48h,用MTT法检测对细胞增殖的影响;用RT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达水平。结果 MTT显示,姜黄素使Hep-2细胞增殖明显降低,并呈时间-剂量依赖性;RT-PCR结果显示,姜黄素使Bcl-2的mRNA表达水平降低,而使Bax的mRNA表达水平升高,并呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素对人喉癌Hep-2细胞增殖具有显著的抑制作用。其作用机制可能与其下调Bcl-2基因表达水平及上调Bax基因表达水平,从而诱导细胞凋亡有关。     

性激素对心钠素基因表达影响的实验研究

为研究雄激素和雌激素对心钠素基因表达的影响,给完整的、去势的雄性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮或雌二醇,持续2周。用冷酚法提取心房总RNA,用α-~(32)P标记ANF—cD-NA探针,经RNA电泳转移杂交和斑点吸印杂交。结果表明去势后ANF—mRNA含量下降,睾丸酮和雌二醇均使ANF—mRNA增加,然而小剂量的睾丸酮、雌二醇对去势大鼠ANF基因表达作用还需进一步研究。     

吗啡对PC12细胞嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

目的：研究吗啡对神经细胞模型PC12嘌呤核苷酸补救合成酶与分解代谢关键酶基因表达的影响。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测暴露于吗啡不同时间的PC12细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）、腺苷激酶（AK）和腺苷脱氨酶（AD A）mRNA的表达水平。结果：与相应时段对照组相比，PC12细胞暴露于吗啡12及24 h时，HGPRT mRNA水平均明显增高(P<0.05)，作用48 h时HGPRT mRNA水平显著降低(P<0.05)，72 h后HGPRT mRNA水平再次升高(P<0.05)；吗啡处理的PC12细胞于12和24 h时，AK mRNA水平均明显降低(P<0.05)，作用48 h时AK mRNA水平升高(P<0.05)，72 h后AK mRNA水平恢复正常；ADA mRNA水平均表现为轻度降低，12 h差异有显著性(P<0.05)。结论：吗啡影响神经细胞嘌呤核 苷酸代谢，使细胞内腺苷酸及腺苷水平增高，这可能是吗啡依赖和耐受形成的机理之一 。     

吗啡依赖大鼠血清尿酸及ALT、AST的检测分析

目的：检测吗啡依赖大鼠血清肝功能生化指标及核苷酸代谢参数的变化.方法：Wistar大鼠35只,随机分成5组,每组7只.第1组为对照组,给予0.9%氯化钠注射液；第2组给予盐酸吗啡20～95 mg&;#8226;kg 1&;#8226;d 1,分2次,ip,共7 d；第3组在给予盐酸吗啡的同时,给予嘌呤碱基混悬液100 mg&;#8226;kg 1&;#8226;d 1,ig,第8天给予盐酸纳洛酮4 mg&;#8226;kg 1,ip,观察戒断体征；第4组用嘌呤核苷混悬液替代嘌呤碱基混悬液,其余同第3组；第5组给予盐酸吗啡和盐酸纳洛酮,用量和用法同第3组.采用Beckman丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及尿酸检测试剂盒测定相应指标.结果：发现了吗啡依赖大鼠血清尿酸水平升高,ALT及 AST酶活性升高.结论：吗啡可引起组织细胞嘌呤核苷酸分解代谢增强,引起肝脏功能的损伤.     

吲哚美辛对喉癌细胞Hep-2增殖与凋亡及COX-2蛋白表达的影响

目的探索吲哚美辛对喉癌细胞增殖与凋亡的作用以及对细胞COX-2蛋白表达的影响。方法Hep-2细胞暴露于含吲哚美辛（125，250，500μM）的培养基中，培养24小时，用MTT方法检测各组药物与溶剂对照组相比对细胞增殖的影响；用台盼蓝染色法检测吲哚美辛对细胞活力的影响；吖啶橙染色法观察吲哚美辛（250μM）对细胞形态的影响；流式细胞仪分析法检测吲哚美辛（250μM）对细胞周期和细胞凋亡的影响，Western blot检测吲哚美辛对细胞COX-2蛋白表达的影响。结果吲哚美辛使Hep-2细胞增殖及细胞活力明显降低，细胞形态发生明显变化，细胞质萎缩而细胞核相对较大，S期细胞分数明显增加，细胞出现凋亡峰，而COX-2蛋白表达量增加。结论吲哚美辛强烈抑制Hep-2细胞增殖与细胞活力，明显改变细胞初始形态，阻滞细胞从S期向G2／M期转化，并诱导其凋亡，吲哚美辛对Hep-2细胞的上述作用机制与COX-2的特异性抑制途径无关。     

嘌呤核苷酸对海洛因成瘾大鼠垂体FSH、LH基因表达及内分泌细胞超微结构的影响

目的:研究嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠腺垂体卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)/间质细胞刺激素(ICSH)基因表达情况及远侧部生长激素细胞和促性腺激素细胞超微结构的影响。方法:采用逐渐递增剂量法腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,92只Wistar大鼠随机分成对照组(生理盐水)、核苷酸组(不给海洛因)、海洛因组、海洛因+核苷酸组(同时给药)、戒断3 d组、戒断9 d组、核苷酸3 d组(海洛因停药后给核苷酸3 d)及核苷酸9 d组(海洛因停药后给核苷酸9 d),RT-PCR法半定量分析各组大鼠垂体FSH及LHmRNA表达的变化,电镜观察腺垂体远侧部生长激素细胞和促性腺激素细胞超微结构的变化。结果:与对照组大鼠垂体FSH mRNA的相对表达量(0.045±0.009)比较,核苷酸组(0.099±0.018)、海洛因+核苷酸组(0.177±0.046)、核苷酸3 d组(0.151±0.030)和核苷酸9 d组(0.184±0.028)明显升高(P<0.01);与对照组大鼠垂体LHmRNA的相对表达量(0.700±0.099)比较,海洛因+核苷酸组(0.950±0.169)、核苷酸3 d组(0.990±0.171)和核苷酸9 d组(0.960±0.147)明显升高(P<0.01)。与对照组相比,海洛因组腺垂体远侧部生长激素细胞和促性腺激素细胞核呈不规则形,核膜不清,核基质略致密,核内异染色质趋边、凝集。胞质内粗面内质网扩张,线粒体肿胀、嵴断裂且呈空泡化,分泌颗粒明显减少,部分细胞内可见髓样小体。海洛因+核苷酸组生长激素细胞和促性腺激素细胞与对照组相比无明显变化。结论:短期应用海洛因对大鼠垂体FSH和LH的基因表达影响不明显,与海洛因同时给予嘌呤核苷酸、或海洛因撤药后给予嘌呤核苷酸则明显促进了FSH、LH基因的表达。海洛因可造成大鼠腺垂体远侧部生长激素细胞和促性腺激素细胞超微结构的损伤;嘌呤核苷酸能一定程度地减轻或抑制海洛因对腺垂体远侧部生长激素细胞和促性腺激素细胞超微结构的损害。     

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中 5-HT及5-HIAA 含量的影响及其机制

目的：研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中 5-羟色胺（5-HT）及 5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量的影响及其作用机制。方法：剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110 只正常雄性 Wistar 大鼠随机分为对照组（C）、海洛因组（H）、海洛因补偿 AMP + GMP 组（HAG）、海洛因补偿 AMP 组（HA）、海洛因补偿 GMP 组（HG）,每组 22只。应用荧光分光光度法测定大鼠脑组织中5-HT和 5-HIAA 的含量,ELISA 法测定大鼠脑组织中色氨酸羟化酶（TPH）的含量,免疫组化法检测脑组织中 TPH 蛋白的表达,每组中有 8 只鼠于第 10 天第 1 次给药后 4 h 观察戒断症状,每组中有4只鼠用于免疫组化。结果：与 H 组比较,HAG、HA 及 HG 组大鼠的咀嚼、齿颤及睑下垂次数均明显减少 (P<0.05)。与 C 组比较, H 组大鼠脑组织中 5-HT 和 5-HIAA 含量显著下降 (P<0.05);与 H 组比较, HAG、HA 和 HG 组大鼠脑组织中 5-HT 和 5-HIAA 含量均有所升高 (P<0.05)。与 C 组比较,H 组大鼠脑组织中 TPH 含量显著下降 (P<0.05);与 H 组比较,HAG、HA 和 HG 组大鼠脑组织中 TPH 含量均有所升高 (P<0.05)。与 C 组比较,H 组大鼠脑组织中 THP 表达的阳性细胞计数明显减少(P<0.05);与 H 组比较,HAG、HA 及 HG 组大鼠脑组织中 THP 表达的阳性细胞计数有所升高(P<0.05)。结论：嘌呤核苷酸补偿能够减轻海洛因依赖大鼠的戒断症状,并能增加大鼠脑组织中 5-HT 和 TPH 的含量。