lncRNA HIF1A-AS1对长春新碱耐药视网膜母细胞瘤细胞化疗敏感性的影响

目的：探讨长链非编码RNA-HIF1A-AS1(lncRNA HIF1A-AS1)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α))表达对长春新碱(VCR)耐药视网膜母细胞瘤(RB)细胞化疗敏感性的影响。

方法：建立人RB VCR耐药细胞株SO-RB50/VCR，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SO-RB50与SO-RB50/VCR细胞lncRNA HIF1A-AS1表达； 在SO-RB50/VCR细胞中抑制lncRNA HIF1A-AS1表达或同时过表达HIF-1α，检测SO-RB50/VCR细胞对VCR的半数抑制浓度(IC₅₀)及细胞增殖、凋亡情况； Western blot检测HIF-1α、多药耐药相关蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达。

结果：与SO-RB50细胞相比，SO-RB50/VCR细胞中lncRNA HIF1A-AS1与HIF-1α蛋白表达水平升高(P<0.05)； 在SO-RB50/VCR细胞中抑制lncRNA HIF1A-AS1表达后，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，细胞吸光度(OD₄₅₀)值显著降低，VCR对细胞的IC₅₀值及HIF-1α、MRP、P-gp蛋白表达水平显著降低(P<0.05)； 过表达HIF-1α可减弱下调lncRNA HIF1A-AS1表达对SO-RB50/VCR细胞耐药性的抑制作用。

结论：lncRNA HIF1A-AS1在SO-RB50/VCR细胞中高表达，抑制lncRNA HIF1A-AS1表达可通过下调HIF-1α表达，降低SO-RB50/VCR细胞对VCR的耐药性。     

青光眼分子遗传学的研究进展

青光眼是一种表现较为复的眼部疾病,所有年龄段的人均可罹患。近几年来,关于青泊眼分子遗传学方面的研究有了长足的进展。本文将以这两个基因为主,就青光眼分子遗传学的研究进展进行综述。     

白介素—1家族与Graves眼病

白介素-1（IL-1）是Graves眼病发展过程中的关键因素，用白介素-1受体拮抗剂（IL-1ra）治疗Graves眼病是目前的研究热点之一。本着重介绍近年来国外有关IL-1a、IL-1β和IL-1ra在实验及临床前研究中的进展，它们在Graves眼病发病机制中的作用，及IL-1ra在Graves眼病中的应用前景。     

人血管生成素-1基因真核表达载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达

目的构建人血管生成素-1（Ang-1）基因的真核表达载体,并检测其在人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）中的表达,为进一步研究Ang-1防治糖尿病视网膜病变（DR）的血管渗漏提供实验依据。方法提取人胎盘组织中的总RNA,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）特异性扩增Ang-1编码区序列,亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1。将pEGFP-N1-Ang-1导入UC-MSCs,然后应用含质量分数10%胎牛血清的DMEM培养基对人UC-MSCs进行培养,荧光显微镜下观察Ang-1在人UC-MSCs中的表达,Western blot法检测重组体的表达。结果 RT-PCR法成功克隆人Ang-1基因编码区序列,纯度为1.82;PCR扩增的片段长度为1.5 kb,与预期片段大小相近。双酶切鉴定法可识别重组pEGFP-N1-Ang-1转染质粒,目的基因与预期基因序列的同源性为100%。人UC-MSCs转染的pEGFP-N1/Ang-1质粒能够表达Ang-1蛋白,呈现绿色荧光。转染pEGFP-N1的人UC-MSCs和对照组人UC-MSCs均未见相应的Ang-1蛋白表达。结论成功地克隆出人的Ang-1基因并构建了真核表达载体pEGFP-N1-Ang-1,为将Ang-1基因转染至人UC-MSCs治疗DR奠定了基础。     

NEW INSIGHT INTO MECHANISMS OF AQUEOUS OUTFLOW DEFICIENCY：ROLE OF THE STRESS RESPONSE

In any given patient, it is difficult, if not impossible to prospec-tively determine either the lower limit of tolerable intraocular pressure(IOP) or the upper IOP threshold for certain injury. If there was a treatment modality that could lower the IOP of all glaucoma patients to between 8 and 12 mmHg without any side effects or risks, one would certainly use it every time. Unfortu-     

IL-1ra对IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞合成糖胺多糖的抑制作用

目的 :明确白介素 1受体拮抗剂 (IL 1ra)是否对白介素 1α(IL 1α)诱导的眼眶成纤维细胞合成糖胺多糖 (gly cosaminoglycans,GAG)有抑制作用 ,探讨IL 1ra在Graves’眼病(GO)治疗及预防中的临床应用前景。方法 :以下述方法分别处理培养的GO患者和正常人眼眶成纤维细胞 :IL 1α 30U/ml或 /和不同浓度的IL 1ra孵育 4 8h ;用IL 1α 30U/ml处理后 ,再加入IL 1ra 75ng/ml共孵育不同时间 (2 4h、4 8h、72h)。用 [3 H]葡萄糖胺掺入法测定 [3 H]GAG的产量。结果IL 1α 30U/ml明显刺激GO患者和正常人成纤维细胞合成GAG ,增加率达 4 6 .6 %～ 12 7.9% (平均 10 3.5 % ,P <0 .0 0 1)。与IL 1α 30U/ml克分子浓度比为 2 5∶1、4 0∶1和 10 0∶1的IL 1ra ,分别抑制IL 1α诱导的GO患者和正常人成纤维细胞合成GAG达 (30 .93± 11.4 6 ) %、(5 9.34± 9.3) %和 (83.15± 8.5 6 ) % (P <0 .0 0 5 )。在 2 4h、4 8h、72h时 ,IL 1ra分别抑制IL 1α诱导的眼眶成纤维细胞合成GAG(2 4 .18± 6 .3) %、(6 0 .4 8± 12 .83) %和 (73.0 4± 7.14 ) % (前两组相比 ,P <0 .0 0 1;后两组相比 ,P =0 .15 9)。结论 :IL 1ra能够剂量和时间依赖性地抑制IL 1α诱导的眼眶成纤维细胞合成GAG ,IL 1ra可望用于GO的治疗和预防。     

初发胬肉与复发胬肉中ⅠL-1α和VEGFR-1的表达相关性研究

目的 探讨初发胬肉和复发胬肉中,白细胞介素lα(ⅠL-1α)和血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1)及它们的相关性及与胬肉的发生、复发的关系.方法 用免疫组织化学方法对30例初发翼状胬肉和30例复发翼状胬肉组织中的ⅠL-1α和VEGFR-1进行检测,并与正常人的角膜缘组织中的ⅠL-lα和VEGFR-1进行对照.结果 免疫组织化学染色显示ⅠL-1α和VEGFR-1在初发胬肉和复发胬肉上的表达有高度相关性,正常结膜、初发胬肉、复发胬肉中的ⅠL-1α和VEGFR-1的含量差异有统计学意义(P=0.000).结论 本研究是首次将初发翼状胬肉与复发翼状胬肉中的ⅠL-1α和VEGFR-1进行检测和相关性研究.ⅠL-1α和VEGFR-1表达成正相关,认为翼状胬肉切除术后两者相互作用可能是翼状胬肉复发的主要因素.     

糖尿病视网膜前膜中ICAM-1及Mac-1的免疫组织化学研究

目的 观察增生型糖尿病视网膜病变（ＰＤＲ）的纤维增生视网膜前膜（ＥＲＭ）中粘附分子（ＩＣＡＭ－１,Ｍａｃ－１）的表达。方法 用免疫组织化学方法对９例ＰＤＲ患者行玻璃体切割术时剥离的视网膜前膜进行观察。其中糖尿病视网膜病变Ⅳ期４例,Ⅴ期５例。结果 ＩＣＡＭ－１和Ｍａｃ－１在８例视网膜前膜中表达,表达率８９％,ＩＣＡＭ－１和Ｍａｃ－１阳性表达在糖尿病分型及分期中无明显差别。结论 ＩＣＡＭ－１和Ｍａｃ－１在增生型糖尿病视网膜中表达,糖尿病视网膜病变的发病中有粘附分子参与。     

初发胬肉与复发胬肉中IL-1α和VEGFR-1的表达相关性研究

目的探讨初发胬肉和复发胬肉中,白细胞介素1α（IL-1α）和血管内皮生长因子受体1（VEGFR-1）及它们的相关性及与胬肉的发生、复发的关系。方法用免疫组织化学方法对30例初发翼状胬肉和30例复发翼状胬肉组织中的IL-1α和VEGFR-1进行检测,并与正常人的角膜缘组织中的IL-1α和VEGFR-1进行对照。结果免疫组织化学染色显示IL-1α和VEGFR-1在初发胬肉和复发胬肉上的表达有高度相关性,正常结膜、初发胬肉、复发胬肉中的IL-1α和VEGFR-1的含量差异有统计学意义（P=0.000）。结论本研究是首次将初发翼状胬肉与复发翼状胬肉中的IL-1α和VEGFR-1进行检测和相关性研究。IL-1α和VEGFR-1表达成正相关,认为翼状胬肉切除术后两者相互作用可能是翼状胬肉复发的主要因素。     

白介素1α和白介素1受体拮抗剂对培养的Graves'眼眶成纤维细胞增殖作用的影响

目的探讨白介素1α(IL-1α)和白介素1受体拮抗剂(IL-1ra)对培养的Graves'眼病(GO)患者眼眶成纤维细胞增殖的影响.方法以下述方法分别处理培养的GO和正常人眼眶成纤维细胞:不同浓度的IL-1α刺激成纤维细胞48 h;30 U/ml的IL-1α刺激成纤维细胞24～72 h;不同浓度的IL-1ra或/和30 U/ml的IL-1α处理成纤维细胞48 h;75 ng/ml的IL-1ra和30 U/ml的IL-1α处理成纤维细胞24～72 h.用MTT法测定成纤维细胞增殖的刺激或抑制率.结果IL-1α以剂量和时间依赖的方式刺激GO和正常人眼眶成纤维细胞增殖,而IL-1ra以剂量和时间依赖的方式抑制IL-1α诱导的GO和正常人眼眶成纤维细胞的增殖活性,刺激和抑制作用在GO和正常人眼眶成纤维细胞之间无明显差异.结论IL-1ra是IL-1α诱导的人眼眶成纤维细胞增殖的强有力的抑制剂,可望用于GO的治疗.     

原发性先天性青光眼CYP1B1基因变异初步研究

目的了解CYP1B1基因变异在中国原发性先天性青光眼(PCG)患者发病中的作用。方法收集来自不同地区的16例PCG患者,对其CYP1B1基因编码外显子进行直接测序,对照组进行单核苷酸多态性分析。结果在1例PCG患者中发现了一种变异,为8006G>A(R390H)。它是位于外显子III的错义突变。还发现了五种单核苷酸多态性,分别为3793T>G,R48G,A119S,A330S,V432L。结论CYP1B1基因是导致中国人PCG患者的致病基因,但也有其他变异可能和PCG变异有关。     

白介素1a和白介素1受体拮抗剂对培养的Graves’眼眶成纤维细胞增殖作用的影响

目的 探讨白介素1a(IL-1a)和白介素1受体拮抗剂(IL-1ra)对培养的Graves’眼病(GO)患者眼眶成纤维细胞增殖的影响。方法 以下述方法分别处理培养的GO和正常人眼眶成纤维细胞：不同浓度的IL-1a刺激成纤维细胞48h；30U／ml的IL—1a刺激成纤维细胞24～72h；不同浓度的IL—1ra或／和30U／ml的IL—1a处理成纤维细胞48h；75ngml的IL—1ra和30U／ml的IL-1a处理成纤维细胞24～72h。用MTT法测定成纤维细胞增殖的刺激或抑制率。结果IL-1a以剂量和时间依赖的方式刺激GO和正常人眼眶成纤维细胞增殖，而IL—1ra以剂量和时间依赖的方式抑制IL—1a诱导的GO和正常人眼眶成纤维细胞的增殖活性，刺激和抑制作用在GO和正常人眼眶成纤维细胞之间无明显差异。结论IL—1ra是IL—1a诱导的人眼眶成纤维细胞增殖的强有力的抑制剂，可望用于GO的治疗。     

p21^WAF1/CIP1在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的探讨p21^WAF1/CIP1在视网膜母细胞瘤（RB）中的表达及其与肿瘤的病理分期、组织分型、浸润深度的关系。方法利用免疫组织化学法检测p21^WAF1/CIP1在46例RB组织和15例正常视网膜组织中的表达。结果p21^WAF1/CIP1主要表达于细胞核及细胞浆内,在RB中的阳性表达率为47.83%,与正常视网膜组织相比差异有统计学意义（P=0.007）,并随肿瘤病理分期的进展而下降,与组织分型和浸润深度有关（P〈0.05）。结论p21^WAF1/CIP1在RB的发生发展过程中起重要作用,表达的下降与肿瘤恶化及预后不良相关。     

白细胞介素-1β诱导大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的研究

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)对大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白(MCP)-1mRNA表达的诱导作用. 方法 24只SD大鼠,右眼为实验眼,左眼为对照眼.实验眼玻璃体内注入IL-1β 250U/5μl,对照眼注入等量生理盐水(PSS).注射后4,24h取视网膜组织,提取总RNA应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测视网膜MCP-1mRNA表达. 结果眼内IL-1β注射后4h实验眼视网膜MCP-1mRNA表达水平较对照眼明显增加;24h实验眼视网膜MCP-1mRNA水平与对照眼相近. 结论视网膜MCP-1mRNA可被眼内IL-1β诱导表达,MCP-1可能在IL-1β诱发的眼内炎症反应中发挥作用.     

Ⅰ型胶原基因与近视关系的研究进展

目前近视的发生率很高,但发病机制不清.实验性近视眼和人类近视眼研究发现,I型胶原基因变化与近视发生、发展关系密切,本文就Ⅰ型胶原基因的表达调控及其与近视的关系作一综述.     

TGF-β1短期眼部应用对兔眼角膜碱烧伤后整合素β1表达的作用

目的：研究TGF—β1短期眼部应用对兔角膜碱烧伤后整合素β1表达和角膜上皮愈合的影响，探求其对角膜碱烧伤的治疗作用。方法：制备大耳自家兔角膜碱烧伤模型，一组给予TGF—β1（浓度为200ng／m1）局部滴眼，每日3次，连续7日；另一组给予PBS溶液代替，处理相同。于角膜碱烧伤后每13观察角膜上皮愈合面积，并于烧伤后6h、1d、3d、7d和14d5个时间点应用免疫组化方法检测TGF—β1实验组与PBS组角膜整合素β1表达情况。结果：烧伤后4d、10d、11d、12d和14d实验组和对照组上皮愈合率比较，差异有统计学意义（P〈0．05），两组随着上皮修复过程的进行，整合素B1的表达均逐渐增加，烧伤后7d、14d两个时间点实验组和对照组整合素B1平均灰度值比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论：TGF—β1在活体实验中能促进整合素β1的表达，而后者的增加可以促进角膜上皮细胞向损伤区域的移行和粘附，从而减少碱烧伤愈合过程中上皮再次脱落现象，有利于创伤愈合。     

原发性先天性青光眼的遗传学研究进展

原发性先天性青光眼作为严重威胁婴幼儿视力发育的眼病,其遗传倾向受到关注,目前GLC3A,GLC3B和GLC3C三个相关候选基因已经定位。CYP1B1是目前仅找到的先天性青光眼的致病基因,其突变和功能的研究成为热点。本文就先天性青光眼的分子遗传学研究进展及其与CYP1B1的关系作一综述。     

中国人原发性先天性青光眼患者CYP1B1基因突变分析

原发性先天性青光眼(primary congenital glaucoma,PCG),是一种严重危害儿童视力的致盲性眼病,与遗传有一定关系。为探讨中国人PCG与CYP1B1基因的关系,我们对7例PCG患者的CYP1B1基因进行分析,现报告如下。1材料与方法1.1病例收集在广州市儿童医院眼科就诊的表型为PCG的患者7例,抽取静脉血5mL,EDTA抗凝。所有标本间均无任何血缘关系。1.2主要试剂和仪器DNA抽提试剂盒、dNTPs、Taq酶(美国Fermentas公司),100bp DNA Markers、EB替代品(广州威佳公司)。采用Biometra UNOⅡ型PCR仪(德国Biometra公司)。1.3基因组DNA的制备按…     

Vogt—Koyanagi—Harada综合征与人类白细胞抗原—DQA1和—DQB1基因 …

目的 探讨人类白细胞抗原－ＤＱＡ１和－ＤＱＢ１（ｈｕｍａｎ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ａｎｔｉｇｅｎ－ＤＱＡ１ ａｎｄ ＤＱＢ１,ＨＬＡ－ＤＱＡ１ａｎｄＤＱＢ１）基因与沃洛特－小柳－原田综合征（Ｖｏｇｔ－Ｋｏｙａｎａｇｉ－Ｈａｒａｄａｓｙｎｄｏｍｅ,ＶＫＨ）遗传易感的相关性。方法 应用聚合酶链式反应－序列特异性引物（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｐｅｃｉｆｉｅｐｒｉｎ