莲子心中生物碱成分的研究

从江西瑞昌产莲子心中分离得到6种生物碱,根据理化常数、波谱分析等,初步鉴定为莲心季铵碱、荷叫碱、前荷叶碱、莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱。     

莲子心的生物碱及酸酯类成分研究

目的:研究莲子心的生物碱及酸酯类成分。方法:采用乙酸乙酯、正丁醇对莲子心的80%乙醇提取物进行萃取,以硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析以及反相制备型高效液相色谱法等现代分离方法对其正丁醇萃取部位进行了分离纯化,利用理化性质以及现代波谱学方法对分离得到的化合物结构进行了结构鉴定。结果:从莲子心中分离鉴定了10个化合物,分别为:邻苯二甲酸二丁酯(1)、齐墩果酸(2)、小檗碱(3)、杏黄罂栗碱(4)、荷叶碱(5)、前荷叶碱(6)、去甲基乌药碱(7)、异莲心碱(8)、甲基莲心碱(9)、莲心碱(10)。结论:其中,化合物1、2为首次从莲属植物中分离得到,化合物3为首次从该植物中分离得到。     

离子对RP-HPLC法测定不同产地莲子心中甲基莲心碱的含量

莲子心为睡莲科植物睡莲 Nelumbo nuciferaGaertn的成熟种子中的干燥幼叶及胚根 ,具有清心安神、交通心肾、涩精止血之功效[1] 。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版 ,莲子心项下只有显微鉴别和一个生物碱的显色反应。莲子心中主要成分为莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱。关于莲子心中甲基莲心碱的含量测定 ,已有正相高效液相色谱法 [2 ]报道 ,本实验采用 ODS柱 ,对 1 0余个不同产地的莲子心中甲基莲心碱的含量进行了测定。1　仪器、药材与试剂Waters高效液相色谱仪 ,Waters 5 1 5泵 ,2 4 87紫外检测器 ,岛津 C- R6A色谱数据处理机 ;莲子…     

大孔吸附树脂对莲子心中有效成分的分离纯化研究

目的研究大孔吸附树脂吸附分离莲子心中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的工艺条件及参数。方法考察了AKS-W、AB-8和H214树脂对莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的静态及动态吸附性能,并采用HPLC定量分析莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱。结果AKS-W树脂对莲子心中有效成分有较好的吸附分离效果,提取物中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的质量分数分别提高到10.2%、6.7%和11.9%。结论大孔型非极性吸附树脂AKS-W对莲子心中有效成分是一种较为理想的分离介质。     

正交试验法优选莲子心中甲基莲心碱提取工艺的研究

目的:从莲子心中提取分离甲基莲心碱。方法:采用正交试验法,以甲基莲心碱含量、得率为指标,多指标综合评分,优选甲基莲心碱提取分离工艺条件。结果:最佳分离方法为:浓度为2.5%的氢氧化钠溶液以体积比1∶1与三氯甲烷进行萃取,由三氯甲烷层得到甲基莲心碱,含量为91.6%,得率为45.6%。结论:该工艺能够有效、快速的从莲子心中提取分离甲基莲心碱。     

清心缓释片的制备及体外释药

清心缓释片主要成分为莲子心总碱。莲子心总碱是从莲子心(Nelum bo nuciferaGaertn.)中提取的有效成分,其中主要含有莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱等,近年来,已有研究证明莲子心总碱有较好的降压、抗心律失常、抗血小板聚集和血栓形成、抑制血管平滑肌细胞增殖等作用[1~4]。本文根据莲子心总碱的性质、治疗要求及给药途径研制了清心缓释片,并对其体外释放度进行了研究。1仪器与试药1.1仪器ZP25旋转式压片机(上海天祥健台制药机械有限公司):TH-20机械式片剂硬度计(上海黄海药检仪器厂);ZRS-4型智能溶出试验仪(天津大学无线电厂);7520型分…     

荷叶和莲子心“同源异效”的物质基础分析

目的 阐明影响同源药材荷叶和莲子心药效差异的关键活性物质，分析二者“同源异效”的物质基础。方法 利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术定性分析荷叶、乳汁（莲叶柄中的汁液）和莲子心中的主要生物碱类成分，选择Waters XBridge C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相0.1%氨水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~13 min，35%~60%B；13~20 min，60%~80%B；20~20.1 min，80%~95%B；20.1~25 min，95%B；25~25.1 min，95%~35%B；25.1~40 min，35%B），电喷雾离子源（ESI），正离子模式，质谱扫描范围m/z 100~1 000，并对其主要生物碱进行代谢网络的构建。结果 从荷叶中鉴定出了5种生物碱（N-去甲基荷叶碱，O-去甲基荷叶碱，番荔枝碱，荷叶碱和莲碱），从乳汁中鉴定出了6种生物碱（荷叶碱，norisoliensinine，6-hydroxynorisoliensinine，莲心碱，异莲心碱和甲基莲心碱）以及从莲子心中鉴定出了8种生物碱（莲心季铵碱，去甲基乌药碱，N-甲基乌药碱，原荷叶碱，dl-杏黄罂粟碱，莲心碱，异莲心碱和甲基莲心碱），构建了双苄基异喹啉类生物碱（莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱）以及阿朴啡类生物碱（荷叶碱，N-去甲基荷叶碱，O-去甲基荷叶碱，莲碱和番荔枝碱）等末端生物碱的生物合成通路。结论 荷叶中荷叶碱等5种阿朴啡类生物碱和莲子心中莲心碱等3种双苄基异喹啉类生物碱是造成荷叶和莲子心“同源异效”的物质基础。荷叶和莲子心中生物碱的代谢来源于同一化合物（S）-N-甲基乌药碱，通过两类不同酶的作用进行两类生物碱的合成。合成的生物碱具有不同的结构，造成了不同组织间化学成分的差异，从而产生不同的药效。     

莲子心总生物碱的提取分离及药效学初步研究

目的:从药材莲子心中提取生物碱类活性成分,对主要成份进行分离鉴定,并对其抗心律失常药效进行初步研究。方法:莲子心药材选用酸性乙醇搅拌提取;采用柱层析的方法分离、纯化;初步对结扎冠状动脉诱导的大鼠的心律失常活性作用进行探讨。结果:从莲子心药材提取的总生物碱中分离得到3个生物碱类成分,为莲心碱(LIE)、异莲心碱(ISOLIE)、甲基连心碱(NEF);药效试验表明:莲子心总生物碱大、中剂量组明显延长室速发生时间及降低室速持续时间。结论:莲子心总生物碱具有抗结扎冠状动脉诱导的大鼠心律失常的作用。     

莲子心化学成分及其抑制蛋白二硫键异构酶活性研究

蛋白质二硫键异构酶既能抑制肿瘤细胞凋亡,又能促进肿瘤细胞浸润转移,在肿瘤的发展进程中具有关键作用。为了研究中药莲子心是否对该酶活性有影响,该文首先对莲子心的化学成分进行了提取分离,得到12个单体化合物,其中N-甲基乌药碱、山柰酚、金圣草素-7-O-新橘皮糖苷和甘露醇为首次从该药材中分离得到。随后该文研究了莲子心中主要的生物碱成分N-甲基乌药碱、莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱对蛋白质二硫键异构酶活性的影响,首次发现它们均具有抑制蛋白二硫键异构酶活性的作用,其中N-甲基乌药碱活性最强(IC501.4μmol·L~(-1))。     

基于指纹图谱及一测多评法的莲子心质量评价研究

目的:建立UPLC指纹图谱和一测多评法评价莲子心的质量。方法:采用UPLC法建立莲子心指纹图谱;采用一测多评法测定莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱3种生物碱类成分的含量,通过与外标法比较,验证一测多评法的可行性和科学性。结果:建立的10批莲子心UPLC指纹图谱确定了10个共有峰,相似度均大于0.900;以莲心碱(S)为内参物,确定异莲心碱、甲基莲心碱的相对校正因子分别为1.1037、1.1039,莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱分别在0.09938～0.70053μg(r=0.9999)、0.10320～0.77400μg(r=0.9999)、0.22172～1.66287μg(r=0.9999)的进样量范围内与峰面积的线性关系良好。外标法与一测多评法的含量测定结果无显著性差异。结论:建立的方法准确、快速、可行,可用于莲子心的质量评价。     

前荷叶碱单体的分离鉴定

目的:分离及鉴定前荷叶碱单体。方法:采用超临界CO2萃取技术从莲子心中提取亲脂性成分,用柱层析技术进行分离纯化,对得到的单体化合物用高效液相色谱(HPLC)、薄层层析(TLC)、气相色谱-质谱分析(GC-MS)进行鉴定。结果:将莲子心超临界CO2萃取物用柱层析分离后可获得单一成分,经HPLC、TLC、GC-MS鉴定后,纯度高,为前荷叶碱单体,其总得率为0.0154‰。结论:用超临界CO2萃取技术,结合柱层析分离纯化,可从莲子心中分离得到前荷叶碱单体。     

莲心碱及莲心碱高氯酸盐初步稳定性考察及莲子心不同部位中莲心碱的含量测定

目的 考察了莲心碱及莲心碱高氯酸盐的稳定性；并测定了莲子心不同部位（幼叶和胚根）中莲心碱的含量。方法 采用反相离子对HPLC法，通过两种不同流动相，确证了莲心碱及莲心碱高氯酸盐的纯度并考察了莲心碱及莲心碱高氯酸盐的稳定性。采用甲醇-水-冰醋酸-辛烷磺酸钠-乙酸钠（55：45：0.6:10mmol/L:5mmol/L)为流动相，以莲心碱高氯酸盐为对照品测定了莲子心不同部位（幼叶和胚根）中莲心碱的含量。结果 莲心碱在各种条件下均不稳定，对光照尤其敏感，而莲心碱高氯酸盐除对光照稍显不稳定外，在其他各种条件下均较稳定，莲子心幼叶中莲心碱的含量约为胚根中莲心碱的含量的4-5倍。结论 在含量测定时应采用莲心碱高氯酸盐作对照品；莲子心幼叶中莲心碱的含量显著高于胚根中莲心碱的含量。     

影响莲心总碱中甲基莲心碱稳定性因素的试验研究

莲心总碱是从中药莲子心中提取的总生物碱，主要为莲心碱(liensinine)、异莲心碱(isoliensinine)及甲基连心碱(neferine)，其中甲基莲心碱含量最高［1］，它们的主要药理作用有降血压、抗心律失常、抗心肌缺血、抗血小板聚集等［2-4］。近年来许多研究证实，甲基莲心碱具有逆转肿瘤细胞多药耐药的作用［5-8］，这使得对莲子心的研究成为热点。对莲子心有效成分的提取工艺、化学成分、含量测定、药理作用和结构测定与修饰等已有研究报道［9-10］，但未见有对甲基莲心碱稳定性的研究报道，本实验对可能影响甲基莲心碱稳定性的多种因素进行了考察。     

RP-HPLC同时测定莲心总碱中的3种生物碱含量

目的：建立同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的反相高效液相色谱法。方法：以Hypsil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,甲醇-磷酸盐缓冲液(73∶27,pH 9.0)为流动相,检测波长为286 nm及230 nm,流速1 mL·min^-1。结果：3种生物碱分离良好,在20～700 μg·mL^-1线性关系良好,日内、日间RSD在0.24%～4.83%,3种生物碱的加样回收率分别为97.9%,98.4%,98.1%。利用该方法测定了不同批次不同方法提取的莲心总碱中3种生物碱含量,结果显示莲心总碱的甲醇提取方法优于乙醇提取方法。结论：本法简单、快捷、适合于测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量。     

薄层扫描法测定莲子心中甲基莲心碱的含量

采用双波长薄层扫描法测定莲子心中甲基莲心碱的含量。工作曲线在0.5～6.7μg范围内呈线性关系,平均回收率为100.35%,测得福建、江西、湖北产莲子心中甲基莲心碱含量分别为0.199%,0.246%和0.248%。     

LC/MS/MS鉴定莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物

目的:应用LC/MS/MS鉴定去甲乌药碱、莲心碱、异莲心碱、荷花碱4种莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物,推测其代谢途径。方法:100μmol/L生物碱作用Caco-2细胞3~12 h后收集并纯化样品,采用LC/MS/MS分析鉴定代谢产物。结果:去甲乌药碱的代谢产物有甲基化去甲乌药碱和去甲乌药碱葡萄糖醛酸苷;莲心碱和异莲心碱的代谢产物分别是去甲基莲心碱和去甲基异莲心碱;荷花碱的主要代谢物为莲心碱、异莲心碱和它们的进一步去甲基产物。结论:LC/MS/MS操作简便,可快速鉴定Caco-2细胞中的莲子心生物碱的代谢产物。莲子心生物碱主要代谢途径有甲基化、去甲基化和葡萄糖醛酸化。     

小叶买麻藤藤茎化学成分的研究

小叶买麻藤Gnetum parvifolium(Warb.)C.Y.Cheng,又名木花生、大目藤、目仔藤,分布于江西、福、广东、广西、湖南等地.有平喘、抗过敏、抗蛇毒等药理作用,对心血管系统也有作用.民间用于治疗风湿性关节痛、腰肌劳损、筋骨酸软、跌打损伤、刀枪伤、蛇咬伤、支气管炎和溃疡出血等症[1,2].据文献报道其藤茎所含化学成分有:买麻藤甲素(geneti-folin)[1]、异土大黄苷元(isorhapontigenin)[1]、白藜芦醇(resveratrol)[1]、β-谷甾醇(β-sitosterol)[3]、消旋去甲基衡州乌药碱盐酸盐(dl-demethyl coclaurinehydrochloride)[4]、(±)-N-methylhigenamine[4]、(-)-N-methylhigenamineN-oxide [4]、(±)-8-(p-hydroxybenzyl)-2,3,10,11-tetrahydroxyproto-berberine[4]等.作者通过与新泽西大学的联合研究发现小叶买麻藤的水提取物、甲醇提取物与乙酸乙酯提取物都有抗肿瘤(MCF-7)活性,特别是乙酸乙酯提取物的抗肿瘤活性最强.所以,对小叶买麻藤的乙酸乙酯提取物进行分离,在药理实验的指导下寻找其有效成分.目前分离得到5个化合物,根据它们的氢谱、碳谱与质谱的分析研究,分别鉴定为白藜芦醇(Ⅰ),芹菜素(Ⅱ),金圣草黄素(Ⅲ),β-谷甾醇(Ⅳ)和胡萝卜苷(Ⅴ).化合物Ⅱ、Ⅲ为首次从小叶买麻藤中分离得到.     

HPLC测定湘莲莲子心中莲心碱的含量△

目的:采用HPLC测定了6个不同产地的湘莲莲子心中莲心碱的含量。方法:色谱柱为ODS C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.015mol·L-1十二烷基磺酸钠-冰醋酸(56∶43∶1);体积流量为1mL·min-1;检测波长为282nm。结果:莲心碱在质量浓度0.0110～0.1210mg·mL-1与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率99.14%,RSD=1.85%。湖南6个不同产地的湘莲莲子心生物碱的含量均在0.21%～0.32%。结论:测定的6个产地湘莲莲子心中莲心碱的含量均大于0.2%,符合《中国药典》2010版规定的要求,以产自湘潭的莲子心中莲心碱的含量最高,为0.32%。     

高效液相色谱法同时测定莲子心中四种异喹啉生物碱的含量

目的:建立同时测定莲子心中四种异喹啉生物碱--莲心季铵碱、莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的离子对反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,色谱柱:H ibarTR,5μm,250 mm×4.6 mm;流动相:乙腈-水-冰醋酸(55∶45∶1,每1 000 m l中加入4 g十二烷基磺酸钠);流速:1.2 m l/m in;检测波长:282 nm;柱温:30℃。结果:莲心季铵碱在0.94~2.82μg,莲心碱在1.14~3.42μg,异莲心碱在0.7~2.1μg,甲基莲心碱在0.96~2.88μg范围内均呈良好线性关系;并均具有较好的加样回收率(>95%)。结论:该分析方法快速、准确、灵敏度高,重复性好,可用于同时对药材莲子心中四种异喹啉生物碱的含量测定。     

HPLC测定建莲莲子心生物碱的含量

目的:建立同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱含量的HPLC方法,并测定了10个不同产地、批次的建莲莲子心生物碱的含量。方法:Platisil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(55∶45),乙二胺调pH 9.80;检测波长282 nm,流速1 mL·min-1。结果:莲心碱在3.9～115.9 mg·L-1(r=0.999 8)、异莲心碱在4.0～120.7 mg·L-1(r=0.999 8)、甲基莲心碱9.7～290.2 mg·L-1(r=0.999 8)呈现良好的线性关系。平均回收率分别为100.24%,99.17%,100.10%,RSD分别为0.78%,1.31%,1.40%。福建产的10个不同产地、批次的建莲莲子心的莲心总碱的含量多数在1.50%～2.00%。结论:该方法简便、灵敏、准确、可靠。测定的10个产地批次的建莲莲子心中,以产自福建建宁的几何莲子芯茶样品中莲心总碱含量最高,可达2.28%。