检测肾病综合征患者尿中足细胞的临床意义

目的:探讨尿中肾小球上皮细胞(足细胞)检测在人局灶节段性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)诊断中的意义.方法:病例选自我科经肾活检病理证实的FSGS患者12例,微小病变性肾小球病(minimal change disease,MCD)20例,8例健康人作对照.取晨尿离心,沉渣甩片,间接免疫荧光法检测尿中足细胞特异蛋白Podocalyxin(PCX)阳性染色细胞.采用免疫荧光法检测肾小球足细胞PCX的表达.结果:FSGS组尿中足细胞阳性8例(阳性率66.67%),MCD组和正常对照组中尿足细胞均为阴性.FSGS患者中,尿足细胞阳性者临床上呈肾病综合征表现.FSGS患者肾活检标本中,肾小球内均可见足细胞特异标记蛋白PCX表达呈节段性缺失,并与肾小球节段硬化部位一致;而MCD患者肾活检标本的肾小球中,上述标记蛋白表达完整.结论:在肾病综合征中,尿足细胞检测可作为FSGS与MCD鉴别的一项可靠、方便、无创性的辅助手段.     

雷米普利对糖尿病肾病患者尿足细胞数量的影响

目的：应用雷米普利治疗2型糖尿病（T2DM）的肾病患者,比较治疗前、后尿足细胞数量的变化,并探讨雷米普利对肾脏的保护机制。方法：选取56例糖尿病肾病（DN）微量白蛋白尿期的患者,随机分为治疗组和对照组。治疗组每日给予雷米普利5mg,连续服用3个月。应用小鼠抗人。肾小球足细胞特异性蛋白（Podocalyxin,PCX）单克隆抗体,采用间接免疫荧光技术检测尿中PCX阳性染色细胞,计数尿足细胞数量。比较治疗前、后两组的尿足细胞数量。结果：雷米普利治疗组的尿足细胞数量较基线明显下降（P〈0．05）,与对照组相比差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：雷米普利可以减少DN患者的尿足细胞数量,保护肾功能。     

PCX、mALB、NAG联合检测对糖尿病肾病早期诊断的临床意义

目的探讨尿足细胞标志蛋白（Podocalyxin,PCX）、微量白蛋白（Microalbumin,mALB）和N一乙酰一B—D氨基葡萄糖苷酶（N—acetyl—B．D—glucosaminidase,NAG）联合检测对糖尿病肾病早期诊断的意义。方法检测85例糖尿病肾病早期患者及50例健康者尿液中足细胞标志蛋白、微量白蛋白与肌酐的测值。结果糖尿病组PCX、mALB、NAG测值明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;糖尿病患者尿液PCX、mALB、NAG阳性率分别为31．8％、24．7％、22．4％,三者联合检测阳性率45．9％,与各单项检测阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论尿PCX、mALB、NAG联合检测对糖尿病肾病早期诊断有重要价值。     

肾病综合征患者尿足细胞与临床病理关系的分析

目的通过观察肾病综合征（NS）患者尿足细胞与临床病理关系,探讨尿足细胞检测代替肾活检的可能性。方法选取80例NS患者被肾穿前1d的晨尿和20例正常对照的晨尿各100ml,离心涂片。用抗人足细胞标记蛋白Podocalyxin（PCX）单克隆抗体分别对尿沉渣涂片和肾组织切片进行免疫组化及免疫荧光检测,并于光学显微镜下计数尿足细胞数目及肾小球足细胞密度,比较NS各种类型尿足细胞排泄情况与。肾脏临床病理的相关性;同时收集患者的临床一般资料和实验室资料,并分析其与尿足细胞和肾组织足细胞的关系。结果各组间年龄、性别构成及临床生化指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。正常对照组免疫组化及免疫荧光检测尿未见足细胞,免疫组化及免疫荧光检测肾组织PCX,可见大量足细胞;NS不同类型组与正常对照组尿足细胞及肾小球足细胞密度相比有统计学差异（P〉0．05）;各类型组中,以局灶节段性。肾小球硬化（FSGS）组患者尿中检出的足细胞数最多,其次是系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）组,再次是膜性肾病（MN）、微小病变性肾病（MCD）。各组患者尿足细胞数与24h尿蛋白量及肾小球病理积分呈正相关（P〈0．05）,与血浆白蛋白、肾小球肾足细胞密度呈负相关（P〈0．05）,与血肌酐无相关性（P〉0．05）;各组患者肾小球足细胞密度与24h尿蛋白量及尿足细胞呈负相关（P〈0．05）,与血浆白蛋白及肾小球病理积分呈正相关（P〈0．05）,与血肌酐无相关（P〉0．05）。结论尿足细胞的检测是一项可反映肾病综合征不同病理类型病情轻重的无创性指标;尿足细胞数有可能作为反应肾脏病变进展的重要指标。     

尿液足细胞标志蛋白Podocalyxin在糖尿病肾病早期诊断中的意义

目的通过对51例糖尿病（DM）和36例糖尿病肾病（DN）患者尿液中的足细胞标志蛋白podocalyxin（PCX）定量检测和分析比较,了解足细胞标志蛋白podocalyxin在糖尿病肾病早期诊断中的意义。方法定量检测患者和正常对照人群尿液中的足细胞标志蛋白Podocalyxin和血液中的各项肾功能指标,对结果进行统计学分析。结果PCX与CysC、Cr、BUN呈正相关,DM组患者PCX阳性率为17．5％,水平为（3．68±1．63）mg／mL,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05oDN组患者PCX阳性率为66．7％,水平为（54．0±18．2）mg／mL,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PCX的检测对发现肾小球的早期损害有重要意义。     

2型糖尿病肾病患者尿足细胞标志蛋白和血管内皮生长因子水平与氧化应激的相关性

目的：探讨2型糖尿病（T2DM ）并发不同程度肾病患者尿足细胞标志蛋白（PCX）和血管内皮生长因子（VEGF）水平变化,及其与氧化应激的关系。方法186例T2DM患者按照24 h尿清蛋白排泄率（UAER）分为单纯 T2DM 组（SDM 组,62例）、微量组（NA组,60例）、大量组（MA组,64例）,另取24 h UAER正常者作对照（NC组,60例）。分别检测PCX、VEGF、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH‐px）和丙二醛（MDA）水平。结果与其他3组比较,MA组VEGF、PCX及MDA水平最高（P＜0．01）,SOD和GSH‐px水平最低（P＜0．01,P＜0．05）。VEGF、UAER、HbA1c是尿PCX的独立危险因素。结论糖尿病肾病患者尿PCX 及血VEGF 与氧化应激相关,氧化应激与足细胞的损伤密切相关。     

糖尿病肾病MKR小鼠蛋白尿与尿中nephrin、PCX含量相关性分析

目的 通过检测糖尿病肾病（DN）MKR小鼠足细胞结构蛋白nephrin 与足细胞标记蛋白（PCX）在肾组织中的表达量及尿中的含量,分析尿微量白蛋白(UmAlb)与尿中nephrin、PCX蛋白含量的相关性。方法 取30只8周龄MKR小鼠随机分为2组（空白组和DN组）,空白组以普通饲料喂养,将DN组小鼠单肾切除并加以高脂喂养2个月复制DN模型;另取15只同龄C57野生鼠为正常对照组,以普通饲料喂养。造模前1 d、喂养4周及8周后,采用电化学法检测各组小鼠空腹血糖(FBG);喂养8周后,取各组小鼠肾脏组织,用电镜观察肾组织足细胞形态结构;Western blot检测肾组织中nephrin、PCX蛋白表达含量;ELISA 法测定尿中UmAlb含量及nephrin、PCX蛋白表达含量。结果 电镜结果显示:喂养8周后,与C57组比较,DN组小鼠肾小球足细胞结构损伤明显,DN组FBG升高( P<0.01),且肾组织中nephrin、PCX蛋白表达下调,而尿中nephrin、PCX蛋白含量及UmAlb 含量均升高( P<0.01)。相关分析显示,尿UmAlb与尿中nephrin和PCX蛋白含量呈正相关（相关系数r=0.920,决定系数R 2=0.829, P<0.05)。结论 尿中nephrin、PCX蛋白含量与UmAlb含量呈正相关,足细胞结构蛋白丢失可能是导致糖尿病肾病蛋白尿的机制之一。     

尿足细胞阳性IgA肾病患者临床病理特点

目的探讨尿足细胞阳性原发性IgA肾病(IgAN)患者临床病理特点。方法50例肾活检明确诊断的IgAN患者和10例健康志愿者,利用足细胞的标记蛋白Podocalyxin(PCX)标记尿液和肾组织足细胞,采集IgAN患者肾活检时临床资料、肾活检光镜结果,其中光镜参照Hass分级,各项病理指标参照Fofi半定量积分法进行评分,荧光显微镜观察肾组织足细胞PCX荧光表达程度,电镜观察足细胞足突形态学改变。结果①尿足细胞阳性的IgAN患者尿蛋白水平、血肌酐水平、平均动脉压较尿足细胞阴性患者增高,血浆白蛋白、肾小球滤过率(GFR)较尿足细胞阴性患者降低(P<0.05);②光镜示尿足细胞阳性的IgAN患者肾小球硬化程度、新月体发生率较尿足细胞阴性患者增高(P<0.05),而两组比较,系膜增生、基质增多、肾小管萎缩、间质纤维化、间质炎细胞浸润、间质血管硬化程度的差异无统计学意义(P>0.05);③肾组织足细胞PCX抗体荧光表达显示:肾小球节段硬化和球性硬化处足细胞PCX抗体荧光表达缺失;④电镜观察提示,无论是否伴足细胞尿,其足细胞足突均可出现一系列形态学改变。结论足细胞尿是反映肾脏疾病轻重的一个指标,与肾脏病理类型有一定关系。     

检测尿足细胞在活动性肾小球疾病中的意义

目的:探讨检测尿足细胞的方法可否作为无创评估肾小球损伤的指标.方法:采用抗人足细胞标记蛋白-Podocalyxin(PCX)抗体进行间接免疫荧光染色.60份尿标本采自我院肾内科住院患者,于肾活检前留取晨尿检测尿沉渣中足细胞,30份尿标本采自健康志愿者作为对照.60例患者均经皮肾活检,肾组织行光镜、免疫荧光和电镜检查作出病理诊断.根据肾小球病变活动性炎症损伤与慢性损伤分为两组,并与尿足细胞阳性和阴性发生率进行对比分析.结果:⑴间接免疫荧光尿沉渣染色抗足细胞PCX抗体仅与足细胞特异结合,可用于检测尿足细胞.⑵尿足细胞见于成人多种类型肾小球疾病,而健康成人尿足细胞阴性.⑶肾小球活动炎症性损伤者尿足细胞阳性率72%,慢性损伤者尿足细胞阳性率22.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).⑷尿足细胞阳性组肾小球病理平均活动指数积分154±60,尿足细胞阴性组肾小球病理平均活动指数积分82±46,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:小鼠抗人足细胞PCX单克隆抗体尿沉渣染色,是一种特异性检测尿足细胞的方法,这项无创检查可作为预测肾小球疾病活动的指标.     

来氟米特对慢性肾炎患者尿足细胞标志蛋白水平的影响

目的：探讨来氟米特对慢性肾小球肾炎患者尿足细胞标志蛋白（ PCX）排泄的影响。方法选取慢性肾小球肾炎患者63例和健康体检者30例,将慢性肾小球肾炎患者随机分为来氟米特组和常规组,健康体检者为对照组,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ ELISA）测定尿液中PCX水平,分别检测治疗前、治疗后4周及治疗后12周尿PCX水平的变化,并结合24小时尿蛋白定量（ UTP）、血肌酐、尿素氮、血白蛋白、血脂等指标进行统计学分析。结果来氟米特组和常规组治疗前尿PCX水平与对照组比较差异均有统计学意义（ P＜0．05）。2组治疗前尿PCX水平与UTP无相关性,治疗后尿PCX水平均较治疗前下降;来氟米特组较常规组治疗4周后PCX水平差异无统计学意义,治疗12周后差异有统计学意义。结论慢性肾炎患者尿中PCX的表达较正常人明显增多,与UTP无相关性。来氟米特可以减少肾脏足细胞的损伤,起到保护肾脏的作用。     

Correlation between podocyte excretion and proteinuria in diabetic nephropathy patients

Objective： To observe the podocyte injury in diabetic nephropathy （DN） patients by identifying the urinary podocytes and the situation of detached podocytes in glomeruli and to demonstrate the correlation between podocyte excretion and proteinuria, blood glucose, serum creatinine in different phases in DN patients. Methods： Urinary podocytes and the podocalyxin （PCX） expression state of podocytes in glomeruli were identified and observed by indirect immunofluorescent method. The DN patients were divided into three groups according to the volume of proteinuria, namely small, medium and large volume proteinuria groups. The podocytes in the urine of every group were calculated. The DN patients were divided into five groups according to the chronic kidney disease （CKD） phases, then the positive podocytes in urine were calculated. Meanwhile, the 24-hour protein in urine, fasting blood glucose （FBG） and the serum creatinine of DN patients were tested. The correlations among the proteinuria, serum creatinine, FBG and the number of positive podocytes in the urine of DN patients were statistically analyzed. Results： Urinary positive podocytes were found in 88% of the patients with DN, whereas podocytes were found in 0% of patients with minimal changed disease （MCD） and healthy cases. The expression of PCX was absent in DN patients. In contrast, PCX was expressed integrally in MCD patients. The positive podocytes was 1.49±0.95/ml in small-volume proteinuria group, 2.15±0.70/ml in the medium-volume proteinuria group, and 3.48±1.27/ml in the large-volume proteinuria group. There was no significant difference between the small- and medium- volume proteinuria groups, and there were significant differences between other groups （P〈0.05）. The positive podocyte number tended to increase as proteinuria was increased. By Pearson analysis, the correlation between podocyte number and proteinuria was podocytes in urine from different groups of DN patients, CKD pc I sitive statistically. The difference of the number of positive -V group was significant statistically. The correlation between serum creatinine of CKD Ⅰ -Ⅲ group and positive podocytes in urine was positive statistically. The correlation between serumcreatinine of CKD Ⅳ- Ⅴ group and positive podocytes in urine was not significant statistically. The correlation between FBG and positive podocytes in urine was not significant either. Conclusion： The mechanism of the podocyte injury in DN patients is present. The podocyte injury in DN may positively correlate to proteinuria and serum creatinine of CKD Ⅰ -ⅢDN patients, but not to the FBG and serum creatinine of CKD Ⅳ-Ⅴ patients.     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠足细胞的影响及其机制研究

目的：探讨黄芪甲苷（AS- IV）对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞的保护作用及其机制,为DN早期防治开辟一条新途径。方法体重180~200g健康雄性SD大鼠45只按配伍法分为正常对照组（NC组）、DN组和AS- IV治疗组（DN＋AS- IV组）,链脲佐菌素腹腔注射建立大鼠早期DN模型。DN＋AS- IV组大鼠在造模前2周予AS- IV 10mg/（kg＆#183;d）灌胃预处理至实验结束,共14周。造模后第6、12周末收集并测定24h尿量及尿蛋白;同时各组按抽签法选取5只大鼠测体重,处死大鼠后测血生化指标,取肾组织,光镜观察肾脏病理病理变化,电镜观察足细胞形态变化,肾母细胞瘤抑制基因1（WT1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,Western blot法测定大鼠肾皮质α3β1整合素蛋白水平的变化。结果与NC组相比,DN组大鼠血糖和24h尿蛋白增高,肾脏肾小球系膜区增生,足细胞足突融合,肾小球足细胞数量减少,α3β1整合素蛋白水平下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。AS- IV可显著改善DN大鼠蛋白尿,抑制肾小球系膜区增生,抑制足细胞足突融合和数目减少,上调α3β1整合素表达。结论 AS- IV对早期DN大鼠足细胞具有保护作用,可能与其上调足细胞α3β1整合素表达相关。     

不同剂量阿托伐他汀对老年早期糖尿病肾病患者外周血NF-κB活性和尿白蛋白排泄率的影响

目的：观察不同剂量阿托伐他汀对老年早期糖尿病肾病（DN）患者外周血单个核细胞中核因子-κB（NF-κB）P65（ser536）的磷酸化水平、血清炎症因子水平（hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β）及尿白蛋白排泄率（UAER）的影响。方法将72例2型糖尿病早期DN老年患者,半随机分为两组,分别给予阿托伐他汀钙片10mg/d（DN1组,37例）和20mg/d（DN2组,35例）,疗程16周。测定两组患者治疗前和治疗16周后外周血NF-κBP65的磷酸化水平、血清炎症因子水平、UAEA、血脂（TC、TG、DHL-C、LDL-C）。结果两组患者治疗后外周血NF-κBP65水平、血清炎症因子水平、TC及LDL-C均较治疗前降低（P＜0.01或P＜0.05）,以DN2组降低更显著。DN2组治疗后UAER较治疗前显著降低（P＜0.01）,DN1组无显著下降（P＞0.05）。结论阿托伐他汀在降低血脂的同时可降低外周血NF-κBP65的活性、血清炎症因子hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,改善患者炎症状态,减少尿蛋白,且呈剂量依赖性。     

尿微量蛋白检测对早期糖尿病肾病诊断的意义

目的探讨尿微量蛋白测定在糖尿病肾病（DN）早期诊断的意义。方法用RIA法分别测定95例早期DN患者（以尿白蛋白排泄率持续20-200μg／min为标准诊断，患者组A），80例无DN的糖尿病患者（患者组B）和82例正常健康人（对照组晨尿中的微量白蛋白（Micro—albumin，mAlb）、β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-m）和α1-微球蛋白（α1-microglobulin，α1-m）的水平。结果患者组A与患者组B及对照组比较，各项检测指标均增高，而患者组B与对照组均相近。结论DN早期肾损害与尿微量蛋白密切相关，尿mAlb、β2-m和α1-m是反映早期DN的敏感指标。     

肥胖对糖尿病肾病患者体内氧化应激系统的影响及相关因素分析

目的 探讨肥胖对糖尿病肾病慢性肾功能不全（CKD 2 ～4期）患者体内氧化应激系统及相关因素的影响.方法 选择同济大学附属东方医院肾内科糖尿病肾病CKD 2 ～4期的患者76例及健康对照组61例,分别按BMI分为正常组、超重组和肥胖组,比较各组生化及各氧化应激指标.结果 糖尿病肾病患者血清前列腺素F2α（PGF20α）及晚期氧化蛋白产物（AOPP）水平分别为（656±38） μg/L及（74±14） μmol/L,较健康对照（214 ±115） μg/L及（39±6）μmol/L明显升高（P＜0.05）,维生素E水平（14.9±2.6）mg/L较健康对照（25.±4.0）mg/L下降（P＜0.05）.糖尿病肾病PGF2α水平各组分别为（632±31） μg/L、（656±33） μg/L、（679 ±36） μg/L;AOPP各组水平分别为（64±8）μmol/L、（75±10） μmol/L、（83±16） μmol/L;超重组均较体重正常组明显升高,肥胖组较超重组明显升高（P＜0.05）.糖尿病肾病维生素E水平各组分别为（16.2±1.4） mg/L、（14.8±3.6） mg/L及（13.8±1.6）mg/L,各组比较有下降趋势（P＞0.05）.通过多元逐步线性回归分析显示BMI、TC、TG、吸烟史影响患者体内氧化应激系统.结论 糖尿病肾病患者体内存在氧化应激状态.肥胖影响糖尿病肾病患者氧化应激系统的水平.与肥胖相关的脂质紊乱同样影响糖尿病患者氧化应激水平.     

1，25—（OH）2D3对糖尿病肾病大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨1，25～（OH）。D3对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织VEGFmRNA及蛋白质表达的影响。方法SD大鼠分为3组，对照组，糖尿病肾病（DN）组，1，25—（OH）2D3组。链脲菌素腹腔注射诱导DM大鼠模型，尿蛋白定量≥30mg／24h为DN大鼠，诱导成功后1，25—（OH）2D3组给予3ng／（100g·d）皮下注射。实验12周末检测大鼠体重、血糖、血肌酐、24h尿白蛋白。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测VEGFmRNA及蛋白质的表达。结果DN组大鼠体重、血糖、尿白蛋白，肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达，肾小球细胞数，细胞外基质（ECM）均高于对照组（P〈0．01）。与DN组相比，1，25—（OH）2D3组大鼠体重、血糖、尿白蛋白，肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达，肾小球细胞数，ECM聚积显著降低（P〈0．01或P〈0．05）。尿VEGF与尿白蛋白呈正相关（rs=0．41，P=0．037），与体重、血糖、血肌酐无相关性（rs分别为0．18，0．13，0．21，P〉0．05）。结论1，25-（OH）2D3可减轻DN大鼠尿白蛋白的排泄，抑制肾小球系膜增殖，降低VEGFmRNA及蛋白质的表达。