APOB基因3′端短串联重复序列多态性与新疆维吾尔族自然长寿的关系

目的探讨载脂蛋白B（apolipoprotein B，APOB）基因第29外显子3′端可变数目串联重复序列（variable number of tandem repeat, VNTR）多态性与维吾尔族自然长寿的关系。方法选择191名年龄90岁以上的健康个体为长寿组，另选53名年龄65～70岁、性别、地域相匹配已自然死亡的正常个体为对照组。应用序列特异引物PCR和PCR-直接测序等技术对APOB进行分型，并测定等位基因HVE36和HVE48的核苷酸序列。结果在维吾尔族人群（长寿组191名，对照组53名）中，共发现14个等位基因。长寿组中HVE36、HVE42频率显著高于对照组（P〈0．05），并且HVE44、HVE46、HVE48、HVE58仅见于长寿组，而HVE26、HVE30、HVE34显著低于对照组（P〈0．05）。逐步逻辑回归分析显示，L等位基因和LL基因型与年龄呈正相关，而S等位基因和SS基因型与年龄呈负相关（P〈0．05）。核苷酸序列分析显示，每一种等位基因由富含AT的15bp长的基本单位或它们的变异体串联重复而构成。结论APOB等位基因S和基因型SS可能是维吾尔族自然长寿老人的危险因素，而等位基因L和基因型LL则是其保护因子。     

糖皮质激素受体基因ER22/23EK多态性与新疆维吾尔族人自然长寿的关系及与汉族人群的比较

目的探讨糖皮质激素受体基因(GR)第2外显子ER22/23EK多态性与维吾尔族人自然长寿的关系及种族差异。方法选择新疆维吾尔族191名年龄>90岁的健康个体为长寿组,另选53名年龄(65~70岁)、性别、地域相匹配已自然死亡的正常个体为对照组;同时随机调查移居新疆和田地区30年以上的(65~70岁)汉族老年人82人。采用序列特异引物PCR(PCR-SSP)、PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)和PCR-直接测序(PCR-sequen-c ing)等技术对GR基因进行分型。结果191名自然长寿老人和53名对照组中,ER22/23EK的等位基因和基因型频率无差异。新疆汉族老人GR基因ER22/23EK携带者显著高于维吾尔族老人,其WM、MM基因型(P<0.001)和M等位基因频率(P<0.0001)均显著高于维吾尔族老人,而WW基因型和W等位基因频率则显著降低。结论ER22/23EK的等位基因和基因型频率可能与维吾尔族自然长寿无关联,但有显著的种族差异。     

血红素加氧酶1基因多态性与新生儿高胆红素血症的相关性研究

目的探讨血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)启动子区域的g-413AT单核苷酸多态性和二核苷酸(GT)n重复序列多态性与新生儿高胆红素血症(neonatalhyperbilirubinemia)的相关性。方法运用改良的多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,IMLDR)技术对60例高胆红素血症新生儿(病例组)和60例健康新生儿(对照组)的HO-1基因启动子g-413AT单核苷酸多态性和二核苷酸(GT)n的重复序列多态位点进行分型。结果病例组和对照组在性别、出生体重、胎龄、日龄、分娩方式和喂养方式等方面的比较差异均无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,病例组HO-1基因启动子g-413AT的等位基因以及基因型分布的差异没有统计学意义(P0.05)。病例组与对照组HO-1基因的S等位基因频率及SS基因型频率分布的差异存在统计学意义(P0.05)。本研究还发现与L等位基因以及LL基因型比较,S等位基因以及SS基因型可显著提高新生儿患高胆红素血症的风险。最后,本研究发现SS基因型患者的血清胆红素浓度明显高于LS和LL基因型患者。结论 HO-1基因启动子区域的(GT)n重复序列多态性与血清胆红素水平与高胆红素血症的发生发展密切相关。     

血浆载脂蛋白B基因3′端可变数目串联重复序列的结构研究

目的研究载脂蛋白B(apolipoproteinB,apoB)基因apoB3′端可变数目串联重复序列(variable numberoftandemrepeats,VNTR)多态性与序列结构。方法应用聚合酶链反应结合琼脂糖凝胶电泳技术检测了522名随机抽取的体检人员apoB基因3′VNTR多态性,选取26个样本的PCR产物进行DNA序列测定。结果分离出16个等位基因即高变单元(hypervariableelement,HVE),其中杂合子多于纯合子,最大的等位基因是HVE58,最小的是HVE24;HVE34频率最高40.4%,其次是HVE32,占34.7%。对26名60个等位基因进行的DNA核苷酸测序中,发现一个等位基因异构体(Y A=ATAATTAAATATTT),4个结构模式。结论中国人与欧美人群在apoB基因3′VNTR等位基因频率分布上存在明显差异,在等位基因异构体与结构模式上也存在不同。     

新疆维吾尔族人自然长寿与HLA-DRB、ACE基因的关联分析

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-DRB基因及血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与新疆维吾尔族人自然长寿的关系.方法研究样本分为4组第1组年龄≥100岁;第2组年龄为90～99岁;第3组年龄为70～90岁;第4组为65-70岁自然死亡者.分别应用聚合酶链反应-序列特异引物法(PCR-SSP)、单链构象多态性(SSCP)分析和直接测序技术对各组进行基因分型.结果百岁组HLA-DR1的频率明显高于对照组(分别为9.5%和1.9%,P＜0.05);HLA-DR6(14)的频率也明显高于对照组(分别为9.5%和0.9%,P＜0.05);HLA-DR6的频率明显高于其余3组;HLA-DR4的频率明显低于对照组(分别为9.5%和23.6%,P＜0.05);HLA-DR9的频率明显低于对照组(分别为1.2%和9.4%,P＜0.05).相关分析显示HLA-DR1及ACE基因的D等位基因与长寿呈正相关,而HLA-DR9呈负相关.结论HLA-DRB基因的DR1等位基因和ACE基因的等位基因D对长寿可能有保护作用;HLA-DRB基因的DR9等位基因可能是不利于长寿的危险因素,HLA-DRB基因多态性和ACE基因多态性相互作用对长寿有协同作用.     

血浆载脂蛋白B基因3''端可变数目串联重复序列的结构研究

目的研究载脂蛋白B（apollpoprotein B，apoB）基因apoB 3’端可变数目串联重复序列（variable number of tandem repeats，VNTR）多态性与序列结构。方法应用聚合酶链反应结合琼脂糖凝胶电泳技术检测了522名随机抽取的体检人员apoB基因3’VNTR多态性，选取26个样本的PCR产物进行DNA序列测定。结果分离出16个等位基因即高变单元（hypervariable element，HVE），其中杂合子多于纯合子，最大的等位基因是HVE58，最小的是HVE24；HVE34频率最高40．4％，其次是HVE32，占34．7％。对26名60个等位基因进行的DNA核苷酸测序中，发现一个等位基因异构体（Y-A=ATAATTAAATATTT），4个结构模式。结论中国人与欧美人群在apoB基因3’VNTR等位基因频率分布上存在明显差异，在等位基因异构体与结构模式上也存在不同。     

5-羟色胺转运体基因启动子连锁多态区多态性与早发心肌梗死及血小板膜糖蛋白Ⅰb的关系

目的 研究中国北方汉族人群5-羟色胺转运体基因启动子连锁多态区(5-hydroxytryptamine transporter gene linked polymorphic region,5-HTTLPR)缺失/插人多态性与早发心肌梗死及血小板膜糖蛋白I b(gIycoprotein I b,GP I b)的关系.方法 采用性别、年龄配对方法 ,选择150例早发心肌梗死患者和150例冠状动脉造影阴性对照者作为研究对象.采用聚合酶链反应技术检测受试对象5-HTTLPR多态性位点的基因型和等位基因分布,全血流式细胞术检测血小板膜GPIb阳性百分率及平均荧光强度.结果 5-HTTLPR基因型LL型、LS型和SS型在心肌梗死组分布频率分别为32%,47%,21%,在对照组为17%,43%和39%(P＜0.01).L等位基因频率在心肌梗死组明显高于对照组(56%vs 39%,P＜0.01).心肌梗死组和对照组内不同基因型的血小板膜GPIb指标比较,LL基因型的血小板膜GP I b阳性百分率及荧光强度均低于同组LS型和SS型(均P＜0.01),多因素Logistic回归分析结果 提示5-HTTLPR的LL基因型与早发心肌梗死发病独立相关(OR=1.961,P=0.037).结论 5-HTTLPR的LL纯合子血小板活化程度增高,LL基因型可能与中国北方汉族人群早发心肌梗死的发病相关联.     

新疆维吾尔族阿尔茨海默病患者脑啡肽酶基因与载脂蛋白E基因多态性的关联分析

目的 探讨脑啡肽酶(neprilysin,NEP)基因rs3736187位点突变及其与载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因相互作用在新疆维吾尔族人群散发性阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer disease,SAD)发病机制中的作用.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法 检测了111例维吾尔族SAD患者和117名维吾尔族正常老年人NEP基因和ApoE基因多态性分布特征.结果 (1)NEP基因T等位基因频率在AD组高于对照组(x2=5.005,P＜0.05),携带T等位基因个体出现AD的危险性高于携带C等位基因的个体.(2)ApoE基因ε4等位基因频率AD组高于对照组(x2=4.218,P＜0.05),携带ε4等位基因个体出现AD的危险性高于未携带ε4等位基因的个体.(3)NEP基因的T等位基因与SAD发病相关且不受ApoE基因型影响.结论 NEP基因和ApoE基因的基因多态性与新疆维吾尔族SAD发病有关联.NEP基因可能是新疆维吾尔族SAD发病独立的易感基因.     

汉族人群载脂蛋白CII基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m多态性

采用套式聚合酶链反应结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术，并构建载脂蛋白CII（ApoCII)基因二核苷酸串联重复序列（TG）n(AG)m及（AG）m序列等位基因梯阶标准；检测正常汉族人群基因型和等位基因频率分布，检出36种（TG）n(AG)m序列基因型、12种等位基因。等位基因为17、18、26－35，其频率分别为0．061、0．011、0．002、0．002、0．054、0．255、0．372、0．084、0．026、0．039、0．052、0．041。检出7种（AG）m序列基因型、4种等位基因。等位基因为6、7、8、9，其频率分别为0．002、0．152、0．812、0．034。与欧洲白种人比较，ApoCII基因二核苷酸串联重复序列（TG）n(AG)m及（AG）m序列等位基因频率分布均具有明显的种族差异性（P＜0．01，P＜0．01）。     

载脂蛋白E基因多态性与新疆维吾尔族自然长寿的相关性研究

目的 探讨载脂蛋白E（apolipoproteinE，apoE）基因多态性与新疆维吾尔族自然长寿的关系。方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测百岁组42名，90岁组102名，65～70岁组70名和对照组53名的apoE基因多态性。结果 百岁组apoE的ε3／3、ε2／3和ε3／4基因型频率分别为69．0％、23．8％和2．4％，其ε3、ε2和ε4等位基因频率分别为82．1％、16．7％和1．2％，百岁组ε3／4基因型及ε4、ε3等位基因频率显著低于对照组（P〈0．01），ε2／3基因型及ε2等位基因频率则显著高于对照组（P〈0．01）。百岁与opoE基因的ε2等位基因呈正关联，与ε4等位基因呈负关联。结论在新疆维吾尔族，opoE基因多态性与个体寿命密切相关，同时也应考虑到长寿是年龄依赖的多种因素影响的结果。