树鼩载脂蛋白CI蛋白质结构分析

为了获得树载脂蛋白CI的蛋白质结构信息，利用相应的计算机软件及改良的Chou等方法，对从构建的树肝组织cDNA文库中克隆出的载脂蛋白CIcDNA序列进行了分析和比较，并对编码的蛋白质氨基酸序列及其二级结构、亲疏水性进行了分析和预测。结果表明，克隆出的树载脂蛋白CIcDNA序列（新基因已被GenBank接受）由380个核苷酸构成，编码翻译88个氨基酸的载脂蛋白CI前体（含26个氨基酸构成的信号肽和62个氨基酸组成的成熟蛋白），并推测出该蛋白的功能域、蛋白质的二级结构及C末端有一明显的疏水区。结果提示：树载脂蛋白CI的疏水性及结合脂质的能力强于人的载脂蛋白CI。     

冠心病患者载脂蛋白AⅠ-CⅢ基因簇限制性片段长度多态性研究

本文利用2.2 kb人载脂蛋白A Ⅰ基因探针,检测河南省商丘地区冠心病患者及健康对照成人的载脂蛋白A Ⅰ—C Ⅲ基因区域Sst Ⅰ限制性片段长度多态性。发现Sst Ⅰ多态性位点与冠心病无密切关系,不宜作为该地区冠心病患者的遗传标记。     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体新突变类型与表型关系的研究

目的　检测中国汉族家族性高胆固醇血症 (FH)家系低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因突变类型 ,研究基因型与表型间的关系 ,探讨FH发病的分子病理机制。方法　先证者及家系成员进行血脂测定、心电图、心脏及大血管彩色多普勒超声检查后采用聚合酶链反应 ( polymerasechainreaction ,PCR) 变性高效液相色谱 (DHPLC)法结合扩增产物直接序列分析检测LDLR基因启动子和全部 18个外显子片段 ,结果与GenBank公布的该基因正常序列比对找出突变并检索FH突变数据库(www .ucl.ac .uk/fh)。此外 ,采用PCR 限制性内切酶技术 ,检测载脂蛋白B10 0 (ApoB10 0 )基因Q35 0 0R突变 ,以排除家族性ApoB10 0 缺陷症 (FDB)。结果　DHPLC分析发现该患儿及其父母LDLR基因第 3外显子存在一异常波峰 ,DNA测序证实该患儿第 3内含子 5′剪接位点存在G→A纯合剪接突变 ,其父母相同位点表现为野生型和突变型杂合现象 ;同时未检测出患儿及其父母ApoB10 0Q35 0 0R突变。结论　国内首次发现LDLR基因第 3内含子G→A纯合剪接突变 ;该突变可能是FH发病的分子基础并导致其严重的临床表型 ;PCR DHPLC法可用于FH可疑人群的确诊     

冠心病患者载脂蛋白AI～CⅢ基因簇限制性片段长度多态性研究

冠心病患者载脂蛋白ＡＩ～ＣⅢ基因簇限制性片段长度多态性研究陈保生，况少青，许秀荣ｅｔａｌ．中国循环杂志，１９９３，８（１２）：７３４本文利用２．２ｋｂ人载脂蛋白ＡＩ基因探针，检测河南省商丘地区冠心病患者及健康对照成人的载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域Ｓｅｔ...     

人载脂蛋白B基因3′端高可变区不同等位基因在真核细胞中对基因表达调控的作用

为探讨人载脂蛋白B基因3'端高可变区（hypervariableregion，HVR）不同等位基因对真核细胞基因表达调控的作用．选取在正常人群中分本最广的HVE36小等位基因和在冠心病病人中分布占优势的大等位基因HVE44，分别克隆进含荧光素酶基因的pGL2－promoter及pGL2－control质粒中，转染Hela细胞和HepG2细胞．结果发现，在不同的细胞系中插入HVE44等位基因的重组质位表达均高于插入HVE36的重组质粒的表达。表明载脂蛋白B基因3'端高可变区不同等位基因具有调控基因表达的作用，HVE44大等位基因可上调细胞内的基因表达，这或许是以HVE44等大等位基因为主体的动脉粥样硬化患者体内载脂蛋白B升高的原因之一．     

树鼠句膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1cDNA和蛋白质结构分析及其组织表达

目的获得不易感动脉粥样硬化动物树鼠句的膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1的cDNA和蛋白质序列,鉴定其组织分布,探讨其是否参与树鼠句独特的高密度脂蛋白代谢。方法以树鼠句肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得树鼠句ATP结合盒转运体A1 cDNA序列并推导出其氨基酸序列,应用实时聚合酶链反应技术分析树鼠句ATP结合盒转运体A1 mRNA在各组织中的分布情况。结果获得的树鼠句ATP结合盒转运体A1 cDNA序列全长为7 762 bp,其中开放阅读框架6 786 bp,编码2 261个氨基酸的蛋白。该蛋白与人ATP结合盒转运体A1的长度相同,二者在氨基酸水平上高度同源(95%)。多组织表达谱显示树鼠句ATP结合盒转运体A1在多种组织中广泛表达,其中表达量最高的依次为肺脏、肝脏、肾脏和脾脏,这与人和小鼠ATP结合盒转运体A1在肝中高表达而在肺和脾中低表达的分布有很大差异。结论树鼠句ATP结合盒转运体A1组织表达谱的特点有可能增加其在体内的浓度和数量,从而可能间接增加高密度脂蛋白的合成。     

人载脂蛋白B基因3′端高可变区不同等位基因在真核细胞中对基因表达调控的作用

为探讨人载脂蛋白Ｂ基因３’端高可变区不同等位基因对真核细胞基因表达调控的作用。选取在正常人群中分布最广的ＨＶＥ３６小等位基因和在冠心病病人中分布占优势的大等位基因ＨＶＥ４４，分别克隆进含荧光毒酶基因的ｐＧＬ２－ｐｒｏｍｏｔｅｒ及ｐＧＬ２－ｃｏｍｔｒｏｌ质粒中，转杂Ｈｅｌａ细胞和ＨｅｐＧ２细胞。     

中国汉族和蒙古族人群载脂蛋白B基因3''端高可变区等位基因的分布频率及序列分析

载脂蛋白Ｂ基因３末端下游有一个高可变宫重复序列（ｖａｒｉａｂｌｅｎｕｍｂｅｒｏｆｔａｎｄｅｍｌｙｒｅｐｅａｔ，ＶＮＴＲ）也叫高可变区，每一个串连重复序列长度在１５ｂｐ左右，富含Ａ，Ｔ两相核苷酸，不同的串连重复序列拷贝数构成了等位基因的高度多态性，本文应用ＰＣＲ技术分析了汉族和蒙古族人群载脂蛋白Ｂ基因３ＶＮＴＲ等位基因的分布和频率；并测定了等位基因ＨＶＥ３４和ＨＶＥ４６的核苷酸序列，在汉族人群（１６     

载脂蛋白E基因多态性与高脂血症的相关性研究

选取１３３例高脂血症患者及１２２例正常对照人群，用多聚酶链反应方法快速鉴定其载脂蛋白Ｅ的基因型，结合血脂分析，研究载脂蛋白基因多态性与高脂血症的关系，结果表明，Ｅ３等位基因的分布频率在病例组中明显低于对照且，病例组中Ｅ４等位基因的分布频率明显高于对照组，表明Ｅ４等位基因与高脂血症显著相关。     

血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质的研制

目的 研制与临床标本基质相似的血清总胆固醇(TC)、总甘油(TTG)、游离甘油(FG)和甘油三酯(TG)标准物质.方法 按国家标准物质技术规范的要求,制备4种血脂浓度的健康人新鲜混合血清,用酶法测定TC检测均匀性,用HPLC法检测稳定性并定值,评估不确定度.结果 4种血清均匀性检验数据方差分析P值分别为0.339、0.212、0.275、0.196(均＞0.05),说明均匀性良好;稳定性研究结果显示4种血清TC和TG在-20℃保存至少可稳定4年;4种血清的标准值和不确定度TC分别为(5.110±0.064)mmol/L、(4.761±0.062)mmol/L、(3.941±0.050)mmol/L和(3.158±0.041)mmol/L;TTG分别为(2.212±0.043)mmol/L、(1.679±0.033)mmol/L、(1.275±0.027)mmol/L和(1.067±0.023)mmol/L;FG分别为(0.142±0.005)mmol/L、(0.149±0.004)mmol/L、(0.146±0.003)mmol/L和(0.122±0.003)mmol/L;TG分别为(2.069±0.043)mmol/L、(1.530±0.033)mmol/L、(1.129±0.027)mmol/L和(0.945±0.023)mmol/L.结论 研制的血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质均匀性和稳定性良好,定值可靠,已被国家质量监督检验检疫总局发布为国家一级标准物质(GBW 09145、GBW 09146、GBW 09147、GBW 09148).