蛞蝓提取物对肺癌细胞P53及端粒酶基因hTERT表达的影响

目的:了解蛞蝓提取物对肺癌细胞P53、端粒酶基因hTERT表达的影响。方法:体外培养肺癌细胞株,用免疫组化SP法进行检测。结果:蛞蝓提取物可抑制肺癌A549细胞端粒酶基因hTERT表达,并改变突变型P53表达。结论:蛞蝓提取物对肺癌细胞的抑制作用有可能是通过抑制突变型P53及端粒酶基因hTERT表达而实现的。     

低分子姬松茸多糖对Bel-7402细胞端粒酶-RNA mRNA表达的影响

目的探讨低分子姬松茸多糖(a low molecular weight polysaccharide isolated from Agaricus blazei,LMPAB)对人肝癌细胞Bel-7402端粒酶-RNA mRNA表达的影响。方法5,10和20μg.ml-1浓度的LMPAB处理体外培养的Bel-7402细胞48 h后,采用原位杂交法检测端粒酶-RNAmRNA表达。结果LMPAB下调体外培养Bel-7402端粒酶-RNAmR-NA的表达,呈剂量依赖性。与空白对照组比较,端粒酶-RNA mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.01)。结论LMPAB具有下调端粒酶-RNA mRNA表达的作用,进而降低端粒酶活性,抑制肿瘤细胞生长。     

清金化痰汤对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶及黏蛋白基因表达的影响

目的探讨清金化痰汤调节慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、清金化痰汤组与克拉霉素组,每组10只。除正常组外,其余3组均采用气管内注入脂多糖和烟熏复合法建立COPD模型,分别给予生理盐水、清金化痰汤、克拉霉素灌胃,连续30 d。实验第31日,处死大鼠提取肺组织,每组随机选取6只,采用实时荧光定量PCR检测肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、表皮生长因子(EGFR)、黏蛋白5AC(MUC5AC)基因表达。结果模型组大鼠肺组织NE、MUC5AC m RNA表达较正常组升高;与模型组比较,清金化痰汤组、克拉霉素组NE、MUC5AC m RNA表达均显著降低,清金化痰汤组NE、MUC5AC m RNA表达较克拉霉素组显著降低;清金化痰汤组EGFR m RNA表达较模型组显著降低。结论清金化痰汤通过调节NE/EGFR/MUC5AC信号转导通路,抑制气道黏液高分泌。     

健脾益肾汤联合肠内营养支持促进大肠癌患者术后恢复的效果及对营养状态、外周血CK20mRNA、端粒酶表达的影响

目的:观察健脾益肾汤联合肠内营养支持(EN)促进大肠癌患者术后恢复的效果及对营养状态、外周血细胞角蛋白(CK20) m RNA、端粒酶表达的影响。方法:按随机数表法将82例大肠癌术后患者分为健脾益肾汤+EN组(研究组,n=41)和EN组(对照组,n=41)。于术毕第1天(T1)、第8天(T2)时检测2组患者血清营养指标[总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、转铁蛋白(TRF)]水平;于T1及术毕第15天(T3)时检测2组患者外周血肿瘤微转移标记物(CK20mRNA、端粒酶)表达情况,评估中医症状积分及生存质量[欧洲癌症治疗研究组织(EORTC)生命质量测定量表(QLQ-C30)、结直肠癌特异性量表(QLQ-CR38)]。结果:T2时,2组血清TP、ALB、TRF水平均较T1时升高,且研究组高于对照组(P均0. 05);外周血CK20mRNA和端粒酶阳性率、各中医症状积分及QLQC30、QLQ-CR38评分均较T1时降低,且研究组低于对照组(P均0. 05)。结论:健脾益肾汤联合EN可显著改善大肠癌术后患者营养状态、中医症状及生存质量,对抑制肿瘤转移有一定帮助。     

端粒酶活性联合p16启动子超甲基化在胆囊癌中的表达意义

目的探讨胆囊癌组织和癌旁组织中端粒酶活性和p16基因启动子超甲基化的意义。方法采用TRAP-ELISA和MSP检测胆囊癌及癌旁组织各46例中端粒酶活性和p16基因启动子区超甲基化。结果46例胆囊癌中33例(72%)p16超甲基化阳性,癌旁组织有14例(30%)p16超甲基化,两者有明显差异(P<0.05)。46例胆囊癌中31例(67%)端粒酶阳性,而癌旁组织端粒酶阳性仅有4例(9%),两者有显著性差异(P<0.05)。p16超甲基化和端粒酶阳性率这两项指标在胆囊癌的不同分化程度中无明显差异(P>0.05);中、低分化胆囊癌与高分化胆囊癌端粒酶积分光度比较有显著性差异(P<0.05)。胆囊癌p16甲基化和端粒酶检测一致性较好(P<0.01)。结论联合检测端粒酶活性与p16启动子异常甲基化对胆囊癌的诊断有一定价值。     

塔本文都苏提取液对衰老小鼠脑组织端粒酶表达的影响

目的比较塔本文都苏(Tabenwendusu,TBWDS)水提取液与乙醇提取液对小鼠脑组织端粒酶的影响。方法 D-半乳糖连续ip建立衰老小鼠模型,并ig给予TBWDS水提液和醇提液,分别检测脑组织的端粒酶、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果 TBWDS水提液和醇提液均可明显提高衰老小鼠脑组织端粒酶及GSH含量和SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量,用药组与衰老模型组比较有明显差异(P0.01或P0.05)。结论 TBWDS水提液和醇提液均可明显提高衰老小鼠脑组织抗氧化能力和端粒酶含量,具有延缓脑组织细胞衰老的作用,但水提液和醇提液之间没有明显差异。     

益肺活血汤对大鼠慢性阻塞性肺疾病模型肺组织氧化抗氧化失衡的影响

[目的]观察益肺活血汤对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型病理和肺功能的影响,评价其在氧化/抗氧化失衡机制方面的干预效应。[方法]采用SPF级雄性SD大鼠40只随机分为对照组10只、COPD组15只、益肺活血汤组15只。COPD组采用气管内注射脂多糖联合香烟烟雾吸入法制备大鼠COPD模型同时给予生理盐水灌胃。益肺活血汤组在COPD组制备方法基础上同时给予益肺活血汤灌胃治疗。对照组则采用室内环境喂养,气管内注射液生理盐水,同时给予生理盐水灌胃。模型制备及治疗过程结束后检测各组大鼠肺功能,并检测肺组织中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,转录因子红细胞系-2p45(NF-E2)相关因子-2(Nrf2)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白及m RNA表达。[结果]与对照组比较,模型组肺功能及肺组织病理切片提示COPD模型制备成功,MDA、GSH增高,SOD下降,NRF2和γ-GCS的蛋白及m RNA表达增高。与模型组比较,治疗组肺功能和肺组织病理变化减轻,MDA、GSH下降,SOD增高,NRF2和γ-GCS的蛋白及m RNA表达下降。[结论]益肺活血汤能有效减轻气管内注射脂多糖联合香烟烟雾吸入所造成的大鼠肺功能下降和肺组织病理变化。其机制应与通过提高肺组织SOD的含量从而减轻氧化应激有关,与激活Keap1-Nrf2-ARE通路引起γ-GCS基因和蛋白水平上调、GSH增多相关可能性小。     

加减射干麻黄汤对哮喘大鼠气道重塑及肺组织PCNA和ERK的影响

目的观察加减射干麻黄汤对哮喘大鼠气道重塑及肺组织增殖细胞核抗原(PCNA)与细胞外调节蛋白激酶(ERK)的影响并探讨其机制。方法 60只Wistar大鼠随机分为模型对照组、空白对照组、中药治疗组、地塞米松组。使用卵蛋白致敏建立哮喘大鼠模型,中药治疗组予加减射干麻黄汤0.5 m L灌胃,地塞米松组用地塞米松(0.65 mg/kg)0.26 m L腹腔注射。利用图像分析软件测量大鼠支气管内管壁面积、平滑肌面积、基底膜周长,通过免疫组化法检测大鼠肺组织PCNA和ERK的表达,原位杂交法检测大鼠肺组织PCNA和ERK的m RNA的表达,免疫印迹法检测大鼠肺组织PCNA和ERK的表达。结果 1)中药治疗组哮喘大鼠的症状明显减轻。2)中药治疗组大鼠肺组织支气管上皮细胞的炎症反应减轻,支气管壁及管腔内的炎症细胞也明显减少(P0.05)。3)中药治疗组WAm/Pbm及WAi/Pbm明显降低(P0.05),与地塞米松组比较无显著差异(P0.05)。4)中药治疗组与地塞米松组PCNA m RNA和ERK m RNA表达较模型对照组明显减少(P0.05)。5)中药治疗组PCNA m RNA和ERK m RNA表达较模型对照组明显减少,且与地塞米松组相当(P0.05)。6)中药治疗组PCNA、p-ERK、ERK蛋白表达较哮喘模型组明显降低(P0.05);与地塞米松组比较明显降低(P0.05)。结论加减射干麻黄汤能改善哮喘大鼠气道重塑,其机制可能是通过降低PCNA的水平,抑制气道平滑肌增殖及ERK、p-ERK、PCNA蛋白表达水平,从而达到改善哮喘气道重塑的目的。     

益气解毒片对鼻咽癌细胞裸鼠植瘤细胞端粒酶抑制作用的实验研究

为了观察益气解毒片在体内对鼻咽癌细胞生长和端粒酶活性的影响。移植鼻咽癌细胞(HNE_1)于BALB/C裸鼠皮下,制备鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,肿瘤生长为(1.89±0.37cm~3)。用益气解毒片药液灌胃荷瘤裸鼠30d,测量肿瘤体积和瘤重,同时取瘤组织,用ELISA-PCR法检测瘤组织端粒酶的活性。结果:益气解毒片药液能抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长和端粒酶的活性,抑瘤率为82.2±7.56％,用药后瘤组织端粒酶活性受到抑制(A_(450):0.37±0.10),均为阴性。与环磷酰胺对照(抑瘤率:83.25±8.97％,A_(450);0.41±0.09)无明显差异。瘤体积和端粒酶的活性(1.66±0.47cm~3,0.37±0.10),明显小于蒸馏水对照组(1O.21±0.67cm~3,A_(450):1.69±O.21)。益气解毒片抗鼻咽癌作用可能与其抑制鼻咽癌细胞端粒酶的活性有关。     

端粒、端粒酶与胃癌及其中西医防治

端粒 (telmoere)与端粒酶 (telomerase)是近年来国际医学生物学界高度重视的研究热点之一。原因是它们与细胞分裂 ,细胞衰老及肿瘤发生、发展有密切关系。笔者就近年来有关端粒及端粒酶在胃癌中的研究概况作一综述。1　端粒与端粒酶端粒是真核细胞染色体末端的一种具有保护作用的特殊结构 ,含有许多简单重复的 DNA序列及相关蛋白质。它使染色体不至于因出现断裂而产生融合 ,亦不易为核酸外切酶所降解 ,保证染色体末端的稳定复制。近年从分子水平研究了端粒的结构 ,证实了人类染色体端粒由 5′TTAGGG3′序列片断重复构成 ,重复次数是2 0 …     

抗癌方抑制人结肠癌细胞增殖及端粒酶活性

端粒酶(Telomerase)是一种由蛋白质和 RNA 组成的反转录酶,日渐增多的资料表明,肿瘤细胞及组织中端粒酶阳性率较高,通过抑制端粒酶活性筛选抗肿瘤药物的研究是当今的热点之一。为研究中药复方抗癌方(简称抗癌方)对人结肠癌细胞的作用机制,我们观察了抗癌方对 HC 8693细胞株细胞增殖及端粒酶活性的影响。现将结果报道如下。材料与方法1 药物与试剂抗癌方由莪术、半枝莲、柴胡、黄芩、党参、法半夏、大枣、甘草组成,按工艺制成每毫升含1g 生药的汤剂。实验时用生理盐水配成合适浓度。四甲基偶氮唑盐(3-[4,5-dimethylthiazol-21y]-2,5-diphenyl terazolium bromide,MTT)购于     

人类偏肺病毒藏身之谜揭开

N6-甲基腺苷(m6A)修饰是RNA最常见的修饰之一,但科学家对其生物学作用并不清楚。美国一项最新研究发现,人类偏肺病毒(HMPV)的m6A修饰可帮助病毒成功隐藏起来,不被免疫系统发现,进而促进HMPV的复制和基因表达。动物实验表明,以m6A为标靶的实验性HMPV疫苗,会引发强烈的先天免疫应答和有效的适应性应答,进而预防肺部和鼻腔感染。相关研究成果刊发在《自然·微生物学》杂志上。     

扶正抑瘤汤对肿瘤细胞端粒酶活性影响的实验研究

目的 :探讨扶正抑瘤汤抗肿瘤作用的机理。方法 :用 S1 80 瘤株接种昆明种小鼠建成 S1 80 实体瘤模型 ,采用扶正抑瘤汤等中药灌胃治疗 ,用端粒酶试剂盒检测肿瘤细胞端粒酶活性。结果 :各中药治疗组肿瘤细胞端粒酶活性较 NS(荷瘤 )组明显降低 ( P<0 .0 0 1)。结论 :扶正抑瘤汤可以明显抑制肿瘤细胞端粒酶的活性 ,是其抗肿瘤作用的机理之一。     

RNA干扰及其在药用植物代谢工程中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是把双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)导入某些生物和细胞而引起同源mRNA降解的现象,是一种转录后基因沉默机制。dsRNA在体内被Dicer二聚体切割成21～25bp的小干涉RNA(smallinterfering RNA,siRNA),然后在siRNA引导下,由RNA诱导沉默复合体(RN Ainduced silencing complex,RISC)降解靶mRNA。RNA干扰作为一种新型反义技术可以有效的抑制特异基因的表达,因此可用于对药用植物次生代谢产物的生物合成途径进行调控,达到调控天然产物生物合成的目的。现将RNAi机制研究的最新进展及RNAi在药用植物代谢工程方面的应用进行综述。     

清金化痰汤对COPD模型大鼠肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶及黏蛋白5AC表达的影响

目的探讨清金化痰汤调节慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法 40只清洁级Wistar大鼠随机分为空白对照组(A)、模型组(B)、清金化痰汤组(C)与克拉霉素组(D)。B、C、D组大鼠均给与气道内滴注脂多糖(LPS)联合烟熏的方法建立慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌模型。B、C、D组连续30 d分别给予生理盐水、清金化痰汤、克拉霉素灌胃,正常组正常喂养。实验第31天,处死大鼠,提取肺组织。每组随机选取6只,采用实时荧光定量PCR检测肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、黏蛋白5AC(MUC5AC)基因表达,阿尔新兰-过碘酸雪夫法观察气道上皮杯状细胞增生,免疫组化法检测肺组织及气道上皮NE、MUC 5AC蛋白表达。结果模型组NEm RNA、MUC 5AC m RNA表达、杯状细胞数目、肺组织中NE及MUC5AC表达均较空白对照组显著升高;清金化痰汤组、克拉霉素组MUC 5ACm RNA、杯状细胞数目、肺组织中MUC 5AC均较模型组显著降低;清金化痰汤组NEm RNA、MUC 5ACm RNA、肺组织气道上皮NE表达较克拉霉素组降低;清金化痰汤组在杯状细胞增生、肺组织气道上皮MUC 5AC表达与克拉霉素组无差异。结论清金化痰汤可能通过调节NE/MUC 5AC途径,抑制慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌。     

胃癌患者的端粒酶的表达

目的:探讨胃癌患者和良性胃病变患者的端粒酶表达。方法:对40例胃癌患者和8例良性病变胃病患者在胃镜下嵌取病变部位胃粘膜,对组织标本中的端粒酶结构hTERT(human telomerase catalytic subunit)进行RT-PCR扩增,来检测端粒酶活性表达。结果:39例胃癌患者的hTERT表达阳性,1例良性病变患者为阳性,其余患者都是阴性。结论:端粒酶结构中的hTERT表达可以作为评价胃癌的重要指标之一,在良性病变胃病患者中可以作为病情发展的重要指标之一。     

RNA干涉技术在基础医学中的研究进展

RNA干涉(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double strand RNA,ds RNA)引起的转录后基因沉默机制,具有序列特异性和高效性,RNAi作为一门新的基因阻断技术,在基础医学研究及基因治疗中具有广阔的应用前景。对RNAi作用机制及其在疾病发病机制及治疗方面的研究进展进行了概述。     

吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞端粒酶活性的影响

目的:探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞凋亡及端粒酶催化亚基(hTERT)表达的影响,为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法:体外培养人结肠癌HT29细胞,加入不同浓度的吴茱萸碱及盐酸小檗碱进行培养,采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,TRAP法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERT的表达。结果:吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后,增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性;能够降低HT29端粒酶活性,但二者无协同作用;并且端粒酶hTERT表达降低,具有剂量依赖关系。结论:吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用,该抑制作用可能通过下调端粒酶hTERT基因表达,降低端粒酶的活性,为临床治疗大肠癌提供实验依据。     

中药天年饮对衰老大鼠睾丸生精细胞端粒酶表达的影响

目的观察中药天年饮对衰老大鼠睾丸生精细胞端粒酶表达的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常组、衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组,每组均为10只。采用D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型。ELISA方法检测各组大鼠血清睾酮含量、黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)的活性、SP免疫组化法检测睾丸生精细胞端粒酶的表达。结果衰老大鼠血清睾酮含量、SOD活性明显下降(与正常大鼠相比P<0.05,P<0.01);衰老大鼠睾丸生精细胞端粒酶的表达明显少于正常大鼠。天年饮可明显抑制衰老大鼠血清睾酮含量、SOD活性的下降(用药组与模型组相比P<0.05,P<0.01);并能明显提高衰老大鼠睾丸生精细胞端粒酶的表达。结论中药天年饮可明显改善衰老大鼠睾丸生精细胞端粒酶的表达,具有一定延缓衰老的作用。     

端粒酶测定对恶性与结核性胸液的鉴别诊断价值／罗艳蓉…／／中国医学文摘

检测恶性组14例，结核组13例。结果：恶性组胸液中端粒酶阳性率显著高于结核组(P＜O.01)，恶性胸液端粒酶阳性率显著高于CEA和肿瘤细胞阳性率(P＜O．05)。胸液端粒酶诊断恶性胸液的特异性与CEA和肿瘤细胞检查(P＜O.05)，表明其对恶性胸液的诊断和鉴别诊断有较好的实用价值。