钙网织蛋白促进新生血管形成在类风湿关节炎发病机制中的作用

目的探讨钙网织蛋白（CRT）促进新生血管形成在类风湿关节炎（RA）发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测活动期RA 患者、骨性关节炎（OA）患者和健康对照组（HC）血清以及RA 和OA 患者关节滑膜液中CRT 的含量。采用免疫组织化学（IHC）法检测CRT 在RA 和OA 患者关节滑膜组织中的表达。应用人脐静脉内皮细胞（HUVECs）体外模型,分别采用MTT 实验、细胞划痕实验及构建体外血管生成的三维模型检测 CRT 在HUVECs 增殖、迁移及管腔形成中的作用。结果RA 组血清中CRT 含量（[ 6.4±3.1）μg/L]明显高于OA 组（[ 3.7±0.9）μg/L]及HC 组（[ 3.4±1.0）μg/L];RA 组滑膜液中CRT 含量（[ 6.9±3.4）μg/L]明显高于OA 组（[ 3.9±0.7）μg/L],差异有统计学意义（P < 0.01）。CRT 在RA 滑膜组织中高表达,主要位于滑膜衬里层和衬里下层的血管内皮细胞及血管周围、炎性细胞内外等,而OA 滑膜组织中CRT 仅见极少量的表达。MTT 实验、细胞划痕实验及体外血管生成三维模型检测结果显示,CRT 具有明显促进HUVECs 增殖、迁移及管腔形成的作用。结论CRT 在RA 患者血清、滑膜液及滑膜组织中表达均升高,CRT 可能通过促进新生血管形成参与RA 滑膜炎和血管翳形成的发病机制。     

白细胞介素-1、基质金属蛋白酶-1在膝关节骨性关节炎发病中的作用探讨

目的探讨白细胞介素-1（IL-1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）在膝关节骨性关节炎（OA）发病中的作用。方法提取23例OA病变轻微患者（OA第一组）、28例OA病变严重患者（OA第二组）、6例对照者（盘状半月板组）的滑膜组织及关节液，采用免疫组织化学方法检测膝关节滑膜组织中IL-1、MMP-1的阳性细胞率及通过夹心ELISA法测定膝关节滑液中IL-1、MMP-1含量。结果本组57份膝关节滑膜组织及关节滑液标本中，无论是对照组还是OA组中，均能测出IL-1、MMP-1。OA病变轻微组膝关节滑膜组织及关节滑液标本中IL-1、MMP-1含量与对照组比较无显著性差异（P〉0．05），OA病变严重组膝关节滑膜组织及关节滑液标本中IL-1、MMP-1含量显著高于病变轻微组和对照组（P〈0．05）。结论IL-1和MMP-1在骨性关节炎的发病中起重要作用。OA患者滑膜细胞高水平自分泌性分泌IL-1和MMP-1可能与其炎性发生与发展密切相关，可能是关节滑液中IL-1和MMP-1的主要来源。     

瘦素在类风湿关节炎中的作用机制初步探讨

目的：检测类风湿关节炎（RA）患者血清瘦素水平、滑膜中瘦素及瘦素受体的表达，探讨瘦素在RA发病中的作用机制。方法：RA患者血清标本30例（RA组），以酶联免疫吸附试验（ELISA）测定其血清瘦素浓度；关节滑膜标本25例，用免疫组化的方法测定瘦素及瘦素受体在滑膜中的表达；并与25例骨性关节炎（OA）组和3例正常者（对照组）比较。结果：RA组患者血清瘦素水平明显高于骨性关节炎（OA）组（P〈0．01），也明显高于滑液水平（P〈0．05）；且与体质量指数、a1酸性糖蛋白呈正相关（标准化回归系数分别为0．369及0．234；P〈0．01）；与握力、胰岛素指数及空腹血糖呈负相关（标准化回归系数分别为-0．295、-0．453及-0．192；P〈0．01）；与胰岛素水平、C反应蛋白、类风湿因子（RF）、肿胀指数、压痛指数、晨僵时间、病程、年龄、性别等无关：瘦素及瘦素受体在RA患者滑膜中的表达明显高于正常对照组。结论：瘦素可能通过在靶器官的高表达而起到调节炎症的作用；可能在炎性反应中参与急性时相蛋白的合成与调节而影响疾病的发展过程。     

IL-23p19 mRNA在RA患者滑膜组织及滑膜细胞中的表达

目的:探讨类风湿性关节炎(RA)与骨性关节炎(OA)患者滑膜组织及体外培养滑膜成纤维细胞(SF)中白细胞介素(IL)-23p19mRNA分泌来源及对RA诊断的意义。方法:收集行滑膜切除术及关节置换术的6例RA患者及6例OA患者滑膜组织,酶消化法对滑膜组织行SF体外培养,RT-PCR方法检测RA和OA滑膜组织、SF中IL-23p19mRNA表达水平,RA患者滑膜组织、SF中IL-1βmRNA的表达水平。结果:(1)6例RA患者和4例OA患者滑膜组织、SF或OASF中IL-23p19mRNA表达均为阳性,且RA患者滑膜组织中的表达高于OA患者,RASF中的表达量显著高于OASF中阳性标本的表达量(均P<0.05)。(2)6例RA患者滑膜组织中IL-1βmRNA表达均阳性,且与IL-23p19mRNA表达水平呈正相关(r=0.900,P<0.05),6例RASF中IL-1βmRNA表达均阳性,且与IL-23p19mRNA表达水平正相关(r=0.883,P<0.05)。结论:IL-23参与了RA的发病过程,并且可由RA患者中的SF分泌,IL-23可作为RA与OA鉴别诊断的指标之一,IL-1β很可能是IL-23在RA中发挥致病作用的途径之一。     

骨性关节炎患者血清和关节液中自由基水平及意义

目的 了解骨性关节炎(OA)患者血清和关节液中自由基水平,探讨一氧化氮(NO)和氧自由基在骨性关节炎发生发展中的作用.方法 检测了63例骨性关节炎患者(OA组)和20例健康对照者(对照组)血清和关节液中NO和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量.结果 与对照组比较,OA患者血清中NO和MDA含量显著升高(P＜0.01),SOD含量明显下降(P＜0.05);关节液中NO和MDA含量明显高于血清中的含量(P＜0.01,P＜0.05),SOD含量低于血清中的含量(P＜0.05).结论 OA患者体内自由基水平增高,NO和氧自由基在骨性关节炎的发病机制中具有重要的作用.     

骨性关节炎患者血清及膝关节液白细胞介素-1、肿瘤坏死因子-α的水平变化及意义

目的 观察骨性关节炎（OA）患者膝关节液及血清中白细胞介素-1（IL-1）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平与病变程度的关系. 方法 50例单侧膝关节OA患者中早期、中期和晚期分别为18例、15例和17例,检测患侧膝关节液及血清中IL-1和TNF-α水平,以健康志愿者15例为对照组. 结果 OA患者膝关节液及血清中IL-1及TNF-α水平高于对照组（P＜0.05）,随着疾病程度加重,膝关节液及血清中的IL-1及TNF-α水平显著增加,IL-1和TNF-α水平存在线性相关（均P＜0.01）. 结论 IL-1和TNF-α与OA患者免疫炎症有关,其水平高低可反映病情活动变化情况,与病变程度密切相关,联合检测这两种指标有助于病情判断.     

骨性关节炎的病因及临床研究进展

骨性关节炎（osteo arthrosis，OA）从关节软骨起病，影响整个关节结构，包括软骨下骨、韧带、滑膜、关节囊及关节外肌肉，最终因关节软骨全部脱失而导致关节畸形和功能丧失的一种疾病。骨性关节炎是世界上最常见的关节病，随年龄增大，患病率迅速上升，大于65岁人群中50％以上有骨性关节炎的X线片表现。     

骨关节炎患者血清及关节液中TNF-α与MMP-3含量及临床意义

目的研究膝关节骨关节炎患者血清及关节液中TNF-α与MMP-3含量与骨关节炎的病变严重程度的关系,及二者在血清及关节液中水平的相关性,探讨TNF-α与MMP-3在骨关节炎发病中的作用及其在临床上反映骨性关节炎（OA）病程变化的可靠性。方法对123例骨性关节炎患者及28名正常人分别拍摄双侧单足站立位膝关节X线片。根据X线片将膝关节骨关节炎患者分早、中、晚3期。正常人及患者均抽取静脉血和膝关节液,离心后取上清液。用夹心酶联免疫吸附法测定血清及关节液样本中TNF-α与MMP-3含量。结果膝关节骨关节炎患者血清中TNF-α与MMP-3含量高于正常人,差异有显著性（P〈0.001）。膝关节骨关节炎患者血清中TNF-α和MMP-3水平在早期已明显增高,而晚期水平达到最高,而且随着病情的加重,含量明显增高;关节液中TNF-α和MMP-3的含量同样随着病情的加重而增高。研究结果还显示,骨关节炎患者血清与关节液中TNF-α和MMP-3水平分别作相关性分析,结果表明存在线性相关：rTNF-α=0.69（P〈0.001）,rMMP-3=0.74（P〈0.001）;同时TNF-α与MMP-3两者含量在血清中和在关节液中同样存在线性相关性。结论TNF-α与MMP-3在骨关节炎患者血清与关节液中均有较高水平,并与关节病变严重程度相关,它们在患者血清与关节液中的水平存在相关性。因此,联合检测TNF-α与MMP-3在OA关节液和血液中的含量,有助于病情的判断。     

金属蛋白酶MMP-3测定对类风湿关节炎与骨性关节炎鉴别诊断的意义

目的探讨基质金属蛋白酶在骨性关节炎(OA)和类风湿性关节炎(RA)损害中的作用.方法采用单克隆抗体酶免疫测定技术检测OA和RA患者血清及关节液中的金属蛋白酶MMP-3的含量,并与正常男女对照组作比较.结果(1)正常对照组男性血清MMP-3含量比女性高1～2倍.(2)OA组血清MMP-3平均水平男性为(141±37)μg/L,对照组为(68±16)μg/L;女性为(110±29)μg/L,对照组为(33±11)μg/L,男女两组与对照组比较差别有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).关节液中的MMP-3的平均浓度为(32970.02±4870.82)μg/L,明显高于血清测定值.(3)在RA组,血清MMP-3水平男性为(681±127)μg/L,女性为(567±116)μg/L显著高于正常对照组及OA病人组(P＜0.01).(4)RA组、OA组血清与关节液中MMP-3水平呈正相关(r分别为0.790 6,0.882 1).结论MMP-3的血清水平RA患者显著高于OA患者,这对于RA和OA的鉴别诊断,探讨发病机理及治疗监测等具有重要的意义.     

雷公藤多甙片对胶原诱导关节炎大鼠细胞因子的调节作用

目的观察雷公藤多甙片对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠外周血清和关节腔中TNF-α、IL-1β以及滑膜中VEGF的影响,探讨雷公藤多甙片治疗CIA的可能机制。方法建立CIA大鼠模型,常规HE染色,测量关节体积,计算关节炎指数及病理积分,用雷公藤多甙片灌胃治疗,治疗一月后用ELISA检测血清和关节液中TNFα-、IL-1β含量;用免疫组织化学染色检测滑膜中VEGF的蛋白表达。结果模型组大鼠血清和关节液中TNFα、IL-1β及滑膜中VEGF明显高于正常组（P〈0.01）。经过TP治疗后,血清和关节液中TNFα、IL-1β及滑膜中VEGF表达均明显下降。结论细胞因子的表达可能在关节炎的形成及发展过程中起重要作用,TP能够通过调整细胞因子变化而发挥治疗作用。     

亚硫酸盐和雌激素及炎症因子在老年女性膝骨关节炎血清与关节液中的水平及意义

目的探讨亚硫酸盐和雌激素及炎症因子在老年女性骨关节炎患者血清及关节液中的含量变化及其抗炎效应。方法选择住院老年女性患者26例,年龄55～75岁,中位年龄67岁;病史1.8～25.6年,平均10年。均为我科初诊患者,根据骨性关节炎诊断标准确诊为膝骨关节炎,留取治疗前常规关节腔减压治疗时抽吸的关节液,及治疗后复查时的关节液。测定血清雌二醇水平、血清及关节液中的亚硫酸盐及白介素(IL-1、IL-6、IL-8)的含量变化。结果老年女性膝骨关节炎患者的血清雌激素(雌二醇)水平显著低于对照组(P<0.01);急性期血清关节液中亚硫酸盐和炎性因子(IL-1、IL-6和IL-8)均较高,经治疗后恢复期时各值均显著下降(P<0.01)。再根据不同年龄段分组,测定不同年龄段的膝骨关节炎患者急性期血清及关节液中亚硫酸盐和炎症因子(IL-1、IL-6和IL-8)的变化,各炎症因子变化差异无统计学意义(P>0.05);而血清雌二醇水平随年龄增加而减低,差异有统计学意义(P<0.01);急性期骨关节液中亚硫酸盐水平随年龄增加而减低,差异有统计学意义(P<0.01)。随着年龄的增长,骨关节炎患者血清雌二醇水平与关节液中亚硫酸盐含量之间有相关性(R2=-0.991,P<0.05)。结论亚硫酸盐和雌激素及炎症因子共同参与老年女性骨关节炎的发病过程,可能是一种生物活性分子在炎症局部发挥一定的病理生理学作用。     

钙网织蛋白在早期类风湿关节炎中的表达及其与 自身抗体和炎性细胞因子的关系

目的 探讨钙网织蛋白在早期类风湿关节炎（RA）患者体内的表达及其与自身抗体和炎性细胞因子的关 系。方法 收集 106 例早期活动性 RA 患者、95 例经治疗达到稳定期 RA 患者、85 例骨性关节炎（OA）患者和 80 例 健康对照者（HC）的外周血标本。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清钙网织蛋白、抗环瓜氨酸肽抗体（antiCCP）及细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α 水平;采用免疫比浊法检测类风湿因子（RF）水 平。Spearman 等级相关分析活动性 RA 患者血清钙网织蛋白水平与血清 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 的相关性。结果 早期活动性 RA 组血清钙网织蛋白水平［（5.84±2.62）μg/L］高于稳定期 RA 组［（4.26±1.42）μg/L］、OA 患者组［（3.92± 1.10）μg/L］和 HC 组［（3.86±0.91）μg/L］（P＜0.001）,后 3 组的血清钙网织蛋白水平差异无统计学意义（P＞0.05）;早 期活动性 RA 患者 RF 阳性组血清钙网织蛋白水平高于 RF 阴性组［（6.12±2.87）μg/L vs. （4.92±1.22）μg/L,P=0.045］, anti-CCP 阳性组血清钙网织蛋白水平也高于 anti-CCP 阴性组［（6.39±2.93）μg/L vs. （4.69±1.17）μg/L,P=0.002］;早期 活动性 RA 患者血清钙网织蛋白水平与血清 IL-1β（rs=0.386,P=0.009）、IL-6（rs=0.405,P=0.006）、TNF-α（rs=0.428, P=0.003）均呈正相关。结论 钙网织蛋白在早期活动性 RA 患者体内表达升高,且与自身抗体及炎性细胞因子水平 有关,提示其可能成为 RA 早期诊断及预后评估的潜在血清学新指标。     

白细胞介素-1在骨性关节炎的水平及作用

目的测定正常组、早、中和晚期膝骨关节炎（KOA）患者血清和关节液中白细胞介素-1（IL-1）水平的变化,探讨IL-1在KOA发病中所起的作用及其用于临床上判断KOA早期病理变化的可能性。方法应用酶联免疫吸附技术（ELSIA）检测10例健康体检者和30例早、中、晚期KOA患者血清和关节液中IL-1水平,通过关节镜观察并切取关节滑膜组织,标本分别行甲苯胺蓝染色,光镜下观察。结果KOA患者早、中、晚期血清和关节液中IL-1含量显著高于正常对照组,且随病情的进展而含量逐渐升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,关节液中IL-1水平与Mankin分值之间呈高度正相关,关节液IL-1水平越高,关节软骨的病变程度越重。结论IL-1与KOA患者免疫炎症有关,其水平高低可反映病情活动变化情况。     

膝关节液透明质酸含量与滑膜炎程度的关系

目的探讨膝关节液透明质酸含量与滑膜炎程度之间的关系。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测膝关节疾病(OA)患者102例共104膝的关节液透明质酸含量,并在关节镜下应用Ayral滑膜炎评分法和Outerbridge关节软骨损伤评分法评价膝滑膜炎和关节软骨损伤程度。采用t'检验、Spearman相关分析和多元线性回归分析进行统计分析。结果Ayral滑膜炎评分≥60分组的关节液透明质酸含量比Ayral滑膜炎评分<60分组高(P<0.001)。104膝关节液透明质酸含量与Ayral滑膜炎评分呈正相关(茁'A=0.497,P<0.001),与Outerbridge软骨损伤累计评分呈负相关(茁'o=-0.364,P<0.001),且Ayral滑膜炎评分的影响较大。关节液透明质酸含量与Ayral滑膜炎评分在Ayral滑膜炎评分≥60分组呈正相关(r=0.306,P<0.05),在Ayral滑膜炎评分<60分组无相关性(r=-0.144,P>0.05)。与非OA组相比,OA组的关节液透明质酸含量较低(P<0.05),而Ayral滑膜炎评分较高(P<0.01)。结论膝关节液透明质酸可作为生物标记物反映滑膜炎的程度,关节液透明质酸含量的增高提示滑膜炎较重。     

骨关节炎患者滑膜和关节软骨中金属蛋白酶组织抑制物—1的研究

目的：了解骨关节炎（OA）滑膜和关节软骨中金属蛋白酶酶抑制－1（TIMP－1）的分布及变化,探讨OA滑膜和关节软骨中TIMP－1变化与OA发病和治疗的关系。方法：应用免疫组织化学方法对26例OA及3例正常人的滑膜和关节软骨中TIMP－1的分布和阳性程度进行观察,结果：17例OA滑膜标本TIMP－1染色阳性,分布于滑膜衬里细胞、血管内皮细胞和质皮巨噬细胞等部位。阳性颗粒位于细胞浆中,程度多为弱阳性。16例OA关节软骨标本TIMP－1染色阳性。讨论：OA患者滑膜和关节软骨中TIMP－1分布减少和含量较低可能与OA的发病有一定关系。设想利用TIMP－1或其类似物可抑制关节软骨破坏和改善OA的病情。     

Biologics in development for rheumatoid arthritis: relevance to osteoarthritis

The osteoarthritis disease process affects not only the cartilage but also the entire joint structure, including the synovium, bone and periarticular muscles. Characteristically, abnormal biomechanical forces result in an imbalance between chondrocyte anabolic and catabolic pathways, which ultimately leads to progressive joint destruction. Within cartilage and synovium, pro-inflammatory cytokines, particularly IL-1b and TNF-a, auto-catalytically stimulate their own production and induce chondrocytes to produce additional catabolic mediators, including proteases, chemokines, nitric oxide, and prostaglandins. The success of targeted biological therapy in rheumatoid arthritis has taught that the blockade of a single dominant cytokine can lead to remarkable clinical benefit, even in complex disease. The effectiveness of biologicals in inflammatory arthritides as disease modifying agents has increased the likelihood that similar strategies can be developed to target specific molecular mechanisms in osteoarthritis (OA). However, since the clinical development program for disease-modifying OA drugs (DMOADs) is complicated by the slow progression of disease in many patients, the introduction of DMOADs will be greatly enhanced by advances in imaging and biomarkers that serve as validated surrogate endpoints for meaningful clinical outcomes.     

骨关节炎患者关节软骨TIMP-3启动子区甲基化水平的初步研究

目的探讨关节软骨中组织金属蛋白酶抑制因子-3（TIMP～3）基因启动子区甲基化与其蛋白表达的相关性,并分析TIMP一3基因CpG岛异常甲基化与骨关节炎（OA）的关联性。方法应用甲基化特异性的聚合酶链反应（MSP）技术和免疫组织化学SP法分别检测14例健康人的正常关节软骨细胞和35例骨关节炎（OA）患者软骨细胞TIMP-3基因启动子区甲基化和蛋白表达情况。结果OA患者和健康人关节软骨中TIMP-3基因启动子区均有甲基化修饰,其阳性率分别为74.3％（26／35）和35．7％（5／14）,0A组TIMP-3基因启动子区甲基化率明显高于健康组（P〈0．05）。14例健康人中,软骨细胞TIMP-3蛋白表达阳性10例（71．4％）,而35例OA患者中,软骨细胞TIMP-3蛋白表达阳性11例（31．4％）。24例OA患者软骨细胞蛋白表达阴性的标本中．TIMP-3启动子区甲基化阳性21例（87．5％）;26例TIMP-3启动子区甲基化阳性的标本中,蛋白表达阴性21例（80．8％）,TIMP-3启动子区甲基化与蛋白表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论启动子区CpG岛高甲基化是OA患者关节软骨细胞TIMP-3表达失活的主要机制之一,其可能参与了OA的发生和发展。