骨髓干细胞在肝纤维化治疗中的作用机制

近年来,骨髓干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)在肝纤维化中的应用研究日益增多,显示出一定的抗肝纤维化作用,但具体机制尚不明确.众多研究结果显示,BMSC可能主要从两方面发挥抗肝纤维化作用,一是通过分化为功能性肝细胞、分泌生长因子和增强内源性肝细胞增殖来促进肝再生,二是通过分泌抗纤维化细胞因子、影响肝星状细胞和表达基质金属蛋白酶-9来抑制肝组织纤维化的形成.本文对骨髓干细胞在肝纤维化治疗中可能的作用机制作一系统阐述,为从事骨髓干细胞移植治疗肝纤维化的研究者提供借鉴和指导.     

骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种多能干细胞,具有分化成肝细胞的潜力.近年研究表明,骨髓间充质干细胞还具有很强的抗肝纤维化的作用,并且不发生同种异体移植排斥反应,这为肝纤维化、肝硬化的治疗带来了新的策略.     

骨髓间充质干细胞逆转肝纤维化的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种来源于骨髓基质的具有多向分化能力的干细胞,在特定条件下,可以分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经元样细胞及肝细胞等.近年研究表明,骨髓间充质干细胞能抑制和减轻肝纤维化,并且具有免疫抑制和诱导免疫耐受的作用.因此,在细胞移植治疗终末期肝病方面具有广阔的临床应用前景.     

异基因造血干细胞移植治疗骨髓纤维化的若干问题

异基因造血干细胞移植是目前治愈骨髓纤维化的惟一治疗方法。文章通过对哪些患者需要做造血干细胞移 植、芦可替尼时代如何选择造血干细胞移植、芦可替尼在移植中所起作用、造血干细胞移植能否治愈骨髓纤维化、如 何提高移植疗效进行综述,指导临床工作中如何提高造血干细胞移植治疗骨髓纤维化的疗效。     

不同来源间充质干细胞治疗肝纤维化的研究进展

间充质干细胞(MSC)是一种中胚层分化而来的干细胞,具有多向分化潜能。MSC通过旁分泌细胞因子及细胞间相互作用,可减轻肝纤维化并改善肝功能,但治疗机制尚未完全明确。MSC来源于多种组织,例如骨髓、脐带组织、脐带血、外周血及脂肪组织等;然而,不同来源的MSC,在肝纤维化的实验研究与临床治疗过程中,进展不一。概括了MSC减轻肝纤维化可能的作用机制以及近年来不同来源MSC在实验研究及临床应用等方面的进展。认为MSC移植作为治疗肝纤维化的一种新方式,具有广阔的应用前景。     

骨髓干细胞在肝纤维化中的作用

近年来,对骨髓干细胞向肝细胞分化,并对肝纤维化的治疗作用的研究日益增多.随着研究的不断深入有研究者也对这个观点提出反对意见,认为骨髓干细胞没有这种能力,同时还有一些研究者提出骨髓干细胞可以分化成为星状细胞或者成纤维细胞,从而参与肝纤维化的发生.本文将骨髓干细胞在肝纤维化中的作用作一阐述.     

HGF基因修饰骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的研究进展

肝纤维化是肝脏慢性损伤导致肝细胞炎症、坏死,肝脏内结缔组织异常增生的一种可逆性的病理变化.越来越多的研究表明,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因修饰骨髓间充质干细胞可减轻或抑制肝纤维化,其效果要好于单纯的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stromal cells)移植,被认为是一种非常有前景的抗肝纤维化的细胞疗法.     

自体骨髓干细胞移植对失代偿期肝硬化患者肝纤维化指标的近期影响

目的:探讨经肝动脉插管自体骨髓干细胞移植对失代偿期肝硬化患者肝纤维化指标的近期影响.方法:收治失代偿期肝硬化患者50例.从患者髂后上棘抽取骨髓,体外分离纯化骨髓源性干细胞,通过肝动脉插管注入肝脏,在移植后4、8 wk复查肝功能和肝纤维化指标(Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、透明质酸酶),观察实验室指标改善、腹水变化及不良反应情况.结果:移植前后白蛋白升高有统计学意义(P0.05).丙氨酸氨基转移酶值较术前有下降,凝血酶原活动度有不同程度升高,但两项指标差异无统计学意义(P0.05).术后腹水减轻或消失,与术前比较有统计学意义(P0.05).Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸酶和层黏连蛋白较术前均有下降,其中Ⅲ型前胶原和透明质酸酶下降明显(P0.05).结论:自体骨髓干细胞移植可减轻失代偿期肝硬化患者的肝纤维化程度,但需要进一步证实.     

肝纤维化的干细胞治疗进展

近年来国内外研究表明,在个体发育的不同阶段及不同成体组织中均存在着干细胞.肝脏内不仅存在肝源性干细胞,还存在其他组织来源的干细胞(如骨髓干细胞,胰腺干细胞等),这些干细胞最终可以分化为成熟的肝样细胞.因此,干细胞的替代疗法为终末期肝病患者的肝纤维化治疗提供了新的思路.本文就近年来干细胞治疗肝纤维化方面的相关研究进展作一综述.     

Fibroscan对自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效评估

目的:评价自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效.方法:选择58例住院治疗的失代偿期肝硬化患者,分移植组27人和对照组31人.患者治疗前行肝穿刺活检与Fibroscan测肝脏弹性值等基线检查,两组患者均行常规内科治疗,移植组同时行自体骨髓干细胞移植治疗.于2、4、8wk复查肝功能、凝血功能,12、24、48wk增加Fibroscan及肝纤维化指标检查,48wk时部分患者再行肝活检,多角度分析自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化的疗效以及Fibroscan在疗效评价中的作用.结果:27例手术成功率100%.两组各7例患者肝活检均符合肝硬化病理诊断.移植组第8周临床症状、体征改善优于对照组.两组患者肝功能及凝血功能均有所改善,移植组效果优于对照组.移植组肝脏弹性测量值(liver stiffness measurement,LSM)在移植前、治疗后12、24、48wk分别为31.66kPa±6.97kPa、31.98kPa±7.36kPa、31.35kPa±6.73kPa、31.78kPa±7.35kPa,48wk时升高有统计学意义(P<0.05);对照组患者LSM值逐步升高,由治疗前32.05kPa±9.09kPa升至48wk时36.39kPa±9.39kPa(P<0.05),治疗后48wk两组间差异有统计学意义(P<0.05).移植组HA较对照组下降明显,24wk时两组有显著差异(P<0.05).结论:自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化有明显的改善作用,近期效果安全可靠;Fibroscan可作为评价自体骨髓干细胞移植疗效的重要手段,还可长期监测患者病情变化.     

骨髓间充质干细胞移植在肝纤维化治疗中的应用

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对肝纤维化大鼠模型的治疗效果,为临床自体BMSC移植治疗肝脏疾病提供实验基础和理论依据.方法 四氯化碳(CCl4)腹腔注射构建SD大鼠肝纤维化模型.以绿色荧光蛋白(GFP)标记的正常SD大鼠BMSC为细胞来源,于造模后第10周经尾静脉植入模型鼠体内,对照组同法注入生理盐水.4周后取大鼠肝脏进行病理学检测,同时采集大鼠血液,检测血清肝纤维化指标和肝功能指标.结果 (1)成功构建SD大鼠肝纤维化模型.(2)体外分离获得了高纯度贴壁生长的大鼠BMSC,并用携带GFP报告基因的慢病毒成功对其进行感染,感染率达80％以上.(3)经BMSC移植的大鼠肝脏中可检测到GFP阳性的细胞,主要沿着中央静脉及汇管区周围纤维间隔分布.免疫组织化学结果显示GFP阳性细胞呈肝样细胞形态,且与肝组织相容.(4)BMSC移植组与模型对照组和生理盐水组相比,病理检测肝纤维化程度减轻,血清学指标好转.结论 BMSC移植能抑制大鼠肝纤维化发展,部分逆转肝纤维化进程,有效改善肝脏功能,为临床自体BMSC移植治疗肝脏疾病提供实验基础.     

Bone Marrow Cells Ameliorate Liver Fibrosis and Express Albumin after Transplantation in CCl4 -Induced Fibrotic Liver

Background/Aim:

We investigated the effect of bone marrow-derived stem cell (BMSC) transplantation on carbon tetrachloride (CCl₄)-induced liver fibrosis.

Patients and Methods:

BMSCs of green fluorescent protein (GFP) mice were transplanted into 4-week CCl₄ -treated C57BL/6 mice directly to the liver, and the mice were treated for 4 more weeks with CCl₄ (total, 8 weeks). After sacrificing the animals, quantitative data of percentage fibrosis area and the number of cells expressing albumin was obtained. One-way analysis of variance was applied to calculate the significance of the data.

Results:

GFP expressing cells clearly indicated migrated BMSCs with strong expression of albumin after 28 days post-transplantation shown by anti-albumin antibody. Double fluorescent immunohistochemistry showed reduced expression of αSMA on GFP-positive cells. Four weeks after BMSC transplantation, mice had significantly reduced liver fibrosis as compared with that of mice treated with CCl₄ assessed by Sirius red staining.

Conclusion:

Mice with BMSC transplantation with continuous CCl₄ injection had reduced liver fibrosis and a significantly improved expression of albumin compared with mice treated with CCl₄ alone. These findings strengthen the concept of cellular therapy in liver fibrosis.     

人骨髓间充质干细胞上清液对体外肝星状细胞增殖周期及MMP-1表达的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSC)对肝星状细胞(HSC)增殖周期及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)活性的影响,以探讨其防治肝纤维化的作用机制.方法 采用密度梯度离心法分离鉴定人BMSC,收集原代培养7d的BMSC培养上清,加入HSC中培养24 h及48 h.通过流式细胞仪观察HSC增殖周期,ELISA方法检测MMP-1浓度.结果 与HSC单独培养组相比,共培养48 h组G1期细胞显著增加(P＜0.01),S期细胞显著减少(P＜0.01),并且共培养组MMP-1表达明显增加,与对照组相比差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 BMSC可抑制HSC的增殖,并且可能通过增加MMP-1的产生,从而起到抗纤维化的作用.     

骨髓间质干细胞在心血管疾病治疗中的应用

心血管疾病是世界范围内的常见病、多发病,细胞移植是治疗心血管疾病的有效途径.而骨髓间质干细胞(BMSC)具有来源广泛、取材方便、免疫源性低、可以分化为心肌细胞、内皮细胞等特点,是治疗心血管疾病的良好种子细胞来源.国内、外学者对BMSC治疗心血管疾病进行了很多的动物实验及部分临床研究,但仍存在很多的问题.本文就BMSC治疗心血管疾病的机制、实验研究、临床研究及所面临的问题作一综述.     

Klotho基因转染骨髓间充质干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的观察Klotho基因(抗衰老基因)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响。方法分离、培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞。慢病毒介导Klotho转染至BMSC中,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSC中Klotho mRNA的表达。制备大鼠慢性心力衰竭模型,随机分为正常对照组、模型对照组、增强型绿色荧光蛋白-BMSC组(EGFP-BMSC组)、EGFP-Klotho-BMSC组。细胞移植28天后多普勒超声检测心功能,荧光显微镜观察细胞存活及分布,HE染色观察心肌组织病理变化。Masson染色检测心肌胶原沉积含量和心肌纤维化程度。结果 Klotho转染BMSC后,BMSC中Klotho mRNA表达明显增多(P0.05)。移植28天后超声心动图结果显示,与EGFP-BMSC组及模型对照组比较,EGFP-Klotho-BMSC组左心室射血分数(LVEF)提高(P0.05)。EGFP-BMSC组及EGFP-Klotho-BMSC组心肌纤维化程度较模型对照组减轻(P0.05),EGFP-KlothoBMSC组较EGFP-BMSC组心肌纤维化改善更为明显(P0.05)。结论 Klotho基因联合BMSC治疗可进一步抑制心肌纤维化,减少心肌间质胶原沉积,改善心功能。     

重视肝纤维化的诊断和治疗

肝纤维化是多种慢性肝病进展至肝硬化的临床病理过程，其病因复杂，明确病因至关重要，准确判断肝纤维化程度是观察抗纤维化疗效和确定治疗终点的基础。目前我国肝纤维化的病因仍以慢性乙型病毒性肝炎为主，但近年来疾病谱已发生了一定变化，其中酒精性和非酒精性脂肪性肝病、自身免疫性肝病、胆汁淤积性肝病所占比例相对增加。各种无创性诊断模型在评价肝纤维化的分期和分级方面有一定的临床用途，但肝活检仍是肝纤维化分级的金标准。肝纤维化的治疗应立足于病因，并积极探索适用于临床的抗肝纤维化药物。     

茵陈金黄方治疗湿热瘀毒型肝炎肝硬化临床观察

目的：观察自拟中药茵陈金黄方加减治疗湿热瘀毒型肝炎肝硬化的临床疗效。方法：将所选病例随机分为两组,其中治疗组56例,对照组56例;治疗组、对照组均给予常规保肝退黄治疗,治疗组加用自拟中药茵陈金黄方,两组疗程均为两个月,同时查肝功能、肝纤维化4项,B超等。结果：两组患者治疗后肝功能（TBil、ALT、Alb）比较,差异有显著性意义（P〈0．01）,在肝纤维化4项（HA、LN、Ⅳ—C、PC-Ⅲ）方面比较,差异有较显著性意义（P〈0．05）;两组患者症状、体征比较,差异有较显著性意义（P〈0．05）;在B超（门静脉内径、脾静脉内径、脾脏厚度）方面比较,差异有显著性意义（P〈0．01）,在HBVDNA,HBeAg方面比较无明显差异。结论：茵陈金黄方治疗湿热瘀毒型肝炎肝硬化在改善肝功能、肝纤维化4项等方面有较好的作用,但在在针对乙肝血清病毒标志物方面无明显的作用。     

Are we any closer to treating liver fibrosis (and if no,why not)?

This review provides a personal view on anti‐fibrosis therapy in the liver. The worst clinical consequence of liver fibrosis is the development of liver cirrhosis and portal hypertension. Etiology is a decisive factor which determines patterns of fibrous septa and subsequent vascular remodeling, which is essential for the development of portal hypertension. Removing or controlling the disease‐causing agent, i.e. anti‐viral treatment for hepatitis, is the essential first step for treating chronic liver diseases and can reverse fibrosis in some settings. However, removing etiology is not always sufficient to prevent fibrosis from progressing towards cirrhosis and portal hypertension. In liver diseases such as severe alcoholic hepatitis and massive parenchymal loss, the formation of vascular anastomoses between portal to central veins based on bridging fibrosis results in cirrhosis and portal hypertension. For these patients, anti‐fibrotic treatment is crucial and urgent. Unfortunately, a lack of understanding how fibrosis contributes to vascular remodeling caused by and combined with a lack of suitable experimental models that recapitulate human liver diseases, has hampered the development of successful anti‐fibrotic drugs for clinical use to date.     

益肝浓缩煎剂抗肝纤维化的实验研究

目的 :观察益肝浓缩煎剂及其组方中药丹参、黄芪对肝纤维化大鼠肝组织病变的影响 ,并探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法 :以皮下注射 4 0 % CCl4 花生油溶液诱导产生大鼠肝纤维化模型 ,并于益肝浓缩煎剂、丹参、黄芪应用治疗前后处死大鼠 ,留取肝组织标本 ,切片并 Masson染色 ,观察胶原纤维增生情况。结果 :益肝浓缩煎剂肝内胶原纤维增生程度明显减轻 ,其疗效优于丹参与黄芪组 :活血化瘀中药有明显抗肝纤维化作用 ;益气健脾中药具有一定的抗肝纤维化作用 ;活血化瘀中药抗肝纤维化作用优于益气健脾中药 ;益肝浓缩煎剂抗肝纤维化作用 ,优于单纯的活血化瘀中药或益气健脾中药。结论 :益肝浓缩煎剂具有良好的抗肝纤维化作用 ,能明显改善肝纤维化大鼠肝脏病变