简易凝肢电泳法检测新生儿腹泻粪便中轮状病毒RNA的研究

轮状病毒(简称Rs)是婴幼儿腹泻的主要病原。用聚丙烯酰胺凝胶电脉(简称PAGE)法可捡测轮状病毒RNA的11条片段，按其第10、11片段在PAGE上的移动快慢可进行电泳分型，这一检测法对明确病因、及时治疗、开展预防及对流行病学研究有着重要意必。国外学者以“半波”原理研制了简易电泳仪，对病毒RNA进行电泳得到满意结果。为此我们用国产原件装置了简易电泳系统，对35例新生儿腹泻。     

简易凝胶电泳法检测新生儿腹泻粪便中轮状病毒RNA的研究

轮状病毒(简称RS)是婴幼儿腹泻的主要病原。用聚丙烯酰胺凝胶电脉(简称PAGE)法可检测轮状病毒RNA的11条片段,按其第10、11片段在PAGE上的移动快慢可进行电泳分型,这一检测法对明确病因、及时治疗、开展预防及对流     

用PAGE电泳法检测腹泻婴幼儿粪便中轮状病毒RNA

目的　探讨婴幼儿轮状病毒感染诊断方法。方法　用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测轮状病毒RNA。结果　 41份腹泻婴幼儿粪便标本中有 16份为RNA阳性 ,阳性率为 39%。结论　用PAGE电泳方法检测轮状病毒RNA准确可靠 ,不易出现假阳性     

核酸电泳诊断技术

现已公认轮状病毒是婴幼儿非细菌性胃肠炎的主要病原。轮状病毒RNA的11个片段,可用聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称PAGE)方法检出。RNA 11个片段在电泳过程中的迁移图称为轮状病毒的电泳型,大片段迁移速度慢,小片段迁移速度快。虽不同宿主来源的轮状病毒电泳图型不同,但轮状病毒的电泳图有一总模式,即可分为4组:第1组为4个大片段(第1～4条     

核酸电泳分析延吉市爆发流行的轮状病毒基因片段

本文报道核酸电泳分析1986年5月延吉市爆发流行的成人腹泻轮状病毒基因片段。我们收集了22份成人腹泻患者的粪便,在电镜下从11份样品中检出轮状病毒颗料。用聚丙烯酰胺凝胶电泳法13例获得具有特征的11片段 RNA 基因组电泳图谱。这种 RNA 基因片段不同于从婴幼儿腹泻患者中分离出来的轮状病毒 RNA 基因片段的电泳图谱,却同最近洪涛等报导的成人腹泻轮状病毒相符。     

核酸电泳法检测轮状病毒(摘要)

轮状病毒(Rota Virus)引起的腹泻,粪便中含有大量轮状病毒(可达10~9—10~(11)/ml),可从粪便中直接提取RNA,用垂直板聚丙烯酰胺淀胶电泳法检测轮状病毒 RNA 基因组(简称核酸电泳法)、根据特有的电泳图型(显11条带)进行诊断。1984年我站在研究病毒性腹泻时首次建立起此方法。采用电镜观察轮状病毒阳性与阴性粪便各20份,其核酸电泳检测结果:电镜阳性者均见到清晰的11条带,即为核酸电泳阳性;电镜阴性者均未见到显带,为核酸电泳阴性。显     

地鼠乳鼠流行性腹泻病原学研究初报

目的确诊地鼠乳鼠流行性腹泻病因。方法病毒、细菌、寄生虫分离检测，轮状病毒RNA电泳，A组轮状病毒试剂盒检测。结果经细菌、寄生虫分离检测，未分离到相关病原体，A组轮状病毒试剂盒检测阴性。地鼠乳鼠粪便轮状病毒RHA电泳，呈现11条电泳带，与B组轮状病毒特征相符。结论引起地鼠乳鼠流行性腹泻病原体为B组轮状病毒感染。     

重庆地区婴幼儿腹泻轮状病毒RNA的分析

轮状病毒基因组RNA经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析可分出11个RNA片段。分析该病毒基因组RNA之PAGE图谱类型对了解轮状病毒引起的地区流行规律具有重要意义。Herring等报告可省去密度梯度离心纯化病毒颗粒等步骤直接从病儿粪便中提取轮状病毒RNA做PAGE分析。目前,这种方法己用于轮状病毒感染病人的快速诊断和分子流行病学的调查。     

秋泻灵加丽珠肠乐治疗不同电泳型轮状病毒性肠炎

本研究从2006年8月～2007年3月收集了56例婴幼儿肠炎的大便,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚丙烯酷胺凝胶电泳(PAGE)检测,结果ELISA阴性者45例,PAGE阴性者28例,28例PAGE阴性者中18例为电泳RNA长型,10例为电泳RNA短型,PAGE阴性者均用秋泻灵加丽珠肠乐治疗,结果发现对长型的效果优于短型轮状病毒性肠炎,提示轮状病毒性电泳RNA长型和短型的毒性有差异.     

381例新生儿及小婴儿轮状病毒亚群感染的研究

多年的研究证明,人类轮状病毒(HRV)的双链RNA 片段,可用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术测出,根据第10、11片段在 PAGE 上迁移速度的快慢,可将其分为长、短两个型,即亚群Ⅰ和亚群Ⅱ。为探索新生儿及小婴儿 HRV 亚群的感染情况,我们于1988年7月～1990年12月共采集新鲜粪样381份,用微型简易聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法与 ELiSA 法检测 HRV-RNA 和抗原,并进行了对比研究。同时对部分母血、脐血、新生儿静脉血和羊水的 HRV 抗体(HRV-Ab)进行测定,现报告如下。     

轮状病毒核酸电泳分析

轮状病毒核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该病毒含有双链节段性RNA,有11个RNA片段,成人轮状病毒有独特的核酸图型,与典型普通轮状病毒有明显区别,特别表现在第3组(7、8、9片段)明显分离,第2组(5、6片段)趋于接近。在1982～1984年济南发生的婴幼儿腹泻中,二种核酸图型同时存在,以长型为主。     

2002年100例秋冬季腹泻患儿轮状病毒分子流行特征的研究(摘要)

目的：研究2002年100例秋冬季腹泻患儿轮状病毒分子流行特征．方法：2002年9月～12月在昆明医学院第一附属医院儿科收集秋冬季腹泻患儿便样标本，利用ELISA和PAGE（聚丙烯胺凝胶电泳）方法，检测100例秋冬季腹泻患儿A组轮状病毒的感染情况，尽可能的降低检测中出现的假阳性和假阴性．并采用RT-PCR及net-PCR方法对PAGE阳性的80份标本进行A组轮状病毒4种主要的VP7血清型（G1、G2、G3和G4）分型．结果：（1）经ELISA检测，有83份阳性，检出率为83％；PAGE检测有80份阳性，检出率为80％；     

轮状病毒cDNA的合成

轮状病毒是婴儿腹泻的主要病原之一。轮状病毒核酸是双链RNA。用聚丙烯酰胺凝胶电泳法可将小儿的轮状病毒核酸分成11个片段。我们从小儿轮状病毒性腹泻粪便中分离了RNA;用~(32)P标记PolyA水解产物,并与dsRNA连接;以脱氧胸腺嘧啶寡核苷酸为引物,在逆转录酶作用下,一次合成双链DNA。轮状病毒cDNA的合成不仅可用于轮状病毒的分子克隆,还可用于诊断小儿腹泻或其它方面的研究。本实验在纯化poly(A)80-dsRNA及cDNA时均避免了用Sephadex层析法而带来的产品丢失。在合成cDNA时,省略了DNA聚合酶,此法具有方法简便,节省经费等优点。     

儿童急性腹泻粪便中轮状病毒的不同检测法

<正> 人轮状病毒(HRV)是引起婴幼儿急性腹泻的主要病因。由于轮状病毒的基因组具有特异的双股RNA结构,因此利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法对其RNA片段电泳移动图型进行分析是目前研究轮状病毒感染的一种最常用方法。但是,多种因素可能影响PAGE的敏感性,因此检测HRV最好采用多种方法,以提高阳性标本的检出率。本文对1983年10月至1984年1月及1984年10月至1985年1月合肥市两个医院一部分急性腹泻病儿的大便标本用直接电镜(EM)、PAGE及酶联免疫吸附试验(ELISA)三种方法进行了比较研究,现将结果总结如下。材料与方法 1.粪便标本:1983年10月—1984年1月的标本采自住院病儿;1984年10月—1985年1月     

轮状病毒感染腹泻致肝脏损害近期临床分析

目的探讨轮状病毒感染腹泻致患儿肝脏损害及近期临床相关因素的关系。方法153例腹泻患儿分为轮状病毒腹泻组（82例）和对照组（71例）。进行①转氨酶[天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）]检测。②大便轮状病毒的ELISA和PAGE电泳检测。③血清及淋巴细胞的分离。结果①轮状病毒腹泻组ALT、AST升高者均较对照组明显增多，且程度较对照组重。②82例轮状病毒腹泻患儿ALT的升高与相关临床表现（腹泻天数、腹泻程度、脱水程度、发热天数、发热程度和大便排毒）的关系无明显相关。③82例血清中2例检出轮状病毒，28例淋巴细胞中6例检出轮状病毒，分属8个患儿。血清阳性者未检测淋巴细胞，淋巴细胞阳性者血清未检出。8例患儿中，4例ALT、AST显著升高，4例轻度升高。结论轮状病毒腹泻可伴有病毒血症，并致肝脏损害。     

人的轮状病毒核酸的提取及鉴定

轮状病毒是婴儿及幼畜腹泻的主要病原之一。轮状病毒核酸是具有11个片段的 RNA 分子。我们从患儿粪便中提取轮状病毒核酸,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离 RNA 片段及分子量测定。用分光光度法测定了核酸的紫外吸收,并对核酸及病毒颗粒进行了电镜观察。     

延边地区婴幼儿轮状病毒的基因RNA分析

本文作者用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对延边地区1985年10月～1987年12月收集的200份婴幼儿腹泻粪便标本进行了婴幼儿轮状病毒的基因RNA分析。1985年和1986年以电泳长型为主,而1987年则为电泳长型和电泳短型各占一半左右,表明婴幼儿轮状病毒电泳型的变异较大。另外,发现长-长电泳型混合感染2例,说明同一宿主可以同时感染不同电泳型的婴幼儿轮状病毒株,表明了婴幼儿轮状病毒在自然界发生基因重组的迹象。     

用PAGE法检测婴幼儿腹泻粪便中轮状病毒核酸的研究

本文首次在国内报告用PAGE法对轮状病毒感染作分子流行病学调查,并首次确认该病毒是本地区引起婴幼儿急性腹泻的主要病原(据我们手头资料)。本研究从151份急性腹泻患儿粪便中提取轮状病毒核酸,用PAGE法进行核酸检测,共测出轮状病毒核酸阳性标本90份(阳性率为59.6%),其中86份的RNA基因图型为“长型”,仅4份为“短型”。我们对轮状病毒核酸检测方法亦作了一些改进。     

羟基磷灰石抽提逆转录套式PCR检测轮状病毒

目的;建立快速、准确、灵敏的检测轮状病毒的方法。方法：用羟基磷灰石抽提轮状病毒RNA,在轮状病毒基因6片段设计引物建立RT－PCR法检测腹泻婴幼儿大便中的轮状病毒。结果：该法重复性好,特异性高,且敏感度比PAGE法至少高1000倍。108例临床标本检测表明该法检测阳性率最高为56．5％。结论：羟基磷灰石抽提RT－PCR法检测轮状病毒,快速、准确、灵敏度高,优于PAGE、ELISA和LA法。     

用琼脂糖凝胶电泳快速检测轮状病毒RNA

本研究用琼脂糖凝胶电泳快速检测轮状病毒(RTV)RNA,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了比较。对115例婴幼儿腹泻的粪便检测结果表明,腹泻粪便中的轮状病毒RNA经浓缩后琼脂糖凝胶电泳的阳性率与聚丙烯酰胺凝胶电泳的阳性率无明显差异,并且证明了用琼脂糖凝胶电泳检测RTV的RNA比聚丙烯酰胺凝胶电泳速度快、简单和经济,特别适用于临床上用于诊断RTV的感染,且可以在电泳过程中随时观察RTV的RNA的泳动情况和型别。