人重组骨形态发生蛋白-2和碱性成纤维细胞生长因子在诱导成骨中的调节作用及其机制

目的：采用原位杂交的方法检测Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA的变化及其变化规律，对骨组织中的碱性磷酸酶(ALP)活性进行测定，以分析人重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在诱导成骨中的调节作用及其调节机制。方法：BALB／c小鼠110只采用掷硬币方法随机分为2组，每组55只，设立rhBMP-2／bFGF为实验组，rhBMP-2为对照组，分别于术后3～21d共8个时间点取材，采用原位杂交方法对新生骨组织中的Ⅰ，Ⅱ型胶原mRNA进行检测；对ALP活性进行定量分析，观察2组在诱导成骨中Ⅰ，Ⅱ型胶原mRNA及ALP的表达情况。结果：①Ⅱ-型胶原mRNA的出现是和成软骨、软骨细胞的出现相伴随的。②作为成骨细胞成熟标志物的Ⅰ型胶原mRNA、ALP在软骨形成期即有表达，但是随着成骨细胞的出现，骨组织的形成Ⅰ型胶原mRNA仍表现为高表达，而ALP的表达则呈下降趋势。③实验组Ⅰ，Ⅱ型胶原mRNA及ALP的表达早于对照组，在术后7，14，21d，实验组ALP分别为(63.85&;#177;6.87)，(27．12&;#177;4．23)，(8.93&;#177;1，49)IU／g；对照组ALP分另U为(27．26&;#177;4．13)，(70.65&;#177;5.92)，(39.46&;#177;4.72)IU／g(t=12.40，20.85，17．52，P&;lt;0．01)。结论：bFGF增强了rhBMP-2诱导成骨中Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA及ALP的表达。     

碱性成纤维细胞生长因子与重组人骨形态发生蛋白-2诱导成骨能力的量效关系

目的对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导成骨能力的量效关系进行研究.方法280只BALB/c小鼠采用掷硬币方法随机分为8组,每组35只,实验组rhBMP-2的剂量均为0.5 mg,bFGF的剂量分别为0,2,10,40,80,300,500活性单位(IU);设立单纯牛松质骨载体为对照组.按实验设计,分别将rhBMP-2混悬液及bFGF-PVP溶液与牛松质骨载体充分混匀,负压下真空抽吸,冻干.将复合植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋内,各组分别于术后3,5,7,9,14,21 d共6个时间点取材,进行组织学、X线分析以及钙含量测定,观察各组的诱导成骨情况.结果①bFGF剂量为10～80IU时,间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成均早于其他各组,成骨量多于其他各组,组织钙含量明显高于其他各组(t=4.44,P＜0.05),提示此剂量bFGF使rhBMP-2的诱导成骨能力明显增强.②bFGF剂量为0,2,300 IU时,各组在间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成以及组织钙含量方面差异均无显著性意义(t=0.73,P＜0.05),提示此剂量bFGF对rhBMP-2的诱导成骨能力无明显影响.③bFGF剂量为500 IU时,术后21d,仅1例标本可见散在的极少量新骨形成,其组织钙含量明显低于其他各组(t=6.15,P＜0.05),提示此剂量bFGF明显抑制了rhBMP-2的诱导成骨能力.④术后21 d,单纯松质骨载体组未见新骨形成.结论bFGF与rhBMP-2诱导成骨能力存在着量效关系.     

联合使用骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子对成纤维细胞成骨表型的影响

目的研究联合使用骨形态发生蛋白(rhBMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对成纤维细胞成骨表型的影响。方法向培养的成纤维细胞NIH3T3中加入不同浓度的rhBMP-2和bFGF,观察成纤维细胞形态学变化、碱性磷酸酶(ALP)活性与染色的情况和骨钙素表达的变化,同时观察细胞增殖周期的变化。结果在两种因子作用下,成纤维细胞由长梭形向多角形方向转化,细胞体积增大、细胞内颗粒增多;成纤维细胞ALP活性增高、骨钙素表达增多,细胞内ALP染色加深;细胞增殖周期缩短。结论联合使用rhBMP-2和bFGF可以促进成纤维细胞成骨表型表达并促进细胞增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子与重组人骨形态发生蛋白-2诱导成骨能力的量效关系

目的：对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导成骨能力的量效关系进行研究。方法：280只BALB／c小鼠采用掷硬币方法随机分为8组，每组35只，实验组舳MP-2的剂量均为0．5mg，bFGF的剂量分别为0，2，10，40，80，300，500活性单位(IU)；设立单纯牛松质骨载体为对照组。按实验设计，分别将rhBMP-2混悬液及bFGF-PVP溶液与牛松质骨载体充分混匀，负压下真空抽吸，冻干。将复合植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋内，各组分别于术后3，5，7，9，14，21d共6个时间点取材，进行组织学、X线分析以及钙含量测定，观察各组的诱导成骨情况。结果：①bFGF剂量为10～80IU时，间充质细胞增殖、分化，软骨细胞及新生骨形成均早于其他各组，成骨量多于其他各组，组织钙含量明显高于其他各组(t=4．44．P&;lt;0．05)，提示此剂量bFGF使rhBMP-2的诱导成骨能力明显增强。②bFGF剂量为0，2，300IU时。各组在间充质细胞增殖、分化，软骨细胞及新生骨形成以及组织钙含量方面差异均无显著性意义(t=0．73，P&;lt;0．05)，提示此剂量bFGF对rhBMP-2的诱导成骨能力无明显影响。③bFGF剂量为500IU时，术后21d，仅1例标本可见散在的极少量新骨形成，其组织钙含量明显低于其他各组(t=6．15。P&;lt;0．05)，提示此剂量bFGF明显抑制了rhBMP-2的诱导成骨能力。④术后21d，单纯松质骨载体组未见新骨形成。结论：bFGF与rhBMP-2诱导成骨能力存在着量效关系。     

骨形态发生蛋白-2、β转化生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在体内诱导成骨中的协同作用

目的探讨骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)、β转化生长因子(TGF-β)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在诱导成骨的协同作用。方法350只BALB/c小鼠随机分为5组,每组70只,设立rhBMP-2/TGF-β/bFGF为实验组;rhBMP-2/TGF-β、rhBMP-2/bFGF、rhBMP-2和单纯松质骨载体为对照组。分别于术后12h～21d共11个时间点取材,进行组织学,碱性磷酸酶活性和钙含量测定,观察5组诱导成骨情况。结果rhBMP-2/TGF-β/bFGF组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞、新生骨形成方面均早于对照组,成骨量优于对照组,碱性磷酸酶水平在早期较对照组明显增高,组织钙含量明显高于对照组(P<0.05)。结论rhBMP-2、TGF-β和bFGF在诱导成骨中存在着协同作用。     

联合使用骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子对成纤维细胞成骨表型的影响

目的 研究联合使用骨形态发生蛋白（rhBMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对成纤维细胞成骨表型的影响。方法 向培养的成纤维细胞NIH3T3中加入不同浓度的rhBMP-2和bFGF，观察成纤维细胞形态学变化、碱性磷酸酶（ALP）活性与染色的情况和骨钙素表达的变化，同时观察细胞增殖周期的变化。结果 在两种因子作用下，成纤维细胞由长梭形向多角形方向转化，细胞体积增大，细胞内颗粒增多；成纤维细胞ALT活性增高，骨钙素表达增多，细胞内ALP染色加深；细胞增殖周期缩短。结化 联合使用rhBMP-2和bFGF可以促进成纤维细胞成骨表型表达并促进细胞增殖。     

阳离子脂质体介导重组人骨形态发生蛋白-2基因转染的兔骨骼肌干细胞体外成骨分化的实验研究

目的初步探讨阳离子脂质体介导的重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)基因对兔骨骼肌干细胞(SMSCs)体外成骨活性的影响。方法pEGFP-rhBMP-2的扩增、浓度及纯度鉴定。脂质体包裹质粒DNA，转染SMSCs后测定转染率。检测rhBMP-2、碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原的表达。结果脂质体介导pEGFP-rhBMP-2SMSCs转染后最大转染率为14．18％，rhBMP-2、ALP和Ⅰ型胶原的表达呈阳性，而pEGFP转染的细胞和未染细胞rhBMP-2、ALP和Ⅰ型胶原的表达弱阳性。结论SMSCs是一种较理想的骨组织工程种子细胞。脂质体介导质粒rhBMP-2的基因转移安全性好，但转染率相对较低。     

复合骨形态发生蛋白2及碱性成纤维细胞生长因子注射型骨修复材料对兔骨髓基质细胞增殖和超微结构的影响

目的观察以纤维蛋白胶(fibrinsealant,FS)为载体的注射型骨修复材料对体外培养的兔骨髓基质细胞(marrowstromalcell,MSC)增殖和超微结构的影响。方法实验分组为实验组(FS+bFGF+rhBMP-2)、对照组1(FS)、对照组2(FS+bFGF)、对照组3(FS+rhBMP-2)及单纯对照组。采用细胞培养、MTT及电镜等方法对各组兔MSC的增殖及超微结构进行研究。结果(1)各组材料对细胞促增殖作用由强到弱依次是:对照组2(FS+bFGF)、实验组(FS+bFGF+rhBMP-2)、对照组1(FS)、对照组3(FS+rhBMP-2)、单纯对照组,差异有显著性(P<0.05);(2)扫描电镜观察发现,材料表面粗糙,有微孔存在,各组细胞与材料融合生长。透射电镜观察发现:实验组的绝大部分细胞呈成骨细胞表型,细胞增殖状态旺盛,分化好。各对照组细胞或是细胞增殖活性高,但向成骨细胞表型分化差,或是向成骨细胞表型分化好,但细胞增殖活性较差。结论FS+bFGF+rhBMP-2即可显著促进MSC增殖和兔MSC向成骨细胞方向的分化水平。     

骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子激发髓核细胞成骨潜能的实验研究

【目的】研究联合使用重组人骨形态发生蛋白(rh-BMP2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对椎间盘髓核细胞成骨潜能的激发作用。【方法】向体外培养的髓核细胞中分别及联合加入rh-BMP2和bFGF观察髓核细胞的形态学变化、细胞生长曲线变化、钙盐沉积情况、I型胶原分泌情况、骨钙素活性变化。【结果】联合使用rh-BMP2和bFGF能够明显促进髓核细胞增殖,由长梭形向多角形变化,细胞体积增大,细胞颗粒增多,增加I型胶原分泌,提高钙盐沉积程度,提高骨钙素的表达水平。【结论】联用rh-BMP2和bFGF能够诱导髓核细胞向成骨细胞方向分化,分泌钙盐并形成矿化结节。     

骨形态发生蛋白—2、β转化生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在体内诱导成骨中的协同作用

目的 探讨骨形态发生蛋白－2（rhBMP-2)、β转化生长因子（TGF－β）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)在诱导成骨的协同作用。方法 350只BALB／c小鼠随机分为5组，每组70只，设立rhBMP-2/TGF-β/bFGF为实验组；rhBMP-2/TGF-β、rhBMP-2/bFGF、rhBMP-2和单纯松质骨载体为对照组。分别于术后12h-21d共11个时间点取材，进行组织学，碱性磷酸酶活性和钙含量测量，观察5组诱导成骨情况。结果 rhBMP-2/TGF-β/bFGF组在诱导间充质细胞增殖、分化，软骨细胞、新生骨形成方面均早于对照组，成骨量优于对照组，碱性磷酸酶水平在早期较对照组明显增高，组织钙含量明显高于对照组（P＜0．05）。结论 rhMBP-2、TGF－β和bFGF在诱导成骨中存在着协同作用。     

Tiotidine and cimetidine--kinetics and dynamics

Tiotidine and cimetidine kinetics and dynamics were compared to assess mechanisms of the longer duration of effect of tiotidine in man. Both drugs has similar lag times for absorption. Tiotidine with a meal was more slowly absorbed than when fasting and was also more slowly absorbed than cimetidine with a meal. The elimination rates for both drugs did not differ; they were both approximately 2 to 3 hr. Oral doses of cimetidine achieved areas under the plasma concentration curve approximately three times that of tiotidine but these concentrations were only 1/10 as potent. The cimetidine concentration inducing 50% inhibition of food-stimulated gastric acid secretion was 0.41 +/- 0.04 whereas it was 0.04 +/- 0.003 microgram/ml for tiotidine. The effect of tiotidine lasted longer than that of cimetidine because the doses recommended for use in man resulted in higher concentrations in plasma relative to effective concentration than clinical doses of cimetidine.     

Developments and trends in traditional medicine and complementary and alternative medicine

With the rapid development of society, medical science and technology, although quality of life is enhanced and life expectancy is prolonged, aging, environmental changes and health problems are unavoidable. More and more people, therefore, are concerned about their health and place high demands on medical care. As modern medicine cannot meet all such demands, other medical care systems emerge. Trends in the seeking of medical care show that people are inclined towards natural approaches, so attention is being paid once again to traditional medicine, as well as complementary and alternative medicine. Under the patient-oriented concept, medical personnel have to recognize means of health care while thinking of the individualized and socioeconomic impacts. The purpose of this paper therefore is to provide medical personnel with information on the developments and trends in, knowledge and research with regard to traditional medicine as well as complementary and alternative medicine.