肝硬化患者血清MMP-3、TIMP-1水平与肝硬化进程探讨

目的探讨肝硬化患者血清中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白组织抑制因子-1（TIMP-1）水平对肝硬化进程的影响。方法分析2011年1月至2012年6月收治的30例乙型肝炎后肝硬化代偿期患者及30例失代偿期患者的临床资料,同期选择健康体检患者30例。分别检测血清MMP-3、TIMP-1水平并计算TIMP-1/MMP-3比值。结果代偿期组和失代偿期组患者血清MMP-3水平分别为（20.32±3.1）、（22.73±5.2）ng/ml,均高于健康组的（17.45±2.3）ng/ml（P均〈0.05）;血清TIMP-1水平分别为（1.72±0.4）、（2.24±0.3）ng/ml,均高于健康组的（1.49±0.3）ng/ml（P均〈0.05）。失代偿期组患者血清MMP-3、TIMP-1水平均比代偿期组升高,差异有统计学意义（P均〈0.05）。代偿期组患者的TIMP-1/MMP-3比值与健康组比较差异无统计学意义（0.088 vs0.086,P〉0.05）;失代偿期组比健康组和代偿期组比值增高（0.103 vs 0.088,0.086）,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论血清MMP-3和TIMP-1水平及TIMP-1/MMP-3比值在一定程度上与肝硬化进程相关,可作为肝硬化的一种临床检测指标。     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原（CEA）、生存素（Survivin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）;TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组（P〈0.05、P〈0.01）;Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达的阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者（P〈0.01、P〈0.05）。结论采用逆转录real-time PCR检测外周血CEA、Survivin、MMP-2 mRNA的表达以及TIMP-2/MMP-2比值可以成为一种无创性乳腺癌辅助诊断、分期、转移的方法。     

肝素对脂多糖诱导内皮细胞损伤中基质金属蛋白酶及其组织抑制剂基因表达的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织抑制剂-1(TIMP-1)在脂多糖(LPS)诱导内皮细胞损伤中的表达,并观察肝素对其水平的影响.方法 LPS 10μg/ml刺激人肺微血管内皮细胞(HPMEC)诱导损伤,肝素预处理组分别于LPS刺激前15 min加入0.1 U/ml及1 U/ml普通肝素,对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS).分别在刺激2、6、12h收集细胞提取RNA,应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA表达.结果 与对照组比较,LPS刺激2h组MMP-9和TIMP-1的mRNA表达明显增高,12h达高峰(MMP-9 mRNA:4.26±0.81比1.00±0.46,TIMP-1 mRNA:4.93 ±0.08比1.00±0.13,均P＜0.05),以TIMP-1增高明显.预防性应用肝素可明显降低MMP-9和TIMP-1的mRNA表达(0.1 U/ml组:MMP-9 mRNA 2.74±0.30,TIMP-1 mRNA 2.96±0.13;1 U/ml组:MMP-9 mRNA 3.08±0.48,TIMP-1 mRNA 2.93±0.27,均P＜0.05).不同剂量肝素组间基因表达水平差异无统计学意义.结论 LPS诱导内皮细胞损伤时MMP-9、TIMP-1表达增加,肝素可能通过调节MMP-9、TIMP-1表达水平发挥其保护作用.     

普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质积聚的影响

摘要 目的：探讨普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞(MC)增殖和细胞外基质（ECM）积聚的影响。方法：大鼠MC分别培养在低糖组, 高糖组及普伐他汀组。CCK-8测定MC增殖，ELISA法检测细胞培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 (TIMP-1)的分泌情况；明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的活性，RT-PCR 法检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达。结果：与低糖组相比，高糖能促进Col-Ⅳ、FN合成，抑制MMP-2 、MMP-9活性，增加TIMP-1、TGF-β1、CTGF的分泌，而普伐他汀能一定程度上逆转上述现象。结论：普伐他汀能抑制高糖环境下的MC增殖，并通过抑制 ECM 的合成、促进ECM的降解减少ECM积聚，机制可能与抑制TGF-β1、CTGF有关。     

MMP-9及其抑制剂TIMP-1与多发性硬化活动相关性研究

目的探讨血清和脑脊液中基质金属蛋白酶（ MMP）-9及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂（ TIMP）-1与多发性硬化发病及疾病活动的相关性。方法本实验共分四组：多发性硬化组、神经系统炎性疾病（OIND）组、神经系统非炎性疾病（NIND）组和健康人群组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清MMP-9、血清和脑脊液中TIMP-1的表达水平;采用酶谱法检测脑脊液中MMP-9水平;以MRI检查为多发性硬化疾病活动性判断标准,分析比较多发性硬化活动组和非活动组MMP-9及TIMP-1水平。结果多发性硬化组血清MMP-9水平显著高于NIND组（ P＜0.05）和健康人群组（ P＜0.001）,血清TIMP-1水平显著低于OIND组（ P＜0.001）、NIND组（ P＜0.001）和健康人群组（ P＜0.001）;多发性硬化组脑脊液中MMP-9水平高于NIND组（ P＜0.05）,脑脊液中TIMP-1水平显著低于OIND组（ P＜0.05）;多发性硬化活动期患者血清MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1比值分别显著高于非活动期（ P均＜0.05）,活动期血清TIMP-1水平与非活动期无统计学差异。结论检测血清和脑脊液中MMP-9及TIMP-1水平对多发性硬化疾病活动性的监测有一定参考价值。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与急性心肌梗死的关系

目的 检测急性心肌梗死(AMI)患者血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的水平变化,探讨MMP-3、MMP-9及TIMP-1与AMI的关系.方法 选择急性心肌梗死(AMI) 患者67例,其中男44例,女23例,发病3小时至5天.入院后肘正中静脉采血,选择同期住院非冠心病患者40例作为对照组,应用ELISA法测定血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1含量.结果 AMI组和对照组血清中MMP-3含量为(34.1±36.1)ng/mL和(10.5±5.0)ng/mL(P＜0.01),MMP-9含量为(381.0±103.2 ng/mL)ng/mL和(205.6±80.2 ng/mL)ng/mL(P＜0.01),TIMP-1含量为(2 382.2±1 011.8 ng/mL)ng/mL和(1 952.8±1 126.9 ng/mL)ng/mL(P＜0.05),MMP-3/TIMP-1比值为(0.015 2±0.013 4)和(0.008 7±0.011 1)(P＜0.05),MMP-9/TIMP-1比值为(0.179 3±0.059 6)和(0.144 6±0.096 6)(P＜0.05).结论 MMP-3、MMP-9过度表达以及MMP-3/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比例失衡,导致了动脉粥样斑块的破裂和心肌梗死的发生.     

肝素对急性肺损伤大鼠基质金属蛋白酶2和9活性的影响

目的 探讨肝素对急性肺损伤( ALI)大鼠体内基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)蛋白及mRNA表达的影响.方法 18只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分成3组,每组6只.经尾静脉注射脂多糖(LPS)6 mg/kg复制ALI大鼠模型;肝素组在注射LPS前15 min经尾静脉注射普通肝素100 U/kg,对照组注射等量生理盐水.分别于制模后1、3、6h取股静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中MMP-2、MMP-9蛋白表达;制模后6h处死动物,取左肺,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺组织中MMP-2及MMP-9的mRNA表达.结果 与对照组比较,ALI组血清MMP-2( μg/L)、MMP-9( μg/L)蛋白表达增高,6h达到高峰(MMP-2:2.86±0.40比1.21±0.24,MMP-9:2.54±0.29比1.15±0.34,均P＜0.01);应用肝素后在6h时MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低(MMP-2:1.92±0.31比2.86±0.40,MMP-9:1.82±0.26比2.54±0.29,均P＜0.05).制模后6h,ALI组肺组织MMP-2、MMP-9的mRNA表达明显高于对照组(MMP-2 mRNA:1.88±0.09比1.00±0.10,MMP-9 mRNA:3.15±0.47比1.00±0.17,均P＜0.01);肝素组MMP-2、MMP-9的mRNA表达较ALI组明显降低(MMP-2 mRNA:1.26±0.14比1.88±0.09,P＜0.01;MMP-9 mRNA:2.06±0.68比3.15±0.47,P＜0.05),但仍高于对照组(均P＜0.05).结论 ALI大鼠体内MMP-2、MMP-9表达增加,肝素能够减少血清及肺组织中MMP-2、MMP-9的表达,从而减轻肺损伤.     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原(CEA)、生存素(Survivin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组(P<0.01);TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组(P<0.05、P<0.01);Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组(P<0.01)。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺...     

早期自然流产患者绒毛中MMP-9 mRNA和TIMP-3 mRNA的表达——附30例检测报告

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-3（TIMP-3）的表达与早期自然流产的关系。方法：于手术时收集30例自然流产孕妇及20例要求行人工流产的正常早孕孕妇的绒毛组织,分为自然流产组及正常绒毛组,提取绒毛组织总RNA,应用逆转录-PCR法检测其中MMP-9 mRNA和TIMP-3 mRNA的表达水平,计算MMP-9 mRNA/TIMP-3 mRNA。 结果：自然流产组的MMP-9 mRNA、TIMP-3 mRNA的相对表达量分别为0.35～0.74（0.55）、0.80～1.00（0.90）,其MMP-9 mRNA /TIMP-3 mRNA比值为0.35～0.80（0.54）,正常绒毛组的MMP-9 mRNA及TIMP-3 mRNA的相对表达量分别为0.11～0.39（0.25）、0.76～0.99（0.87）,其MMP-9 mRNA /TIMP-3 mRNA比值为0.11～0.30（0.19）,自然流产组的MMP-9 mRNA表达水平、MMP-9 mRNA /TIMP-3 mRNA比值明显高于对照组（均为P〈0.01）,2组TIMP-3 mRNA水平相近（P〉0.05）。结论：自然流产者的MMP-9 mRNA表达水平较高,其MMP-9 mRNA/TIMP-3 mRNA比值亦较高,MMP-9 mRNA表达水平及MMP-9 mRNA/TIMP-3 mRNA的比值与自然流产可能有关。     

乌司他丁对兔急性百草枯中毒心肌的保护作用

目的 探讨乌司他丁( UTI)对急性百草枯中毒致心肌损伤的保护作用及机制.方法 将24只健康日本大耳白兔按随机数字表法均分为对照组、模型组(腹腔注射百草枯37 mg/kg1次)及UTI低、高剂量组(染毒前1周开始分别静脉注射UTI 25 kU·kg-1·d-1、50 kU·kg-1·d-1,共9d)4组.于末次给药后24h称重并处死动物,取左心室组织,测定羟脯氨酸(HYP)含量;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)转录水平;行免疫组化染色观察心肌形态学及MMP-2免疫组化评分.结果 与对照组相比,模型组心肌HYP含量(mg/g)明显增高(3.85±0.36比2.52±0.29,P＜0.05);心肌组织MMP-2 mRNA表达及免疫组化评分(分)明显增高(mRNA:2.07±0.57比1.00±0.35;免疫组化评分:2.24±0.82比1.40±0.62,均P＜0.05),同时TIMP-2 mRNA表达呈下降趋势(0.78±0.24比1.00±0.17,P＞0.05);组织形态学显示心肌排列紊乱.与模型组相比,UTI低、高剂量组心肌HYP含量降低(3.40±0.48、3.12±0.43比3.85±0.36,P＞0.05和P＜0 05);MMP-2 mRNA表达和免疫组化评分明显降低(mRNA:1.86±0.44、1.58±0.46比2.07±0.57,P＞0.05和P＜0.05;免疫组化评分:1.93±0.86、1.75±0.67比2.24±0.82,均P＜0.05);TIMP-2 mRNA表达虽升高,但差异无统计学意义(0.82±0.35、0.94±0.33比0.78±0.24,均P＞0.05);且心肌纤维排列紊乱程度减轻.结论 UTI具有改善急性百草枯中毒致心肌功能障碍及心肌间质纤维化的作用,这一作用可能与其下调组织MMP-2水平有关,且这种下调作用呈剂量依赖性.     

Nurses make high tech high touch

Until nurses at St. Mary's Hospital took the lead in establishing an outpatient infusion unit, oncology patients had to travel up to 100 miles to receive chemotherapy. Today, they need travel only ten minutes to receive the best and latest of a variety of high-tech services.     

高职和高专护理专业学生创新能力的培养

随着医学模式的转变和社会需求的发展,护理教育必须注重培养学生的创新能力。要转变教育观念,培养学生的创新意识,改革教学方法,开发学生的创新思维,利用学科特点,培养学生的创新能力,最大限度地挖掘学生的创新潜能,培养高素质的护理人才。     

高职和高专护理专业学生创新能力的培养

随着医学模式的转变和社会需求的发展，护理教育必须注重培养学生的创新能力。要转变教育观念，培养学生的创新意识，改革教学方法，开发学生的创新思维，利用学科特点，培养学生的创新能力，最大限度地挖掘学生的创新潜能，培养高素质的护理人才。     

高职高专儿科护理学实践教学改革体会

为适应卫生事业改革和发展的需要,要求高职高专护理专业以培养应用型人才为目标,加大实践教学的改革力度。我院对护理专业的儿科护理学实践教学进行了改革,取得了一定成绩,并取得了一定的经验：①改变教学观念,以社会需求为导向,充分调研市场需求,根据调研结果制订实训内容及教学大纲。②实验室建设要有针对性及先进性。③构建模块式实践教学体系,方式与手段应体现目的性与多样性。④完善考核制度,评价教学目标的实现情况,进一步深化教学改革。     

高职高专儿科护理学实践教学改革体会

为适应卫生事业改革和发展的需要,要求高职高专护理专业以培养应用型人才为目标,加大实践教学的改革力度.我院对护理专业的儿科护理学实践教学进行了改革,取得了一定成绩,并取得了一定的经验:①改变教学观念,以社会需求为导向,充分调研市场需求,根据调研结果制订实训内容及教学大纲.②实验室建设要有针对性及先进性.③构建模块式实践教学体系,方式与手段应体现目的性与多样性.④完善考核制度,评价教学目标的实现情况,进一步深化教学改革.     

高钙、高磷对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞钙化的作用

目的研究高钙、高磷对体外培养的原代大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）钙沉积以及VSMCs、成骨细胞标志蛋白表达的情况。方法应用大鼠原代血管平滑肌细胞进行体外实验,根据培养基中钙、磷浓度不同分为3组：正常钙、磷组（对照组）、高钙组和高磷组。以更换培养液当天为D0。在培养的10天内观察细胞的形态学变化,应用原子分光光度计检测细胞内钙含量。应用免疫组化染色和Western blot方法观察VSMCs及成骨细胞标志蛋白的表达。结果对照组VSMCs钙含量在10d内无明显变化,高钙组VSMCs钙含量D2有明显增加,D8、D10进一步增加;高磷组D8钙含量有明显增加,D10进一步增加,与D0比较差异均有显著性（P〈0.01）。Western blot显示高钙组、高磷组平滑肌肌动蛋白α（α-SMA）表达在D12较D0分别下降52%和57%,而对照组无明显变化。D17α-SMA免疫组化染色此两组细胞胞浆中几乎无表达。免疫组化染色显示,高钙组和高磷组VSMCs在培养的10d内,成骨细胞标志蛋白核心结合因子α1（Cbfα1）、I型胶原（ColI）和骨桥蛋白（OPN）表达并逐渐增强,对照组仅有微弱表达,且随时间无明显变化。Western blot显示高钙组和高磷组D8 OPN的表达明显高于对照组,为对照组的2.6倍。结论大鼠VSMCs在高钙或高磷条件下出现钙盐沉积。在此过程中,VSMCs发生细胞表型转化。高钙、高磷可能通过使血管平滑肌细胞转化为成骨样细胞导致钙化发生。