银杏叶提取物对辛伐他汀药物代谢影响的研究

目的:研究银杏叶制剂对辛伐他汀体外代谢及其代谢相关酶的影响,探讨两药是否存在相互作用,为临床上两药的合理联用提供试验依据.方法:将大鼠随机分为4组:分别为生理盐水对照组、苯巴比妥钠阳性对照组、低剂量银杏叶制剂组和高剂量银杏叶制剂组.灌胃10天后,处死动物摘取肝脏并制备成微粒体.分光光度法测定各组微粒体蛋白含量,红霉素N-脱甲基酶(ERDase)活性,HPLC测定辛伐他汀体外代谢情况.结果:与生理盐水对照组比较:苯巴比妥钠阳性对照组微粒体蛋白含量、ERDabe活性及辛伐他汀体外代谢均显著增加(P<0.05);高剂量银杏叶组上述各指标也明显增加(P<0.05),且数值均介于生理盐水和苯巴比妥钠两组之间;低剂量银杏叶组各指标仅有增加趋势,但差别无统计学意义.结论:大剂量银杏叶制剂可以诱导CYP3A的活性,促进辛伐他汀的体外代谢,提示银杏叶制剂与辛伐他汀或其他CYP3A底物合用时要注意药物的相互作用.     

大鼠肝微粒体CYP450酶对芦荟大黄素体外代谢的影响

目的:通过考察芦荟大黄素在大鼠肝微粒体外代谢的主要条件,研究CYP450酶对芦荟大黄素代谢的影响。方法:随机将12只SD雄性大鼠分为空白对照组和苯巴比妥钠组,对空白对照组(0.5%CMC-Na溶液,10 ml/kg,ig)和PB组(苯巴比妥钠,75.0 mg/kg,ip)进行大鼠肝微粒体的诱导和制备,再将芦荟大黄素与大鼠肝微粒体进行体外孵育代谢,-80℃终止反应,三氯甲烷提取样品。用高效液相-荧光检测器(HPLC-FLD)测定芦荟大黄素含量,流动相为甲醇:0.1%磷酸水(70:30),激发波长435nm,发射波长515nm。结果:测定方法专属性,回收率高,日内和日间精密度良好,稳定性好满足生物样品检测要求。以芦荟大黄素代谢消失率计,在肝微粒体蛋白浓度为0¹.0mg/ml范围内成线性增加趋势,1.01.0mg/ml范围内成线性增加趋势,1.0².5mg/ml趋势不明显;孵化时间02.5mg/ml趋势不明显;孵化时间0³0min成线性增加,且高于60%。芦荟大黄素代谢消失率随其浓度的增加呈线性增加趋势,达到一定浓度后成降低趋势。芦荟大黄素低、中、高浓度在PB、CMC-Na肝微粒中代谢消失率比较均为PPB-CMC-Na<0.01。结论:芦荟大黄素在大鼠肝微粒体中的体外代谢具有酶促动力学特征,CYP450酶对芦荟大黄素的代谢起促进作用,苯巴比妥钠诱导的CYP450亚型酶参与了芦荟大黄素的代谢。     

伪麻黄碱与麻黄碱对大鼠细胞色素P450酶活性的影响

目的:分析伪麻黄碱与麻黄碱对大鼠细胞色素P450(CYP450)酶活性的影响。方法:大鼠CYP450酶探针底物双氯酚酸钠(CYP2C6)、奥美拉唑(CYP2C)、非那西丁(CYPlA2)、氯唑沙宗(CYP2E1)和睾酮(CYP3A)分别与不同作用浓度麻黄碱或伪麻黄碱在大鼠肝微粒体中共温孵反应适当时间后,用HPLC法测定探针底物的相对代谢清除率。结果:伪麻黄碱对CYP1A1/2、CYP2E1的IC50值分别为54.0和206.7μmol/L,而麻黄碱(400μmol/L)能使非那西丁、双氯芬酸的相对代谢清除率分别提高了1.3倍和0.6倍。结论:伪麻黄碱对CYP1A1/2、CYP2E1活性一定抑制作用,而麻黄碱对CYP2C、CYP1A1/2活性有一定诱导作用。     

莪术油对大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性的影响

目的:建立非那西丁及其代谢产物的液质联用检测法,研究莪术油对大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性的影响,为临床合理用药提供参考。方法:色谱柱为XDB-C18(150mm×2.1mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸,流速:0.4mL.min-1,柱温:30℃,以多反应监测方式采集数据。以非那西丁为探针药物,采用体外实验,实验组给予莪术油,对照组给予生理盐水,评价药物代谢酶CYP1A2酶活性的变化。结果:非那西丁和对乙酰氨基酚的检测浓度线性范围分别为4～1600ng.mL-1(r=0.9973)、3-2000ng.mL-1(r=0.9973)。实验组测得的扑热息痛/非那西丁的比值:11.30±0.71,对照组:9.60±1.04,t检验显示P<0.05,有统计学意义。结论:本法可用于检测大鼠肝微粒体孵育液中非那西丁及其代谢物浓度。莪术油对大鼠肝CYP1A2酶的活性,有体外诱导作用。     

六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2及肠道P-gp活性的影响

目的:考察六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2及肠道P-gp活性的影响。方法:两组(各5只)大鼠分别灌胃给予六味地黄丸生理盐水7 d后,静脉给予咖啡因,用HPLC法测定咖啡因的血药浓度,获得药-时曲线,计算药动学参数,以咖啡因t1/2的变化来评价六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2活性的影响;采用在体肠循环法,通过分析P-gp底物地高辛肠吸收参数的变化来考察六味地黄丸对P-gp活性的影响。结果:生理盐水组、六味地黄丸组大鼠体内探针药物咖啡因的t1/2分别为(2.61±0.98)h、(5.14±0.21)h;地高辛在给药组和对照组肠吸收百分率分别为(6.54±0.71)%、(5.42±0.23)%,吸收速率常数分别为(0.030±0.005 7)h-1、(0.024±0.003 9)h-1。结论:六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2活性具有一定抑制作用,对肠道P-gp活性具有较弱的诱导作用。     

川楝子对大鼠肝细胞色素P450诱导作用的研究

目的:考察川楝子对大鼠肝细胞色素P450 1A2、2E1、3A1活性的影响。方法:大鼠分组,连续灌胃给予150g生药/kg的川楝子7天;苯巴比妥组腹腔注射0.08g/kg的苯巴比妥3次。高效液相色谱法对肝细胞色素P450 1A2、2E1、3A1代谢能力进行测定。结果:连续给予川楝子7天后,对肝细胞色素P450 1A2代谢能力影响不明显,但可使大鼠肝微粒体酶蛋白含量增加,使肝细胞色素P450 1A2总代谢能力增强;对大鼠大鼠肝细胞色素P450 2E1活性及代谢能力均无明显影响;川楝子可诱导雌性大鼠大鼠肝细胞色素P450 3A1,使6-OH睾酮代谢生成速率及肝脏总代谢睾酮的能力增强;对雄性大鼠肝细胞色素P450 3A1有诱导的趋势,使6-OH睾酮代谢生成速率及肝脏总代谢睾酮的能力有增强的趋势,但与对照组比较差异无显著意义。结论:川楝子对大鼠肝细胞色素P450 3A1活性具有诱导作用。     

广西莪术水提物对大鼠肝脏胞浆液抗氧化酶和微粒体药物代谢酶的影响

目的研究广西莪术水提物对大鼠肝脏胞浆液和微粒体内抗氧化酶和药物代谢酶的影响。方法用差速离心法制备肝脏胞浆液及微粒体,测定抗氧化酶和药物代谢酶NADPH-细胞色素P-450还原酶、CYP3A、CYP2E1和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和葡萄糖醛酸-转移酶(UGT)的活性。结果在肝胞浆液,与空白组比较,广西莪术各剂量组对超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GR)水平的影响没有明显差异(P0.05);中剂量显著增高过氧化氢酶(CAT)活性(P0.01);高剂量明显增高GSH-PX活性(P0.05)。广西莪术各剂量组对CYP2E1和UGT的活性均没有显著的影响(P0.05);均明显增高GST活性(P0.05);低剂量显著降低NADPH-细胞色素P-450还原酶活性(P0.05),各剂量组明显降低CYP3A活性(P0.05);苯巴比妥钠组明显增高CYP3A、GST和UGT的活性(P0.05)。结论广西莪术可能会影响体内药物代谢,合并用药时,应考虑潜在的药物间相互作用。     

藏药余甘子鞣质部位对大鼠肝微粒体代谢酶P450活性的影响

目的：考察藏药余甘子鞣质部位对大鼠肝微粒体代谢酶P450活性的影响。方法：采用“Cocktail”探针底物与大鼠肝微粒体体外温孵法,通过HPLC同时测定6种探针药物氨苯砜、氢溴酸右美沙芬、香豆素、非那西丁、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲的代谢消除率,评价余甘子鞣质部位对P450酶中CYP3A4、CYP2D6、CYP2A6、CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9亚酶活性的影响。结果：余甘子鞣质部位对P450酶影响较小,CYP3A4,CYP1A2的IC₅₀值超过200μg·mL^{-1,CYP2C9的IC₅₀值超过500μg·mL-1。结论：藏药余甘子鞣质部位对肝P450酶活性影响较弱。}     

壮骨关节丸对大鼠肝微粒体P450的影响

[目的]考察壮骨关节丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响。[方法]壮骨关节丸及其两个新工艺按含生药2.1 g/kg连续给大鼠灌胃7 d,末次药后24 h断头处死大鼠并取肝脏,用钙沉降法制备肝微粒体。在体外用含氨苯砜、非那西丁、奥美拉唑、氯唑沙宗的cocktail探针代谢来考察肝微粒体CYP3A、CYP1A2、CYP2C19、CYP2E1的活性。[结果]cocktail探针在体外肝微粒体系统中代谢1 h后,包括壮骨关节丸及其两个新工艺的给药组剩余氯唑沙宗浓度显著高于对照组,而奥美拉唑、非那西丁、氨苯砜浓度与对照组之间差异无统计学意义。[结论]壮骨关节丸可以抑制大鼠肝脏CYP2E1活性,但对CYP1A2、CYP3A及CYP2C19无显著影响。     

归脾汤对雷公藤醇提物致肝损伤大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性的影响

目的:建立一个快速、准确的测定大鼠肝微粒体中CYP3A4酶活性的HPLC,研究雷公藤醇提物对肝损伤大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性的影响,进而探讨归脾汤对其保护机制。方法:50只大鼠随机分为正常组、模型组、归脾汤组、P450诱导组、P450抑制组。正常组、模型组灌服生理盐水,归脾汤组灌服归脾汤(9g·kg-1),P450诱导组、P450抑制组分别腹腔注射地塞米松(100mg·kg-1)和酮康唑(80mg·kg-1),连续ig 4d后,再以雷公藤醇提物(3.25mg·kg-1)ig 3d造模。选用HPLC以咪达唑仑为探针药物,检测各组大鼠肝微粒体中CYP3A4酶活性。结果:在所建立的HPLC条件下,咪达唑仑的出峰时间在8.960min,能够完全分离,且无其他生物基质峰干扰;线性范围是0.25~20μmol·L-1(r=0.9999),符合检测要求,方法可靠。结果显示,与正常组比较,模型组大鼠CYP3A4活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,归脾汤组、CYP450诱导组大鼠CYP3A4活性亦明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);归脾汤组与CYP450诱导组之间比较,大鼠CYP3A4活性差异不明显,无统计学意义。结论:本方法能够对CYP3A4活性进行准确评价,雷公藤对大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性有一定的抑制作用,归脾汤可能通过诱导CYP3A4活性而降低雷公藤的毒性从而发挥对肝脏的保护作用。     

苯巴比妥钠诱导细胞色素P450对内毒素所致鼠毒性的保护作用

 目的蜒究苯巴比妥钠诱导细胞色素P450(P450)对内毒素所致鼠毒性的保护作用。方法 紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体P450含量;鲎试剂法测定血浆内毒素含量;应用组织形态学方法（光镜和电镜）,观察苯巴比妥钠对内毒素所致大鼠肝线粒体以及肝细胞、肝小叶结构、肺泡、肺间质、肺支气管、肾曲管细胞等病理改变的影响。结果苯巴比妥钠可明显降低血浆内毒素含量;延长内毒素休克小鼠的平均生存时间,降低其死亡率;诱导大鼠肝微粒体P450的产生;对内毒素大鼠肝线粒体以及肝细胞、肝小叶结构、肺泡、肺间质、肺支气管、肾曲管细胞等损害具保护作用。结论苯巴比妥钠诱导细胞色素P450对内毒素所致鼠毒性具有保护作用。     

甘草酸对抗胡椒碱对大鼠肝P450抑制的研究

目的:研究胡椒配伍甘草使用对大鼠肝细胞色素P450的影响。方法:灌胃给予SD大鼠甘草酸50mg/kg,胡椒碱30mg/kg,胡椒碱30mg/kg 甘草酸20mg/kg、50mg/kg、90mg/kg,苯巴比妥钠50mg/kg和等量生理盐水,7d后处死大鼠,差速离心法制备肝微粒体,采用Johannesen等[1]方法测定肝细胞色素P450含量。结果:与正常对照组(4.971±1.631nmol/ml)相比,胡椒碱组肝细胞色素P450含量(2.734±1.013mol/ml)明显降低,甘草酸组(4.540±1.094nmol/ml)无明显变化,苯巴比妥钠组肝细胞色素P450含量(16.620±3.503nmol/ml)明显升高,而胡椒碱 甘草酸组其肝细胞色素P450的含量(3.008±0.784、4.215±1.237、5.075±1.324nmol/ml)随甘草酸剂量的增加而增加。结论:胡椒碱可以明显抑制大鼠细胞色素P450的活性,甘草酸本身无明显诱导肝细胞色素P450的作用,但能对抗胡椒碱引起的肝药酶抑制,并具有剂量依赖性。     

半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝脏 CYP450酶活性的影响

目的:研究半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝微粒体CYP450亚型酶的影响,从肝脏代谢角度评价半夏泻心汤组方的合理性。方法:将大鼠随机分为全方组、辛开组、苦降组、甘补组及空白对照组,分别灌胃水煎液,运用肝微粒体体外温孵法,对探针底物进行孵育,并结合超高效液相检测方法,测定各探针底物代谢产物的含量,计算代谢速率,以反映各给药组的肝微粒体CYP2C6,CYP2E1,CYP3A1/2亚型酶活性。结果:与空白组相比,全方组,苦降组对各亚型酶均起抑制作用(P<0.01);辛开组对CYP2C6有抑制作用(P<0.01),而对CYP2E1和CYP3A1/2无显著抑制作用;甘补组对CYP2C6和CYP2E1亚型起抑制作用(P<0.01),而对CYP3A1/2无抑制作用。结论:全方对大鼠肝微粒体CYP450酶起抑制作用,比较各配伍组间差异,苦降组抑制作用较其他配伍组显著。     

柴胡皂苷-白芍总苷对大鼠肝微粒体CYP450酶活性及肝功能的影响

目的研究柴胡皂苷-白芍总苷对大鼠肝微粒体CYP450酶活性及肝功能的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、柴胡皂苷组(500 mg/kg)、白芍总苷组(500 mg/kg)、柴胡皂苷-白芍总苷配伍组(柴胡皂苷、白芍总苷各500 mg/kg)、苯巴比妥组(80 mg/kg)。除苯巴比妥组连续4 d腹腔注射给药外,其他各组均连续15 d灌胃给药。采用Cocktail探针底物与肝微粒体体外温孵法,HPLC测定肝微粒体中各探针底物的代谢消除率,评价各组对肝微粒体CYP450酶活性的影响;检测肝功能相关指标ALT、AST水平,测定肝组织内MDA、SOD水平。结果与空白组比较,柴胡皂苷组CYP2E1活性显著升高(P0.05),而柴胡皂苷-白芍总苷配伍组CYP450各同工酶的活性均无显著变化;柴胡皂苷组、白芍总苷组、柴胡皂苷-白芍总苷配伍组血清ALT、AST水平显著增高,且肝组织内MDA水平增加,SOD水平下降(P0.05)。结论柴胡皂苷可升高CYP2E1的活性,柴胡皂苷-白芍总苷配伍后可影响柴胡皂苷提高CYP2E1活性的作用,柴胡皂苷、白芍总苷单独或配伍给药均有不同程度的肝功能损伤。     

探针药物评价大黄苷元对P450酶CYP1A2活性的影响

目的:研究大黄苷元对大鼠细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)中CYP1A2活性的影响。方法:将SD大鼠60只随机分为12组,即空白组,苯巴比妥钠组(PB),地塞米松组(DEX),β-奈黄酮组(β-NF),酮康唑组(KET),大黄苷元不同剂量组;空白组ig给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),PB,DEX,β-NF三诱导剂组分别给予苯巴比妥钠注射液75 mg·kg-1,地塞米松80 mg·kg-1,β-奈黄酮75 mg·kg-1,KET抑制剂组给予酮康唑82.5 mg·kg-1,大黄苷元不同剂量组分别给予不同剂量大黄苷元(7.08,14.40,30.82,46.55,51.63,61.63,100.07 mg·kg-1)。以非那西丁为探针药物,制得肝微粒体进行孵化实验,样品经处理后,进行高效液相测定其代谢产物对乙酰氨基酚的生成量,研究大黄苷元对CYP1A2活性的影响及给药剂量与其活性的关系。结果:与空白组、KET给药组对比,大黄苷元61.63,30.82,14.40 mg·kg-1组与对乙酰氨基酚的生成量有显著差异(P0.05),其诱导效应明显弱于PB组,DEX给药组,β-NF给药组,且随着大黄苷元给药剂量(7.08,14.40,30.82,46.55,51.63,61.63,100.07 mg·kg-1)的增加,对乙酰氨基酚的生成量有增多的趋势。结论:大黄苷元对CYP1A2有诱导作用,且随其剂量的增加,作用呈增强趋势。     

霍山石斛对小鼠肝脏细胞色素P450酶表达和活性的影响

该文旨在研究口服霍山石斛对小鼠肝脏细胞色素P450酶表达和活性的影响,为评价霍山石斛与临床药物联用时的药物-药物的相互作用提供参考。将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、霍山石斛低剂量组(含生药1.25 g·kg~(-1))、霍山石斛高剂量组(含生药7.5 g·kg~(-1))和苯巴比妥阳性对照组(0.08 g·kg~(-1))连续给药2周。提取小鼠肝脏微粒体,采用Western blot(蛋白质印迹)法检测P450酶主要亚型蛋白表达情况。针对蛋白表达发生变化的P450亚型使用探针药物法对其酶活性进行检测。结果显示,口服霍山石斛对小鼠肝脏CYP1A1,CYP1A2,CYP2B蛋白表达有一定程度的诱导作用。进一步的体外酶活实验结果表明,口服霍山石斛组小鼠CYP1A1,CYP2B对应的探针药物乙氧基异吩噁唑、安非他酮代谢与空白组相比没有显著的差异;口服霍山石斛组小鼠中CYP1A2亚型酶对应的探针药物非那西丁代谢速率V_(max)与空白组相比显著升高约20%,清除率CL_(int)也显著升高约32%。因此,口服霍山石斛可能加快对CYP1A2酶催化的药物代谢,但口服霍山石斛对小鼠肝脏中大多数的P450酶的活性没有影响,理论上对绝大多数临床药物不存在与P450酶系相关的药物-药物相互作用。     

Cocktail法评价注射用益气复脉(冻干)对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A的诱导作用

目的:研究注射用益气复脉(冻干)Yi Qi Fu Mai Injection(YQFM)(Lyophilized)对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A的诱导作用。方法:将wistar大鼠分为生理盐水对照组,苯巴比妥钠诱导组,YQFM组,连续给药7天后处死,制备肝微粒体。采用Cocktail法,将特异性探针底物非那西丁(CYP1A2)、睾酮(CYP3A)与肝微粒体共孵育,采用高效液相色谱测定孵育所得代谢产物对乙酰氨基酚和6β-羟基睾酮的生成速率,来评价YQFM对CYP1A2、CYP3A的诱导作用。结果:空白对照组、诱导组和YQFM组的对乙酰氨基酚的生成速率分别为(18.04±1.00)、(43.07±2.90)、(27.6±4.5)ng.(mg pro-tein)-1.min-1,6β-羟基睾酮的生成速率分别为(15.79±1.43)、(40.86±3.32)、(32.8±3.67)ng.(mg protein)-1.min-1。结论:YQFM对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A有诱导作用。     

注射用益气复脉(冻干)对大鼠肝微粒体CYP1A2,CYP3A4活性的影响研究

目的:研究注射用益气复脉(冻干)对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP1A2,CYP3A4)酶活性的影响效应.方法:实验设空白对照组(生理盐水)、诱导组(苯巴比妥)和益气复脉低、中、高剂量组,连续给药7 d.采用高效液相色谱法检测,以探针药非那西丁和咪达唑仑经大鼠肝微粒体孵育后转化的代谢产物对乙酰氨基酚和1'-羟基咪达唑仑的生成速率来判定CYP1A2,CYP3A4酶的活性.结果:空白对照组、诱导组和益气复脉低、中、高剂量组的对乙酰氨基酚的生成速率分别为(1.304 ±0.205),(8.555±1.193),(2.927±0.576),(3.675±0.444),(3.024±0.552)ng·mg-1·min-1,1-羟基咪达唑仑的生成速率分别为(9.100±2.235),(47.413±4.320),(38.649 ±5.043),(36.282±3.254),(33.764±5.128)ng·mg-1·min-1.结论:注射用益气复脉对大鼠CYP1A2,CYP3A4酶的活性具有诱导作用.     

中药有效成分对药物代谢酶的影响

目的:探讨与分析中药有效成分对药物代谢酶的影响。方法:选用人肝微粒体孵育法,将非那西丁、美分妥因、甲苯磺丁脲等作为探针药物,采用探针药物测定法测定探针药物代谢酶浓度水平。结果:4种药物均对单个或多个代谢酶的代谢产生明显的抑制作用,5种常见酶参与了80%药物在人体内的代谢作用。结论:为降低药物不良反应的产生,提高临床用药的合理性,必须加强中药有效成分对药物代谢酶的研究。     

石膏水煎液对肝微粒体细胞色素P450酶系中CYP1A2和CYP2E1的影响

目的:研究石膏水煎液对肝微粒体细胞色素P450酶CYP1A2和CYP2E1活性的影响,指导临床合理用药。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对肝脏细胞色素P450酶CYP1A2和CYP2E1进行了初步研究。结果:与空白对照组比较,石膏水煎液对大鼠肝脏中的CYP1A2含量有降低的趋势,对CYP2E1的含量没有显著影响。结论:石膏对大鼠肝微粒体CYP1A2活性有抑制作用,临床上当与经过CYP1A2代谢的药物合用时应适当调整药量。