NF-κB信号转导途径与炎症性疾病

核因子κB广泛存在于胞浆中,通常以p65-p50二聚体的形式存在,与抑制物IκB结合而呈非活性状态。NF-κB信号转导途径能被TNF-α、IL-1、神经生长因子等多种因素激活。激活后NF-κB信号转导途径能够调节包括生长因子、转录因子、细胞素、趋化因子、抗凋亡蛋白等在内的基因转录。NF-κB信号转导途径参与了炎症、细胞凋亡、免疫反应等病理过程。其与炎症性疾病关系密切,深入了解NF-κB信号转导途径,有助于阐明某些炎症性疾病的发病机制以及为某些炎症性疾病提供新的治疗靶点。     

枸杞多糖通过TLR4/Myd88通路抑制糖尿病肾病大鼠炎症反应

目的观察枸杞多糖对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用,探讨TLR4/Myd88信号通路的作用机制。方法 SD大鼠45只,随机分为假手术组(Sham组),糖尿病肾病模型组(DN组)、枸杞多糖治疗组(LBP组),DN组和LBP组采用三联法(手术+高糖高脂+STZ)法建立II型糖尿病肾病大鼠模型,建模后LBP组给予枸杞多糖100mg/Kg灌胃,Sham组及HS组予以等量生理盐水;血生化检测大鼠肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)浓度,ELISA检测炎性因子TNF-α、IL-6、IL-10的水平,HE染色观察肾脏组织病理学变化,qPCR、Western blot检测肾脏组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达。结果糖尿病肾病大鼠可导致肾功能损伤,肾小球细胞结构破坏,炎性因子侵润;枸杞多糖可以减轻糖尿病肾病大鼠的肾损伤,降低炎症反应,改善肾功能,且可下调TLR4、Myd88、NF-κB蛋白表达。结论枸杞多糖减轻糖尿病大鼠肾功能损伤,与TLR4/Myd88信号通路介导炎症反应下降有关。     

Rel／NF—κB／IκB／IKK信号转导途径与动脉粥样硬化

Rel/NF-κB/IκB/IKK信号转导途径与动脉粥样硬化的发生发展具有密切的相关性,AngⅡ可激活NF-κB,诱发内皮细胞炎症反应.Rel/NF-κB/IκB/IKK途径可能为动脉粥样硬化发病的始动机制.     

姜黄素抑制肺上皮细胞BEAS-2B真菌产生炎症细胞因子的作用

目的探讨姜黄素(Cur)抑制肺上皮细胞BEAS-2B真菌产生炎症细胞因子的作用。方法黄曲霉菌(AFT)感染肺上皮细胞BEAS-2B后,用不同浓度的姜黄素(10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L)进行抗炎抑制作用。采用ELISA法检测细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-Iβ、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TLR4和NF-κB的表达水平;采用Western blot和Real-time PCR检测重组高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)、TLR4和NF-κB蛋白和m RNA表达。结果随着姜黄素剂量的升高,细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-Iβ、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TLR4和NF-κB的表达显著降低(P0.05);HMGB1、TLR4和NF-κB蛋白和m RNA表达明显降低(P0.05)。结论姜黄素调节TLR4/NF-κB信号通路来产生抗炎作用,可以抑制真菌刺激肺上皮细胞BEAS-2B产生炎症细胞因子。     

核转录因子-κB与支气管哮喘的研究进展

近年来,支气管哮喘发病率呈逐年上升趋势,有效控制哮喘的发生对哮喘患者的生活质量至关重要.目前研究认为气道炎症和气道重构是支气管哮喘病理过程的两个重要方面.此过程与多种炎性蛋白的高表达有关,而核转录因子-κB(NF-κB)作为这些炎症蛋白的上游调控因子参与了哮喘的病理发展.由此,特异性的抑制NF-κB信号转导通路为支气管哮喘的治疗开辟了一条新的途径.     

枸杞多糖抑制核因子κB(NF-κB)通路降低骨关节炎软骨细胞炎性细胞因子水平

目的探讨枸杞多糖对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、细胞中免疫相关细胞因子水平的影响及其潜在机制。方法收集骨关节炎样本,分离培养OA软骨细胞。以(0、100、200、400、800)μg/m L枸杞多糖作用OA软骨细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖确定最佳枸杞多糖剂量。以400μg/m L枸杞多糖处理OA软骨细胞,实时荧光定量PCR检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、生长转化因子β(TGF-β)、核因子κBp65(NF-κBp65)的mRNA水平,Western blot法检测细胞i NOS、TGF-β、NF-κBp65的蛋白水平,ELISA检测培养OA软骨细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果当枸杞多糖剂量为(200、400、800)μg/m L时,OA软骨细胞活力明显低于0μg/m L组,且400μg/m L组、800μg/m L组细胞活力低于200μg/m L组,而400μg/m L组和800μg/m L组细胞活力无明显变化,选取400μg/m L为最适剂量。与对照组相比,400μg/m L枸杞多糖处理的OA软骨细胞上清液中IL-1β和TNF-α水平降低,细胞中i NOS在mRNA和蛋白水平上表达下调,而TGF-β表达上调,同时,NF-κBp65蛋白水平降低。结论枸杞多糖能够降低OA软骨细胞炎性细胞因子水平,抑制NF-κB信号通路,从而改善骨关节炎症损伤。     

沉默NF-κB p65基因下调TNF-α诱导的肺泡上皮细胞的炎症反应

目的建立急性肺损伤体外细胞炎症模型,探讨NF-κB p65基因沉默减轻细胞炎症、保护肺结构细胞的可行性。方法以TNF-α(10 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),运用RNA干扰技术沉默NF-κB p65基因,采用RT-PCR及Westernblotting法检测沉默效率,ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10等炎症因子浓度。结果 TNF-α刺激A549细胞可在基因水平上调NF-κB p65的表达,并增加NF-κB蛋白的核转位,上调细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10的浓度;预转染NF-κB p65 siRNA可在基因水平及蛋白水平有效沉默NF-κB p65表达,降低上述各炎症因子浓度(P<0.05)。结论急性肺损伤体外细胞炎症模型构建成功,RNA干扰技术能有效沉默该模型NF-κB p65基因,下调炎症反应水平,保护肺泡上皮细胞,为急性肺损伤免疫调控机制的研究和基因靶向治疗提供实验依据。     

三百棒通过调控TLR4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的RAW264.7细胞极化的影响

目的：探讨三百棒醇提物(TAAE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核-巨噬细胞RAW264.7极化趋向以及其对炎症反应的影响。方法：用LPS诱导RAW264.7细胞建立炎症模型。CCK-8法检测细胞活力;ELISA检测细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10)的水平;Griess法检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)的分泌情况;荧光染色双标法观察巨噬细胞的极化状态;免疫荧光染色检测NF-κB定位及表达;Transwell检测TAAE对RAW264.7细胞迁移和趋化性的影响;RT-qPCR检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、Arg-1、NF-κB和TLR4的mRNA水平;Western blot检测iNOS、COX-2、TLR4、NF-κB、p-NF-κB、IκBα和p-IκBα蛋白水平。使用TLR4通路抑制剂TAK-242进一步验证TAAE对TLR4/NF-κB信号通路的影响。结果：与模型组相比较,TAAE降低LPS诱导的炎症模型RAW264.7细胞中M1型促炎因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)及NO水平,促使M2型抑炎因子(IL-10和Arg-1)分泌...     

呼吸道合胞病毒激活靶细胞NF-κB的机制及途径研究进展

NF-κB是一个重要的转录调节因子,调控许多生物活性介质基因的转录和表达.静息时,NF-κB与IκB结合以非活性异寡聚体的形式存在于胞浆中,胞外刺激通过不同的信号转导途径激活NF-κB.本文主要介绍了呼吸道合胞病毒作用于靶细胞通过蛋白激酶C、磷脂酰肌醇激酶3、丝裂原活化蛋白激酶及蛋白磷酸酶2A等介导的信号级联反应活化NF-κB的机制及途径的研究进展.     

IL-18对HK-2细胞E-钙黏蛋白表达的作用及其可能的胞内信号途径

目的:探讨白细胞介素-18(IL-18)是否通过核因子-κB(NF-κB)细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化.方法:实验分单纯IL-18刺激组和SN50预孵育组, 单纯IL-18 刺激组采用终浓度分别为0、 1、 10、 100 μg/L的IL-18处理人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)72 h, SN50预孵育组在此基础上预先应用终浓度为100 mg/L的NF-κB特异性抑制剂 SN50预处理细胞0.5 h.然后应用免疫细胞化学法检测HK-2细胞E-cadherin的表达百分数;采用RT-PCR法检测HK-2细胞E-cadherin mRNA的表达.结果:NF-κB特异性抑制剂SN50可拮抗IL-18对HK-2细胞E-cadherin mRNA和蛋白表达的抑制作用.结论:IL-18可通过核因子-κB(NF-κB)细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化.     

NLRP3炎症小体及IκB、IKK在痛风性关节炎中的作用机制研究进展

痛风性关节炎的发病机制复杂,其中与2条重要通路密切相关。其一为TLR/NF-κB信号转导通路,其二为NLRP3炎症小体激活通路及其下游的IL-1β。文章就这两条主线阐述NLRP3炎症小体及TLR/NF-κB信号转导通路中2个关键信号分子IκB、IKK在痛风性关节炎中的作用机制,为今后其发病机制的进一步阐明及抗痛风新制剂的研发提供方向和理论基础。     

新型促炎细胞因子IL-36的免疫调节作用及其与免疫相关疾病的关系

IL-36是新的促炎细胞因子,包括IL-36α、IL-36β、IL-36γ3个成员。人类IL-36基因存在于2号染色体上,其结构模型和经典的IL-1家族相似。IL-36主要分布在皮肤、肺脏、关节、肠道、肾脏和大脑中,可由单核细胞、T淋巴细胞、角质细胞等多种细胞产生。IL-36主要通过与其相应受体结合后激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核因子κB(NF-κB)信号转导途径在固有免疫和适应性免疫中发挥着重要作用,参与了慢性炎症和自身免疫性疾病的病理生理过程。现就IL-36的基因结构、来源、受体及受体拮抗剂、作用机制、免疫调节作用及其与相关疾病的关系进行综述。     

LLDT-8对类风湿关节炎滑膜细胞NF-kB信号通路的影响

研究新雷公藤衍生物雷藤舒[(5R)-5-hydroxytriptolide,LLDT-8]对TNF-α联合IL-17诱导的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)NF-κB信号通路及其下游IL-6、IL-8表达的影响。体外培养FLS,TNF-α联合IL-17体外诱导FLS,ELISA法检测FLS上清液中IL-6、IL-8的含量;RT-PCR法检测FLS中IL-6、IL-8mRNA的表达;Western blotting检测FLS p-p65、p-IκBα的表达;免疫荧光染色法检测FLS NF-κB p65的核转运。研究发现LLDT-8可抑制NF-κB信号通路下游炎性因子IL-6、IL-8的表达;LLDT-8可抑制FLS NF-κB信号通路的IκBα磷酸化、p65活性;LLDT-8可显著抑制TNF-α联合IL-17诱导的NF-κB p65向FLS核内移位。由此LLDT-8可能通过调控NF-κB信号通路的活化,抑制IL-6、IL-8表达最终达到抗炎作用,将为进一步的临床应用提供实验依据。     

土荆皮乙酸对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及M1表型偏移的抑制作用

目的初步探讨土荆皮乙酸(PLAB)对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞抗炎作用及影响M1表型偏移的分子机制。方法 LPS诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型,给予0.5μmol/L PLAB和1μmol/L过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)阻滞剂GW9662处理。流式细胞术检测细胞周期变化,实时定量PCR检测PPARγ和M1型巨噬细胞标志物白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达,Western blot法检测核因子κB(NF-κB)信号通路相关信号分子水平。结果 PLAB能够明显降低LPS诱导RAW264.7细胞的IL-1β、TNF-α的mRNA水平,上调PPARγ的mRNA水平。下调NF-κB p65、p NF-κB p65、IKKα、IKKβ、p IKKα/β、IκBα、p IκBα的蛋白水平,使RAW264.7细胞阻滞在G0和G2期。GW9662可以抵抗PLAB的抗炎作用。结论 PLAB抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应并抑制巨噬细胞向M1表型偏移,与影响细胞周期分布、调控NF-κB/PPARγ通路有关。     

核因子-κB在肝纤维化中作用的研究进展

细胞核因子-κB(NuclearFactorkappaB,NF-κB)是调节炎症反应最重要的转录因子,在肝纤维化中参与调控肝细胞的凋亡和增殖,调节各种介质释放、引起的炎症反应、促发枯否(氏)细胞产生炎性因子扩大肝脏炎症过程,最终使肝星状细胞(hepatocelluarstellatecell,HSC)活化,产生大量胶原纤维发生纤维化。本文概述了NF-κB通路的组成和激活过程,NF-κB与其它肝纤维化相关细胞因子的关系以及在肝纤维化形成过程中NF-κB对肝细胞、肝星状细胞有关基因转录的调节进展。     

SIRT1-NF-κB通路在流感病毒感染小鼠体内调节机制的研究

目的 探讨巨噬细胞SIRT1-NF-κB信号转导途径在流感病毒感染小鼠体内的调节机制.方法 用流感病毒血凝素蛋白(HA)和核衣壳蛋白(NP)蛋白免疫小鼠,取小鼠腹腔巨噬细胞,采用ELISA法检测细胞培养上清中促炎症因子IL-1β、IL-6、IL-18和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;采用实时荧光定量PCR检测细胞内沉默信息调节因子1(SIRT1)、NF-κB、IL-1β、IL-6、IL-18以及TNF-α的基因表达.结果 两组蛋白初次免疫后巨噬细胞分泌的各因子及其mRNA表达水平均无明显变化.二次免疫后,HA蛋白组仅TNF-α、IL-6蛋白表达水平增加,与对照组比较差异有统计学意义,NP蛋白组IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α蛋白表达水平均增加,与对照组比较差异均有统计学意义;而两组蛋白刺激后巨噬细胞TNF-α、IL-6 mRNA均表达上调,SIRT1 mRNA均表达下调,与对照组比较差异有统计学意义.结论 流感病毒可能通过所表达的HA、NP等蛋白影响SIRT1的活性,从而解除SIRT1对NF-κB的抑制作用,激活NF-κB信号通路调节的炎症反应或免疫应答.     

核因子-κB在糖尿病肾组织中的表达及干预治疗

核因子(NF)-κB是细胞中一种重要的核转录因子，它参与细胞内的信号转导、免疫反应、炎症反应以及细胞生长发育等多种生物过程，在细胞因子诱导的基因表达中起关键性的调控作用。活化的NF-κB可能通过调控许多炎症因子的转录过程在糖尿病肾病（DN）的发生发展过程中起重要作用。抑制NF-κB的激活和IκB的降解等干预治疗可能是防治DN的手段之一。     

薯蓣皂苷减轻卵清蛋白诱导的过敏性哮喘小鼠的气道炎症

目的探讨薯蓣皂苷对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的过敏性哮喘小鼠中过敏性支气管炎的影响及机制。方法24只小鼠随机分为对照组、OVA组、OVA+30 mg/kg薯蓣皂苷组和OVA+60 mg/kg薯蓣皂苷组,每组纳入6只小鼠。全自动生化仪检测各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞的数量;ELISA法检测BALF中促炎因子IL-1β、IL-4、IL-5和TNF-α的含量;PAS染色法观察肺组织黏液分泌情况并对黏液分泌程度进行评分;免疫组化法观察肺组织p-NF-κB p65的表达和分布情况;Western blotting法检测肺组织中p-IκB和NF-κB p65的蛋白表达水平。结果薯蓣皂苷可降低过敏性哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,同时降低BALF中促炎因子IL-1β、IL-4、IL-5和TNF-α的水平以及肺部黏液的分泌和NF-κB的活化水平。结论薯蓣皂苷能减轻过敏性哮喘小鼠的气道炎症,且其抗炎作用与抑制NF-κB活化有关。     

核因子-κB在肝纤维化中作用的研究进展

细胞核因子-κB（Nuclear Factor kappa B，NF-κB）是调节炎症反应最重要的转录因子，在肝纤维化中参与调控肝细胞的凋亡和增殖，调节各种介质释放、引起的炎症反应、促发枯否（氏）细胞产生炎性因子扩大肝脏炎症过程，最终使肝星状细胞（hepatocelluar stellate cell，HSC）活化，产生大量胶原纤维发生纤维化。本文概述了NF-κB通路的组成和激活过程，NF-κB与其它肝纤维化相关细胞因子的关系以及在肝纤维化形成过程中NF-κB对肝细胞、肝星状细胞有关基因转录的调节进展。     

NF-κB活化在IL-1β诱导的小鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用

目的：研究NF-κB在rhIL-1β刺激引起的体外培养的鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用。方法： NF-κΒ活性检测采用电泳迁移率改变法(EMSA),IL-6 mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PR)检测,培养上清IL-6蛋白含量采用ELISA检测。结果：rhIL-1β刺激肾小球系膜细胞时,在上调IL-6蛋白和基因表达的同时亦激活NF-κB,而且这种上调作用可被NF-κB特异性抑制剂PDTC所阻抑。结论： IL-1β诱导鼠肾小球系膜细胞表达IL-6是通过NF-κB调控,NF-κB可能参与肾小球肾炎的免疫炎症反应。