低剂量棉酚与甾体激素联合应用对生精细胞凋亡和iNOS蛋白表达的影响

目的 研究低剂量棉酚与甾体激素联合应用(棉甾联合用药)对大鼠睾丸生精细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响. 方法 本实验采用大鼠喂服棉酚12.5mg/(kg.d)+激素[去氧孕烯125μg/(kg.d)+炔雌醇25μg/(kg.d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg.d)]联合用药的方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服甲基纤维素溶剂的大鼠相对照,通过原位缺口末端标记(TUNEL)染色,观察生精细胞凋亡的情况;通过免疫组织化学染色和免疫印迹法,观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的变化. 结果 TUNEL染色显示,在正常对照组,阳性着色主要分布在Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ期生精小管的残余体中,偶见于粗线期精母细胞中.棉甾联合用药组和激素组,阳性着色主要分布在粗线期精母细胞中,随用药时间的延长,阳性着色的细胞数量增多(P＜0.01).iNOS免疫组织化学显示,在正常对照组,在残余体、精原细胞和粗线期精母细胞中的表达具有期依赖性.在Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ期生精小管,iNOS主要在残余体中表达;在IX-XII期生精小管,精原细胞和粗线期精母细胞的核中可见少量表达.在棉甾联合用药组,iNOS在残余体中的表达,随用药时间的延长表达量降低(P＜0.05);iNOS在粗线期精母细胞、精原细胞胞核中的表达,随用药时间的延长表达量增高(P＜0.05).iNOS在正常对照组的间质细胞中持续表达,棉甾联合用药组4周降至最低,3时间点表达量无统计学差别. 结论 iNOS蛋白在低剂量棉酚加甾体激素联合应用大鼠睾丸中各部位的表达变化趋势不一致,分别产生不同的功能;生精细胞凋亡数增加,可能与iNOS的表达增多有关.     

过量饮酒对凋亡相关基因bcl-2、bax在生精细胞表达的影响

目的　研究长期过量饮酒对凋亡相关基因bcl - 2、bax在睾丸及生精细胞中表达的影响。方法　利用人类饮用白酒制备大鼠的酒精毒性模型 ,采用免疫组织化学技术 ,检测酒精对Bcl- 2、Bax蛋白在睾丸及生精细胞表达的影响。结果　高剂量的酒精作用于大鼠 2个生精周期 ,每个生精小管中Bcl- 2蛋白表达的阳性细胞数目在高剂量组为 96± 33.74 ,低剂量组为 15 6 .6± 2 8.5 2 ,均显著低于正常对照组 (2 2 2 .6± 5 6 .86 ) (P <0 .0 1)。每个细胞中Bcl- 2蛋白表达强度 (OD值 )在高剂量组 (0 .14 2± 0 .0 35 )、低剂量组 (0 .15 1± 0 .0 2 6 ) ,都明显低于对照组 (0 .196± 0 .0 32 ) (P <0 .0 1) ;Bax蛋白表达的阳性细胞数在高剂量组为 (4 12 .4± 96 .75 ) ,低剂量组为 (337.5± 94 .39) ,均明显高于对照组 (2 14± 82 .5 7) (P <0 .0 1) ,Bax蛋白的表达强度 (OD值 )在高剂量组 (0 .113± 0 .0 36 )和低剂量组 (0 .0 82± 0 .0 17) ,均明显高于对照组 (0 .0 5± 0 .0 2 4 ) (P <0 .0 1)。结论　长期过量饮酒使睾丸及生精细胞中bcl- 2的表达降低 ,bax的表达增强。     

左旋多巴加速帕金森病大鼠黑质细胞凋亡的实验研究

目的:研究左旋多巴(L-dopa)对黑质细胞的神经毒性作用,探讨合理应用L-dopa治疗帕金森病(Parkinson disease,PD)的方法。方法:通过6-OHDA脑立体定向注射术建立大鼠PD模型,采用行为学、细胞凋亡(TUNEL观测法)、原位杂交的方法观察L-dopa小、中、大三种不同剂量[10 mg/ (kg·d)、50 mg/(kg·d)、100 mg/(kg·d)]在1、3、5、7天不同的作用时间对PD大鼠黑质细胞的毒性作用,以及治疗7天后各项指标的变化。结果:PD大鼠旋转行为、细胞凋亡数、Bcl-2 mRNA随着L-do- pa治疗的时间的延长和剂量的增加而增加,P53 mRNA在1天迅速达高峰,此后逐渐下降。除小剂量组外,中、大剂量L-dopa组各项指标均高于对照组(P＜0．05),停止治疗7天后,L-dopa治疗各组指标均得到改善。结论:L-dopa能加速PD大鼠黑质细胞凋亡,这种作用受到Bcl-2 mRNA、P53 mRNA调控,小剂量、间隔使用L-dopa能有效减少其神经毒性作用。     

低剂量棉酚和甾体激素联合用药对精母细胞凋亡和支持细胞吞噬作用的影响

目的 探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药对睾丸精母细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用的影响。 方法 本实验采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式［棉酚125mg/（kg&#8226;d）+去氧孕烯125μg/（kg&#8226;d）+炔雌醇25μg/（kg&#8226;d）+十一酸睾丸酮100mg/（kg&#8226;d）］,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,用药4、6和8周取睾丸组织,应用体视学、原位缺口末端标记(TUNEL)和油红O染色的方法,观察精母细胞和球形精子细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用。 结果 联合用药中,甾体激素成分可明显减少精母细胞和球形精子细胞的数量,精母细胞凋亡增加并同时伴有生精上皮油红O染色的增强。 结论 精母细胞凋亡并被支持细胞吞噬是联合用药抗生育机制之一。     

低剂量棉酚与甾体激素联合用药抗男性生育协同作用

目的 探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药发挥抗男性生育的药物协同作用.方法 采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg·d)],与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,应用形态学观察、半定量检测和体视学睾丸组织结构定量研究的方法,探讨低剂量棉酚和甾体激素抗生育的药物协同作用. 结果 在睾丸重量、附睾重量、睾丸精子产量和睾丸组织结构定量方面,低剂量棉酚和甾体激素无药物协同作用;在降低附睾精子计数和精子活动度方面,联合用药组的效果强于其他3组,低剂量棉酚和甾体激素具有药物协同作用.结论与单用低剂量棉酚和甾体激素比较,两者联合用药可以更快地减少附睾精子的数量和活动度,从而快速达到避孕效果.     

三氧化二砷对实验性自身免疫性葡萄膜炎疗效的初步观察

 目的 初步探讨三氧化二砷(arsenic trioxide ,ATO)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠模型的疗效及机制。方法 用光感受器间维生素A类结合蛋白(interphotoreceptor retinoid-binding protein ,IRBP)R14多肽免疫雌性Lewis大鼠后随机分为ATO高剂量组、ATO中剂量组、ATO低剂量组、环孢素A(CsA)组和生理盐水组5组,每组5只,分别腹腔注射ATO 5mg/(kg•d)、ATO 2mg/(kg•d)、ATO 0.5mg/(kg•d)、CsA 2mg/(kg•d)及生理盐水2ml/(kg•d)。裂隙灯显微镜观察大鼠眼前房炎症情况,第15天时处死大鼠,光学显微镜观察大鼠眼球的病理变化程度,实验前后记录各组大鼠体重变化情况,免疫组织化学方法观察大鼠眼球中T-bet+Th1及FOXP3+调节性T细胞的浸润情况。结果 生理盐水组和ATO 0.5mg/(kg•d)组可见明显的虹膜充血、血管扩张和脓性渗出,ATO 5mg/(kg•d)组和CsA组前房炎症反应程度较轻。ATO 2mg/(kg•d)组眼部炎症表现比较明显。与生理盐水组比较,ATO 5mg/(kg•d)组、ATO 2mg/(kg•d)组和CsA组的临床评分均有所降低,差异均有统计学意义(P =0.000、P =0.004及P =0.008),ATO 5mg/(kg•d)组比ATO 2mg/(kg•d)组的临床评分要低（P =0.046）。组织病理学评分显示各组间差异有统计学意义(F=31．75,P =0．000)。与生理盐水组比较,CsA组、ATO 5mg/(kg•d)组和ATO 2mg/(kg•d)组差异均有统计学意义(P =0.000、P =0.000和P =0.000)。ATO 5 mg/(kg•d)组比ATO 2 mg/(kg•d)组的病理评分低（P =0.000）。与正常大鼠相比,各组大鼠在实验前后体重改变无明显差异（P >0.05）。与生理盐水组比较,ATO 5mg/(kg•d)组和CsA组的T-bet+Th1细胞浸润明显减少。FOXP3+调节性T细胞在各组间并无明显差别。结论 ATO 5mg/(kg•d)腹腔内注射治疗EAU大鼠能明显改善其前房充血、渗出等炎症表现,改善其视网膜病理变化,减少Th1细胞在眼内的渗出来抑制眼内炎症反应,对眼内的FOXP3+调节性T细胞无明显影响,且对大鼠的生长无明显的抑制作用。     

低剂量棉酚甲基睾丸酮和炔雌醇联合用药作为男性避孕药的安全性检测

目的 探讨低剂量棉酚12mg/(kg·d)、甲基睾丸酮20mg/(kg·d)和炔雌醇100μg/(kg·d)联合用药24周,能否影响大鼠生精干细胞的功能.方法 采用生精细胞原位凋亡、生精干细胞移植和生殖能力自主恢复实验.结果 联合用药24周后,在大鼠睾丸组织切片中发现了凋亡信号阳性细胞,凋亡信号阳性细胞主要是精母细胞和精子细胞,没有发现精原细胞出现凋亡阳性信号.当把用药组大鼠的生精干细胞移植进入受体裸鼠的曲细精管内2～3个月后,在受体裸鼠的曲细精管中观察到了来自供体大鼠的长型精子细胞.停止用药6周后,用药组大鼠的生殖能力与对照组相比完全恢复.由恢复生殖能力的用药组大鼠产生的F1代仔鼠在经过一系列的检测后被证明为身体机能和智力水平正常.结论 此联合用药在24周内没有影响到用药大鼠生精干细胞的生存和分化功能.     

肿瘤抑制剂GA对SH-SY5Y细胞凋亡的影响及分子机制研究

为了探讨HSP90特异的功能抑制剂geldanamycin(GA)能否用于神经母细胞瘤的临床治疗 ,通过检测未分化的和全反式维甲酸 (RA)诱导分化的神经母细胞瘤SH SY5Y细胞在不同浓度GA处理后的细胞存活率 ,发现GA呈剂量依赖性诱导SH SY5Y细胞凋亡 ,但是分化细胞对同样剂量的GA不是很敏感 [细胞存活率依次为 (82 0±6 0 ) %比较 (6 5 0± 3 0 ) % ,P <0 0 2 ;(6 7 9± 3 1) %比较 (4 3 4± 3 9) % ,P <0 0 3;(4 3± 0 8) %比较 (0 4±0 1) % ,P <0 0 5 ]。Western印迹分析和免疫荧光实验显示 ,GA能抑制细胞中c Jun和c Fos的表达 ,并且GA剂量越高 ,其抑制越明显 ;同时GA也诱导了p5 3的核聚集。与未分化细胞相比 ,在相同剂量GA处理后分化细胞中c Jun和c Fos的表达均比未分化细胞略高 ;但是分化细胞中p5 3的核聚集却不如前者明显。提示未分化细胞对同样剂量的GA比分化细胞更敏感 ,可能与分化细胞能抵抗GA引起的c Jun、c Fos的降低以及p5 3的核聚集有关。     

大蒜素诱导人肝癌BEL—7402细胞凋亡

目的　探讨大蒜素诱导人肝癌BEL 740 2细胞凋亡作用。　方法　MTT法检测大蒜素对BEL 740 2细胞的生长抑制作用 ,光镜、电镜、流式细胞术观察大蒜素诱导BLE 740 2细胞凋亡作用。　结果　 10、2 0、40ml L大蒜素皆能抑制BEL 740 2细胞生长 ,其抑制作用与剂量、作用时间呈正相关。 6 0mg L大蒜素作用 3h ,BEL 740 2细胞出现典型凋亡形态学变化 :细胞体积缩小 ,微绒毛消失 ,染色质浓聚、边集、裂解 ,细胞表面凸起多个小泡或小球状小体 ,凋亡细胞拒染台盼蓝等。台盼蓝染色计数对照组凋亡率 2 0 2± 0 37% ,诱导组凋亡率 78 48± 3 15 % ;流式细胞分析对照组凋亡率 1 78± 0 48% ,诱导组凋亡率 74 0 7± 3 94% ,对照组诱导前时G0 /G1 、S、G2 /M期细胞分别为47 6 6± 2 72 % ,2 2 0 6± 2 0 4% ,30 2 5± 3 78% ,皆低于 74 0 7± 3 94%。　结论　大蒜素诱导人肝癌BEL 740 2细胞凋亡 ,其诱导凋亡效果明显 ,并推测大蒜素诱导BEL 740 2细胞可能自细胞周期不同分期多点启动凋亡     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

目的研究激活诱导细胞死亡 (AICD)现象在乙型肝炎慢性化和重型化机制中的意义。方法分离 2 0例慢性 /慢性重型乙型肝炎病人与 10例健康献血员外周血单个核细胞 (PBMC) ,在 PHA的刺激下培养 72 h后收集细胞 ,经流式细胞仪检测凋亡。结果 PBMC凋亡率乙型肝炎组明显高于正常对照组 [(2 5 .48± 14.0 7) % vs(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1];慢性乙型肝炎组 [(30 .5 7± 13.43) % ]明显高于正常对照组 [(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1]和慢性重型乙型肝炎组 [(13.5 9± 6 .44 ) % ,P<0 .0 1];PBMC凋亡率乙型肝炎 HBe Ag(+ )组明显高于正常对照组 [(2 9.5 0± 12 .5 4) % vs(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1]。结论 AICD可能是形成 HBV慢性感染免疫耐受的一个重要机制。     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

膝关节骨性关节炎的关节镜治疗体会

目的我科自2001～2005年4月对59例67膝的骨性关节炎（0A），进行关节镜检查及镜下清理术。方法镜检：膝关节骨性关节炎伴不同程度滑膜炎，滑膜皱壁粘连纤维片，关节软骨不同程度破坏。镜下清除增生滑膜，松解粘连，去除剥脱软骨、修复关节面。结果随访2月～4年，平均1.5年，术后综合评估2月～1年，优良率94％；1～2年，优良率79.2％；2年以上优良率54.8％。结论关节镜对膝关节骨性关节炎诊断能提供了比较全面的资料，并对骨性关节炎早期有良好疗效，具有创伤小、恢复快、并发症少和重复治疗等优点。     

Assessment of the efficacy of treatment of hemangiomas

Assessment of the aftereffects of cryoexposure and ultrahigh-frequency cryoexposure on hemangioma tissue of various types, cavernous and squamous, showed a higher cryogenic effect in hemangiomatous tissue preexposed to ultrahigh-frequency waves. A quantitative criterion is proposed for assessing the efficacy of the studied methods of exposure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 119, N ^o 6, pp. 669–672, June, 1995     

石斛属民族药用植物的分类及生药学研究

中药石斛早在《神农本草经》中就被列为上品,其应用历史悠久,具有养阴生津、补肾益气、润喉护嗓、活血明目、抗癌防老等功效。本文对国内外石斛属民族药用植物的分类及生药学研究进行了综述。     

Effect of route of antitoxin administration on efficacy of treatment of experimental tetanus

The efficacy of treatment with Diaform-3 antitoxin, given by either intracisternal or intralumbar injection in a dose of 400 i.u./kg, was compared in experiments on 100 rabbits with ascending, hematogenous, and cerebral tetanus caused by injection of 1 c.l.d. of tetanus toxin. Intracisternal injection of the antitoxin was found to be three times more effective than intralumbar (the proportion of animals cured was 31.4 and 10.2% respectively). The latter was effective only in animals with ascending tetanus, evidently because the portal of entry of the toxin into the CNS was along the peripheral nerves of the hind limbs.Central Research Laboratory, L'vov Medical Institute. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR A. M. Chernukh.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 86, No. 8, pp. 212–213, August, 1978.     

Effect of ultralow doses of thyroliberin on microviscosity of lipid components of biological membranes

Effects of the regulatory peptide thyroliberin on microviscosity of lipid components of endoplasmic reticulum biological membranes in mouse hepatocytes were studied by electron paramagnetic resonance. Thyroliberin in a concentration of 10⁻³–10⁻¹⁸ M decreased microviscosity of surface layers of membrane lipids. This decrease was the most pronounced (30%) under effects of 10⁻¹⁰ and 10⁻¹⁶ M thyroliberin. Physiological effects of thyroliberin corresponded to its influence on the membrane structure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 129, No. 1, pp. 38–40, January, 2000     

Pathways of the realization of immunomodulating effects of neurotransmitters

Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 115, N ^o 4, pp. 401–404, April, 1993