中药制剂中乌头碱含量的测定及其临床应用

目的：建立乌头碱中毒的临床和法医学检验的检测方法。方法：结合乌头碱中毒的临床症状，采用高效液相色谱法检测中毒者所服药品中乌头碱含量，计算出病人服用的乌头碱量是否达到中毒量和致死量，从而为临床诊断乌头碱中毒提供检测方法和量化依据。结果：测定的线性范围为1．8－7．3μg，回收率和RSD为97．87％，1．85％。结论：本方法简便、快速、准确，可为乌头碱药酒中毒的临床诊断和法医鉴定提供检测依据。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中乌头碱的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测大鼠血浆中乌头碱的浓度。方法:以维拉帕米作内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用HyPURITYCyano(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为乙腈:10mmol/L甲酸铵=(70∶30,V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,乌头碱和维拉帕米的离子选择通道分别为:m/z646.4→586.4和455.2→164.9。结果:乌头碱的线性范围为9.3～2390pg/mL,最低检测浓度为9.3pg/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本方法灵敏度高,适用于乌头碱在鼠内的药物代谢动力学研究。     

细胞膜吸附/LC-MS分析附子中对兔心肌具毒效作用的成分

目的 研究附子中对心肌具有毒效作用的成分,并进行确证.方法 采用心肌细胞膜吸附附子提取物中的成分,解析后,用LC-MS测定.结果 MRM扫描中有646.0/586.0、616.3/338.5、632.0/105.0离子检测峰存在.结论 附子中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱均对心肌具有毒效作用.     

HPLC测定草乌与贝母配伍后乌头碱类成分含量的变化

目的探讨生草乌与贝母不同配比在煎煮过程及体外模拟消化环境中乌头碱类成分的变化规律。方法采用HPLC法,测定生草乌与浙贝母不同配比水煎液及其经人工胃、肠液解离后的溶液中乌头碱及其水解产物焦乌头碱、苯甲酰乌头碱和苯甲酸的含量。结果除草乌贝母(2∶1)合煎液外,草乌贝母不同配比合煎或单煎后混合溶液中乌头碱的含量均较草乌单煎液明显提高。经人工胃肠液处理后各配伍液中乌头碱类成分的含量明显降低,但水解产物焦乌头碱、苯甲酰乌头碱与乌头碱的构成比较处理前明显提高。结论草乌与贝母一定比例下的配伍,毒性成分明显增大,证实了"草乌反贝母"的科学性。     

一测多评法测定乌头类药材中生物碱

目的 建立一测多评法同时定量测定乌头类药材中6种乌头类生物碱.方法 采用高效液相色谱法同时测定乌头类药材中6种生物碱,以乌头碱为内参物,测定其与次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱的相对校正因子,利用乌头碱和相对校正因子对其他5种生物碱成分进行测定,同时利用外标法测定这6种成分,比较两种测定方法的差异,验证一测多评法的可行性和准确性.结果 在一定线性范围内,乌头碱与次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱的相对校正因子分别为0.780、1.008、0.836、0.907、0.987,在不同实验条件下相对校正因子重现性良好,不同乌头类药材中6种生物碱成分含量计算值与实测值间无显著性差异.结论 一测多评法在乌头类药材及制剂质量控制中应用是可行的、准确的.     

一测多评法同时测定制川乌中9种生物碱的含量

目的:建立一测多评法同时测定制川乌中9种乌头类生物碱含量.方法:采用高效液相色谱四级杆飞行时间串联质谱(HPLC-QTOF-MS)法.色谱柱为Agilent ZORBAX Extend-C18 RRHT(2.1 mm×50 mm,1.8μm);甲醇为流动相A,以水(含0.1%甲酸和2.5 mmol·L-1醋酸铵溶液)为流动相B,梯度洗脱;流速为0.21 mL·min-1;柱温为30℃.以乌头碱为内参物,测定次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱对于其的相对校正因子,并对相对校正因子进行重现性考察.利用相对校正因子计算其它8种生物碱成分的含量,同时利用外标法测定这9种成分,比较两种测定方法的差异,验证一测多评法的准确性和可行性.结果:建立QAMS法测定乌头类中药材9种生物碱的含量,其测定值与计算值无显著差异.结论:经方法学验证,本方法可用于制川乌药材中9种生物碱的含量测定.     

一测多评法测定小活络丸中9种乌头类生物碱的含量

摘 要 目的：建立一测多评法同时测定小活络丸中9种乌头类生物碱含量。方法: 采用高效液相色谱四级杆飞行时间串联质谱（HPLC QTOF MS）法,采用Agilent ZORBAX Extend C18 RRHT（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）色谱柱;流速为0.21 ml·min-1;柱温为30 ℃;以甲醇为流动相A,以水（含0.1%甲酸和2.5 mmol·L^-1醋酸铵溶液）为流动相B,梯度洗脱。以乌头碱为内参物,测定次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱对于其的相对校正因子,并对相对校正因子进行重现性考察。利用相对校正因子计算其他8种生物碱成分的含量,同时利用外标法测定这9种成分,比较两种测定方法的差异,验证一测多评法的准确性和可行性。结果: 在线性范围内,次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱对乌头碱的相对校正因于分别为1.736、1.979、1.0471、0.9242、1.2901、1.3078、1.2859、1.0948,建立了QAMS法测定小活络丸中9种生物碱的含量,其测定值与计算值无显著差异。结论: 本文方法可用于小活络丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱的含量测定。     

在体皮肤微透析的建立及对乌头碱经皮给药药代动力学研究

目的:建立大鼠在体皮肤微透析技术,并用于乌头碱经皮给药药代动力学研究。方法:采用HPLC-MS/MS联用技术建立大鼠血浆和微透析样品中乌头碱的分析方法。体外回收率的测定采用浓差法(增量法、减量法),体内回收率的测定采用减量法,考察流速、浓度对回收率的影响。5只SD大鼠在麻醉状态下,作皮肤微透析预处理后,将乌头碱凝胶涂于探针所在皮肤表面,进行皮肤微透析和颈动脉采血,应用HPLC-MS/MS测定透析液样品及血浆中乌头碱浓度,并绘制血药浓度-时间曲线,并计算药动学参数。结果:乌头碱在检测要求范围内线性关系良好,色谱的专属性、回收率、精密度等测定结果均符合生物样品测定要求。增量法及减量法测定的回收率一致;回收率随灌流速度的增大而减小,探针的回收率与溶媒中乌头碱的浓度无关。体内皮下探针对乌头碱的回收率为(34.48±3.05)%,乌头碱在皮下探针中6 h回收率的变化基本上保持稳定。乌头碱经皮给药后,在皮肤中最大药物浓度为(2723.8±848.8)mg.L-1,AUC(0～t)为(18212.4±4749.1)mg.h.L-1,体内血药浓度比较稳定。结论:本研究提示体内研究的反透析法可作为微透析研究中乌头碱回收率的测定...     

不同炮制方法对川乌双酯型生物碱含量的影响

目的 研究炮制方法对川乌双酯型生物碱含量的影响。方法将生川乌分别通过药典法、黑豆法和米醋法进行炮制,以RP—HPLC结合梯度洗脱的色谱方法为检测手段,比较分析不同川乌炮制方法对双酯型生物碱（主要为乌头碱、次乌头碱）含量的影响。结果3种炮制方法均可显著降低生川乌中乌头碱、次乌头碱的含量。所建立的色谱方法可定量分析炮制品中双酯型生物碱。结论不同炮制方法对生川乌均能起到减毒作用。     

佳蓉片中6种乌头类生物碱的定量研究

目的分析佳蓉片中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱6种乌头类生物碱的含量。方法采用HPLC法。色谱条件:Kromasil C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-四氢呋喃(25∶15)以及0.1 mol·L^-1醋酸铵溶液(每1000 mL加冰醋酸0.5 mL),梯度洗脱;流速为0.8 mL·min^-1;柱温为25℃;检测波长为235 nm。结果苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱分别在4.32~432.40,1.29~128.83,1.08~108.46,1.77~177.30,0.78~78.40和1.19~119.04μg·mL^-1范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率分别为96.46%,98.26%,98.03%,98.23%,98.86%和98.70%;RSD值分别为1.50%,1.20%,1.27%,1.06%,1.50%和1.19%;10批制剂中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量范围分别为100.32~119.18,9.35~16.02,7.99~10.87,1.54~1.85,0.87~0.99和2.21~3.27μg·g^-1。结论该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可作为佳蓉片中乌头类生物碱成分的定量方法。     

炎琥宁中主要有关物质的结构鉴定

为了对炎琥宁中3个主要有关物质的结构进行鉴定,采用制备高效液相法分离杂质,并应用LC-ESI/TOFMS、LC-ESI/MSn、NMR、UV、IR等对主要有关物质进行结构鉴定。结果发现其中一个杂质是炎琥宁的水解氧化产物,另外两个杂质是炎琥宁水解掉不同琥珀酸形成的单酯。由此表明炎琥宁容易被水解和氧化,应在阴凉干燥处保存。     

27例急性乌头碱中毒的救治分析

目的:探讨急性乌头碱中毒的救治方法,以提高抢救的成功率。方法:回顾性分析我院近年来救治的乌头碱中毒患者的临床资料。结果:27例乌头碱中毒患者治愈26例,死亡1例。结论:及时明确的诊断,根据疾病严重程度,早期进行以血液灌注治疗为主的综合治疗,可提高抢救成功率。     

栀子总苷对幽门结扎大鼠胃溃疡保护作用的实验研究

目的：研究栀子总苷（TGZ）对幽门结扎模型大鼠胃溃疡的影响,初步探讨其抗溃疡作用的机制。方法：采用大鼠幽门结扎的方法建立大鼠胃溃疡模型,收集胃液测定胃液游离酸和总酸、胃蛋白酶活性以及观察胃黏膜损伤指数。结果：TGZ灌胃70或140mg/kg5d能显著抑制幽门结扎大鼠胃溃疡的发生,抑制胃液量,降低胃液中游离酸度与总酸度,有效降低胃液中胃蛋白酶活性。结论：栀子总苷对幽门结扎所致的大鼠胃溃疡具有明显的保护作用,与其抑制胃酸分泌和胃蛋白酶的活性有关。     

甲基苯丙胺中毒死亡大白兔体内分布研究

目的:建立甲基苯丙胺中毒致死的动物模型,探讨其在致死大白兔体内的分布规律。方法:用6只日本♂大白兔经胃管按照150mg·kg-1(3LD50)给予盐酸甲基苯丙胺建立动物模型,大白兔死后迅速解剖并提取心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、睾丸、胃、心血、周围血、胆汁、尿液和玻璃体液,用正己烷∶乙醇(20∶1)作为提取溶剂,利用UPLC-MS/MS法检测其中甲基苯丙胺含量,使用SPSS15.0统计软件进行方差分析,采用均数两两比较的SNK法。检验水准为α=0.05。结果:实验大白兔胃内甲基苯丙胺含量最高,其次是脾、肺、肾、睾丸和尿液,而心血、周围血和玻璃体液中含量较低。结论:本实验的结果与相关案例报道基本吻合,这提示胃、脾、肾和尿液是甲基苯丙胺中毒案件鉴定的理想检材,中毒死后的甲基苯丙胺分布规律可为相关案件的鉴定提供一定的依据。     

乌头类药材及中毒案例未知品中酯型生物碱的检出及测定

目的：建立乌头类主要毒性尬发新乌头碱，乌头碱，次乌头碱的检出方法和含量测定方法。方法：以TLC法和HPLC法双重鉴定各药材及未知品中酯型生物的存在并测定其含量。结果：TLC法能有效检出新乌头碱，乌头碱和次乌头碱，HPLC法可进一步确证各酯型生物碱的存在并测定TLC1/500点样量的乌头碱含量。结论：该方法操作简单，快速，准确，可作为乌头类药材及中毒案例未知品的鉴定与含量测定方法。     

胃液糖类抗原19-9/72-4联合检测对胃癌的诊断价值

目的 探讨胃液糖类抗原72-4(CA72-4)、糖类抗原19-9(CA19-9)联合检测诊断胃癌的可行性.方法 应用自制胃液采集器通过胃镜分别采集研究组胃癌30例、对照组萎缩性胃炎32例、胃溃疡30例 和慢性浅表性胃炎30例患者的胃液,以ES-300全自动酶免分析仪批量同步检测CA72-4、CA19-9的表达.结果 研究组CA72-4、CA19-9检测水平分别为(83.54±143.70)U/ml和(47.05±29.64)U/ml,阳性检出率分别为76.66%和43.33%,均明显高于对照组(P<0.01);两者联合检查阳性率可达80.00%,32例萎缩性胃炎有2例CA72-4升高,其中1例患者9个月后确诊为胃癌.结论 胃液CA72-4、CA19-9联合检测可作为胃癌诊断的参考依据,也是晚期胃癌的重要指标.     

银杏叶提取物的胃粘膜保护作用(英文)

目的:研究银杏叶提取物的胃粘膜保护作用.方法:采用大鼠束缚-冷冻应激(RCS)模型和小鼠无水乙醇损伤模型观察GbE对胃粘膜损伤指数的影响;采用幽门结扎法收集胃液,观察GbE对胃液分泌量,胃液酸度和胃蛋白酶活性的影响;采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定胃粘膜及血清中丙二醛(MDA)含量.结果:GbE(25,50,100 mg/kg,bid×5 d,ig)剂量依赖性地抑制RCS和无水乙醇引起的胃粘膜损伤.用药组应激后的胃粘膜损伤指数分别为对照组的58％,43％和31％;用药组乙醇诱发的胃粘膜损伤指数降至对照组的62％,36％和26％;GbE尚能增强西米替丁对胃粘膜的保护作用,但对大鼠胃液分泌量、胃液酸度及胃蛋白酶活性GbE并无明显影响.小鼠经无水乙醇ig后1 h,胃粘膜和血清中的MDA含量显著升高(P<0.01),而GbE(25,50,100 mg/kg,ig)预处理则可以明显抑制MDA的升高.结论:GbE具有胃粘膜保护作用,并且与西米替丁在治疗急性胃粘膜损伤方面具有协同作用.     

超高效液相色谱法测定风湿骨痛丸中5种成分的含量

目的： 采用超高效液相色谱法（UPLC）测定风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱5种成分的含量。方法： （1）乌头碱、次乌头碱、新乌头碱检测方法：色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,ACQUITY UPLC HSS T3预柱（5 mm×2.1 mm,1.8 μm）,流动相为甲醇-0.3 mol·L^-1三乙胺（65∶35,V/V）,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长235 nm,进样量10 μL;（2）麻黄碱、伪麻黄碱检测方法：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）,采用梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长210 nm,进样量10 μL。结果： 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱分离度良好;线性范围依次为4.00~80.04 μg·mL^-1（r=0.999 4）,4.00~80.02 μg·mL^-1（r=0.999 3）,4.03~80.57 μg·mL^-1（r=0.999 6）,6.40~640.25 μg·mL^-1（r=0.999 6）,6.41~641.34 μg·mL^-1（r=0.999 7）;检出限依次为2.03,1.98,1.93,3.67,3.73 μg·mL^-1;定量限依次为3.98,3.87,4.03,6.37,6.41 μg·mL^-1;平均回收率依次为99.06%,98.87%,99.95%,99.92%,100.54%,RSD依次为0.95%,1.55%,1.58%,1.18%,0.91%;风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱的平均含量依次为0.001%,0.004%,0.004%,0.041%,0.027%。结论： 本研究UPLC方法准确,重复性良好,可测定风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱的含量,为风湿骨痛丸的质量控制提供参考。     

Lidocaine intoxication: Two fatal cases

We present two fatal cases, a 41-year-old male (case 1) and his 8-year-old daughter (case 2), resulting from acute lidocaine poisoning. Lidocaine was quantified by gas chromatography (GC) analysis using nitrogen-phosphorus detection. The lidocaine concentrations of cases 1 and 2 were: liver, 27.7 microg/g and 24.9 microg/g; spleen, 70.1 microg/g and 29.9 microg/g; and gastric contents, 23.6 microg/g and 42.8 microg/g, respectively.     

Incidence of herb-induced aconitine poisoning in Hong Kong: impact of publicity measures to promote awareness among the herbalists and the public.

BACKGROUND: In Hong Kong 'chuanwu' (the main root of Aconitum carmichaeli) and 'caowu' (the root of Aconitum kusnezoffii) are used by herbalists to treat patients with various musculoskeletal disorders. These aconite roots contain aconitine, mesaconitine and hypaconitine, which are neurotoxins and cardiotoxins. During 1989 to 1991, 31 patients were treated in public hospitals because of poisoning by aconite roots and there were two deaths from ventricular arrhythmias. In late 1991, healthcare officials together with cardiologists held a press conference to warn the public, healthcare professionals and herbalists of the potential toxicity of aconite roots. The risk of ventricular arrhythmias and the need for urgent medical attention were highlighted. An information leaflet was also sent to hospital doctors. Since 1992, the topic was covered periodically in the local newspapers, medical journals and continuing medical education programmes. OBJECTIVE: The objective of this study was to assess the impact of these publicity measures on the incidence of herb-induced aconitine poisoning in the New Territories East, based on the number of admissions to the Prince of Wales Hospital. METHODS: During 1989 to 1993 and 1996 to 1998, all patients admitted to our medical wards because of herb-induced aconitine poisoning were identified by on-going surveillance of medical patients, searching our computerised medical record system and reviewing reports received by the 24-hour Drug and Poisons Information Bureau. RESULTS: The number of hospitalisations due to aconitine poisoning markedly decreased from four to six per year in 1989 to 1991 to one to two per year in 1992 to 1993. The annual incidence of aconitine poisoning showed a marked decrease from 0.49 to 0.69 [overall 0.60, 95% confidence intervals (CI) 0.34 to 0.99] to 0.10 to 0.22 (overall 0.16, 95% CI 0.03 to 0.46) per 100,000 population (p = 0.024). During 1996 to 1998, herb-induced aconitine poisoning remained uncommon, with zero to two hospital admissions per year or an annual incidence of zero to 0.33 (overall 0.17, 95% CI 0.05 to 0.43) per 100,000 population (p = 0.016). DISCUSSION: It is possible that the herbalists could have used smaller doses of 'chuanwu' and 'caowu' than before. Patients could be more compliant with the instructions on how to prepare the herbal decoction at home. However, our experience suggested that publicity measures to promote awareness, among the herbalists and the public, may reduce the incidence of poisoning due to toxic herbs such as aconite roots.