风疹病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及应用

为了建立产生风疹病毒（ＲＶ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株及检测ＲＶ感染的捕获ＥＬＩＳＡ。用ＲＶ抗原免疫后的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合建立杂交瘤细胞株。用相应单抗建立检测血清中ＲＶ行异性ⅠｇＭ的捕获ＥＬＩＳＡ，并以该法与间接ＥＬＩＳＡ进行了比较实验。获得的杂交瘤细胞５Ｄ５、５Ｇ５、２Ｆ７相应单抗均属ⅠｇＧ１，与纯化ＲＶ抗原有强阳性反应。两法比较，阳性血清Ｘ＾２＝０．２５，Ｐ〈０．     

抗组织因子途径抑制物单克隆抗体的制备及鉴定

目的：制备抗组织因子途径抑制物（ＴＦＰＩ）单克隆抗体。方法：用微量ＴＦＰＩ脾内包埋免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，建立了２株稳定分泌抗ＴＦＰＩ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，分别命名为４Ｆ４和４Ｆ８。对其中的一株４Ｆ８进行研究，其杂交瘤细胞染色体众数为９３，分泌的抗体为ＩｇＧ１。以简易正辛酸法从腹水纯化ＭｃＡｂ４Ｆ８，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测其纯度，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析显示其可特异性地识别分子量为３４８００的抗原分子。对纯化的抗体以改良过碘酸钠氧化法用辣根过氧化物酶标记后，采用双夹心ＥＬＩＳＡ法检测正常人血浆ＴＦＰＩ含量。结果：稀释的凝血酶原时间（ＰＴ）测定，ＭｃＡｂ４Ｆ８可缩短其凝固时间，且呈量效关系，ＭｃＡｂ４Ｆ８还可使乏因子Ⅸ血浆稀释的ＰＴ明显缩短。正常人血浆ＴＦＰＩ含量为１０３．２±１１．５μｇ／Ｌ，结果与美国Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ公司的ＴＦＰＩＥＬＩＳＡ试剂盒所测结果（９８．４±１０．３μｇ／Ｌ）相近（ｒ＝０．９２）。结论：ＭｃＡｂ４Ｆ８有潜在的药用价值，并可望为我国ＴＦＰＩ的研究提供精确的检测手段。     

抗丙肝病毒核心抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定

用基因工程重组技术获得的丙肝病毒（ＨＣＶ）核心蛋白抗原与鼠血清白蛋白交联后免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,用杂交瘤技术成功地建立了四株稳定分泌抗核心抗原单克抗体的杂交瘤细胞。试验结果表明,该４株ＭｃＡｂ与免疫抗原及核心区Ｃ３３肽,ＣＰ９、ＣＰ１０抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶ ＮＳ３,ＮＳ４、ＮＳ５无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。４株ＭｃＡｂ中３株为ＩｇＧ２ａ亚     

山东省11株肾综合征出血热病毒抗原分析及毒力测定

选择肾综合征出血热疫区抗原阳性鼠肺组织 ,现症病人外周静脉血及尿液 ,接种Ｖｅｒｏ-Ｅ6细胞 ,分离出 1 1株出血热病毒。应用ＭｃＡｂ对 1 1株病毒进行抗原分析并测定毒力 ,报告如下。材料与方法1 肾综合征出血热毒株 :标准毒株 ( 76- 1 1 8、ｃｈｅｎ、Ｒ2 2 ) ,地方株 (Ｒ74、Ｒ84、Ｒ87、Ｒ2 83 、Ｒ2 5 、Ｒ3 6、ＬＵ84、Ｂ78、88-ＨＶ、Ｒ160 、Ｒ9)。2 肾综合征出血热ＭｃＡｂ、组特异ＭｃＡｂ :ＨＦＲＳＭｃＡｂ、组特ＭｃＡｂ、Ｌ13 Ｆ3 、Ａ5 、2 5 -9- 1 1、Ｅ5 ;ＨＴＮＭｃＡｂ :ＭｃＡｂＡ、1 2 42、2 2 44、Ｃ3 2 1;ＳＥＯ…     

CD34单克隆抗体HI273的制备和鉴定

中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所的研究人员以ＫＧ１ａ人髓系细胞为抗原，用杂交瘤技术成功地制备出一株ＣＤ３４杂交瘤ＨＩ２７３，经过１年多时间的冻存、复苏和传代，一直保持了稳定分泌ＣＤ３４单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的能力。通过应用免疫荧光、免疫...     

逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测汉坦病毒（HTV）

目的探讨ＲＴ－ＲＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检测汉坦病毒ＲＮＡ及抗原的敏感性。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检侧汉坦病毒Ａ９株细胞培养物中病毒ＲＮＡ和抗原。结果ＲＴ－ＰＣＲ敏感性最高，种毒后１天即可检出病毒ＲＮＡ；其次为ＥＬＩＳＡ，种毒后２天可检出冻融细胞上清内的病毒抗原；ＩＦＡ检出感染细胞内病毒抗原的最短时间为７２小时。ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，该毒株与汉坦病毒７６－１１８株Ｍ片断的同源性为８１．８％，从而验证了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性。结论ＲＴ－ＰＣＲ的敏感性高于双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ。     

逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测汉坦病毒（HTV）

目的探讨ＲＴ－ＲＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检测汉坦病毒ＲＮＡ及抗原的敏感性。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检侧汉坦病毒Ａ９株细胞培养物中病毒ＲＮＡ和抗原。结果ＲＴ－ＰＣＲ敏感性最高，种毒后１天即可检出病毒ＲＮＡ；其次为ＥＬＩＳＡ，种毒后２天可检出冻融细胞上清内的病毒抗原；ＩＦＡ检出感染细胞内病毒抗原的最短时间为７２小时。ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，该毒株与汉坦病毒７６－１１８株Ｍ片断的同源性为８１．８％，从而验证了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性。结论ＲＴ－ＰＣＲ的敏感性高于双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ。     

不同培养时间的CD_3AK与LAK细胞对8株瘤细胞系的细胞毒活性分析比较

不同培养时间的ＣＤ_３ＡＫ与ＬＡＫ细胞对８株瘤细胞系的细胞毒活性分析比较刘军权，陈复兴，韩惠敏（江苏省徐州市９７医院，２２１００４）经抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＣＬＬＣＤ３ＭｃＡｂＡｃｔｉｖａｔｅｄＫｉｌｌｅｒｃｅｌｌ）即ＣＤ３ＡＫ细胞已经...     

表达CD7抗原的急性髓细胞白血病

表达ＣＤ７抗原的急性髓细胞白血病刘征辉张学光夏学鸣郑列琳陆定伟薛永权阮长耿报告６例表达ＣＤ７抗原急性髓细胞白血病（ＣＤ７＋ＡＭＬ）的观察结果。材料和方法１病例６９例ＡＭＬ均系１９９３年６月至１９９４年８月来我所诊治的成人初治患者。按ＦＡＢ标准分型：Ｍ...     

脐血CD3AK细胞体外抗肿瘤活性的实验研究

目的　探讨抗ＣＤ３ 单克隆抗体（ＡｎｔｉＣＤ３ＭｃＡｂ）＋ 重组人白细胞介素２（ｒＩＬ２） 激活的脐血杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ） 细胞对白血病细胞株Ｋ５６２ 、ＨＬ６０ 的杀伤作用。方法　采用间接玫瑰花结法测定脐血单个核细胞表面分化抗原,ＥＬＩＳＡ双抗夹心法测定肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、ＩＬ６ 和ＩＬ８ ,用β液闪仪测定３Ｈ胸腺嘧啶核苷标记的靶细胞杀伤活性。结果　①经ＡｎｔｉＣＤ３ＭｃＡｂ＋ ｒＩＬ２ 激活的脐血单个核细胞免疫表型发生明显变化;②细胞因子水平较未激活组明显增高;③脐血ＣＤ３ＡＫ 细胞对Ｋ５６２、ＨＬ６０细胞均有杀伤作用,最佳杀伤条件：脐血单个核细胞浓度为１ ×１０６／ｍｌ,ＡｎｔｉＣＤ３ＭｃＡｂ １ μｇ／ｍｌ,ｒＩＬ２ １０００ Ｕ／ｍｌ,作用时间７２ 小时,效靶比１００∶１。结论　脐血单个核细胞能被ＡｎｔｉＣＤ３ ＭｃＡｂ＋ ｒＩＬ２ 激活为杀伤细胞,激活后有较强的细胞毒作用,且对白血病细胞株有明显的杀伤作用,该研究为应用活化脐血进行肿瘤的过继免疫治疗提供理论依据。     

通过64KDAb的检测从Ⅱ型糖尿病中识别成人迟发性自身免疫性糖尿病

目的探讨６４ＫＤ抗体（６４ＫＤＡｂ）对成人迟发性自身免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）早期诊断的临床意义。方法采用ＥＬＩＳＡ法测定了９０例３０岁以后起病的开始无酮症、非胰岛素依赖≥６个月的糖尿病（ＤＭ）患者的血清６４ＫＤＡｂ和胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）。结果需要胰岛素治疗的ＤＭ组（ＩＴＤＭ组）３６．７％６４ＫＤＡｂ（＋），１６．７％ＩＣＡ（＋），明显高于口服降糖药治疗有效组（ＯＨＡ组）的６．７％（Ｐ＜０．００５）和０％（Ｐ＜０．０５）；胰岛素分泌不足组（ＩＤ组）和胰岛素分泌保存组（ＮＩＤ组）的６４ＫＤＡｂ阳性率分别是５３．３％和２０％（Ｐ＜０．０１），ＩＣＡ的阳性率分别是２６．７％和６．７％（Ｐ＜０．０５）；６４ＫＤＡｂ（＋）者体重指教（ＢＭＩ）低（平均２２．６ｋｇ／ｍ２），发病至需要胰岛素治疗的时间短（平均５．６年），ＩＣＡ阳性率高（３３．３％），血清Ｃ肽（ＣＰ）水平低，具有Ⅰ型ＤＭ的特征。结论通过６４ＫＤＡｂ的检测可以在一部分表现为Ⅱ型ＤＭ的成人患者中发现ＬＡＤＡ。     

CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤活性研究

肿瘤的生物治疗（Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ）在当今被认为是除手术、放疗、化疗以外的第四种有效的肿瘤治疗手段。继八十年代后期的ＬＡＫ细胞和ＴＩＬ细胞后，抗ＣＤ３单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂＡｃｔｉｖａｔｅｄＫｉｌｅｒＣｅｌｓ，...     

抗HCMV不同多肽的6株McAb的研究

目有：为了制备人巨细胞病毒（HCMV）单特异性可溶性多肽的单克隆抗体。方法：采用细胞杂交技术建立了分泌单克隆抗体（McAb）的13株杂交瘤细胞,本文选取6株杂交癌细胞作了进一步研究。结果：6株杂交瘤细胞分泌的McAb均为IgGl,重链、轻链分子量分别为50KD、25KD。间接免疫荧光试验表明：McAb8B8相应的多肽为即刻早期抗原;而McAb7B4、7D7、7E7、7E11、8D6的相应病毒多肽为晚期抗原。免疫印迹试验表明：McAb7B4、7D7、7E7、7E11、8B8、8D6相应的病毒多肽分子量分别为46、150、38、51、72、65KDO结论：6株McAb可用作HCMV感染的诊断。     

关于医学名词英文缩写的启事

ＡＣＴＨ促肾上腺皮质激素Ａ／Ｇ白蛋白／球蛋白比值ＡＬＴ丙氨酸转氨酶ＡＳＴ天冬氨酸转氨酶Ｃｃｒ肌酐清除率ＣＯＰＤ慢性阻塞性肺疾病ＣＴ计算机Ｘ线体层扫描ＤＩＣ弥散性血管内凝血ＤＮＡ脱氧核糖核酸ＨＢｃＡｂ乙型肝炎核心抗体ＨＢｅＡｂ乙型肝炎ｅ抗体ＨＢｅＡｇ乙型肝炎ｅ抗原ＨＢｓＡｂ乙型肝炎表面抗体ＨＢｓＡｇ乙型肝炎表面抗原ＨＤＬＣ高密度脂蛋白胆固醇Ｉｇ免疫球蛋白ＬＤＬＣ低密度脂蛋白胆固醇ＭｃＡｂ单克隆抗体ＯＴ旧结核菌素试验ＰＣＲ聚合酶链反应ＰＥＴ正电子发射断层扫描ＲＦ类风湿因子ＳＬＥ系统性红斑狼疮ＳＰＥＣ…     

关于医学名词英文缩写的启事

ＡＣＴＨ促肾上腺皮质激素Ａ／Ｇ白蛋白／球蛋白比值ＡＬＴ丙氨酸转氨酶ＡＳＴ天冬氨酸转氨酶Ｃｃｒ肌酐清除率ＣＯＰＤ慢性阻塞性肺疾病ＣＴ计算机Ｘ线体层扫描ＤＩＣ弥散性血管内凝血ＤＮＡ脱氧核糖核酸ＨＢｃＡｂ乙型肝炎核心抗体ＨＢｅＡｂ乙型肝炎ｅ抗体ＨＢｅＡｇ乙型肝炎ｅ抗原ＨＢｓＡｂ乙型肝炎表面抗体ＨＢｓＡｇ乙型肝炎表面抗原ＨＤＬＣ高密度脂蛋白胆固醇Ｉｇ免疫球蛋白ＬＤＬＣ低密度脂蛋白胆固醇ＭｃＡｂ单克隆抗体ＯＴ旧结核菌素试验ＰＣＲ聚合酶链反应ＰＥＴ正电子发射断层扫描ＲＦ类风湿因子ＳＬＥ系统性红斑狼疮ＳＰＥＣ…     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA－DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ一ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ一ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ一ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康各血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此法特异性强、重复性好（阳性血清ＣＶ为４．７％，阴性血清ＣＶ为０％），抗体涌度范围１：５～１：４０。     

B7/CD28分子激发T细胞抗多发性骨髓瘤细胞的作用

目的探讨Ｂ７／ＣＤ２８分子激发Ｔ淋巴细胞抗多发性骨髓瘤（ＭＭ）作用和提高ＭＭ细胞抗原性的机制。方法采用人Ｂ７１基因对人ＭＭ细胞的转导、ＣＤ２８激发型单克隆抗体（单抗）的激发、同种异体混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）、免疫表型分析和白细胞介素２（ＩＬ２）ＥＬＩＳＡ法定量检测。结果ＸＧ细胞转染Ｂ７１ｃＤＮＡ后,能稳定高表达Ｂ７１,转染Ｂ７１ｃＤＮＡ前后细胞表达ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、ＣＤ４０、ＣＤ５４、ＣＤ５６、ＣＤ５８、Ｂ７２（ＣＤ８６）、ＣＤ４０Ｌ、ＨＬＡⅠ和ＨＬＡⅡ抗原均无明显变化,转染Ｂ７基因后可使肿瘤细胞的抗原性明显增加,在ＭＬＲ中,ＸＧ７１转基因细胞较ＸＧ细胞更能显著介导ＣＤ８＋Ｔ细胞的活化、增殖和ＩＬ２的分泌。ＣＤ２８激发型单抗与Ｂ７１分子相似,能显著介导同种异体Ｔ细胞的混合淋巴细胞反应。结论人ＭＭ细胞不能有效地激发Ｔ细胞抗肿瘤的主要原因之一为其不表达Ｂ７１分子,转染Ｂ７１分子或者加入ＣＤ２８激发型单抗均能有效地提高肿瘤细胞的抗原性和对Ｔ细胞的激发作用,ＣＤ２８激发型单抗临床治疗ＭＭ更具有可行性。     

兴奋剂促红细胞生纱免疫检测方法的研究

目的 探索兴奋剂促红细胞生成素（ＥＰＯ）的检测方法。方法 制备了抗重组ＥＰＯ（ｒＨｕＥＰＯ）的两株单无隆抗体：ＭｃＡｂＦ８和ＭｃＡｂＦ１１,同时纯化了天然螺旋藻中的藻胆蛋白。以ＭｃＡｂＦ８作包被抗体,建立了检测血清中ＥＰＯ浓度的竞争ＥＬＩＳＡ法;并将藻胆蛋白作为荧光探针标记ＭｃＡｂＦ８,建立了检测血清中ＥＰＯ浓度的荧光免疫检测法,其检测线性范围为１０＾－１０￣１０＾－１２ｍｏｌ／Ｌ。特异性等方面,     

快速检测鼻咽分泌物中腺病毒抗原方法的比较研究

以病毒分离，Ａｄｖ多克隆坑ＩＩＦ和Ａｄｖ－ＭｃＡｂ－ＩＩＦ三种方法，对５６例急性呼吸道感染患儿ＮＰＳ中Ａｄｖ抗原进行平行检测，结果显示：上述三咱方法的阳性率分别为１０．７％、１０．７％和８．９％。但有一多克隆抗体ＩＩＦ阳性而病毒分离为阴性，说明为非特异反应。以病毒分离为对照，Ａｄｖ－ＭｃＡｂ－ＩＩＦ有敏感性、特生和诊断诊断准确度分别为８３．３％，１００％和９８％。Ａｄｖ－ＭｃＡｂ－ＩＩＦ技术快速准     

血小板第4因子及四肽AcSDKP的造血保护作用研究

目的了解血小板第４因子（ＰＦ４）和四肽Ｎ乙酰丝天赖脯（ＡｃＳＤＫＰ）对５氟尿嘧啶（５ＦＵ）处理后小鼠体内造血的作用。方法实验鼠用ＰＦ４（４０μｇ／ｋｇ）或ＡｃＳＤＫＰ（４μｇ／ｋｇ）注射２次,间隔６小时,第２次注射后２０小时再注射５ＦＵ（１５０ｍｇ／ｋｇ）。第６,８和１３天时,检查高增殖潜能的集落形成细胞（ＨＰＰＣＦＣ）、红系爆式集落形成单位（ＢＦＵＥ）、粒巨噬系集落形成单位（ＣＦＵＧＭ）、巨核系集落形成单位（ＣＦＵＭＫ）及巨核细胞（ＭＫ）。结果ＰＦ４或ＡｃＳＤＫＰ可促使６～８天的ＨＰＰＣＦＣ以及８天的ＢＦＵＥ和ＣＦＵＧＭ明显增加;ＰＦ４还能促进８天的ＣＦＵＭＫ和ＭＫ增加,但ＡｃＳＤＫＰ则无此作用。结论ＰＦ４和ＡｃＳＤＫＰ虽然对巨核祖细胞的作用不同,但它们均能加速体内ＨＰＰＣＦＣ、ＣＦＵＧＭ和ＢＦＵＥ的恢复,这两种分子有可能具有保护造血细胞抵抗化疗药物杀伤的作用。