骶神经电针刺激对脊髓全横断损伤后神经源性膀胱大鼠脊髓神经生长因子NGF及其受体TrkA表达的影响

目的观察电针刺激骶2神经对脊髓全横断损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱重量、排尿量、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其酪氨酸激酶受体(TrkA)的影响,探讨骶神经电针刺激治疗脊髓全横断损伤后神经源性膀胱的机制。方法以尖刀横断T9脊髓方式建立大鼠脊髓全横断损伤后神经源性膀胱模型,通过膀胱重量、排尿量的测量观察空白组、模型组、电针组大鼠的膀胱功能变化;通过Western blot方法观察各组大鼠脊髓内NGF及TrkA表达情况,并统计分析各组间的差异。结果治疗4周后,与空白组比较,模型组和电针组膀胱重量均明显增高(P0.05)。与模型组比较,电针组膀胱重量降低(P0.05)。与空白组比较,模型组手法排尿量增加(P0.05)。与空白组比较,电针组手法排尿量增加(P0.05)。与模型组比较,电针组手法排尿量减少(P0.05)。空白组和电针组的NGF及TrkA的表达明显高于模型组(P0.05)。电针组的NGF高于空白组,TrkA的表达低于空白组(P0.05)。结论骶神经电针刺激治疗可以通过提高损伤脊髓局部神经生长因子NGF及其高亲和力受体TrkA的表达,抑制脊髓损伤局部神经细胞凋亡,保护神经细胞并促进损伤神经的恢复。同时电针刺激促进排尿反射的协调进行,改善SCI后NB的膀胱功能。     

针刺影响大鼠慢性脊髓损伤神经递质的表达

为探讨针刺治疗慢性脊髓损伤的作用机理 ,采用大鼠后路渐进性脊髓压迫法造成动物模型 ,然后手术减压 ,并进行电针治疗。通过观察联合行为评分 (CBS)及胆碱乙酰转移酶 (Ch AT)的免疫组化检测 ,对实验动物进行评价。结果脊髓损伤后 Ch AT免疫组化染色阳性细胞数减少 ,CBS升高 ;经过电针治疗后 ,Ch AT阳性细胞数增多 ,CBS也下降。电针组与减压组比较 ,在统计学上具有显著差异 (P<0 .0 5 )。表明电针治疗可以促进脊髓损伤大鼠脊髓神经元合成 Ch AT,从而合成更多的运动神经递质乙酰胆碱 ,加速实验动物的行为功能的恢复     

电针不同经穴对心肌缺血模型大鼠大脑皮质区神经生长因子、酪氨酸激酶A表达的影响

目的:观察电针心经原穴"神门"、小肠经络穴"支正"和背俞穴"心俞"对心肌缺血大鼠大脑皮质内神经生长因子(NGF)及其受体酪氨酸激酶A(TrkA)表达的影响,比较针刺不同经穴抗心肌缺血效应的差异,探讨针刺经穴效应的相对特异性。方法:雄性SD大鼠随机选取10只为假手术对照组,其余70只采用左冠状动脉前降支结扎法复制急性心肌缺血模型,模型复制成功的大鼠采用随机数字表分为模型组、神门组、支正组和心俞组,每组15只。各电针组电针相应穴位,每天治疗1次,每次15min,共治疗7d。采用免疫组化法和实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠大脑皮质中NGF及其受体TrkA的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠大脑皮质NGF及其受体TrkA阳性细胞数以及NGF、TrkA mRNA的表达差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,各针刺治疗组的大脑皮质NGF及其受体TrkA阳性表达细胞数目和NGF、TrkA mRNA表达均有显著增加(P0.01,P0.05)。与支正组及神门组比较,心俞组大脑皮质NGF、TrkA阳性细胞数和NGF、TrkA mRNA表达增多(P0.01,P0.05)。结论:电针"神门""支正""心俞"均能够提高心肌缺血大鼠大脑皮质中NGF及其受体TrkA的表达水平,且"心俞"穴效应最佳,具有相对特异性。     

电针“长强”穴对大鼠急性脊髓损伤后神经生长因子和脑源性神经营养因子表达的影响

目的:观察电针"长强"穴对急性脊髓损伤后神经生长因子(NGF)及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨电针长强穴治疗急性脊髓损伤的作用机制。方法:将24只成年雌性SD大鼠随机分为电针组、模型组、假手术组,每组8只。假手术组只采用椎板摘除暴露脊髓但不予打击,模型组和电针组采用改良Allen’s法制备急性脊髓损伤模型。电针组在造模成功后采用电针"长强"穴治疗,每天治疗1次,连续治疗7 d;假手术组、模型组每天均抓取1次,不予其他任何干预。术后第1、3、5、7天对各组大鼠进行BBB(basso beattie bresnahan,BBB)评分直至取材,术后7 d取材,灌注固定、石蜡包埋。采用尼氏染色法观察脊髓及神经元形态变化,免疫荧光法检测脊髓中NGF和BDNF的表达情况。结果:术后第3、5、7天,电针组BBB评分均高于模型组(P0.05,P0.01)。尼氏染色显示,假手术组脊髓灰质呈蝴蝶状,结构完整,灰白质界限清楚;模型组脊髓灰质结构不完整,局部可见体积大、颜色较深的瘀血斑块等;与模型组比较,电针组瘀血面积较小,神经元水肿较轻,神经元形态较好,未见空泡样改变。免疫荧光检测,与假手术组比较,模型组和电针组NGF和BDNF表达均显著升高(均P0.01);与模型组比较,电针组NGF、BDNF表达显著升高(均P0.01)。结论:电针"长强"穴能促进大鼠急性脊髓损伤后NGF、BDNF的表达,提高模型大鼠BBB评分,有利于急性脊髓损伤的修复。     

川芎嗪对脊髓急性损伤大鼠神经营养因子表达的影响

目的探讨川芎嗪(TMP)对大鼠脊髓急性损伤(ASCI)模型脊髓神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响及其对脊髓损伤后脊髓功能的保护作用。方法取SD大鼠随机分为正常对照组、假治疗组和川芎嗪组并给予相应处理。采用改良Allen’s法造模,BBB评分对实验大鼠脊髓功能进行行为学评分;SABC法检测造模后大鼠损伤段脊髓NGF和BDNF的表达。结果随时间延长,术后SD大鼠BBB评分逐渐升高,术后7 d、14 d和21 d川芎嗪组BBB评分值均较假治疗组高(P均0.05);川芎嗪组术后3 d7、d和14 d时NGF、BDNF阳性细胞数表达均较假治疗组明显增加(P均0.05)。结论川芎嗪对脊髓继发性损伤有保护作用,这种保护作用可能与其能促进损伤段脊髓NGF、BDNF的表达有关。     

电针调控大鼠脊髓损伤后灰质中BDNF、NGF和NT3的表达

目的观察电针对脊髓损伤后灰质中BDNF、NGF和NT3表达的影响,探讨电针治疗脊髓损伤的相关作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组12只。假手术组仅行椎板切除术,模型组和电针组采用脊髓打击器制备脊髓损伤模型。术后电针组给予电针干预,其余各组给予同等条件抓取。术后每日对大鼠进行BBB评分。术后7 d取材。采用尼氏染色法观察神经元形态,采用免疫荧光法检测灰质中BDNF、NGF和NT3的表达情况,采用Western blot检测BDNF蛋白、NGF蛋白和NT3蛋白表达情况,采用实时定量PCR检测BDNF mRNA、NGF mRNA和NT3 mRNA的表达量。结果与假手术组比较,模型组和电针组BBB评分显著下降(P0.05),模型组和电针组灰质中BDNF、NGF和NT3阳性细胞数均显著升高(P0.05),模型组和电针组BDNF蛋白、NGF蛋白和NT3蛋白表达均显著增加(P0.05),模型组和电针组BDNF mRNA、NGF mRNA和NT3 mRNA表达均显著增加(P0.05);与模型组比较,电针组BBB评分于干预后5 d起显著提高(P0.05),电针组神经元形态较模型组明显改善,电针组灰质中BDNF、NGF和NT3阳性细胞数均显著升高(P0.05),电针组BDNF蛋白、NGF蛋白和NT3蛋白表达均显著增加(P0.05),电针组BDNF mRNA、NGF mRNA和NT3 mRNA表达均显著增加(P0.05)。结论电针能促进大鼠脊髓损伤后灰质中BDNF、NGF和NT3表达,从而有利于神经元修复和大鼠肢体运动功能恢复。     

电针结合吗啡对骨癌痛大鼠痛觉敏化及脊髓星形胶质细胞的活化作用

目的观察电针结合吗啡对骨癌痛大鼠痛觉敏化及脊髓星形胶质细胞的活化作用。方法将60只雌性Wistar大鼠随机分为5组,每组12只。模型组、吗啡组、电针组和电针吗啡组大鼠右侧胫骨注入Walker 256大鼠乳腺癌细胞制备骨癌痛模型,假手术组大鼠注入Hanks液作为对照。造模后第15 d起,分别予以相应的电针和(或)吗啡干预,每天1次,连续6天。治疗前后,检测大鼠热刺激缩爪潜伏期(PWL),并采用Western blot法和免疫荧光组织化学法分别测定脊髓背角胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、白细胞介素1β(IL-1β)和神经生长因子(NGF)的表达情况。结果 1吗啡组、电针组和电针吗啡组大鼠的PWL均高于模型组(P0.01),电针吗啡组PWL高于吗啡组与电针组(P0.01)。2与模型组比较,电针组和电针吗啡组脊髓GFAP和NGF表达显著降低(P0.01);吗啡组、电针组和电针吗啡组脊髓IL-1β表达显著降低(P0.01)。结论电针结合吗啡可抑制骨癌痛大鼠痛觉敏化,其镇痛机制是能抑制脊髓背角星形胶质细胞的活化。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓星形胶质细胞增殖的影响

目的 探究补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓星形胶质细胞增殖的影响。方法 采用改良Allen重物打击法制作脊髓损伤模型，将大鼠分为3组，即假手术组、脊髓损伤模型组、补阳还五汤组，各10只。造模干预1、3、5周后，巴索-比蒂-布雷斯纳汉(Basso-Beattie-Bresnahan, BBB)评分和斜板试验，评价大鼠后肢运动功能；皮层体感诱发电位波潜伏期，检测大鼠脊髓神经传导功能。于术后5周，HE染色，观察脊髓组织形态学变化的情况；免疫荧光染色，检测脊髓损伤区域中脊髓星形胶质细胞数量；蛋白质印迹法，检测脊髓组织中GFAP蛋白表达。结果 在造模干预1、3、5周后，模型组BBB评分及斜板试验倾斜角度显著低于假手术组(P<0.05),皮层体感诱发电位波潜伏期显著高于假手术组(P<0.05);补阳还五汤组BBB评分及斜板试验倾斜角度明显高于模型组(P<0.05),皮层体感诱发电位波潜伏期明显低于模型组(P<0.05)。在造模干预5周后，HE染色见补阳还五汤组脊髓组织结构较清晰，白质及灰质中坏死区减小，胶质疤痕减少，细胞及组织结构接近假手术组。在造模干预5周后，模型组大鼠脊髓组...     

电针与穴位注射对糖尿病周围神经病变大鼠神经保护作用的比较研究

目的比较电针与穴位注射对糖尿病周围神经病变大鼠保护作用的效应特点。方法 136只大鼠分为正常对照组、模型组、电针组、穴位注射组,建立大鼠DPN动物模型。电针组取肾俞、足三里,穴位注射组取穴相同,注入弥可保注射液。分别于治疗前、20 d、40 d、60 d后进行空腹血糖、坐骨神经运动传导速度和感觉传导速度、神经生长因子(NGF)及其受体TrkA的表达检测。结果电针和穴位注射法均具有一定的降低血糖及良好的改善神经传导功能的作用,其降糖效应以电针法为优(P<0.01),在提高感觉神经传导速度方面以穴位注射法为佳(P<0.01),对运动神经传导功能的改善作用两组基本一致(P>0.05)。电针和穴位注射法均能提高DPN大鼠NGF及其受体TrkA的表达,治疗60天时穴位注射的提高幅度优于电针组(P<0.05)。结论电针和穴位注射法均具有抗本病神经损伤的作用,但对血糖、神经传导速度、NGF及其受体TrkA表达的影响存在效应差异。     

电针对兔脊髓损伤后NGF及下肢运动功能的影响

目的:探讨电针对兔脊髓损伤节段神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)及下肢运动功能的影响。方法:将30只健康成年雌性新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组,每组10只。采用改良Allen’s法建立脊髓损伤模型。治疗28d后,分别取兔脊髓损伤段脊髓组织,采用免疫组化法测定NGF阳性细胞计数的表达水平;并在术前、术后麻醉清醒后1h、术后1d、7d、14d、28d通过分析改良Tarlov评分法比较各组兔后肢运动功能状况。结果:1.脊髓损伤节段NGF阳性细胞的表达水平:治疗后模型组与电针组较空白组NGF阳性细胞数增多(P<0.05);治疗后电针组NGF阳性细胞数显著多于模型组(P<0.05)。2.下肢运动功能:经改良Tarlov评分显示,术后28d后,电针组评分值与模型组相比有明显升高(P<0.05)。结论:脊髓损伤后,电针可能通过激发损伤段脊髓组织中NGF的表达增多,促进脊髓损伤的恢复,改善下肢运动功能。     

大鼠脊髓慢性压迫伤诱发电位的实验研究

为研究大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型的体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)的病理改变及其应用价值.采用颈脊髓前侧持续压迫法造模,硬脑膜和硬脊膜直接引导,用生物信号采集处理系统进行图象采集和数据处理,分别于造模前、造模后即刻、造模后15天、造模后30天测量比较潜伏期及波幅的变化.结果硬脑膜和硬脊膜直接测量能引导出较稳定的SEP和MEP;SEP波幅和潜伏期各组比较,均无显著性差异(P＞0.05);MEP造模后即刻波幅降低率较小或不降低,造模后15和30天降低明显,有显著性差异(P＜0.05);降低程度与压迫程度有关,中压模型组差异有非常显著性意义(P＜0.01).表明直接硬膜测量法是研究脑脊髓诱发电位的较可靠方法;MEP波幅能灵敏地反映大鼠颈脊髓慢性损伤程度;SEP波幅和潜伏期不能反映大鼠颈脊髓慢性损伤变化.     

EFFECTS OF JIA-JI EA AND BWSTT ON THE EXPRESSION OF NESTIN AND NGF IN SCI MODEL RATS

Objective: Electroacupuncture(EA) and body weight support treadmill training(BWSTT) are effective in spinal cord injury(SCI) treatment.This design tried to investigate the effect of EA combined with BWSTT by evaluating the locomotor functionalrecovery and the expression of nestin and NGF.Methods: Seventy-two adult male SD rats were randomized into sham control group, model control group, EA treatment group and EA combined with BWSTT treatment group.SCI was made by NYU impactor on T9-T10 spinal segment.Outcome measures included motor test evaluated by BBB locomotor rating scale and nestin and NGF expressions of the lesion segment by immunohistochemical technique.Results: BBB scores were significantly higher(P0.05) in the two treatment groups compared to the model control group in the period from 7 to 28 d post-lesion, and D group showed a significant higher score(P0.05) compared with the C group from 14 to 28 d post-lesion.NGF expression showed a trend of gradually increasing after SCI and reached a peak on 28 d.Compared to the model control group, the number of NGF- and nestin-positive cells was increased significantly(P0.05) in the two treatment groups at 7, 14 and 28 d; however, there was no statistical difference between the two treatment groups.Conclusion: EA intervention can increase the expression of endogenous NGF post-SCI so as to promote the nerve regeneration, and increase the nestin expression to promote the activation and proliferation of endogenous neural stem cells(ENSCs).EA combined with BWSTT treatment is more effective than only EA treatment in the aspect of promoting the locomotor functional recovery, but no statistical difference exists in increasing the proliferation of ENSCs and activating the endogenous NGF.     

夹脊电针结合BWSTT干预脊髓损伤大鼠髓鞘超微结构及p-MLC的研究

目的探讨夹脊电针结合减重步行训练(BWSTT)对脊髓损伤大鼠髓鞘超微结构及磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)的影响。方法将60只大鼠随机分为正常组、模型组、电针(EA)组、药物组和EA+运动组,每组再分连续治疗7 d和14 d的2个亚组。除正常组外,其余4组运用改良的Allen法制备脊髓损伤模型,造模成功后,正常组和模型组均不予治疗,EA组采取针刺夹脊穴进行电针治疗,药物组采用腹腔注射法舒地尔(Fasudil)进行治疗,EA+运动组采用夹脊穴电针联合部分重量支撑平板训练进行治疗。各组分别连续治疗7 d和14 d,治疗结束后,通过脊髓损伤行为学评分(BBB评分)评估大鼠的后肢运动功能恢复情况,运用Western blot法检测p-MLC和中枢髓鞘来源的神经生长抑制受体(NGR)蛋白的表达,采用髓鞘染色(LFB染色)观察髓鞘的超微结构。结果BBB评分显示,脊髓损伤后大鼠后肢运动功能显著下降,治疗7 d、14 d后,EA+运动组与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),治疗14 d后,EA+运动组BBB评分较前升高,与EA组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,脊髓损伤后p-MLC、NGR明显增多,治疗7 d、14 d后,EA+运动组p-MLC和NGR表达与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗14 d后EA+运动组p-MLC和NGR表达下降,与EA组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。LFB染色显示,脊髓损伤后,轴突髓鞘结构遭到破坏,脊髓白质纤维紊乱,髓鞘缺失,有髓神经纤维较少,髓鞘染色平均IOD值下降明显,治疗7 d、14 d后,EA+运动组与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗14 d后,EA+运动组平均IOD值较前升高,与EA组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论夹脊电针结合BWSTT可通过抑制脊髓损伤后MLC的磷酸化及NGR的表达,保护髓鞘结构,促进运动功能恢复。     

慢性渐进分级压迫大鼠脊髓损伤动物模型的研制

为设计并验证一种较理想的慢性渐进性压迫脊髓损伤动物模型,采用切除T9椎板,置入慢性渐进压迫装置,多次渐进旋入螺钉,造成大鼠胸段脊髓不同程度的慢性渐进性压迫损伤的方法造模,根据椎管侵占率将实验组分为轻度(＜30%)、中度(30%～60%)、重度压迫(＞60%)三组,行组织病理学、CBS、MEP和SEP等检查.结果显示,椎管侵占率达12.3%～82.5%;组织病理学检查发现三组动物基本再现了不同程度的慢性压迫性脊髓损伤的特点;CBS、MEP和SEP等检查显示三组动物呈不同程度的脊髓神经功能减退,且行为功能检查和神经电生理检查呈显著正相关.表明该实验动物模型是一种较为理想的、能合理分级的慢性渐进压迫脊髓损伤动物模型.     

电针对脊髓损伤大鼠早期bax mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨电针对脊髓损伤后 bax mRNA 及蛋白表达的影响。方法成年雄性 SD 大鼠,随机分为模型组、电针治疗组、甲基强的松龙治疗组及假手术组。采用改良的 Allen’s 锤击法致大鼠 T_(10)脊髓损伤,应用原位杂交和免疫组织化学方法及图像定量分析法观察脊髓损伤早期 bax mRNA 和蛋白的表达。结果假手术组有中等量的 bax mRNA 及蛋白表达。模型组脊髓损伤后6h 及24h bax mRNA 及蛋白表达均增高,电针治疗组 bax mRNA 及蛋白表达均低于模型组,与甲基强的松龙组比较差异无显著性。结论电针可下调bax mRNA 及蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡,保护神经细胞。     

针刺对大鼠脑内及脊髓内亮啡肽含量的影响

<正> 针刺对大鼠实验性关节炎的镇痛作用以及针刺后大鼠下丘脑、垂体内甲硫氨酸脑啡肽(MEK)含量的变化,我们已将研究的结果作了报道。本实验仍以急性过敏性关节炎为疼痛的动物模型,观察针刺的镇痛作用与脑内(下丘脑、垂体)及后肢炎症部位相应节段脊髓(T_(12)-L_1)内亮氨酸脑啡肽(LKE)含量的变化的关系,为阐明针刺治疗炎症性疼痛的作用提供病理生理学依据。     

针刺配合推拿治疗外伤性脊髓截瘫疗效观察

为探讨针刺和推拿疗法对脊髓损伤的治疗作用,将１３８例外伤性截瘫奢随机分为两组。在常规手术和非手术治疗方法的基础上,观察组给予配合推拿治疗,结果显示其疗效明显优于对照组。表明针刺和推拿疗法具有兴奋脊髓,疏通经络,强壮筋骨的作用,可促进神经功能恢复,是脊髓损伤的有效治疗方法。     

电针及纳洛酮阻断电针镇痛对豚鼠肾上腺和脊髓脑啡肽样物质影响的免疫组化观察

<正> 自从1975年 Hughes 等发现甲啡肽和亮啡肽以来,许多研究工作已表明,EK 与针刺镇痛关系密切。应用放射免疫(RIA)法的研究表明,大鼠电针后尾核和下丘脑的EK 含量升高,并与针效呈正相关;用抑制 EK 降解的肽酶抑制剂给大鼠腹腔注射(ip)和家兔测脑室注射后,可使针刺镇痛效应提高,同时大鼠尾核和下丘脑 EK 含量升高。Vacca 等曾应用 PAP 法研究了