牛胚胎干细胞建系的现状与展望

胚胎干细胞是能在体外培养中保持自我更新和多分化潜能的细胞。因此,牛胚胎干细胞系是基因工程、治疗性克隆、发育生物学、人类疾病动物模型研究的良好实验载体。公认的胚胎干细胞系已在小鼠和灵长类动物中建立。虽然关于牛类胚胎干细胞的报道也已有不少,但是真正的牛胚胎干细胞建系尚未获得成功。本文将综述当前牛胚胎干细胞建系的研究进展并对其中存在的问题,如胚胎分离胎龄、牛胚胎干细胞识别与鉴定、培养条件和与分化相关细胞因子和信号通路等,进行探讨并提出可能采取的解决办法。     

不同分化程度卵巢癌细胞中胚胎干细胞相关通路的基因集富集分析

背景:近年来一些研究发现肿瘤细胞具有与干细胞类似的特征,因此,控制干细胞功能的某些基因调控网络,可能也在某些肿瘤中同样发挥作用。目的:观察不同分化程度卵巢癌的分子特征,获得与胚胎干细胞相关基因的表达情况。方法:从美国国立生物信息中心(NCBI)共享数据库GEO下载原始基因芯片文件,登录号为GSE2109,选取卵巢癌样本作为研究材料。去除临床指标缺失的样本,按照组织学分级将卵巢癌样本分为高分化和低分化两组。原始数据经dChip进行质量检验和标准化,获得基因表达的矩阵。收集胚胎干细胞相关的基因集、生物学过程和KEGG通路在不同分化的卵巢癌中的富集情况,用GSEA进行基因集富集分析。结果与结论:选取了13个与胚胎干细胞相关的基因集,低分化的卵巢癌细胞中有9个基因集上调,PRC2靶点相关的4个基因集下调,说明与胚胎干细胞相关的基因集大多在低分化的卵巢癌细胞中上调。并且在低分化卵巢癌细胞显著上调的都是与细胞周期、细胞分裂、DNA复制等与增殖相关的通路。基因表达谱分析表明低分化的卵巢癌与胚胎干细胞具有相似的分子特征,这可以为卵巢癌的早期诊断和治疗提供新的思路。     

胚胎干细胞定向分化的研究进展

胚胎干细胞已成为组织工程、发育生物学、药物开发及基因研究的热点。本文仅就胚胎干细胞定向分化的机制、研究进展和应用前景作一综述 ,旨在进一步推动胚胎干细胞的研究工作。     

let-7e生物学作用的研究进展

let-7e是由22个核苷酸构成的内源性非编码RNA,是let-7miRNA基因家族的一员。最近的miRNA筛查研究发现：let-7e在胚胎干细胞分化、肿瘤的发展过程、神经系统功能和炎症反应等方面可通过调控其mRNA靶基因的表达,发挥极其重要的生物学作用。     

let-7e生物学作用的研究进展

let-7e是由22个核苷酸构成的内源性非编码RNA,是let-7 miRNA基因家族的一员.最近的miRNA筛查研究发现:let-7e在胚胎干细胞分化、肿瘤的发展过程、神经系统功能和炎症反应等方面可通过调控其mRNA靶基因的表达,发挥极其重要的生物学作用.     

let-7e生物学作用的研究进展

let-7e是由22个核苷酸构成的内源性非编码RNA,是let-7 miRNA基因家族的一员.最近的miRNA筛查研究发现:let-7e在胚胎干细胞分化、肿瘤的发展过程、神经系统功能和炎症反应等方面可通过调控其mRNA靶基因的表达,发挥极其重要的生物学作用.     

美国科学家利用血液细胞培养诱导多能干细胞获成功

美国科学家表示,在新近完成的研究中,他们将普通循环血液中的细胞经过重组,获得了与胚胎干细胞从分子结构和功能上难以区分的细胞。该研究为人们提供了快速得到干细胞源的途径及获取胚胎干细胞的替代方法。长期以来,人们始终期望胚胎干细胞移植能作为治疗多种疾病的途径。     

宫内干细胞移植与基因治疗研究新进展

在做到产前诊断的前提下 ,以适当的载体携带治疗基因 ,输入到子宫内发育中的胚胎 ,在特定器官长期表达 ,可以使遗传性疾病在尚未造成不可逆性损害之前 ,即得到治疗。近年宫内干细胞移植与基因治疗 ( IUT)已经在动物实验和部分患者中获得成功。本文对 IUT研究现状和应用前景做扼要介绍     

皮肤干细胞的生物学特点与应用研究

随着对成体干细胞研究的深入,发现皮肤中至少含有6种成体干细胞。本文着重介绍目前研究取得结果较多的表皮干细胞和真皮多能干细胞,包括目前已知的其各自的生物学特性和鉴别等。同时,对皮肤干细胞在组织工程（皮肤、牙齿）、创伤修复、基因研究及遗传性疾病的治疗等方面的应用作一简要综述,为其将来的应用提供参考。简单介绍对皮肤中几种成体干细胞的基础研究和分离纯化技术的进展,可望进一步加深对皮肤自身生物学特点和机制的了解以及为临床应用等方面开拓广阔的前景。     

基于AAV的基因治疗在遗传性耳聋中的研究进展

近 20年来,遗传性疾病的基因治疗研究日益深入。作为临床试验中相对较为安全的基因治疗载体,重组腺相关病毒AAV在遗传性疾病的基础和临床研究中被广泛使用。遗传性耳聋 (包括非综合征和综合征耳聋) 的主要致病原因是遗传物质,即基因发生异常突变。自1997年发现首个耳聋基因以来,目前已鉴定123个非综合征耳聋基因,超过40个综合征耳聋基因。遗传性耳聋的临床发病率高,但缺乏有效的治疗方法。随着分子生物学和基因治疗临床研究的发展,重组 AAV介导的基因治疗开始广泛应用于耳聋治疗的基础研究之中。本文对重组AAV及其介导的遗传性疾病,尤其是遗传性耳聋相关的基因治疗的概念、策略及其应用作一综述。     

HOXA9基因与白血病的研究进展

HOXA9基因是同源盒(HOX)基因家族成员,作为转录因子,HOXA9是胚胎形成前-后轴过程中的关键因子,在调控干细胞生物学行为及促进造血系统形成的过程中发挥重要作用。HOXA9既可与上游相关调节蛋白相互作用,又可调节下游靶基因的表达,发挥转录激活或抑制作用,进而调控血液细胞的生物学行为。HOXA9在超过50%的急性髓性白血病中过表达,而且高水平表达与不良预后密切相关。     

生命科学与生物技术研究新进展2007

 2007 年生命科学与生物技术研究领域精彩纷呈，新成果、新技术不断涌现。本文仅就国内外相关研究简况，以信息传递形式加以总结。1 国外研究进展 1.1 首次利用人体皮肤细胞制造出类胚胎干细胞 2007 年 11 月，日、美科学家同时宣布，利用基因重排技术，向人体皮肤细胞中植入一组 4 个基因，成功地将人体皮肤细胞改造成可与胚胎干细胞相类似的干细胞。这一技术有希望用于特定疾病（如糖尿病、癌症、阿尔茨海默病）的干细胞研究和治疗，并且避开了利用晶胚或卵母细胞获得胚胎干细胞的伦理争议。因为这些皮肤细胞都是取自自体，所以不会发生身体排异现象。完成这项研究的日本科学家是京都大学山中伸弥教授；美国科学家则是在美国汤姆森实验室工作的中国留美学生俞君英博士。俞君英 1997 年北京大学生物系毕业后进入美国宾西法尼亚大学攻读生物学博士学位，师从首次成功分离人类干细胞的著名生物学家 James Thomson 教授。2003 年博士毕业后加盟汤姆森实验室做研究助理。......     

胚胎干细胞可在遗传性血液紊乱中输送“优质基因”

据Eckardt S 2011年1月10日(J Clin Invest,2001 Jan 10.pii:45377.doi:10.1172/JCI45377.[Epub ahead of print])报道,利用生殖细胞产生胚胎干细胞,可解决遗传疾病的问题,该方法与无需基因组工程的典型基因治疗方法不同。美国全国儿童医院研究所研究人员公布了一份基因治疗方案,改善鼠实验中的遗传性血液紊乱——β-地中海贫血,基因改善是使用鼠的未受精卵制造胚胎干细胞系。这些干细胞系没有遗传疾病基因,可用于小鼠的移植治疗。对于治疗常染色体显性遗传     

Nanog与肿瘤细胞和干细胞的关系

Nanog是维持干细胞自我更新增殖和亚全能性的关键性基因,胚胎干细胞的转录因子。近年来,随着对Nanog在干细胞和肿瘤细胞中的表达相关研究的不断深入,为研究肿瘤的起源和生物学行为以及治疗肿瘤提供了新途径。     

Spry1在miR-21调控人骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用

背景：前期研究发现,miR-21在骨髓间充质干细胞成骨分化中表达上升,但是miR-21在骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用及分子机制尚不明确。 目的：验证miR-21的靶基因Spry1,探明Spry1在人骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用。 方法：荧光素酶报告验证miR-21靶基因Spry1,Western Blot检测Spry1在人骨髓间充质干细胞成骨过程的表达。构建Spry1慢病毒表达载体,感染人骨髓间充质干细胞。碱性磷酸酶、茜素红染色、RT-PCR和Western Blot分析Spry1高表达后人骨髓间充质干细胞成骨能力的改变。 结果与结论：荧光素酶报告提示Spry1为miR-21的靶基因,在人骨髓间充质干细胞成骨过程中表达量下降。上调Spry1能够抑制人骨髓间充质干细胞的成骨分化。结果表明Spry1作为miR-21的靶基因负向调控人骨髓间充质干细胞的成骨分化,在骨形成过程发挥着重要作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

与干细胞研究相关学术会议介绍

<正>内容简介第三届广州国际干细胞与再生生物学论坛,将于 2010 年 12 月 15-17日在广州举行。本次论坛拟围绕干细胞重编程研究、干细胞的化学生物学研究、胚胎与成体干细胞的应用研究、干细胞与药物研发、发育     

基因疗法

将遗传信息插入哺乳动物细胞的方法很多,其中部分方法已成功地用于活体动物胚胎细胞和躯体细胞遗传信息的修饰。一旦引入基因的表达得以控制,这些技术就有可能治疗人类的某些遗传性疾病。已确认的遗传疾病有百余种,它包括单基因或一小串连锁基因缺陷,它们涉及酶的基因,或涉及结构蛋白基因。遗传性疾病目前的治疗方法有二:1.针对一种代谢障碍的药物和饮食疗法,2.对原发遗传变异所致并发症的支持疗法。显然这些措施未能解决病因学问题。遗传性疾病对人类     

胚胎体外培养及胚胎干细胞系的建立

背景：人类胚胎干细胞体外建系成功,对人类胚胎发育机制和发育生物学研究、细胞和组织移植治疗某些疾病等领域都有重大意义。目的：综述近年来关于胚胎体外培养及建立胚胎干细胞系的研究进展,重点探讨胚胎体外培养影响因素、人废弃胚胎培养分离内细胞团建立胚胎干细胞系的方法及建立胚胎干细胞系的条件。方法：以“胚胎(embryo),胚胎干细胞(embryonic stem cell),共培养(co culture),序贯培养(sequential culture)”为检索词,由第一作者检索2000至2014年CNKI数据库和SCI数据库,获取有关胚胎体外培养、移植及胚胎干细胞建系的相关文献,并进行系统评价,最终保留58篇文献进行分析。结果与结论：胚胎体外培养条件是影响胚胎移植结局的重要因素,其中包括培养液的成分和培养体系。在过去的研究过程中,培养液的构成及应用已经发生了很大的变化,培养体系也从单一培养发展到共培养、序贯培养。伦理问题及胚胎来源的限制束缚着人胚胎干细胞系的建立,利用临床废弃的低质量的胚胎可作为建立人胚胎干细胞系的材料来源之一,有效的缓解了建立人胚胎干细胞系过程中胚胎缺乏的问题,并减少其中的伦理学纷争。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

绿色荧光蛋白腺病毒表达载体在大鼠肌源性干细胞标记中的应用

目的:对大鼠肌源性干细胞转染携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒表达载体,为进一步行标记细胞移植治疗实验奠定基础。方法:复苏并培养人胚胎肾293细胞,进行包装重组及大规模扩增腺病毒;原代培养大鼠肌源性干细胞并进行GFP基因转染,荧光显微镜观察转染情况并计算转染率。结果:人胚胎肾293细胞在普通培养条件下生长良好,加入Ad-GFP病毒液后48h荧光显微镜观察绝大多数细胞呈悬浮状态,带有较强的绿色荧光;转染肌源性干细胞后呈Desmin免疫组织化学显色阳性;48h荧光转染率为83.14%,4d为78.35%,8d为75.12%。结论:采用携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒表达载体标记肌源性干细胞的方法安全可靠、简便有效,且能保持肌源性干细胞原有生物学特性。     

细胞重编程前后基因组的动态稳定性

背景:研究表明,人类早代诱导多能性干细胞发生拷贝数变异多于晚代、体细胞及人类胚胎干细胞。目的:分析重编程过程是否危及基因组稳定性,进一步探讨诱导多能性干细胞建系的有效性。方法:利用高分辨率的Affymetrix Cytoscan HD芯片检测遗传性癫痫先证者的体细胞及早代诱导多能性干细胞,分析重编程后基因组拷贝数变异及杂合性缺失的变化。结果与结论:与遗传性癫痫患者体细胞相比,其早代诱导多能性干细胞的杂合性缺失未发现明显差异,而存在更多的拷贝数变异,且均为微重复,涉及致癌基因。结果证明重编程过程中基因组稳定性动态变化,需要动态监测诱导多能性干细胞保证其基因组稳定性及临床安全性。