P2X7受体在癫痫患者中的表达水平及临床意义

目的 观察P2X7受体(P2X7R)在癫痫患者中的表达情况,探讨其在癫痫发病、发展过程中的作用及临床意义.方法 选取2014年3月-2015年12月行手术治疗的癫痫96例作为观察组,同时选择同期行神经外科减压或清创患者14例作为对照组.观察2组脑组织中P2X7R mRNA和蛋白、白介素-1 β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平.结果 P2X7R在正常脑组织和癫痫患者脑组织中均有表达.观察组P2X7R mRNA和蛋白、IL-1 β和TNF-α表达水平均高于对照组(P＜0.05).结论 P2X7R可能参与了癫痫的发生与发展,为药物治疗癫痫提供了新的靶点,检测P2X7R表达水平可为癫痫的预后判断提供一定的依据.     

p38丝裂原活化蛋白激酶选择性抑制剂对难治性癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用及其机制研究

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)选择性抑制剂SB202190对难治性癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用及其机制。方法:取大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(卡马西平5 mg.kg-1)和SB202190低、中、高剂量组(7.5、15、30mg.kg-1),每组10只,除空白对照组外,其余各组腹腔注射海仁酸(KA)10 mg.kg-1建立难治性癫痫模型,阳性对照组和SB202190各剂量组建模前30 min腹腔注射相应药物。建模给药后按Racine分级标准对各组大鼠进行行为学评价,观察建模给药后1 h内各组大鼠的脑电图(EEG)变化,采用免疫组化法和蛋白免疫印迹法检测建模给药后3 h各组大鼠脑组织中p38MAPK蛋白的表达。结果:空白对照组无癫痫发作,EEG无明显节律性;模型组癫痫大发作,发作程度为5级,EEG出现癫痫样放电,与空白对照组比较,模型组p38MAPK阳性细胞数明显增加,其表达明显增强(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组和SB202190 3个剂量组发作程度、EEG癫痫样放电、p38MAPK阳性细胞数及其蛋白表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:SB202190对KA诱导的难治性癫痫模型大鼠神经细胞具有保护作用,可能与其抑制p38MAPK蛋白的表达有关。     

难治性癫痫患者致痫灶中CX43的表达

目的探讨由CX43组成的缝隙连接在难治性癫痫患者致痫灶脑组织中的表达,为难治性癫痫的临床研究及治疗提供新的思路。方法以24例行手术治疗的难治性癫痫患者为实验组,6例脑外伤急诊手术患者为对照组,采集其手术切除的致痫灶脑组织,应用免疫组织化学方法,观察CX43的表达并与对照组进行比较。结果免疫组织化学方法检测显示实验组CX43的表达高于对照组(P<0.001)。结论难治性癫痫患者致痫灶脑组织中CX43表达增高,提示CX43所形成的缝隙连接参与癫痫活动,可能在癫痫的发生、发展中发挥重要的作用。     

耐药性癫痫患者血浆miRNA分子标志物的初步筛选

目的 分析耐药性癫痫患者血浆mi RNA表达谱,探讨其变化对诊断耐药性癫痫的价值。方法 利用mi RNA芯片技术筛选耐药性癫痫患者(耐药组)、非耐药癫痫患者(控制组)及健康人(对照组)各15例血浆的mi RNA表达谱,并分析差异mi RNA的生物学功能。结果 耐药组患者血浆与对照组相比,筛选出12个差异表达mi RNA,其中7个上调,5个下调;控制组患者血浆与对照组相比,筛选出12个差异表达mi RNA,其中6个上调,6个下调;耐药组与控制组相比,筛选出8个差异表达mi RNA,其中5个上调,3个下调。结论 通过mi RNA芯片技术发现了多个差异表达的mi RNA,为探讨耐药性癫痫发病机制及寻找诊断依据提供了参考。     

颞叶癫痫儿童脑海马组织内 BDNF表达变化的意义

目的：探讨脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）在颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy, TLE）发病机制中的作用。方法观察组为2012年3月-2013年3月在某医院神经外科癫痫中心16例TLE患儿术中切除的海马脑组织,对照组为2011年9月-2013年3月某医院神经外科8例非癫痫手术患儿的海马脑组织。标本采用免疫组化SABC法进行检测。免疫组化结果的判定以显微镜下观察,按每张切片的阳性细胞着色程度及数量,采用积分综合计量,并采用Ridit分析。结果按照显微镜下观察评分对两组数据进行分类,经Ridit 分析可知两组分级差异有统计学意义（ Hc＝9.2472,P＜0.01）,故认为观察组海马脑组织中BDNF表达强于对照组中海马脑组织BDNF表达。结论 BDNF在颞叶癫痫患儿的海马脑组织中表达增强,可能在颞叶癫痫的发病机制中起重要作用。     

多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联研究

目的探讨多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子(BDNF)基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联性。方法选取多药耐药基因-1的T-129C多态性、BDNF基因的C270T多态性作为研究的位点,利用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析技术,在耐药性癫痫组41例患儿、药物有效癫痫组43例患儿、正常对照组30例儿童中进行这两个多态性检测,比较3组之间基因型分布及等位基因频率的差异。结果耐药性癫痫组MDR1基因T-129C多态性的TT基因型分布频率、T等位基因频率高于药物有效癫痫组及正常对照组,差异有显著性(P<0.05)。耐药性癫痫组BDNF基因C270T多态性的CC、CT、TT基因型分布频率和C、T等位基因频率与药物有效癫痫组及正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论MDR1基因T-129C多态性可能与小儿耐药性癫痫存在关联,在小儿耐药性癫痫的发生中可能起作用;而BDNF基因C270T多态性与小儿耐药性癫痫可能无关联。     

唑尼沙胺添加治疗耐药性癫痫部分性发作的临床疗效和安全性评价

目的 观察在耐药性癫痫部分性发作治疗中,唑尼沙胺作为添加治疗的临床疗效和安全性,探讨唑尼沙胺在耐药性癫痫中的治疗作用.方法 采用随机双盲、安慰剂对照、前瞻性研究方法.耐药性部分性癫痫45例,随机进入试验组与对照组,分别服用唑尼沙胺或安慰剂,观察病人的发作情况及不良反应.结果 试验组有效率17%(4例),显效率17%(4例),完全控制率17%(4例);对照组有效率14%(3例),显效率9%(2例),完全控制率0%(0例);2组比较有显著差异(P＜0.05).试验组不良反应率(75%)高于对照组(50%),但2组比较无显著差异(P＞0.05).结论 唑尼沙胺作为耐药性癫痫的添加治疗,疗效好,且不良反应轻而少.     

老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达分析

目的探讨老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达情况。方法选取我院接收的70例老年妇女外阴营养不良患者作为观察1组,同时选取10例老年妇女外阴营养不良恶变患者作为观察2组,利用原位末端标记及免疫组化S-P法对两组患者蜡包埋组织中的细胞凋亡及相关基因bcl-2、bax的表达情况进行检测。同时选取10例石蜡包埋的老年妇女正常外阴皮肤进行对照(对照组)。结果三组患者均在细胞凋亡及bcl-2、bax的表达现象,且观察1组患者的细胞凋亡指数及bcl-2、bax的表达方面均明显高于观察2组(P<0.05);bcl-2、bax二者间的表达呈正相关(P<0.05),在恶变部分凋亡细胞的分布区域及bcl-2、bax的表达方面则无明显相关性。结论外阴营养不良的发生发展与恶变及细胞凋亡间有较大的关系,且bcl-2、bax发挥着一定的作用。     

青少年耐药性癫痫采用拉莫三嗪添加治疗的疗效及安全性分析

目的：对青少年耐药性癫痫（DBE）采用拉莫三嗪（LTG）添加治疗的疗效及安全性分析。方法青少年耐药性癫痫患者120例，将其随机分为对照组和观察组，每组60例，给予对照组患者采用丙戊酸钠进行治疗，给予观察组患者采用拉莫三嗪进行治疗，对两组的疗效和安全性进行分析。结果观察组治疗后的总有效率（90.00%）明显好于对照组的（65.00%），观察组患者治疗后不良反应的发生率（24.00%）明显低于对照组的（50.00%），两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论对青少年耐药性癫痫患者选用拉莫三嗪进行治疗有良好的治疗效果，降低患者治疗后不良反应的发生率，值得在临床的治疗中广泛推广应用。     

托吡酯联合丙戊酸钠治疗难治性癫痫的临床价值

目的:研究托吡酯联合丙戊酸钠治疗难治性癫痫的临床疗效。方法:选取收治的难治性癫痫患者101例,随机分为对照组50例与观察组51例。对照组采用托吡酯治疗,观察组在此基础上添加丙戊酸钠联合治疗。结果:用药后两组患者癫痫发作次数较用药前均有所改善,且观察组改善情况明显优于对照组;两组患者用药后不良反应发生率差异均无统计学意义;观察组治疗总有效率为92.16%,明显高于对照组(72.00%)。结论:托吡酯联合丙戊酸钠对难治性癫痫患者的临床治疗效果非常显著,可有效减少癫痫发作次数,提高治疗效果,且未增加不良反应。     

重组人谷氧还蛋白1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrx1)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,病理形态学方法证实模型建立成功。小鼠尾静脉注射rhGrx1(5mg·kg-1和10mg·kg-1)后,观察脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及蛋白质羰基含量的变化,Western blot检测小鼠脑组织中p38MAPK表达水平的变化。结果HE染色证实模型建立成功且提示rhGrx1可改善缺血/再灌注损伤所致的小鼠脑组织病理形态学变化;rhGrx1能增加小鼠脑组织LDH、SOD活性、降低蛋白质羰基的含量。与假手术组小鼠相比,缺血和再灌注时脑组织p38MAPK蛋白表达量明显增加,注射rhGrx1后p38MAPK蛋白表达被抑制。结论rh-Grx1对局灶性脑缺血/再灌注损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK蛋白表达相关。     

丁苯酞对大鼠神经细胞凋亡的保护作用及其机制研究

目的 探讨丁苯酞对大鼠神经细胞凋亡的保护作用及其机制研究.方法 选用90只SD大鼠,随机分为给药组、对照组和健康组,每组30只.对给药组和对照组大鼠使用10％水合氯醛麻醉(剂量为0.5 mL/100 g),麻醉完成后,对大鼠双侧海马区位置进行准确定位后,将浓度为5μL(1 μg/μL)Aβ1-42注入造模.将配置的丁苯酞与食用麻油混合配制成悬浊液.造模完成后,分别给予不同的处理方法,给药组按75 mg/kg比例对大鼠进行灌胃给药,1次/d.对照组按同等比例灌胃给予生理盐水,1次/d.健康组为正常健康组,不给予任何手术和药物处理.取大鼠脑组织分为两部分,一部分经固定、脱水、石蜡包埋后制得厚度约5μm切片.采用TUNEL染色法对脑组织细胞凋亡进行检测;并使用H&E染色法观察各组大鼠脑组织细胞;采用Western Blot法检测各组脑组织MAPK、Erk和P38的蛋白表达水平,并使用RT-PCR法检测MAPK、Erk和P38的mRNA表达水平.结果 30 d后,给药组大鼠脑组织细胞凋亡明显少于对照组及健康组.给药组大鼠MAPK、Erk和P38的蛋白表达水平明显低于对照组但高于正常健康组(P＜0.05).使用RT-PCR法检测MAPK、Erk和P38的mRNA表达水平发现,给药组大鼠MAPK、Erk和P38的mRNA水平明显低于对照组但高于正常健康组(P＜0.05).对照组大鼠达到学会标准次数与健康组比较明显升高(P＜0.05).与对照组比较,给药组大鼠达到学会标准次数明显降低(P＜0.05).结论 丁苯酞对Aβ1-42处理的大鼠脑组织细胞凋亡具有保护作用,通过抑制大鼠脑组织MAPK,Erk和P38的表达发挥作用.     

慢性吗啡处理对大鼠交感神经节pCREB和CREB mRNA表达的影响

目的观察慢性吗啡(Mor)处理对大鼠交感神经节-颈上神经节(SCG)环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP responseelement binding protein,CREB)磷酸化和mRNA表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分成4组(正常对照组、吗啡急性给药组、吗啡依赖组、吗啡戒断组),免疫组织化学方法及RT-PCR法分别检测磷酸化的CREB(phosphorylated CREB,pCREB)和CREB mRNA在SCG中的表达。结果 (1)与正常对照组相比,吗啡急性给药组大鼠SCG中pCREB含量明显降低(P<0.05);(2)吗啡依赖组大鼠SCG中pCREB含量回到正常对照组水平,并有增高趋势(与正常对照组比较,P>0.05;与吗啡急性给药组比较,P<0.01);(3)吗啡戒断组大鼠SCG中pCREB含量明显高于正常对照组(P<0.01);(4)各组大鼠SCG的CREBmRNA表达无差异(P>0.05)。结论慢性吗啡处理大鼠交感神经节CREB磷酸化水平存在适应性上调现象。     

癫痫患者血清S100B、TNF-α、NO及NSE变化研究

目的探讨癫痫患者血清S100B、TNF-α、NO及NSE水平的变化规律。方法选取2009年1月至2011年12月的35例癫痫患者为观察,同时选取同期的35名健康人为对照组,将两组患者的血清S100B、TNF-α、NO及NSE水平进行比较。结果观察组的S100B、TNF-α、NO及NSE水平均高于对照组,且重度患者高于中度及轻度患者,P均<0.05,均有显著性差异。结论癫痫患者血清S100B、TNF-α、NO及NSE水平呈现较高的水平,且重度患者的水平尤其高。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织BDNF与livin的影响

目的研究灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织BDNF与livin的影响,探讨灵芝孢子粉保护癫痫大鼠脑细胞的可能机制。方法对健康雄性Wistar大鼠36只进行建模,随机分成对照组(生理盐水腹腔注射+生理盐水灌胃),模型组(PTZ腹腔注射+生理盐水灌胃),灵芝孢子粉组(PTZ腹腔注射+灵芝孢子粉灌胃),每组各12只,采用免疫组织化学方法检测3组脑组织BDNF与livin水平。结果 BDNF与livin在大鼠皮质区、海马区均可见表达。与对照组和模型组比较,灵芝孢子粉组的BDNF、livin表达水平明显增加(P<0.05)。结论BDNF与livin的表达可能在癫痫发病过程中扮演着重要的角色,推测灵芝孢子粉通过调控BDNF与livin表达来减少脑细胞损伤及凋亡,进而对癫痫脑组织起到保护作用。     

缬沙坦对自发性高血压大鼠肾脏和脑组织中血管紧张素转化酶2表达的影响

目的 研究缬沙坦对自发性高血压大鼠肾脏和脑组织中血管紧张素转化酶2(ACE2)表达的影响,探讨ACE2对肾脏及脑组织中的保护作用.方法 选取24只(♂)12周龄的自发性高血压大鼠(SHR),随机均分为缬沙坦组和SHR组;选取12只正常♂ Wistar大鼠做为对照组.缬沙坦组大鼠ig给予缬沙坦30 mg·kg-1 ·d-1,而SHR组及对照组均给予等量0.9％氯化钠溶液.10周后处死大鼠,取出肾脏及脑组织,HE染色法观察各组大鼠肾脏及脑组织的病理变化,免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测各组大鼠肾脏及脑组织中ACE2的表达差异.结果 与正常大鼠相比,缬沙坦组、SHR组大鼠肾脏及脑组织中ACE2的表达明显减低(P＜0.05);与缬沙坦组相比,SHR组大鼠组织中ACE2的表达较低(P＜0.05).结论 缬沙坦能够上调自发性高血压大鼠肾脏及脑组织中ACE2的表达,并对肾脏及脑组织起保护作用,可能为血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂类药物降压的新机制.     

通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜 p38 MAPK信号通路的影响

目的：观察通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜p38丝裂原活化蛋白激酶（ p38 MAPK）信号通路的影响,探讨其视网膜保护作用的可能机制。方法 KK／Upj-Ay小鼠40只随机分为糖尿病模型组、通心络低、中、高剂量组,每组10只,另设C57BL／6（C57）小鼠10只作为对照组。按照分组给予不同剂量处理因素,疗程3个月,观察体质量,测定空腹血糖（FBG）,取眼球行HE 染色,Western-blot 检测视网膜p38MAPK、JNK、ERK 总蛋白及磷酸化p38MAPK、JNK、ERK（ p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK）的表达。结果与对照组比较,模型组体质量、FBG及p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK表达均显著增高,通心络胶囊能够减轻视网膜病理损伤,降低p-p38 MAPK表达（ P ＜0?．05）,而不影响体质量、FBG及p-JNK、p-ERK表达（ P ＞0．05）;且各组p38MAPK、JNK、ERK 总蛋白表达差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论 p38 MAPK信号通路可能参与了糖尿病视网膜损害的发生发展。通心络胶囊可减轻糖尿病小鼠视网膜病理损伤,其机制可能与降低p38MAPK蛋白磷酸化水平有关。     

醒脑静注射液对癫痫持续状态患者NSE及MMP-9的影响

目的 观察癫痫持续状态患者应用醒脑静注射液治疗后神经元特异性烯醇化酶(NSE)以及血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的动态变化,并通过对比不同患者的预后,探讨醒脑静的治疗意义.方法 随机将74例癫痫持续状态患者分为两组,A组应用地西泮、甘露醇联合醒脑静治疗,B组应用地西泮、甘露醇治疗,分别在用药前以及用药后72小时分别抽血应用ELISA法对患者NSE以及MMP-9水平进行动态检测.选取34例无持续状态发作的癫痫患者作为对照组C组,监测患者血清NSE及MMP-9值作为对照.结果 癫痫持续状态患者血清NSE及MMP-9明显升高(P＜0.05),A组血清NSE及MMP-9在72小时内下降明显快于B组(P＜0.05).结论 癫痫持续状态患者发病后血清NSE及MMP-9迅速升高,醒脑静联合治疗能更好的降低血清NSE及MMP-9,从而说明醒脑静对脑组织起到一定的保护作用.     

高压氧治疗脑卒中后癫痫的临床效果观察

目的：探讨高压氧治疗脑卒中后癫痫的临床效果。方法选取2007—2013年冀中能源峰峰集团总医院收治的脑卒中后癫痫患者128例,随机分为对照组与观察组,各64例。两组患者均给予常规治疗,观察组患者加用高压氧治疗。观察两组患者临床效果、治疗前后血清神经元特异性烯醇化酶（ NSE）水平及不良反应发生情况。结果观察组患者临床效果优于对照组,差异有统计学意义（ P﹤0.05）;治疗前两组患者血清NSE水平比较,差异无统计学意义（P﹥0.05）;治疗后观察组患者血清NSE水平低于对照组,差异有统计学意义（P﹤0.05）;两组患者均未发生严重不良反应。结论高压氧治疗脑卒中后癫痫的临床效果显著,可降低患者血清 NSE水平,且不良反应小。     

液化石油气中毒大鼠脑组织p38MAPK的表达及意义研究

目的 观察p38MAPK在液化气中毒大鼠脑组织中的表达,探讨p38MAPK信号通路在液化气中毒大鼠发病中的作用.方法 采用大鼠液化石油气中毒模型,动物分别于中毒后1、3、7d处死,苏木精-伊红染色观察脑组织神经细胞的形态变化,免疫组化方法检测脑组织p38MAPK的表达水平.结果 大鼠液化石油气中毒后大脑皮质神经元细胞核浓缩、结构不清,可见神经元坏死迹象.免疫组化技术观察显示p38MAPK在急性液化气中毒大鼠脑组织中的表达与正常组比较明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 p38MAPK信号传递途径促进液化石油气中毒诱导的大鼠脑组织神经元坏死,在液化石油气中毒大鼠发病中起重要作用.