应用多重等位基因特异PCR技术进行β地中海贫血的基因诊断

在等位基因特异ＰＣＲ及多重ＰＣＲ的基础上建立了多重等位基因特异ＰＣＲ技术（ＭＡＳＰＣＲ），对中国人常见的－２８Ａ→Ｇ，ＣＤ１７→０，ＣＤ４１－４２（－４ｂｐ）和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）等β地中海贫血基因突变进行检测，应用该技术对２１例β地中海贫血患者或携带者进行基因诊断和２例高风险胎儿进行产前诊断诊断，诊断结果与ＰＣＲ／ＡＳＯ探针点杂交或ＤＮＡ测序的结果完全一致，证实多重等位基因特异ＰＣＲ技术具有简便、快速、可靠和经济等优点。     

中国西北三省区β地中海贫血的基因突变类型及其分布特点

目的总结丝绸之路沿线西北三省区β地中海贫血的基因分析结果，讨论突变类型特点及其分布规律。方法采用ＤＮＡ扩增结合等位基因特异的寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ／ＡＳＯ）技术。结果对８５例β地中海贫血先证者进行了基因分析，从５个民族中共确定１２种基因突变型，除中国人常见的类型外，还首次从该地区检出了ＣＤ８（－ＡＡ）、ＣＤｓ８－９（＋Ｇ）、ＣＤｓ２７－２８（＋Ｃ）杂合子和［－２８（Ａ→Ｇ）。ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）／Ｎ］双重杂合子，其中［－２８（Ａ→Ｇ）、ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）／Ｎ］为同一染色体上的双重基因突变，极为罕见。结论丝绸之路地区β地中海贫血的基因突变类型有明显的地区差异和显著的民族特点，是我国一个较为特殊的地贫分布区域     

一种新的β地中海贫血双重突变杂合体[—28（A→G）.CD17（A→T…

为研究不同民族β地中海贫血的基因突变，作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合等位基因特异性寡核苷酸（ＡＳＯ）探针点杂交技术，对现居新疆的一个布依族家系的β地贫进行了基因分析，发现其中两名成员为－２８（Ａ→Ｇ）和ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）的双重杂合体。结合家系调查表明，为同一染色体上的双重突变，文献中未见报道。这种基因的携带者表现为轻型β地中海贫血，从而为认识β地盆高度的异质性、为研究我国少数民族β地贫的基因背     

用反向点杂交法对广东地区35例重型β地中海贫血患儿及双亲的基因突变研究

为探讨临床对β地中海贫血（β－地贫）的快速基因诊断方法，应用ＰＣＲ反向点杂交（ｒｅｖｅｒｓｅｄｏｔｂｌｏｔ，ＲＤＢ）技术，对广东地区３５例重型β地贫患儿及其双亲的基因突变特征进行了研究。结果显示：（１）广东重型β地贫基因突变可见７种类型：ＣＤ４１－４２（－ＴＣＴＴ），ＩＶＳ２ｎｔ６５４（Ｃ→Ｔ）。ＴＡＴＡｂｏｘ－２８（Ａ→Ｇ），ＣＤ１７（Ａ→Ｔ），βＥ（２６）（Ｇ→Ａ），ＣＤ７１－７２（＋Ａ）及ＣＤ１４－１５（＋Ｇ），其结构比依次为：４０％，２８．６％，１１．４％，７．１％，７．１％，７．１％，４．３％及１．４％，和１３种基因组合形式；（２）基因突变类型不同致临床表型不同，β°纯合子临床多表现重症，发病早（３～６个月），靠输血维持生命；β°／β－（Ｅ或－２８）双重杂合子多表现中间型或重型，发病年龄较晚，贫血较轻，输血较少，ＰＣＲ－ＲＤＢ技术不需依赖同位素、操作简便、快速，宜于临床推广应用。     

一种新的β地中海贫血双重突变杂合体［－28（A→G）·CD17（A→T）／N］

为研究不同民族β地中海盆血（β地贫）的基因突变，作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合等位基因特异性寡核苷酸（ＡＳＯ）探针点杂交技术，对现居新疆的一个布依族家系的β地贫进行了基因分析，发现其中两名成员为－２８（Ａ→Ｇ）和ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）的双重杂合体。结合家系调查表明，为同一染色体上的双重突变，文献中未见报道。这种基因的携带者表现为轻型β地中海贫血。从而为认识β地贫高度的异质性、为研究我国少数民族β地贫的基因背景，积累了有意义的资料。     

α—地中海贫血的基因检测与诊断

α－地中海贫血（α－地贫）是严重危害人类健康的遗传病，其基因背景正不断被揭示，具有遗传异质性。目前检测患及其携带的水平正确正不断提高。随着ＤＮＡ分析技术的不断发展，α－地贫的基因诊断日臻完善，本就α－地贫的基因检测检测的ｇａｐ－ＰＣＲ，Ｍ－ＰＣＲ，ＰＣＲ－ＡＳＯ，ＡＲＭＳ，ＡＣＲＳ，ＤＧＧＥ，ＲＤＢ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ等方法进展作一综述。     

中国人β地中海贫血的分子基础及产前诊断

β地中海贫血是一组高度异质性的遗传性血液病。中国人中已发现２１种β地贫基因，其突变类型包括碱基替代、小的缺失和插入。我国南方常见的类型是密码子（ＣＤ）４１－４２（－ＴＣＴＴ）移码突变，ＩＶＳ－２ｎｔ６５４（Ｃ→Ｔ）突变，ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）突变，ＴＡＴＡ盒ｎｔ—２８（Ａ→Ｇ）突变和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）移码突变，其基因频率分别为４１．６％、２１．８％、１８．０％和８．０％及３。９％。β地贫的突变类型及频率分布具有明显的地域差异和种族特征。近年来，由于β地贫分子病理的阐明及ＰＣＲ扩增技术结合各种先进的．点突变检测方法的应用和发展，使β地贫的产前基因诊断已逐步走向临床。目前，在应用于这种高度异质性遗传病的各种分子诊断方法中，快速简便的反向点杂交（ＲＤＢ）技术引人注目。     

四例维吾尔族β地中海贫血CD8（－AA）突变型

在新疆喀什市进行地中海贫血调查时，应用聚合酶链反应结合等位基因的特异的寡核苷酸探针杂交技术，在４例无亲缘关系的维吾尔族学生中检出β地中海贫血ＣＤ８（－ＡＡ）杂合子。这种突变型在我国人中系首次发现，而在维吾尔族中的频率较高。现报告先证者的临床血液学资料和基因分析结果，并对它的分布特点和意义进行初步讨论。     

应用MOEA技术快速诊断β-地中海贫血基因突变

β－地中海贫血（β－地贫）是我国南方诸省常见的遗传性血液病之一。由于目前对β－地贫尚缺乏有效的疗法，故开展产前诊断杜绝重型患儿的出生，是预防该病、提高我国人口素质的有效措施。聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合等位基因特异性寡核苷酸探针（ＡＳＯ）斑点杂交技术是...     

四例维吾尔族β地中海贫血CD8（—AA）突变型

在新疆喀仁市进行地中海贫血调查时，应用聚合酶链反应结合等位基因的特异的寡核苷酸探针杂交技术，在４例无亲缘关系的维吾尔族学生中检出β地中海贫血ＣＤ８（－ＡＡ）杂合子，这种突变型在我国人中系首次发现，而在维吾尔族中的频率较高。现报告先证者的临床血液学资料和基因分析结果，并对它的分布特点和意义进行初步讨论。     

β-地中海贫血产前基因诊断的临床应用研究

目的 探讨多重等位基因特异PCR基因诊断β－地中海贫血的临床应用价值。方法 选择四川人群中的5种突变热点（CD41－42，CD17，nt-28,nt-29,IVS-Ⅱ 654），对29个家系中的β－地中海贫血贫血患儿及其家庭成员进行了检测，共89例，其中羊水产前诊断6例。结果 异常染色单体数99条，其中未知突变15条，可诊断率84．7％。产前基因诊断中11例为单个突变的杂合子，4例双重杂合子，1例胎儿基因型为CD17／N或CD17／U。结论 多重等位基因特异PCR可用于四川地区临床β－地中海贫血高风险胎儿的产前基因诊断。     

用反向点杂交法对广东地区35例重型β地中海贫血患和及双…

为探讨临床对β地中海贫血的快速基因诊断方法，应用ＰＣＲ反向点杂交技术，对广东地区３５例重型β地贫患儿及其双亲的基因突变特征进行了研究。结果显示：（１）广东重型β地贫基因突变可见７种类型：ＣＤ４１－４２，ＩＶＳ２ｎｔ６５４，ＴＡＴＱＡ ｂｏｓ－２８，ＣＤ１７，βＥ＾２６，ＣＤ７１－７２及ＣＤ１４－１５，其结构比依次为：４０％，２８．６％，１１．４％，７．１％，７．１％，７．１％，４．３％及１．４％，     

用PCR单链构象多态性快速判别个体间HLA－DP相容性并检出新等位基因

先确定和比较ＨＬＡ纯合细胞ＤＰＡＩ和ＤＰＢＩ基因ＰＣＲ扩增产物的单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ），然后分析了２０对无血缘关系个体单链ＤＮＡ及其两两混合状态下的构象多态性变化，在分子水平测定异体间ＤＰ匹配性，并和已有的ＤＰ基因分型（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）格局相比较，结果表明，ＲＦＬＰ不同的个体其ＳＳＣＰ必定不同；而ＲＦＬＰ相同的个体，ＳＳＣＰ一般相同，但有例外。从例外个体异常的ＳＳＣＰ格局中发现了新ＤＰ等位基因。本研究证实ＰＣＲ－ＳＳＣＰ在检测等位基因之间微小差异方面十分敏感，并具有简单、快速、经济等优点，对移植中的ＤＰ交叉配型有实际应用价值。     

应用MAS PCR技术诊断β地中海贫血

本文应用多重等位基因特异ＰＣＲ技术，对４种常见的β地贫进行基因诊断，成功地对２例β患者进行基因诊断和１例β地贫高危胎儿进行产前诊断。结果表明多重等位基因特异ＰＣＲ人有简便、快速、准确和经济等优点，利于推广应用。     

用基因工程表达的抗原早期诊断鼻咽癌

目的为了建立鼻咽癌（ＮＰＣ）早期诊断方法。方法以基因工程表达的、经纯化的ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｖｉｒｕｓ，ＥＢＶ）早期抗原（ＥＡ）成分ＥＡ－Ｄ和ＥＡ－Ｒ作为诊断抗原，建立了酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），检查３０例ＮＰＣ病人及４９例正常人血清中的ＥＡ／ＩｇＡ抗体。结果用ＥＬＩＳＡ检测抗体较用细胞涂片免疫酶方法（ＩＥ）敏感。ＥＬＩＳＡ检测ＮＰＣ病人血清中ＥＡ／ｌｇＡ抗体，阳性率为１００％，ＥＡ／ｌｇＡ抗体效价均≥１∶１００。而用ＩＥ法，平行检测３０例ＮＰＣ病人血清中ＥＡ／ｌｇＡ抗体效价，结果６例为阴性（＜１∶１０），抗体阳性率为７０％。ＥＬＩＳＡ明显地提高了ＮＰＣ的检出率。以ｐ１３８（ＥＡ－Ｒ）和ｐ５４（ＥＡ－Ｄ）分别或混合包被，检测对ＥＢＶ特异的ＥＡ－Ｄ和ＥＡ－Ｒ的抗体。结论表明在ＮＰＣ病人血清中存在对ＥＡ两种抗原的抗体，对ＥＡ－Ｄ的抗体滴度高于对ＥＡ－Ｒ的抗体。因此，以两种抗原混合包被作为诊断抗原建立的ＥＬＩＳＡ方法，为ＮＰＣ的早期诊断提供更敏感、特异和简便的手段。     

中国人β地中海贫血的分子基础及产前诊断

β地中海贫血是一组高度异质性的遗传性血液病。中国人中已发现２１种β地贫基因，其突变类型包括碱基替代、小的缺失和插入。我国南方常见的类型是密码子（ＣＤ）４１－４２（－ＴＣＴＴ）移码突变，ＩＶＳ２ｎｔ６５４（Ｃ→Ｔ）突变，ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）突变，ＴＡＴＡ盒ｎｔ－２８（Ａ→Ｇ）突变和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）移码突变，其基因频率分别为４１．６％、２１．８％、１８．０％和８．０％及３．９％。     

中国南方汉族人群HLA—DQA1位点多态性与系统性红斑狼疮易感…

应用多聚酶链反应／序列特异寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ／ＳＳＯＰＨ）方法，探讨了我国东南沿海汉族人群ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因多态性与系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的易感性关系，对５０例ＳＬＥ患者和６７例健康人对照血样本分析，表明ＳＬＥ患者具有显著高的ＤＱＡ１＊０１０２等位基因频率，ＯＲ＝４６．０４，Ｐ＜０．００１，可能是一易感等位基因，而ＤＱＡ１＊０５０１在病例与对照中呈相反结果，ＯＲ＝０．０４２，Ｐ＝０。     

HLA—DRB1＊04等位基因亚型的DNA分型

采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）检测我国汉族人群ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４等位基因亚型频率，并与白种人群进行比较。利用５′端公用引物与３′端８个特异性引物进行ＰＣＲ反应，可准确分辨出１１个ＤＲＢ１＊０４等位基因，耗时４小时，无假阳性和假阴性结果。８５份随机样本的分型结果显示，我国汉族人群ＤＲＢ１＊０４基因亚型的频率与白种人之间存在非常显著性差异。     

PCR/SSP结合PCR/SSCP分析湖南汉族HLA-DQA1等位基因多态性

为准确阐明湖南汉族群体ＨＬＡ－ＤＱＡ１遗传多态性,采用ＰＣＲ／ＳＳＰ方法,并联合应用可同时区分ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１０１～０６０１等位基因的银染ＰＣＲ／ＳＳＣＰ技术对６０例随机选择的湖南汉族健康者作ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因分型。结果表明,湖南汉族存在...     

中国湖北汉族重症肌无力与HLA-Ⅱ类等位基因的关联

目的和方法：探讨中国湖北汉族重症肌无力（ＭＧ）患者与ＨＬＡ－Ⅱ类等位基因的关联。利用ＰＣＲ／ＳＳＰ和ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术对湖北地区９１例ＭＧ患者进行ＨＬＡ－Ⅱ类（ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＤＱＢ１和ＤＰＢ１）基因型别分析,民１６８例正常个体比较。结果：患者组（１）：ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０９０１、ＤＱＢ１＊０３０３和ＤＰＢ１＊０５０１等位基因频率明显高于对照组,ＲＲ值分别为４．１２、３．０４和３．０１,Ｐ〈０