基质金属蛋白酶9和血管内皮生长因子表达在大鼠肺血栓栓塞症模型肺损伤中的作用

目的 通过颈外静脉注入自体血栓建立大鼠急性肺血栓栓塞症(pulmonarythromboembolism,PTE)模型,观察急性PTE后基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平变化和表达,及其在PTE后肺组织病理改变中的作用.方法 56只健康雄性SD大鼠随机均分为PTE组及假手术(sham)组.于制模后2 h、6 h、24 h及72 h处死大鼠.应用苏木精-伊红染色方法观察肺组织病理改变.采用酶联免疫吸附试验法测定血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中MMP-9和VEGF浓度;考马斯亮兰法测定BALF中总蛋白浓度并进行细胞计数;免疫组织化学染色观察MMP-9和VEGF在肺组织中的表达.结果 ①病理结果:PTE组栓塞区肺组织有肺损伤改变;sham组未见上述病理变化;②血清学结果:PTE组MMP-9和VEGF浓度在6 h、24 h和72 h显著高于sham组(P<0.01);③BALF结果:PTE组MMP-9浓度24 h时显著高于sham组(P<0.01);VEGF 2 h和24 h均显著高于sham组(P<0.05,P<0.01);PTE组BALF中总蛋白浓度和细胞数2 h和24 h组均显著高于sham组(P值均<0.01);④免疫组织化学结果:显示PTE组MMP-9和VEGF表达显著高于sham组.结论 急性PTE可引起肺损伤.PTE可引起血液中MMP-9和VEGF细胞因子释放及其肺组织中显著表达,促进炎性细胞和蛋白渗出,参与PTE相关肺损伤的发生.     

不同剂量沙美特罗替卡松联合川芎嗪对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织炎症的影响

目的探讨ICS/LABA联合川芎嗪对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺部炎症的干预作用。方法 70只Wistar大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、川芎嗪组(C组)、中剂量ICS/LABA组(D组)、中剂量ICS/LABA联合川芎嗪组(E组)、高剂量ICS/LABA组(F组)、高剂量ICS/LABA联合川芎嗪组(G组),每组10只。采用烟熏加气管内注入脂多糖(LPS)法建立COPD模型。吸入ICS/LABA中、高2个剂量及川芎嗪腹腔注射进行干预。观察大鼠肺功能及肺组织病理变化,流式细胞术测定血中CD4、CD8值,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子β1(TGF-β1)表达,免疫组化法测定肺组织中金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、分泌性白细胞蛋白酶抑制物(SLPI)的表达,RT-PCR法检测肺组织中MMP-9 mRNA的表达。结果 B组大鼠肺泡壁破坏,肺大疱形成,间质内大量炎性细胞浸润,符合COPD肺组织病理改变,各干预组均有所减轻;B组大鼠MMP-9及其mRNA相对含量、TGF-β1浓度比A组大鼠显著升高;CD4/CD8比A组大鼠明显降低。经ICS/LABA及川芎嗪干预后,各组大鼠MMP-9及其mRNA相对含量、TGF-β1浓度与B组大鼠相比有明显降低(P<0.05);CD4/CD8、SLPI比B组大鼠有显著提高(P<0.05),以G组疗效最明显(P<0.05)。相关分析表明,MMP-9与第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)/用力肺活量(FVC)呈负相关(r=0.861 3,P<0.01);SLPI与FEV0.3/FVC呈正相关(r=0.832 1,P<0.01)。结论 ICS/LABA和川芎嗪均可抑制COPD大鼠肺部炎症,高剂量ICS优于低剂量ICS,且联合用药比单独用药疗效显著,其机制可能是通过降低TGF-β1、MMP-9水平并调节SLPI及CD4、CD8的表达而实现。     

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠HMGB1、MMP-2、MMP-9的影响

目的观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠高迁移率族蛋白(HMG)B1、基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9的影响。方法随机将70只SD大鼠分为7组,每组10只,分别为正常组、模型组、二陈汤组、消咳喘组、二陈汤加味低、中、高剂量[10、20、40 g/(kg·d)]组。以烟熏及气管滴注脂多糖(LPS)的方法制备COPD大鼠模型。成功造模之后,治疗组灌胃给药,正常组与模型组则灌胃等体积纯水。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠血清、支气管肺泡灌洗液和肺组织匀浆液中MMP-2、MMP-9的浓度。Western印迹检测肺组织HMGB1的蛋白表达。结果与正常组相比,模型组肺组织中MMP-2、MMP-9水平显著升高(P<0.05)。模型组肺组织HMGB1蛋白水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,各治疗组肺组织中MMP-2、MMP-9水平均有不同程度降低(P<0.05)。各治疗组肺组织HMGB1蛋白水平均有不同程度降低(P<0.05)。结论二陈汤加味可能通过降低MMP-2、MMP-9的含量,抑制HMGB1的蛋白表达,从而减轻COPD大鼠肺组织炎症及肺血管重构的进程,减缓COPD及其并发症的进展。     

吸入盐酸氨溴索对烟雾暴露大鼠COPD的防治效应研究

目的观察盐酸氨溴索(AMB)注射液对吸烟引致大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)的干预效果。方法2006年3月至8月,在哈尔滨医科大学第一临床医学院呼吸内科应用单纯吸烟法引致大鼠COPD模型,雾化吸入AMB进行干预。对各组进行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数;测定BALF中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的质量浓度;定量分析肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)、肺泡腔面积与总面积比(PAA)、肺内弹力纤维的相对面积。结果COPD组BALF中MMP-9、IL-8及TNF-α与BALF中白细胞总数、中性粒细胞百分比、中性粒细胞绝对计数均呈正相关;COPD组大鼠肺内弹力纤维受到严重破坏,MLI、PAA高于对照组,MAN和弹力纤维的相对面积低于对照组,BALF中MMP-9、IL-8及TNF-α的质量浓度均明显高于对照组;AMB组BALF中IL-8、TNF-α、MLI、PAA及MAN均介于其他2组之间,而弹力纤维的相对面积、MMP-9质量浓度与COPD组差异无显著性意义。结论单纯吸烟可导致大鼠COPD,气道和肺泡内的MMP-9、IL-8和TNF-α均可能参与了弹力纤维的破坏和COPD的形成过程。AMB在一定程度上可抑制COPD大鼠气道及肺泡内的IL-8和TNF-α释放。     

慢性阻塞性肺疾病患者肺泡灌洗液中皮质抑素的表达和意义

目的探讨皮质抑素在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)患者肺泡灌洗液中的表达及其意义。方法选择我院收治的慢性阻塞性肺病患者39例,按肺功能分为中度组(23例)和重度组(16例),选择因自觉胸痛、无吸烟史、自愿行支气管肺泡灌洗的健康者15例为对照组。对3组对象进行支气管肺泡灌洗,检测比较3组对象的血清C反应蛋白水平及肺泡灌洗液(BALF)中的皮质抑素水平;检测比较3组对象BALF中嗜中性粒细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞占细胞总数的百分比。结果 COPD中度组及重度组患者血清C反应蛋白水平和BALF中皮质抑素水平均显著高于对照组,COPD重度组患者血清C反应蛋白水平和BALF中皮质抑素水平均显著高于COPD中度组,差异有统计学意义(P 0. 05)。COPD中度组及重度组患者BALF嗜中性粒细胞百分比均显著高于对照组,巨噬细胞百分比均显著低于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论皮质抑素在慢阻肺患者肺泡灌洗液中的表达显著增加,可能参与了患者气道炎症的反应过程。     

H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用

目的探讨H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用。方法观察正常对照组、COPD模型组及松弛素治疗组大鼠肺组织的病理变化,比较各组大鼠支气管壁及平滑肌厚度,检测基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达水平及MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值。结果与正常对照组大鼠相比,COPD模型组大鼠肺支气管壁及平滑肌厚度显著增厚,且松弛素治疗组大鼠肺支气管壁厚度及平滑肌厚度与COPD模型组大鼠相比显著降低(P0.05)。COPD模型组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达水平均高于正常对照组(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与正常对照组相比,呈现明显升高趋势(P0.05);而对比COPD模型组大鼠,松弛素治疗组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达有所降低(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与COPD模型组相比均降低(P0.05)。结论松弛素能抑制大鼠肺组织结构病理变化,抑制COPD气道平滑肌的增殖。     

慢性阻塞性肺疾病气道炎症与肺泡巨噬细胞炎症蛋白1α、明胶酶B活性的研究

目的探讨慢性支气管炎(慢支炎)及慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺泡巨噬细胞(AM)培养上清液中巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)、明胶酶B(MMP-9)的浓度变化.方法用支气管肺泡灌洗技术收集BALF,用ELISA方法测定13例COPD组患者、14例慢支炎组患者和14名正常对照组的BALF和AM培养上清液的MIP-1α、MMP-9浓度.结果慢支炎组及COPD组BALF及AM培养上清液的MIP-1α、MMP-9浓度高于正常对照组(P均<0.05).BALFMIP-1α、MMP-9浓度分别与AM培养上清液MIP-1α、MMP-9浓度呈正相关(r=0.253,P<0.05;r=0.529,P<0.01).BALF中AM数与MIP-1α、MMP-9浓度呈正相关(r=0.558,P<0.01;r=0.405,P<0.01).结论AM是COPD患者肺内MIP-1α、MMP-9的主要细胞来源,MIP-1α及MMP-9通过促进AM等炎症细胞在肺内的聚集而参与了慢支炎及COPD的炎症过程.     

辛伐他汀对膝骨关节炎大鼠MMP-3、MMP-9、TGF-β1表达的影响及作用机制

目的探讨辛伐他汀对膝骨关节炎大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、转化生长因子(TGF)-β1表达水平的影响及其作用机制。方法 40只胶原诱导膝骨关节炎造模成功的大鼠随机分为模型组和低剂量组、中剂量组和高剂量组,另选取10只未造模大鼠作为对照组。分别给予低、中、高剂量组0.01、0.1、0.5 mg/ml辛伐他汀稀释液灌胃,剂量为0.2 ml/kg,同时给予对照组和模型组同等剂量无菌生理盐水灌胃。6 w后处死,采用免疫组化法检测组织中Caspase-3表达情况。对比5组给药前、3 w和6 w后血清MMP-3、MMP-9和TGF-β1水平变化及Caspase-3表达情况。结果用药前对照组血清MMP-3、MMP-9和TGF-β1表达水平均较其他各组显著降低(P<0.05),3 w后和6 w后对照组和模型组血清因子水平均无显著变化(P>0.05),而低、中、高剂量组均随着用药时间延长而显著降低(P<0.05),3 w和6 w后各项指标水平按照由高到低排列为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组,且每两组间差异均有统计学意义(P<0.05);高剂量组Caspase-3 OD值远远高于中剂量组和低剂量组(P<0.05),中剂量组远远高于低剂量组(P<0.05),低剂量组较对照组和模型组高(P<0.05),对照组和模型组无显著差异(P>0.05)。结论辛伐他汀可改善膝骨关节炎大鼠血清MMP-3、MMP-9和TGF-β1水平,在一定范围内剂量越高作用效果越好,推测可能和Caspase-3异常激活有关。     

他汀类药物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症及黏液高分泌的作用及机制

目的探讨他汀类药物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道炎症及黏液高分泌的作用及机制。方法通过烟熏和气管注入脂多糖建立大鼠COPD模型。将21只SD大鼠随机分为对照组、COPD组、辛伐他汀组,每组7只。对照组、COPD组每日用生理盐水灌胃1次,剂量为1 ml/100 g;辛伐他汀组每日用0.5 g/L的辛伐他汀溶液按1 ml/100 g剂量灌胃1次。检测大鼠肺功能指标,苏木素-伊红(HE)染色观察支气管和肺组织的病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液中细胞因子白细胞介素(IL)-8、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;免疫组化法检测肺组织中核转录因子(NF)-κB、黏附分子1、黏蛋白5AC、Toll样受体(TLR)4的表达;Western印迹和RT-PCR检测肺组织黏蛋白5AC、TLR4蛋白和mRNA的表达。结果辛伐他汀组大鼠肺功能指标明显高于COPD组,低于对照组(P<0.01);辛伐他汀组大鼠病理学改变较COPD组明显减轻。COPD组大鼠BALF中IL-8、IL-17、TNF-α含量明显高于辛伐他汀组和对照组,辛伐他汀组明显高于对照组(P<0.01)。COPD组、辛伐他汀组大鼠肺组织中NF-κB、黏附分子1、黏蛋白5AC、TLR4水平均明显高于对照组而低于COPD组(P<0.01)。COPD组大鼠组织黏蛋白5AC、TLR4蛋白和mRNA表达量均明显高于对照组,辛伐他汀组明显低于COPD组(P<0.01);辛伐他汀组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论辛伐他汀可有效降低COPD大鼠的气道炎性反应,抑制气道黏液高分泌,主要通过抑制NF-κB下游信号通路和TLR4/NF-κB信号通路来实现。     

益气活血方对急性心肌缺血大鼠模型MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的观察益气活血方对急性心肌缺血大鼠模型基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶特异性抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法应用结扎冠状动脉左前降支方法建立Wistar大鼠急性心肌缺血模型,运用HE染色观察其病理改变,同时以ELISA法和SP免疫组化法检测血清TIMP-1含量及心肌组织中MMP-9的阳性表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠出现显著的心肌缺血损伤的病理形态;与模型组比较,各药物干预组均可增加心肌缺血后大鼠血清TIMP-1含量(P<0.05),中药高剂量组血清TIMP-1含量显著高于低剂量组和阳性对照组(P<0.01);与模型组比较,各药物干预组大鼠心肌组织中MMP-9表达较有明显降低(P<0.01)。结论益气活血方对大鼠缺血心肌有显著的保护作用,其作用机制可能与影响TIMP-1及MMP-9的表达有关。     

吡非尼酮逆转博来霉素诱导大鼠PIF的疗效及对TGF-β1、caspase-3的影响

目的探讨吡非尼酮治疗博来霉素诱导大鼠肺纤维化(PIF)的效果及对大鼠肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、凋亡相关蛋白caspase-3的影响。方法选取SPF级成年SD大鼠72只,采用随机数字表法分为空白组(等量生理盐水处理)、模型组(等量生理盐水处理)、阳性对照组(强的松0.6 mg/100 g/d)、实验组(500 mg/kg/d)各18只,连续干预4周,检测各组大鼠血清中肺纤维化相关指标,采用免疫组化染色检测并肺组织中TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白的表达程度,采用RT-PCR方法检测TGF-β1 mRNA表达程度。结果模型组大鼠的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、肺泡灌洗液中IL-6、IL-8水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、肺泡灌洗液中IL-6、IL-8水平显著的低于模型组(P0.05);模型组大鼠的肺组织中SOD、GSH-px显著的高于空白组(P0.05),MDA、iNOS显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织中SOD、GSH-px显著的高于模型组(P0.05),MDA、iNOS显著的低于模型组(P0.05);模型组大鼠的TGF-β1 mRNA表达水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织TGF-β1 mRNA表达水平低于模型组(P0.05);模型组大鼠的TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白表达水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白表达水平低于模型组(P0.05)。结论吡非尼酮治疗博来霉素诱导的大鼠PIF具有一定的效果,主要与增强抗氧化能力,降低血清中纤维化指标、炎症反应程度、TGF-β1和caspase-3表达有关。     

姜黄素对COPD大鼠IL-1β和IL-17的影响

目的 探讨姜黄素干预对COPD大鼠IL-1β和IL-17水平的影响.方法 将雄性SD大鼠38只随机分为正常对照组、COPD模型组、姜黄素干预组和溶剂对照组,采用香烟烟熏加气管内注射脂多糖方法建立COPD大鼠模型,并按照分组情况对大鼠进行干预.干预结束后计数BALF中的炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量,HE染色观察大鼠气道炎症及肺气肿程度,酶联免疫吸附测定检测血清和BALF中IL-1β、IL-17含量,实时荧光定量聚合酶链式反应检测肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平.结果 与正常对照组比较,COPD模型组BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量均显著升高(P＜0.05);姜黄素干预组大鼠BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量较COPD模型组降低(P＜0.05).组织病理学显示COPD模型组大鼠小气道周围大量炎症细胞聚集、肺泡腔扩张,姜黄素干预可减轻小气道周围炎症细胞聚集及肺泡腔扩张.与正常对照组相比,COPD模型组大鼠血清和BALF中IL-1β、IL-17含量升高,肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平上调,差异有统计学意义(P＜0.05).姜黄素干预后COPD大鼠血清和BALF中IL-1β、IL-17含量下降,肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平降低,与COPD模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素对COPD具有保护作用,其机制可能与抑制IL-1β、IL-17炎症因子释放有关.     

基质金属蛋白酶9在老年肺癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9在老年肺癌中的表达及临床意义。方法选取肺癌患者32例为肺癌组及40例健康受试者作为对照组。观察肺癌组与对照组的MMP-9及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1表达及肺癌组中MMP-9及TIMP-1的表达与临床特征的关系。结果肺癌组患者血清MMP-9水平显著高于对照组(t=39.440,P<0.001);肺癌组患者血清TIMP-1水平显著高于对照组(t=14.700,P<0.001);肺癌组患者MMP-9/TIMP-1比值显著高于对照组(t=7.487,P<0.001)。肺癌组患者随着临床分期增加血清MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值逐渐升高,而TIMP-1水平逐渐下降。病理分级低、肿瘤发生淋巴结转移及肿瘤体积大于3 cm均导致MMP-9及TIMP-1进一步升高。结论 MMP-9及TIMP-1在肺癌患者中表达升高,且随着临床分期及肿瘤侵袭性行为而升高。     

基于Wnt/PCP通路HSG过表达对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道重建的作用机制研究

目的分析细胞增殖抑制基因(HSG)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重建的作用及对Wnt/平面细胞极性(PCP)通路的影响。方法取40只SD大鼠气道内注射脂多糖联合烟熏法,建立COPD模型,随机分为模型组、过表达组、空载组、Wnt/PCP抑制组,每组10只。另取10只健康大鼠为对照组。对比各组肺功能指标;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF)中PDGF、TGF-β1、MMP-9水平;HE染色观察肺组织病理变化;组织块贴壁法培养大鼠气道成纤维细胞;实时荧光定量PCR及Western blot检测各组成纤维细胞HSG、Wnt、RhoA、JNK mRNA及蛋白表达情况。结果 HSG过表达后,与模型组和空载组比较,过表达组气道阻力减小,肺顺应性、PEF升高,PDGF、TGF-β1、MMP-9水平降低(P0.05),与Wnt/PCP抑制组比较差异无统计学意义(P0.05)。HE染色显示,过表达组病理改变较模型组与空载组轻,与Wnt/PCP抑制组相当。与模型组、空载组和Wnt/PCP抑制组比较,过表达组成纤维细胞中HSG mRNA及蛋白相对表达量升高(P0.05);与模型组、空载组比较,过表达组Wnt7a、RhoA mRNA和蛋白相对表达量及p-JNK/JNK降低(P0.05),与Wnt/PCP抑制组比较升高(P0.05)。结论 HSG过表达可改善COPD大鼠肺功能,延缓病理变化,抑制气道重建,其机制可能与抑制Wnt/PCP通路的激活有关。     

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1及基质金属蛋白酶-9与细胞黏附因子表达的关系

目的 研究COPD患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白和mRNA的分布和表达,探讨其与气流阻塞的关系及吸烟对其影响.方法 取39例因肺癌行肺叶切除的癌旁肺组织标本,其中不吸烟不伴COPD组(A组)9例、吸烟不伴COPD组(B组)11例、吸烟伴COPD组(C组)19例.用免疫组化和逆转录聚合酶链反应方法检测TIMP-1、MMP-9、ICAM-1的蛋白和mRNA表达,并进行相关性分析.结果 MMP-9表达于肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、间质细胞,C组MMP-9免疫组化阳性细胞数(54.0±15.0)明显高于A组和B组(1.2±0.7和1.4±0.8);TIMP-1蛋白表达的主要部位为肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞、血管平滑肌细胞,C组弱表达,A组和B组无表达;ICAM-1主要表达于肺泡上皮细胞,C组ICAM-1免疫组化阳性细胞数(52.1±13.4)明显高于A组和B组(2.1±1.1和4.5±2.4).C组MMP-9、TIMP-1、ICAM-1的mRNA平均吸光度值(0.71±0.16、0.47±0.10、0.62±0.15)明显高于A组(0.17±0.05、0.20±0.06、0.37±0.11)和B组(0.20±0.08、0.26±0.08、0.44±0.12).C组肺组织TIMP-1、MMP-9与ICAM-1的mRNA表达水平呈直线正相关,MMP-9与ICAM-1蛋白表达水平呈显著正相关.MMP-9和ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平、TIMP-1的mRNA表达水平与FEV1占预计值%、FEV1/FVC占预计值%均呈显著负相关.结论 TIMP-1、MMP-9和ICAM-1在促进炎性细胞迁移进入细胞外基底膜及气道上皮细胞,导致肺组织破坏和重塑,引起及加重COPD患者的气流阻塞中起着重要作用.     

慢性阻塞性肺疾病大鼠血清和肺组织中IL-10、TNF-α及IFN-γ的表达及意义

目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血清和肺组织中白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α及γ-干扰素(IFN-γ)的表达及意义。方法 8周龄SD大鼠70只,根据数字随机表法分成观察组以及对照组各35只,将观察组大鼠制成COPD模型,对照组则常规预处理,对比两组血清以及肺组织的IL-10、TNF-α及IFN-γ水平,检测肺平均内衬间隔(MLI)和平均肺泡数(MAN)、肺泡腔的面积与总面积的比值(PAA)气道阻力和肺顺应性等肺功能指标。结果观察组的血清和肺组织的IL-10及IFN-γ水平均明显低于对照组,TNF-α水平明显高于对照组(P<0.05)。观察组的MLI、PAA及气道阻力水平明显高于对照组,MAN及肺顺应性水平明显低于对照组(P<0.05);COPD大鼠的IL-10和IFN-γ分别与MLI、PAA及气道阻力呈负相关,与MAN及肺顺应性呈正相关;TNF-α分别与MAN及肺顺应性呈负相关,与MLI、PAA及气道阻力呈正相关(均P<0.05)。结论 COPD大鼠的血清及肺组织的IL-10及IFN-γ水平明显降低,而TNF-α水平明显上升,炎症反应与肺功能之间具有十分紧密的关联。     

痰上清液MMP-9、TIMP-1与慢性阻塞性肺疾病气道炎症的关系

目的探讨痰上清液基质金属蛋白酶(MMP)-9及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症的关系。方法 COPD急性期患者47例,COPD稳定期患者50例,同期健康体检者50例为健康对照组,均采集痰液计算痰细胞总数,离心处理后经细胞涂片瑞氏染色计算每类细胞数,包括中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(Lym)、巨噬细胞(Macro)及嗜酸性细胞(Eos),同时采用双抗体夹心法对痰上清液MMP-9与TIMP-1进行检测,分析COPD急性期MMP-9、TIMP-1与气道炎症的相关性。结果 COPD患者的细胞总数、Neu、Lym、Macro、Eos明显高于对照组(P<0.05),急性期组细胞总数、Neu、Neu/白细胞计数(WBC)明显高于稳定期组(P<0.05),而Lym/WBC、Macro/WBC、Eos/WBC明显低于稳定期组与对照组(P<0.05);急性期组的痰MMP-9、TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1比值均明显高于稳定期组与对照组(P<0.05),且稳定期组明显高于对照组(P<0.05);COPD急性期痰上清液中除TIMP-1外,MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1均与Neu、Lym、Macro及Eos呈正相关(P<0.05)。而COPD稳定期仅痰上清液TIMP-1与Macro呈正相关(P<0.05)。结论 MMP-9与COPD气道炎症的关系紧密,TIMP-1与MMP-9水平失衡可能是COPD急性发作的重要原因。     

中药心康方对大鼠心力衰竭模型心肌胶原代谢的影响

目的观察中药心康方对大鼠心力衰竭模型心肌胶原代谢的影响。方法阿霉素腹腔注射法建立大鼠心力衰竭模型,随机分为对照组(10只)、模型组(9只)、心康方组(9只)和卡托普利组(9只)。Masson染色观察心肌胶原变化,Western blot检测心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原、转化生长因子β1(TGF-β1)、核因子κB的抑制蛋白(IκB)和p56的表达,Western blot和RT-q PCR分别检测心肌基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达显著增加,胶原容积分数显著升高(均为P<0.01);TGF-β1和p56表达显著增加,IκB显著降低(均为P<0.05);MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,心康方组和卡托普利组大鼠的心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达显著减少,胶原容积分数显著降低(均为P<0.01);TGF-β1和p56显著降低,IκB显著升高(均为P<0.05);MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论中药心康方可减轻心力衰竭大鼠的心肌胶原沉积,其机制可能与抑制核因子κB介导的TGF-β1上调有关。     

压力负荷下血管紧张素Ⅱ对心肌基质金属蛋白酶和纤连蛋白的影响

目的探讨压力负荷下心肌组织基质金属蛋白酶家族(MMPs)MMP-2、3、9与其抑制物-1(TIMP-1)的变化,及血管紧张素受体拮抗剂对MMP-2、3、9、TIMP-1及细胞外基质纤连蛋白(fibronectin,FN)的影响。方法腹主动脉缩窄法建立大鼠超压力负荷模型,实验动物分为手术组(n=8);缬沙坦(val-sartan)组(n=8):手术组 缬沙坦(1 mg/kg.d);PD123319组(n=8):手术 PD123319(30 mg/kg.d)组;假手术组(n=8)。免疫沉淀法检测心肌组织MMP-2、3、9及TIMP-1,免疫荧光检测FN分布。结果大鼠术后14 d,缬沙坦组血浆AngⅡ浓度显著高于假手术组及PD123319组(P<0.05),缬沙坦组心肌AngⅡ浓度则低于假手术组及PD123319组(P<0.05)。手术组MMP-2、3、9蛋白表达显著高于假手术组(P<0.01),手术组TIMP-1、FN蛋白表达显著低于假手术组(P<0.01);缬沙坦组MMP-2、3、9显著低于手术组及PD123319组(P<0.05),缬沙坦组TIMP-1、FN显著高于手术组及PD123319组(P<0.05)。MMP-2、3、9、TIMP-1及FN蛋白表达在手术组与PD123319组间差异没有显著性(P>0.05)。结论超压力负荷下,心肌组织MMP-2、3、9表达量的增高,细胞外基质FN,参与心肌重构的病理过程,主要通过AT1起作用。     

PTEN在支气管哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的 探讨PTEN在支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道炎症中的作用.方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为2组,对照组和哮喘组.以卵清白蛋白致敏激发法复制大鼠哮喘模型,每只大鼠左肺留取肺组织,右肺进行支气管肺泡灌洗并留取支气管肺泡灌洗液(BALF).对BALF进行细胞分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich ELISA)法测定BALF中IL-4、IL-12浓度;采用免疫组织化学法和Western blot法测定PTEN蛋白的表达和量的变化.结果 ①BALF IL-4的浓度哮喘组显著高于对照组,BALF中IL-12的浓度哮喘组显著低于对照组(P值均＜0.01);②免疫组织化学显示PTEN蛋白主要表达细胞是支气管上皮细胞,Western blot法显示哮喘组支气管PTEN蛋白的表达显著低于对照组(P＜0.01);③支气管上皮细胞PTEN蛋白表达量分别与BALF中的IL-4浓度呈显著负相关,与BALF中的IL-12浓度呈显著正相关.结论 哮喘大鼠PTEN蛋白表达明显减少,它能减少Th2因子的表达,可能与哮喘大鼠气道炎症中Th1/Th2平衡密切相关.