巴尔通体对19种抗生素体外敏感性分析

目的 检测巴尔通体菌株对10类19种抗生素最低抑菌浓度（MICs）,分析药物敏感性及耐药性,为指导临床用药和耐药监测提供实验和数据参考。方法 采用E试验法,检测巴尔通体属11种、35株菌株对强力霉素、阿奇霉素、利福平等19种抗生素的MICs。将培养的巴尔通体菌制成McFarland（MCF）2.0浊度的菌悬液,均匀涂布于含5%去纤维羊血的胰酶大豆琼脂培养基上,置5% CO2的37℃培养箱培养。培养5~7 d后判读MICs。结果 35株巴尔通体菌在体外对强力霉素、阿奇霉素、红霉素、克拉仙霉素等13种抗生素敏感,MICs 0.016 mg/L;34株对利福平敏感,MICs 0.002 mg/L;对克林霉素、丁胺卡那霉素、万古霉素、多粘菌素和磺胺类5种抗生素不敏感,MICs较高。结论 绝大多数巴尔通体菌对强力霉素等14种抗生素敏感,但也对克林霉素等5种抗生素不敏感,在对巴尔通体病进行治疗时要注意选择敏感药物。     

2012－2017年天津市百日咳鲍特菌耐药情况分析

目的 了解2012 — 2017年天津市百日咳鲍特菌菌株对抗生素敏感性的分布情况及耐药位点变异情况,为百日咳防治提供依据。 方法 以2012年2月至2017年7月天津市分离的18株百日咳鲍特菌菌株作为研究对象,采用纸片扩散法对培养的阳性菌株进行红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、左氧氟沙星及克林霉素敏感性进行检测,同时采用E-test法检测菌株对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、左氧氟沙星及复方新诺明的敏感性;对红霉素结合区域23S rRNA domain V基因片段进行扩增、序列测定及分析。 结果 纸片扩散法结果显示,18株菌株中仅1株对5种抗生素均敏感,其余17株对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素及克林霉素均耐药,红霉素耐药率最高,达94.44%（17/18）,18株菌对左氧氟沙星均敏感;E-test法结果显示,仅1株菌对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的最低抑制浓度（MIC）在敏感范围内,其余17株对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的MIC均＞256 μg/ml,18株菌对左氧氟沙星的MIC为0.19～0.38 μg/ml,复方新诺明的MIC为0.047～1.500 μg/ml;23S rRNA扩增产物序列分析发现,17株菌发生A2047G位点突变。 结论 纸片扩散法和E-test法对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素和左氧氟沙星的耐药结果完全符合,17株菌对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素同时耐药,耐药株23S rRNA序列均发生A2047G红霉素耐药位点改变。      

巴尔通体体外药敏试验方法研究

目的优化巴尔通体体外药敏试验方法,检测多种抗生素对巴尔通体的最低抑菌浓度(MICs),并分析耐药性。方法优化Etest法试验条件;将该方法与琼脂稀释法进行比较,评价该方法的可靠性。采用Etest法,检测了7株ATCC参考株对22种抗生素的MICs,数据分析使用SPSS 13.0软件。结果确定含5%羊血的胰酶大豆琼脂培养基为最佳培养基、2.0 MCF(麦氏浊度)度为最佳细菌接种浓度,7天为最佳孵育时间。测试的7株巴尔通体在体外对强力霉素等13种抗生素敏感(MIC0.016),对克林霉素等4种抗生素MIC偏高。结论 Etest法简便易行、定值准确、重复性好、结果可靠,可以用于巴尔通体体外药敏试验,并获得了巴尔通体的一些体外药敏数据,为将来制订巴尔通体药敏标准提供一定的依据。     

临床分离棒状杆菌对常用抗菌药物的敏感性分析

摘要:目的：研究棒状杆菌的药敏试验方法,了解临床标本中分离的棒状杆菌对常用抗菌药物的敏感性。 方法：以微量肉汤稀释法测定12种抗生素的最低抑菌浓度(MIC),用SENSITITRECMP2IHM微量肉汤药敏板进行质控对照。 结果：184株棒状杆菌对青霉素、头孢噻肟、红霉素、环丙沙星、四环素、多西环素、克林霉素的耐药率超过50%。超过50%的菌株对亚胺培南、庆大霉素和利福平敏感,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药。 结论：用微量肉汤稀释法检测临床分离棒状杆菌的MIC值,用CLSI M45-A判断标准判读结果,可为临床提供准确的敏感或耐药结果。棒状杆菌对多种抗菌药物的敏感性降低,多重耐药株在增加。     

巴尔通体MALDI-TOF MS数据库的建立与鉴定方法的评价

目的建立巴尔通体的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)数据库和质谱鉴定方法,利用野生菌株进行验证、评价。方法应用MALDI-TOF MS采集巴尔通体ATCC标准菌株和国内流行菌株的质谱数据,每株菌采集24张的质谱图集,获得特定的蛋白指纹图谱,汇总成不同种巴尔通体的标准质谱图,建立巴尔通体MALDI-TOF MS标准数据库。比较乙醇-甲酸提取法和直接涂抹法对质谱鉴定结果的影响,并进行重复性实验评估方法的稳定性。进一步应用173株野生巴尔通体菌株评估该标准数据库和相应的质谱鉴定方法。结果应用汉赛巴尔通体、五日热巴尔通体和杆菌样巴尔通体等21种/亚种巴尔通体,共计200株多地区来源的地理菌株,建立了巴尔通体MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱标准数据库。2种样品制备方法均可以达到正确鉴定标准,提取法质谱得分略高于直接涂抹法。应用8种、16株巴尔通体菌株进行的重复性验证,得分为(9.078±0.031)~(9.776±0.006)分,变异系数(CV)为0.06%~1.12%。14种、173株巴尔通体测试菌株的质谱鉴定得分为9.014~9.796分,平均(9.462±0.195)分,在种水平上能被正确识别。结论基于该研究自主建立的巴尔通体质谱数据库,MALDI-TOF MS技术能够快速、准确鉴定巴尔通体种类,该课题组所建立的巴尔通体质谱标准数据库具有重要应用价值,对临床上巴尔通体病的实验室检验与诊断具有重要意义。     

结核分枝杆菌耐利福平基因变异株的体外最小抑菌浓度研究

目的：研究结核分枝杆菌（MTB）耐利福平临床分离株基因突变对其体外最小抑菌浓度（MIC）测定结果的影响。方法用基因芯片对临床分离的对利福平耐药的175株 MTB及对利福平敏感的48株 MTB进行耐药基因检测;并对所有标本进行利福平的 MIC测定,比较不同变异株的 MIC测定结果。结果对利福平耐药的 MTB 临床分离株基因突变以531、526、516、533位点单突变为主;531位点单突变的利福平耐药变异株 MIC 高于526位点单突变的耐药变异株,差异有统计学意义（t′＝2．2237,t′α＝2．0449,P＜0．05）;526位点单突变的利福平耐药变异株 MIC高于516位点单突变的耐药变异株,差异有统计学意义（t＝2．2056,P＝0．0329,P＜0．05）。双突变者均有较高的 MIC测定值。结论合理的基因芯片设计能检出95．0％以上的对利福平耐药 MTB变异株;对利福平耐药的 MTB变异株有不同的基因突变模式,且不同突变模式的 MTB耐药程度不同,可以为临床用药提供参考。     

儿童呼吸道标本分离的流感嗜血杆菌耐药模式研究

目的了解儿童来源的流感嗜血杆菌(Hi)分离株对常用抗菌药物的敏感性和体外耐药模式,为临床合理用药提供参考。方法对杭州市2006年12月至2007年6月经V因子、X因子和V+X因子试验鉴定的152株Hi用头孢硝噻酚法检测β-内酰胺酶,用纸片扩散法检测其对12种抗菌药物的敏感性,并用E-test法检测氨苄西林(AMP)的最低抑菌浓度(MIC)。结果152株菌株中,对AMP的敏感率为74.3%,耐药率为22.4%,检测AMP对141株菌株的MIC,MIC50为0.250μg/mL,MIC90为12μg/mL。34株β-内酰胺酶阳性,产酶率为22.4%,β-内酰胺酶阴性的耐AMP株共2株。菌株对头孢哌酮-舒巴坦(CFS)、亚胺培南(IMP)、阿莫西林-克拉维酸(AMC)、头孢噻肟(CXT)、头孢曲松(CRO)、利福平(RIF)和头孢克洛(CEC)的敏感率为94.1%~100.0%,对复方磺胺甲口恶唑(SXT)的耐药率最高,达65.8%,对克拉霉素(CLR)、氯霉素(CHL)和四环素(TET)的耐药率分别为7.9%、14.5%和20.4%,仅34株菌株(22.4%)对12种抗菌药物均敏感。结论杭州地区儿童来源的Hi耐药...     

2008-2009年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌对体外抗生素敏感性检测

目的了解2008-2009年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌(Nm)分离株的抗生素敏感性变化趋势。方法药敏纸片扩散(K-B)法和E-test试纸条检测方法对本研究室2008-2009年收集的68株分离自患者和健康带菌者菌株进行体外抗菌药物敏感性检测。结果所有菌株对3种治疗药物头孢噻肟、头孢曲松和氯霉素均敏感,1株C群患者菌株对美洛培南耐药,13株对青霉素不敏感菌株,6株对氨苄西林不敏感菌株。6种预防用药组中,除1株Y群带菌者菌株对利福平耐药外,其他菌株对阿奇霉素、米诺环素和利福平均敏感,70.59%菌株对萘啶酸,72.06%对环丙沙星,95.59%对复方新诺明耐药。W135群带菌者菌株对青霉素和氨苄西林敏感株比例较大,2株对磺胺类药物敏感。患者菌株和带菌者菌株药敏谱略有不同。结论磺胺类和喹诺酮类药物仍不被考虑作为流脑的预防性药物,加强对青霉素和氨苄西林治疗药物在各种血清群Nm的耐药性监测。长期对Nm药敏监测非常必要,对流行性脑脊髓膜炎预防和治疗药物的选择应因时因地而宜。     

儿童呼吸道标本分离的流感嗜血杆菌耐药模式研究

目的了解儿童来源的流感嗜血杆菌（Hi）分离株对常用抗菌药物的敏感性和体外耐药模式,为临床合理用药提供参考。方法对杭州市2006年12月至2007年6月经V因子、X因子和V＋X因子试验鉴定的152株Hi用头孢硝噻酚法检测β-内酰胺酶,用纸片扩散法检测其对12种抗菌药物的敏感性,并用E-test法检测氨苄西林（AMP）的最低抑菌浓度（MIC）。结果152株菌株中,对AMP的敏感率为74.3%,耐药率为22.4%,检测AMP对141株菌株的MIC,MIC50为0.250μg/mL,MIC90为12μg/mL。34株β-内酰胺酶阳性,产酶率为22.4%,β-内酰胺酶阴性的耐AMP株共2株。菌株对头孢哌酮-舒巴坦（CFS）、亚胺培南（IMP）、阿莫西林-克拉维酸（AMC）、头孢噻肟（CXT）、头孢曲松（CRO）、利福平（RIF）和头孢克洛（CEC）的敏感率为94.1%-100.0%,对复方磺胺甲口恶唑（SXT）的耐药率最高,达65.8%,对克拉霉素（CLR）、氯霉素（CHL）和四环素（TET）的耐药率分别为7.9%、14.5%和20.4%,仅34株菌株（22.4%）对12种抗菌药物均敏感。结论杭州地区儿童来源的Hi耐药率呈上升趋势,临床应根据药敏结果合理使用抗菌药物。     

淋球菌流行株对5种抗生素敏感性分析

目的 检测2008年度临床分离的淋球菌对青霉素、四环素、大观霉素、头孢曲松和环丙沙星的敏感性,分析耐药菌株的流行特点.方法 采用琼脂稀释法测定菌株对5种抗生素的最小抑菌浓度(MIC),判断其敏感性并按WHO西太平洋地区淋球菌耐药性监测统一标准.用纸片酸度法检测产β-内酰胺酶淋球菌菌株.结果 107株淋球菌中,检出94株对青霉素耐药(87.9%),产β-内酰胺酶淋球菌43株(40.2%);四环素耐药率为88.8%,其中质粒介导高度耐四环素淋球菌(TRNG)63株(58.9%);环丙沙星耐药率81.3%;未发现对大观霉素和头孢曲松耐药菌株.青霉索、四环素和环丙沙星的MIC50及MIC90均已超过耐药标准,尤以青霉素为甚,其MIC50及MIC90均超过耐药标准1、32倍.结论 淋球菌对大观霉素和头孢曲松的敏感性较高,可作为治疗的首选药物;对青霉素、四环素和环丙沙星耐药率较高,提示对淋病的治疗作用差.     

2008－2014年间北京地区幽门螺杆菌耐药变迁分析

目的 分析北京地区2008－2014年幽门螺杆菌（HP）耐药的变化情况。方法 分别收集2008年5月至2010年10月和2013年3月至2014年1月北京地区接受胃镜检查的HP感染者的胃黏膜标本,对分离获得的HP菌株经系统鉴定后,采用E-test方法进行甲硝唑（MZ）、阿莫西林（AC）、克拉霉素（CH）、左氧氟沙星（LE）、莫西沙星（MX）、利福平（RI）、四环素（TC）、庆大霉素（GM）8种抗菌药物的耐药性检测,并进行对比分析。结果 分别收集到461份（A组）和1 848份（B组）胃黏膜标本,标本进行培养后获得412和1 483株HP菌株,菌株分离率分别为89.37%和80.25%。对A组中的412株和B组中随机选择的607株HP菌株进行耐药性检测的结果显示,2013年后HP对CH、LE、MX和RI耐药率明显上升,MZ耐药率略下降,AC、TC和GM耐药率仍保持较低水平。对CH、LE、MX和RI的菌株最低抑菌浓度（MIC）分布特征进行比较发现,2013年后HP的MIC水平不论是敏感菌株还是耐药菌株,都有明显升高。结论 2013年后北京地区HP菌株对CH、LE、MX和RI的耐药率呈上升趋势,同时表现为敏感菌株和耐药菌株MIC的明显增高,是造成HP根除率显著下降的关键因素,对HP耐药判断折点的调整势在必行。     

浙江省衢州市结核分枝杆菌耐药监测调查

目的 了解浙江省衢州市结核分枝杆菌临床分离株耐药状况, 为结核病的防治提供参考依据。 方法 收集2010年全年衢州4县2区6家医院肺结核就诊病例痰标本,用改良罗氏培养基进行病原分离,鉴别培养基培养法进行菌型鉴定。对分离到的结核分枝杆菌采用比例法对4种一线抗结核药物,异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB),和二线抗结核药物氧氟沙星(OFX)、卡那霉素(KM)进行药物敏感性检测,用 SPSS 11.0统计软件进行统计分析。 结果 371 株结核分枝杆菌对4种一线抗结核药物,INH、RFP、SM和 EMB全部敏感的菌株为292株(78.71%),对二线抗结核药物OFX和KM全部敏感的菌株为337株(90.84%);耐药菌株89株(23.99%),其中,单耐药菌株51株(13.75%),耐多药菌株21株(5.66%),多耐药株14株(3.77%),广泛耐药株3株(0.81%)。结核分枝杆菌对4种一线药物INH、RFP、SM和 EMB的耐药率分别为15.36%(57/371)、7.01%(26/371)、11.86%(44/371)和3.23%(12/371);对2种二线药物OFX和KM的耐药率分别为7.82%(29/371) 和2.42%(9/371)。326例初治患者的耐药率为INH 10.12%(33/326)、RFP 2.45%(8/326)、SM 8.90%(29/326)、EMB 1.23%(4/326)、OFX 3.68%(12/326)、KM 1.53%(5/326),非耐药80.98%(264/326),耐多药1.84%(6/326);45例复治患者的耐药率为INH 53.33%(24/45)、RFP 40.00%(18/45)、SM 33.33%(15/45)、EMB 17.78%(8/45)、OFX 37.78%(17/45)、KM 8.89%(4/45),非耐药40.00%(18/45),耐多药33.33%(15/45)。 结论 衢州市结核分枝杆菌的耐药情况较为严重,每种药物复治患者的耐药率均明显高于初治患者,在制定结核病防控策略时应给予充分重视,同时进一步加强高质量的全程监督短程化疗。     

60株克罗诺杆菌的药敏分析

目的 研究国内分离于11个省(直辖市)婴幼儿配方奶粉或米粉等食品标本中的60株克罗诺杆菌的药物敏感性和耐药性。 方法 采用Kirby-Bauer纸片扩散法测定菌株对7类14种抗生素的药敏情况。 结果 菌株对头孢吡肟、亚胺培南、美罗陪南平、环丙沙星、复方新诺明5种抗生素的敏感率较高,达到93.5%。但有4株菌对14种抗生素全部耐药,4株菌对头孢呋辛耐药,1株菌对阿莫西林/克拉维酸耐药。 结论 60株克罗诺杆菌中,56株菌对目前医院内治疗肠杆菌科感染的多数抗生素药物敏感;4株菌具有强耐药性,其耐药机制需要今后进一步研究证实。     

2018－2021年湖南省人源非O1/非O139群霍乱弧菌药物敏感性及基因组特征

  目的  了解2018—2021年间湖南省从病例分离到的非O1/非O139群霍乱弧菌的药物敏感性及基因组特征。  方法  选取2018—2021年间湖南省腹泻病例肠道标本分离的非O1/非O139群霍乱弧菌分离株4株和非腹泻病例血液标本分离的非O1/非O139群霍乱弧菌分离株3株,进行药物敏感性测试以及基因组序列测定,分析其药物敏感性及基因组特征。  结果  3株血液样品分离株对氨苄西林、诺氟沙星、头孢曲松、美罗培南、米诺环素、复方磺胺甲恶唑、庆大霉素、头孢噻肟、萘啶酸、环丙沙星全部敏感,1株对四环素中介,1株对氯霉素耐药;4株粪便样品分离株对诺氟沙星、头孢曲松、美罗培南、米诺环素、复方磺胺甲恶唑、庆大霉素、头孢噻肟全部敏感,1株对四环素、氯霉素中介,1株对氯霉素耐药,2株对氨苄西林、环丙沙星、萘啶酸耐药;其中1株对氨苄西林、萘啶酸、环丙沙星二重耐药;1株对氨苄西林、萘啶酸、环丙沙星、氯霉素多重耐药。 7株非O1/非O139群霍乱弧菌的基因组序列表现出明显的多样性,但是部分菌株在核心基因组和泛基因组都高度相似。 基因组序列中均未检出ctxAB基因、VPI-1和VSPII基因组岛。 分离自粪便的菌株携带耐药基因的数量是4～8个,分离自血液的菌株携带耐药基因的数量是1～2个。  结论  湖南省非O1/非O139群霍乱弧菌基因组表现出明显的多样性,菌株对多种抗菌药物耐药,需加强腹泻病例、食品及环境水体中非O1/非O139群霍乱弧菌的菌株型别变异及药物敏感性监测。     

浙江省温州地区志贺菌流行菌株的血清分型及耐药性分析

目的调查志贺菌在浙江省温州地区流行的主要血清型和耐药性。方法收集临床分离的志贺菌株进行生化鉴定、血清学分型和抗生素敏感性试验。结果116株志贺菌中28 株为宋内志贺菌,占24.1%;80 株为福氏志贺菌,占68.9%(包括4 株福氏变异株,占总数的3.5%),痢疾志贺菌7株占6.0%,鲍氏志贺菌1株占0.9%。宋内志贺菌对抗菌药物的敏感率依次为氟喹诺酮类（萘啶酸为14.4%）100%、第三、四代头孢为92.9%,对复方新诺明、萘啶酸、氨苄西林呈高耐药性。福氏志贺菌对诺氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、洛美沙星、左氟沙星的敏感率为80%左右;对三、四代头孢的敏感率为97%,但头孢噻肟的敏感率仅为22.3%。鲍氏志贺菌出现严重耐药,只有亚胺培南和美洛匹宁敏感,其他均耐药。结论温州地区志贺菌感染以福氏志贺菌和宋内志贺菌为主,福氏志贺菌中以福氏4c型为主, 其次为血清2a 型和2b型。福氏志贺菌对各种抗生素耐药性有增高趋势;并出现严重耐药菌株,必须引起临床重视。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的了解感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床分布及对临床常用抗菌药物的耐药性。方法金黄色葡萄球菌（SA）采用ATB-Expression半自动细菌鉴定仪进行鉴定,采用头孢西丁纸片琼脂扩散法确定MRSA,药敏试验采用K—B纸片扩散法。结果185株SA中MRSA共计118株（63．78％）。MRSA病区分布以神经外科、肝胆烧伤外科、普外科和呼吸内科为主。118株MRSA对青霉素、氨苄西林、哌拉西林／他唑巴坦、头孢噻肟、美洛培南、环丙沙星、红霉素均耐药;对阿米卡星和利福平耐药率较高;没有发现耐万古霉素和替考拉宁的菌株。结论MRSA菌株表现为多重耐药性和高耐药性,万古霉素和替考拉林是有效控制MRSA感染的最佳抗茵药物。     

导尿管相关尿路感染生物被膜菌及药敏结果分析

目的了解九江地区近2年来导尿管插管后患者尿路感染的病原菌构成,细菌耐药性和生物被膜形成情况,以便指导临床合理用药。方法于2009年8月至2011年8月选择我院住院部收治的CAUTI患者145例为对象,对其导尿管进行细菌培养,药敏试验和细菌生物被膜的检测。结果共分离出118株生物被膜菌,检出率81.4%;以大肠埃希菌为主,占46.61%;大多数生物被膜菌株有较厚的生物被膜;革兰阴性菌中大肠埃希菌等对β-内酰胺类抗生素有很高的耐药率,对阿米卡星的耐药率较低,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南敏感率为100%。革兰阳性球菌的耐药情况也相当严重。结论针对大多数生物被膜菌株有较厚的生物被膜,要选择细菌生物被膜敏感的抗菌药物,根据菌株的药敏试验,合理地制定治疗方案,以便控制感染。     

首次复治肺结核病结核分枝杆菌对利福平耐药性与rpoB基因RRDR突变的研究

目的：研究分离自首次复治肺结核病患者的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, Mtb）临床菌株对利福平的耐药性, 及其与rpoB基因利福霉素耐药决定区（rifampicin resistance determining regions, RRDR）位点突变间的相关性。方法：收集2013年2月至2013年12月国内19家医院的首次复治肺结核患者的Mtb, 进行利福平药敏检测;使用PCR技术检测Mtb的rpoB基因RRDR位点突变。结果：来自全国12个省19家医院共141例患者的141株临床菌株获得药敏结果, 而RRDR位点测序分析显示首次复治结核患者中有53%（75/141）对利福平耐药。RRDR DNA测序共检测到72株Mtb存在rpoB耐药突变区突变, 其中71株的突变发生在RRDR, 主要突变位点分别为531位（42株）、526位（11株）和516位（10株）。有75株Mtb对利福平耐药, 其中70株（93.3%）检测到rpoB突变, 69株的突变发生在RRDR;除了2株L511P、H526N突变的Mtb对利福平敏感, 70株rpoB突变株均对利福平耐药。对于复治结核患者, 检测RRDR突变判断利福平耐药有较高的特异度。结论：首次复治肺结核病患者对利福平耐药率较高, Mtb耐利福平与rpoB基因RRDR突变密切相关, RRDR突变检测可以用于快速鉴定复治肺结核病患者的Mtb利福平耐药。