联苯胺接触人群外周血白细胞AN43基因检测研究

为职业性膀胱癌高危人群的监护及膀胱癌的临床诊断探索一种特异,可靠的手段。方法 应用核酸探针杂交技术,免疫组化法及定量ＰＣＲ方法对５０例膀胱癌高危人群,１８例膀胱癌患者及３０例健康人群进行外周血白细胞中ＡＮ４３基因及其ｍＲＮＡ的定量ＰＣＲ检测,并与尿细胞病理学检查结果进行比较。     

应用改进的聚合酶链反应快速检测水中的肠道病毒

近年来 ,聚合酶链式反应 (ＰＣＲ)技术由于特异性强、操作简便已广泛用于环境中肠道病毒的检测。常规ＰＣＲ 1次只能检测 1种病毒 ,而水中病毒有多种 ,因而不能满足实际应用的需要。Ｔｓａｉ等[1] 用多重ＰＣＲ1次检测脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒和轮状病毒 3种病毒 ,这种方法需要引物较多 ,引物之间易相互干扰 ,检测 3种以上病毒就比较困难。Ｚｏｌｌ等[2 ] 采用通用引物ＰＣＲ技术检测肠道病毒 ,但是这种方法只能证明有无肠道病毒的存在 ,不能鉴别病毒种类。我们首次将通用引物ＰＣＲ和多重ＰＣＲ相结合用于肠道病毒检测 ,兼顾了两者的…     

定量聚合酶链反应快速产前诊断21三体

定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）是近年来产前诊断２１三体的一种瓣方法，具有快速、准确等优点。本文就春原理、主要过程作一简要介绍。     

PCR技术应用于霍乱监测的效果探讨

为探讨ＰＣＲ 检测技术在霍乱监测中的应用价值，应用ＰＣＲ 技术与培养法平行检测各类标本８６４ 份，结果ＰＣＲ 检出阳性率为７．４１ ％ ，明显高于培养法的４．５１ ％ （χ２ ＝ ５．９５ ，Ｐ＝ ０．０１４７ ＜ ０．０５） 。其中健康接触者ＰＣＲ检出率为１３．７３ ％ ，明显高于培养法的１．９６ ％ （χ２ ＝ ４．８８ ，Ｐ＜ ０．０５） ；水标本ＰＣＲ检出率９．２３ ％ ，也明显高于培养法的４．７６ ％ （χ２ ＝ ４．４８ ，Ｐ＜ ０．０５） 。表明ＰＣＲ 法既特异又敏感、快速，在霍乱监测中有很好的应用前景，可在有条件的地方和单位推广应用     

卡氏肺囊虫基因诊断方法的应用研究进展

卡氏肺囊虫是引起免疫抑制患者卡氏肺囊虫肺炎的重要条件致病菌。以ＰＣＲ为基础的基因诊断方法显示了广阔的应用前景。已用于Ｐｃ－ＰＣＲ的支基因有核５ＳｒＤＮＡ，１８ＳｒＤＮＡ，ＩＴＳ，ｍｔＬＳＵｒＤＮＳ，ＴＳ和ＤＨＦＲ等，其方法各具特色。就其敏感性和特异性而言，Ｐｃ－ＩＴＳ－ＰＣＲ法和Ｐｃ－ｍｔ ＬＳＵｒＤＮＡ－ＰＣＲ法较其他的ＰＣＲ法优越，值得推荐。     

结核病人外周血单个核细胞结核菌DNA转阴时间探讨

探讨结核病人外周单个核细胞ＰＣＲ结果转阴时间。方法 对１５例确诊为活动性肺核病人进行正规抗痨，追查其外周血单个核细胞结核ＰＣＲ结果转阴性的时间，同时检测１０例三年前涂阳肺结核已治愈者的血单个核细胞结核菌ＰＣＲ。     

用RT—PCR方法直接测定麻疹病人唾液,尿液中的麻疹病毒RNA

以反转录二步多聚酶链反应方法（ＲＴ－ＰＣＲ）直接测定麻疹病人急性期尿液、唾液中的麻疹病毒ＲＮＡ（ＭＶ－ＲＮＡ）。实验证明麻疹病人发病后８～１０天的唾液标本中ＲＴ－ＰＣＲ阳性率为９０．９％；发病第１２天的标本中ＲＴ－ＰＣＲ阳性率为６６．６％。抗ＭＶ－ＩｇＭ阳性的病人唾液标本中的ＲＴ－ＰＣＲ总阳性率高于尿液标本的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率，分别为７２．９％、６４．０％。     

抗原捕捉一步RT—PCR检测HAV研究

甲型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＡｖｉｒｕｓ,ＨＡＶ)是环境中常见的肠道病毒 ,因其易引起爆发流行 ,给人民的身心健康以及国民经济的发展带来极大的危害。 1985年ＰＣＲ技术问世 ,并日益应用到微生物检测领域 ,目前已建立了许多ＲＴ -ＰＣＲ检测ＨＡＶ的方法。本研究将抗原捕捉 (ａｎｔｉｇｅｎｃａｐｔｕｒｅ ,ＡＣ)ＰＣＲ与一步ＲＴ-ＰＣＲ相结合建立了抗原捕捉一步ＲＴ -ＰＣＲ ,并对人为污染样品中的ＨＡＶ进行了检测 ,获得较好结果。现将有关结果报告如下 :1　材料和方法1 1　材料　ＨＡＶＮｊ株以及ＰＬＣ/ＰＲＦ/ 5细胞 ,由军事…     

三种常见型号PCR扩增仪的临床应用评价

聚合酶链式反应 (ＰＣＲ)是由美国Ｃｅｔｕｓ公司人类遗传研究室ＭｕｌｌｉｉＫＢ等人于 1985年首创的一种体外模拟天然ＤＮＡ复制过程的核酸扩增技术[1] 。此项技术发明以来 ,现已广泛应用于生命科学的各个领域。它不仅用于基因的分离、克隆和核酸序列分析 ,还可用于突变体和重组体的构建、基因表达调控的研究、基因多态性的分析、遗传病和传染病的诊断、肿瘤机制探查、法医学鉴定诸多方面 ,ＰＣＲ已成为便利获得特异性基因片段的基本工具。而作为ＰＣＲ反应不可缺少的关键设备—ＰＣＲ扩增仪 ,一直是国内外厂商争夺的制高点。目前 ,ＰＣＲ…     

复合多聚酶链检测淋病奈瑟菌和溶脲脲原体

目的 评价用ＰＣＲ民时检测标梧的淋球菌和溶脲脲原体。方法 通过筛选不同引物，确定了两引物对的最佳浓度配比。结果 特异性和敏感性评价表明，该复合系统是淋菌和溶脲脲原体特异的，可分别检出２７０ｆｇ、６４ｆｇ的相应ＤＮＡ。结论 临床标本证明，复合ＰＣＲ检测淋球菌与单一ＰＣＲ结果符合率达１００％，检测溶脲脲原体与单一ＰＣＲ结果符合率达９９％。     

影响PCR技术检测HBV DNA结果的因素分析

ＰＣＲ技术 (聚合酶链反应 )检测ＨＢＶ　ＤＮＡ ,具有简便、快速、特异性强、灵敏度高等优点 ,自问世以来就得到临床的广泛重视。本文就其结果的影响因素进行分析如下。1　假阳性结果1.1　ＰＣＲ实验室设计未达到要求所致　由于ＰＣＲ是一种特异强、灵敏性高的体外基因扩增技术 ,只要有靶ＤＮＡ片段污染 ,就会造成假阳性 ,这是开展ＰＣＲ技术的一大困难 ,且不易克服。笔者认为应有四间ＰＣＲ实验室 :一间配制试剂、一间处理标本、一间扩增 ,一间检测扩增产物。这样就避免室间污染 ,增加结果的可信度。1.2　人为因素所致　操作人员素质低 ,…     

山东蒙阴县恙虫病立克次体的PCR检测和分型研究

本文报告采用恙虫病立克次体表面蛋白５６ＫＤａ基因编码区构建的群、型特异引物，ＰＣＲ检测１４份恙虫病患者血提取的ＤＮＡ模板，扩增后均见有３１７～３３２ｂｐ片段的扩增带。与血清学检测比较，ＰＣＲ具有敏感、早期诊断的意义。群引物扩增的阳性产物再经ＰＣＲ分型，结果证明山东蒙阴地区存在Ｋａｗａｓａｋｉ型Ｒｔ。     

聚合酶链反应限制酶切分析及病毒分离检测巨细胞病毒感染

在人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）直接早期蛋白Ｅｃｏ ＲＩＪ ＤＮＡ片段内,自行设计两对引物,建立套式ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ ＤＮＡ,同时结合病毒分离检测临床标本。结果发现２３例新生儿肝炎综合征患儿中,１０例病毒分离及套式ＰＣＲ均阳性;１例病毒分离阴性,但套式ＰＣＲ阳性。对５８例妊娠早期孕妇血标本进行检测,套式ＰＣＲ阳性率９％,病毒分离阳性率则为７％。     

PCR—SSCR：一种检测突变的方法

聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析是建立在ＰＣＲ技术基础上的用于检测突变的简便、灵敏的方法。本综述了这项技术的原理、方法及最新进展，并与现在广泛使用的其它检测基因突变的方法进行了比较。     

用双重式聚合酶链反应技术检测鼠疫菌的实验研究

近几年来,随着分子生物技术的迅猛发展,国内外学者对聚合酶链反应（ＰＣＲ）用于鼠疫的检测十分关注。Ｈｉｎｎｅｂｕｓｃｈ等〔１〕（１９９３）用Ｐｌａ基因序列,以特异性片段为引物,建立了检测印鼠客蚤体内鼠疫菌的ＰＣＲ方法。Ｈｉｒｏｋｏ氏等〔２〕（１９９６）...     

RT—PCR法检测甲肝疫苗滴度

建立快速灵敏特异的甲肝减毒活疫苗滴度的ＲＴ－ＰＣＲ检测法。方法：以编码甲肝病毒（ＨＡＶ）ＶＰ３羧基端的基因区为目标区，运用ＲＴ－ＰＣＲ法对甲肝疫苗病毒进行检测，并与ＴＣＩＤ５０检测法进行比较。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法灵敏度和特异性均与ＴＣＩＤ５０法相似，...     

人巨细胞病毒感染套式PCR基因诊断方法的研究

依据人巨细胞病毒主要早期基因核苷酸序列，建立了其套式ＰＣＲ诊断方法．并组装了较为实用的ＰＣＲ诊断试剂盒．该方法特异性强，敏感性较普通ＰＣＲ技术高２—３个数量级，标本处理方法简单，并可在６ｈ内判定结果，是一种在临床上值得推广应用的技术．     

戊型肝炎病毒PCR产物直接测定序法的建立及应用

以γ－＾３２Ｐ－ＡＴＰ标记的ＰＣＲ引物为测序引物，Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶为测序酶，ＰＣＲ产物为测序模板，建立了戊型肝炎病毒ｃＤＮＡ序列分析方法。应用本法测定１株新疆流行性ＨＣＶ和株散发性ＨＥＶ ｃＤＮＡ序列，呈清晰的序列梯，其序列与用荧光法测定的另一株散发性ＨＥＶ序列有高度同源性，以上结果说明，ＰＣＲ产物直接测序法可用于ＨＥＶ核酸序列分析。     

应用连接介导PCR法于线粒体DNA的测序

目的 简化ＤＮＡ测序方法，优化条件，以适用于线粒体ＤＮＡ的测序。方法 应用Ｍａｘａｍ Ｇｉｌｂｅｒｔ化学断反应和连接介导ＰＣＲ（Ｌｉｇａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉａｔｅｄ ＰＣＲ，ＬＭＰＣＲ）来测定线粒体ＤＮＡ的序列。结果 读取的１４０ｂｐ的核苷酸序列，输入基因库，确定为线粒体ＤＮＡ重链８０５１～８１９０片段的序列，符合率为７０．７％（９９／１４０）。结论 该方法改进的成功，对进一步进行线料体ＤＮＡ氧化损     

PCR,EIA对乙型肝炎病毒检测的比较

多聚酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是近几年发展起来的先进的快速体外基因扩增技术，已经在很多医学领域得到应用，目前ＰＣＲ技术已逐渐推广至病毒性疾病的诊断和研究中。为了寻找比目前常用的ＥＩＡ技术更敏感更有效的检测方法，...