X H-211对3T3-L1细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的：研究异黄酮脂肪酸酯类化合物 XH‐211对前脂肪细胞株3T3‐L1增殖、分化和凋亡的影响。方法体外培养3T3‐L1细胞,加入不同浓度XH‐2111×10‐4、1×10‐5、1×10‐6和1×10‐7 mol／L ;同时另设DMSO空白对照组。采用MTT法和流式细胞术分别检测3T3‐L1细胞增殖和凋亡情况,油红染色法观察3T3‐L1细胞分化过程产脂量的变化。结果与空白对照组相比,XH‐211呈浓度依赖性地抑制3T3‐L1细胞增殖和油脂的产生,诱导3T3‐L1细胞和分化成熟的3T3‐L1细胞凋亡（P＜0．05）。结论 XH‐211通过诱导3T3‐L1细胞凋亡,抑制细胞增殖,减少分化过程中的产脂量,从而减少脂肪堆积,降低血脂。     

人皮肤角质形成细胞库的构建

目的探索人皮肤角质形成细胞的分离、培养、传代、冻存、复苏及鉴定技术。方法采用细胞培养技术及免疫组化技术。结果我们采用细胞培养技术体外分离培养了小儿包皮角质形成细胞,传代后的角质形成细胞,经冻存、复苏后,此角质形成细胞仍既能增殖、又能分化,生长状态与新鲜分离的角质形成细胞相类似。结论酶消化法是快速大量培养皮肤角质形成细胞的简便易行的方法。     

Concentration dependent actions of glucocorticoids on neuronal viability and survival

A growing body of evidence based on experimental data demonstrates that glucocorticoids (GCs) can play a potent role in the survival and death of neurons. However, these observations reflect paradoxical features of GCs, since these adrenal stress hormones are heavily involved in both neurodegenerative and neuroprotective processes. The actual level of GCs appears to have an essential impact in this bimodal action. In the present short review we aim to show the importance of concentration dependent action of GCs on neuronal cell viability and cell survival in the brain. Additionally, we will summarize the possible GC-induced cellular mechanisms at different GC concentrations providing a background for their effect on the fate of nerve cells in conditions that are a challenge to their survival.     

芍药苷对人上皮性卵巢癌HO8910细胞增殖、凋亡及迁移的影响及其机制研究

目的 观察芍药苷（Paeoniflorin,PF）对人上皮性卵巢癌HO8910细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 培养人上皮性卵巢癌HO8910细胞,随机分为对照组、芍药苷低剂量组、芍药苷中剂量组、芍药苷高剂量组。芍药苷低、中、高剂量组分别在加入0.5、1与2 mg·mL^-1芍药苷的DMEM培养液中培养48 h。采用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测HO8910细胞增殖抑制率;TUNEL染色法检测细胞凋亡率;细胞划痕实验检测HO8910细胞迁移率;免疫蛋白印迹技术（Western blot）分析核因子-κB（NF-κB) p56、Bcl-2、caspase-3蛋白的表达。结果 与对照组相比,芍药苷对HO8910细胞增殖、迁移率有明显的抑制作用并促进其凋亡（P<0.05）,这种作用呈现剂量依赖性;芍药苷处理组细胞内caspase-3表达水平较对照组明显升高（P<0.05）,Bcl-2、核因子-κB p56表达水平较对照组明显降低（P<0.05）,且呈现剂量依赖性（P<0.05）。结论 芍药苷可明显抑制HO8910细胞的增殖,诱导其凋亡;其机制部分可能与阻断核因子-κB通路有关。     

染料木素对人宫颈癌Siha细胞增殖凋亡和周期的影响

［摘要］目的探讨染料木素对人宫颈癌Siha细胞增殖、凋亡和周期的影响及机制。方法50 mol&#8226;mL 1染料木素处理Siha细胞,用噻唑蓝（MTT）法检测细胞生长抑制率,用流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡、周期及周期蛋白cyclin A和cyclin B表达的变化。结果染料木素作用于Siha细胞后,增殖抑制率比对照组明显升高（P＜0.05）;染料木素处理48 h后,实验组凋亡率较对照组升高,分别为（67.45±1.54）%和（45.37±1.65）%（P＜0.01）。染料木素处理后的Siha细胞G2/M期的细胞比例显著上升,由（9.55±0.71）%升至（79.54±1.09）%（P＜0.01）;cyclin A和cyclin B表达上调,分别由（1.84±0.11）%升至（37.38±0.71）%（P＜0.01）,由（69.44±1.84）%升至（97.70±1.20）%（P＜0.01）。结论染料木素在体外可有效抑制人宫颈癌细胞生长,其抗肿瘤机制可能是上调cyclin A和cyclin B蛋白表达和引起G2/M期细胞周期阻滞。     

Influence of viability on bromosulfophthalein uptake by isolated hepatocytes

Summary The initial rates of BSP uptake by isolated hepatocytes were compared in cells of good and poor viability. Cells with impaired viability were obtained by ageing or by accident also in fresh preparations. Viability was judged by trypan blue stainability, membrane potential and respiratory parameters indicative for energy state, substrate supply and plasma membrane permeability changes. It was found that concomitant with impaired viability there was a decline of uptake rates at low and an increase at high BSP concentrations with a crossover point at 10 M as manifest in an increase of K _m and V. Simultaneously, the affinity and size of the membrane bound fraction decreases. The results give kinetic support to the supposition that it is the decreased uptake from plasma to liver that is responsible for the prolonged plasma retention times in the liver function test of patients with impaired hepatobiliary function.Abbreviations BSP Bromosulfophthalein - CCP Carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone A preliminary report was given on the Spring Meeting of the German Pharmacological Society at Mainz, March 23–26, 1976 [Schwenk, M., Burr, R., Pfaff, E.: Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 293, R48 (1976)].This study was supported by the Deutsche Forschungsgemeinschaft. The authors wish to thank Mrs. Sylvia Kasperek for skilful technical assistance.     

肝细胞生长因子对人脐带间充质干细胞增殖、黏附及迁移影响的体外研究

目的：探讨肝细胞生长因子( HGF)对人脐带间充质干细胞( hUCMSCs)增殖、黏附及迁移能力的影响。方法按照不同腺病毒感染 hUCMSCs 分为实验组( Ad-GFP-HGF )和对照组( Ad-GFP )。以最佳感染复数转染hUCMSCs,观察细胞形态变化以及GFP蛋白的表达。比较各组细胞增殖能力、黏附能力及迁移能力。 Western Bolt检测各组细胞HGF的表达水平。结果对照组和实验组均出现了GFP的表达,实验组hUCMSCs的增殖、黏附及迁移能力均较对照组增强(P<0．05)。实验组细胞HGF的表达水平显著高于对照组(P<0．05)。结论 HGF的高表达能明显促进hUCMSCs的增殖、黏附和迁移。     

miR-373靶向调控同源异型盒基因 B3表达影响子宫内膜癌 Ishikawa细胞生物学特性的实验研究

目的 探讨微小RNA(miR)-373靶向调控同源异型盒基因B3(HOXB3)表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 本研究起止时间为2018年2月至2019年6月,将体外培养的Ishikawa细胞分为抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)组(转染inhibitor-NC)、miR-373抑制剂(inhibitor)组(转染miR-373 inhibitor)、miR-373 inhibitor+siNC组(共转染miR-373 in?hibitor和NC siRNA)和miR-373 inhibitor+siHOXB3组(共转染miR-373 inhibitor和HOXB3 siRNA),采用实时荧光定量PCR检测Ishikawa细胞中miR-373的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-373和HOXB3的靶向关系,采用免疫印迹法检测Ishikawa细胞中HOXB3蛋白的表达,细胞计数(CCK-8)法、Transwell实验和膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测各组细胞增殖、侵袭和凋亡能力.结果 HOXB3是miR-373的靶基因.与inhibitor-NC组相比,miR-373 inhibitor组、miR-373 inhib?itor+siNC组和miR-373 inhibitor+siHOXB3组细胞中miR-373表达水平[(1.00±0.11)比(0.32±0.02)/(0.36±0.03)/(0.34±0.03)]和细胞增殖活力[24 h(0.63±0.04)比(0.41±0.03)/(0.43±0.03)/(0.52±0.03);48 h(0.97±0.06)比(0.68±0.05)/(0.72±0.06)/(0.85±0.05);72 h(1.35±0.11)比(0.88±0.08)/(0.92±0.07)/(1.12±0.09)]、穿膜细胞数[(85.26±8.72)个比(37.64±2.85)个/(40.55±3.23)个/(61.38±3.64)个]均明显降低,而细胞凋亡率[(8.75±1.23)％比(25.64±3.38)％/(28.48±3.26)％/(14.25±2.02)％]和细胞中HOXB3蛋白的表达水平[(0.27±0.03)比(0.77±0.06)/(0.73±0.06)/(0.51±0.03)]均明显升高(P<0.05);且miR-373 inhibitor+siHOXB3组中各指标的变化强度明显低于miR-373 inhibitor组(P<0.05);而miR-373 inhibitor+siNC组和miR-373 inhibitor组之间无明显差异(P>0.05).结论 下调miR-373表达可通过靶向HOXB3抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭并促进细胞凋亡.     

大鼠腹主动脉平滑肌细胞培养及鉴定

目的 培养、鉴定大鼠腹主动脉平滑肌细胞.方法 采用组织贴块法分离培养大鼠腹主动脉平滑肌细胞,胰蛋白酶消化传代,相差显微镜及即用型SABC免疫组化染色试剂盒进行细胞鉴定.结果 平滑肌细胞呈梭形或长梭形生长,透射电镜可见细胞的胞浆内有很多与细胞纵轴平行的肌丝和与之相连的致密体.高倍镜下可见胞质内大量棕色、与细胞长轴平行的纤...     

乳腺癌细胞来源的Exosomes的提取和鉴定

目的从MCF-7B乳腺癌细胞培养上清液中分离获得Exosomes,并进行形态学观察鉴定。方法通过低速、高速、超滤及超高速离心等方法,从MCF-7B乳腺癌细胞培养上清中分离Exosomes,用透射电子显微镜观察其形态特征,Lorry方法蛋白定量,通过用免疫印记进行组织相容性抗原(MHC)分子鉴定。结果MCF-7B乳腺癌细胞上清中分泌大量的Exosomes,电镜下观察呈椭圆形或圆形的双层膜的囊泡,直径为50～100nm,具有完整的细胞膜。结论用离心的方法可从MCF-7B乳腺癌细胞培养上清中提取Exosomes,有可能作为乳腺癌免疫治疗潜在的抗原,同时也为研究肿瘤的发病机制提供一个新的途径。     

宫颈癌演进过程中的细胞动力学研究

目的：探讨宫颈癌演进过程中的细胞动力学特征。方法：应用增殖细胞核抗原（PCNA）的免疫组织化学技术和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末标记（TUNEL）技术,对25例宫颈癌、15例宫颈上皮内肿瘤中增殖细胞与凋亡细胞进行分析,以10例正常宫颈上皮为对照。结果：正常宫颈上皮中增殖细胞主要位于复层鳞状上皮的基底层,凋亡细胞集中分布于复层鳞状上皮的表层;宫颈上皮内肿瘤和宫颈癌丧失上述分布特征。宫颈癌细胞增殖指数（PI）显著高于宫颈上皮内肿瘤和正常宫颈上皮（P＜0．01）;宫颈上皮内肿瘤PI显著高于正常宫颈上皮（P＜0．01）。宫颈上皮内肿瘤细胞凋亡指数（AI）显著高于宫颈癌和正常宫颈上皮（P＜0．01）;宫颈AI显著高于正常宫颈上皮（P＜0．01）。宫颈癌PI／AI比值显著高于宫颈上皮内肿瘤和正常宫颈上皮（P＜0．01）;宫颈上皮内肿瘤与正常宫颈上皮间PI／AI比值差异无显著性（P＞0．05）。结论：在宫颈上皮内肿瘤向肿瘤向宫颈癌演进过程中,增殖细胞群体随着病变恶性程度的增加而增加,凋亡细胞群体随着病变恶性程度的增加而减少,细胞增殖和细胞凋亡失衡是宫颈癌发生、发展的重要要机制之一。     

Methods to assess stem cell lineage, fate and function

Stem cell therapy has the potential to regenerate injured tissue. For stem cells to achieve their full therapeutic potential, stem cells must differentiate into the target cell, reach the site of injury, survive, and engraft. To fully characterize these cells, evaluation of cell morphology, lineage specific markers, cell specific function, and gene expression must be performed. To monitor survival and engraftment, cell fate imaging is vital. Only then can organ specific function be evaluated to determine the effectiveness of therapy. In this review, we will discuss methods for evaluating the function of transplanted cells for restoring the heart, nervous system, and pancreas. We will also highlight the specific challenges facing these potential therapeutic areas.     

MAPK/ERK通过诱导纤维蛋白A磷酸化抑制垂体瘤细胞增殖、凋亡、迁移及相关信号转导

目的探讨MAPK/ERK对垂体瘤细胞增殖、凋亡、迁移及相关信号转导的影响。方法通过CCK-8法确定SB203580(MAPK/ERK抑制剂)的最佳安全浓度,然后将体外培养的垂体瘤细胞分为SB203580组和对照组,通过CCK-8法检测垂体瘤细胞的增殖情况,流式细胞术检测垂体瘤细胞的细胞凋亡百分数,RT-PCR和Western blot检测垂体瘤细胞中细胞周期因子CyclinD1、CyclinE1、p21和细胞凋亡因子Bcl-2和Bax的表达情况,Western blot检测垂体瘤细胞纤维蛋白A的磷酸化水平、NF-κB、MMP-9、VEGF蛋白的表达情况,通过Transwell TM实验检测垂体瘤细胞的迁移情况。结果SB203580的最佳安全浓度是55μmol/L。SB203580处理垂体瘤细胞后,SB203580组细胞与对照组相比显著增多,CyclinD1、CyclinE1表达升高,p21、Bcl-2表达下降,Bax表达升高,纤维蛋白A的磷酸化水平下降,NF-κB、MMP-9、VEGF蛋白表达升高;流式细胞术检测显示,SB203580组的细胞凋亡数显著增加;Transwell TM实验发现,细胞迁移能力升高。结论MAPK/ERK通过促进纤维蛋白A的磷酸化,抑制垂体瘤细胞的增殖、凋亡和迁移能力,同时抑制NF-κB/MMP-9/VEGF通路的发生。     

三氧化二砷对成纤维细胞的生长抑制及细胞周期的影响

目的探讨三氧化二砷(AS2O3)对成纤维细胞的增殖及细胞周期的影响。方法用含AS2O3浓度分别为0、2、4μmol/L的培养液分别作用于成纤维细胞,24 h和48 h后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布。结果 AS2O3可显著抑制成纤维细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性(P<0.01);AS2O3可使细胞周期G0/G1期比例增加(P<0.01),G2/M期减少(P<0.01)。结论 AS2O3具有抑制成纤维细胞的增殖及阻止细胞周期进展的作用。     

Notehl对人脐带问充质干细胞增殖、黏附及迁移影响的体外研究

目的探讨Notchl基因的重组腺病毒转染对人脐带间充质干细胞（humanumbilicalcordmesenchymalstemcells,hUCMSCs）增殖、黏附及迁移能力的影响。方法按照不同腺病毒感染hUCMSCs分为实验组（Ad-Notchl）、阴性对照组（Ad—GFP）与空白对照组。以最佳MOI转染hUCMSCs,观察细胞形态变化以及GFP蛋白的表达。比较3组细胞增殖能力、细胞周期、黏附能力及迁移能力。WesternBolt检测3组细胞Notchl蛋白的表达水平。结果荧光下观察腺病毒成功感染细胞,阴性对照组和实验组均出现了GFP的表达,且随培养时间的延长表达量增高,可见光下观察实验组细胞增殖速度较快。实验组细胞的增殖能力（48、72、96h）、黏附能力（12、16、20h）及迁移能力均较阴性对照组及空白对照组增强（P〈0．05）。WesternBolt检测实验组细胞Notchl蛋白的表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05）。结论Notchl能明显促进hUCMSCs的增殖、黏附和迁移。     

The evidence for solid lipid nanoparticles mediated cell uptake of resveratrol

The potential for colloidal carriers to increase drug bioavailability has spurred a renewed interest in their uptake mechanisms and movement within cells. Solid lipid nanoparticles (SLN) were used as a carrier for a promising chemopreventive drug, resveratrol (RSV). The effects of SLN, empty or loaded with RSV (SLN–RSV), on the internalization, growth, morphology, metabolic activity and genetic material of keratinocytes were compared to those of RSV in solution.     

三磷酸腺苷生物发光法在白血病细胞株K562化疗药物敏感实验中应用探讨

目的:探讨三磷酸腺苷生物发光法(ATP-BLA法)在白血病细胞药敏实验中的可行性.方法:采用ATP-BLA法,用液体闪烁记数仪检测ATP标准品以及白血病细胞株K562在不同细胞浓度、药物浓度、培养时间下的荧光发光值.结果:ATP标准品浓度、K562细胞浓度的对数与荧光发光值的对数具极好的线性关系(P＜0.001);药敏实验时,结束细胞培养的时间以第4 d为宜,药物浓度的选择以1×PPC为最佳.结论:ATP-BLA法在白血病药敏试验中是可行的,有一定的临床应用价值,值得进一步研究.     

细胞周期调节蛋白P16在子宫内膜癌中的表达及意义

目的研究细胞周期调节蛋白P16在子宫内膜癌中的表达,探讨子宫内膜癌的病因及发病机制。方法选取子宫内膜癌组织（组织学分级G1组16例、G2组27例、G3组8例）,子宫内膜非典型增生组织21例,正常子宫内膜组织10例。用免疫组化S-P法检测P16在子宫内膜癌组、子宫内膜非典型增生组和正常子宫内膜组中的表达。结果 P16在子宫内膜癌组和子宫内膜非典型增生组的表达明显低于正常子宫内膜组（P〈0.01）,在子宫内膜癌中G2、G3组的表达低于G1组,差异有显著意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论 P16的低表达或缺失,失去对细胞周期的调节作用,导致细胞增殖过度,可能是子宫内膜癌发病机制之一。     

微 RNA-30d-5p通过调控 ABCB5对胰腺癌进程的影响

目的探讨微 RNA(miR)-30d-5p在胰腺癌( PAAD)中的潜在作用和调控机制。方法选择 2016年 12月至 2019年 1月来新疆维吾尔自治区人民医院接受手术治疗的胰腺癌病人 35例,术后即刻获得胰腺肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织,采用实时定量 PCR检测 miR-30d-5p在胰腺癌组织和细胞中的表达水平。使用细胞计数试剂盒( CCK-8)、克隆形成、 transwell和流式细胞术检测 miR-30d-5p对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。通过萤光素酶测定和蛋白质印迹法评估 miR-30d-5p对 ABCB5表达的调控作用。进一步构建裸鼠成瘤模型通过肿瘤质量和体积验证 miR-30d-5p对肿瘤生长的影响。采用苏木精伊红染色验证肿瘤组织增殖情况。结果与癌旁组织( 1.03±0.17)及正常细胞( 0.98±0.18)相比,胰腺癌组织( 0.35±0.08)和细胞( 0.63±0.08,     

Imaging of cellular therapies

Cellular therapy promises to revolutionize medicine, by restoring tissue and organ function, and combating key disorders including cancer. As with all major developments, new tools must be introduced to allow optimization. For cell therapy, the key tool is in vivo imaging for real time assessment of parameters such as cell localization, numbers and viability. Such data is critical to modulate and tailor the therapy for each patient. In this review, we discuss recent work in the field of imaging cell therapies in the clinic, including preclinical work where clinical examples are not yet available. Clinical trials in which transferred cells were imaged using magnetic resonance imaging (MRI), nuclear scintigraphy, single photon emission computed tomography (SPECT), and positron emission tomography (PET) are evaluated from an imaging perspective. Preclinical cell tracking studies that focus on fluorescence and bioluminescence imaging are excluded, as these modalities are generally not applicable to clinical cell tracking. In this review, we assess the advantages and drawbacks of the various imaging techniques available, focusing on immune cells, particularly dendritic cells. Both strategies of prelabeling cells before transplant and the use of an injectable label to target cells in situ are covered. Finally, we discuss future developments, including the emergence of multimodal imaging technology for cell tracking from the preclinical to the clinical realm.