单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤与修复在辐射生物剂量学中的应用

目的探索细胞DNA辐射损伤后离体修复与整体修复的关系，拟合修复曲线，在辐射生物剂量估算中结合应用剂量一效应关系曲线，提高剂量估算的准确性。方法用中性单细胞凝胶电泳技术检测1Gyγ射线辐照后不同时间点的小鼠和人淋巴细胞DNA双链断裂，分别拟合DNA修复曲线，并对二者曲线模型进行比较。结果人外周血和小鼠辐照后，随照后时间的推移，DNA损伤的修复增加，残余损伤逐渐减少，呈明显的时相一效应关系。人淋巴细胞辐照后体外修复曲线方程模型与动物体内修复曲线方程模型均以对数方程为最佳，分别为：小鼠：YTM=55．8256—10．792 lnX（R^2=0．629，P〈0．01）和YOTM=25．4173—4．5273 lnX（R^2=0．661，P〈0．01）；人：YTM=30．2427—7．3836 lnX（R^2=0．686，P〈0．01）和YOTM=17．9772—3．9125 lnX（R^2=0．752，P〈0．01）。结论人淋巴细胞离体辐照后的修复过程可基本反映体内DNA双链断裂的修复水平与速度，修复曲线可以作为辐射生物剂量估算时的参考。     

贪吃零食致癌风险与受辐射相同

美国营养学家研究证明：在某种意义上，贪吃零食和受到辐射一样会让人易患癌症。这是因为．人体的遗传物质——DNA的合成与修复需要叶酸、维生素B12、维生素B6、维生素C、维生素E等营养素．如果这些营养素不足．会导致DNA损伤无法修复．其后果与辐射带来的伤害非常相似。     

放射卫生

辐射对小鼠精子发生过程中印记基因表达的影响；bFGF基因在中子辐射肠道损伤和修复中的表达和意义；睡眠剥夺复合贫铀污染对大鼠行为学及皮层NOS的影响；γ射线照射人正常肝细胞染色体损伤的修复；辐照的血管内皮对造血干细胞迁徙的影响。[编者按]     

低剂量辐射对T细胞CD28和Fas分子表达作用的研究

目的 研究低剂量辐射对T细胞CD38受体分子和Fas受体表达的适应性反应，探讨低剂量辐射免疫兴奋效应的分子机制。方法 采用直接免疫荧光－流式细胞仪分析技术，测定低剂量γ射线辐射后T细胞CD28受体分子和Fas受体（CD95）表达的变化。用JAM检测技术研究低剂量γ射线辐射后T细胞DNA断裂程度。结果 用低剂量γ射线诱导辐射后，正常人CD3^ T细胞CD28受体分子的表达有所增加；先低剂量辐射再高剂量辐射，CD28受体分子的表达无明显下降，Fas受体的表达和T细胞DNA断裂程度低于单纯高剂量照射组。结论 低剂量γ射线辐射增加CD28受体分子的表达，先低剂量γ射线辐射再高剂量辐射，CD28受体分子、Fas受体分子的表达和T细胞DNA断裂程度存在适应性反应，这可能是低剂量辐射的免疫兴奋效应的分子机制之一。     

WORTMANNIN对细胞辐射反应性的影响

目的 了解磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol-3Kinase,PI-3K)的特异性抑制剂WORTMAN-NIN(WT)对细胞辐射反应性的影响。方法 将处于对数生长期的LP3细胞经不同浓度WT作用1h,进行⁶⁰Coγ射线照射,继续进行克隆培养,制作剂量存活曲线。应用180°脉冲场琼脂糖凝胶电泳,检测受20Gyγ射线照射后细胞DNA双链断裂及其修复。继续用迁移率变化分析(Eloctrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)观察转录因子NF-kB的相应变化。结果 发现WT可以增加SP3细胞的辐射敏感性,最佳增敏浓度在20μmol/L以上;明显增敏效应时间在6h以内;DNA凝胶电泳实验显示,随着受照后时间的延长,受50μmol/LWT作用的细胞DN进入凝胶的量均高于单纯受照射组;转录因子NF-kB的结合活性在受照后6h内都经历了一个由低升高,然后降低的过程,大概在照后3h是这个变化的峰值。结论 提示存在PI-3K介导的辐射增敏信号途径。电离辐射可能通过激活NF-kB,进而促使一些与DNA损伤修复和细胞其它防御机制有关的基因活动,以减轻辐射损伤。WT有可能是通过阻滞这一过程的早期阶段而发生辐射增敏效应。     

用单细胞凝胶电泳技术评价五指毛桃对辐射小鼠DNA损伤修复作用

目的 探讨五指毛祧对辐射小鼠组织细胞DNA损伤的修复作用.方法 6 Gy<;60>Co γ射线全身一次性照射建立辐射损伤模型,3个低、中、高给药+辐射组分别灌胃给予相当于生药5、10、20 g·kg-1·d-1五指毛桃水提液,每天1次,连续7 d,阴性对照组、单纯辐射组给予生理氯化钠溶液,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠组织细胞DNA损伤和修复情况.结果 各辐射+给药组小鼠组织细胞DNA的尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail moment)均低于单纯辐射纽(P<0.01),且随着给药剂量的增加,Tail DNA%和Tail moment越低.结论 五指毛挑对辐射小鼠各组织细胞DNA的损伤有修复作用,具有一定的抗辐射作用.     

电离辐射诱发小鼠脾细胞DNA链断裂及修复

目的通过观察γ射线照射后IRM-2辐射抗性小鼠DNA链的断裂及修复,探讨IRM-2小鼠辐射抗性产生的可能机理。方法采用脉冲场凝胶电泳法,测定不同剂量γ射线诱发IRM-2小鼠及其亲本ICR/JCL和615小鼠脾细胞DNA单、双链断裂及照射后不同时间DNA链断裂的修复动力学。结果对照组IRM-2小鼠本底DNA损伤较低,即ssb和dsb的数目低于未照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.01)。不同剂量(1、2、4和8Gy)照射后,IRM-2小鼠ssb和dsb的数量均明显低于经相同剂量照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.05和P<0.01)。在较低剂量2Gy时,IRM-2小鼠与亲本小鼠相比,dsb和ssb修复无统计学差异;当分别接受4、8Gy大剂量照射后,IRM-2小鼠表现出较高的修复效率,即IRM-2小鼠0.5h和1hdsb、ssb修复速率比亲本小鼠快(P<0.05和P<0.01),而且修复后剩余的损伤远低于亲本小鼠。结论电离辐射后IRM-2小鼠DNA链断裂量较低,DNA链断裂的修复速率比亲本小鼠快,因此能及时快速地抵抗辐射造成的损伤,具有较强的辐射抗性。     

鼻咽癌细胞MeDIP-Seq测序reads在染色体上分布差异的研究

目的探讨同源不同辐射抗拒鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞DNA甲基化差异,期望从表观遗传学角度阐述人鼻咽癌辐射抗拒的发生机制。方法采用Me DIP-Seq测序法对CNE2R/CNE2细胞进行测序,分析比较DNA甲基化水平差异区间的分布。结果 CNE-2R和CNE-2细胞甲基化分布差异主要集中在第5、6、7、9、13、17号染色体上,其中第5、6、13、17号染色体上为甲基化上调区间的密集区域,第7、9号染色体上为甲基化下调的密集区域。结论同源不同辐射抗拒鼻咽癌细胞CNE-2R和CNE-2细胞的甲基化水平存在差异;差异甲基化水平可能与辐射抗拒相关。     

放射卫生

某市环境电磁辐射水平的分布；居室中放射性污染调查与辐射剂量估算；微波辐射对大鼠睾丸StAR、P450scc基因表达影响；刺五加皂苷的抗辐射损伤作用；电离辐射对松果腺细胞功能的影响。     

辐射诱导的BLAP75蛋白的磷酸化和核定位的改变

目的 研究BLAP75蛋白对紫外线辐射和电离辐射的反应.方法 运用Western印迹和间接免疫荧光技术,检测紫外线辐射和电离辐射对BLAP75蛋白的影响,以及采用蛋白磷酸酶反应来确定BLAP75蛋白的翻译后修饰类型.结果 当细胞受到紫外线或者γ射线的照射后,BLAP75蛋白会受到翻译后修饰,并且咖啡因能部分抑制这种蛋白修饰.电离辐射还会导致BLAP75被招募到细胞核聚焦体.结论 紫外线辐射和电离辐射能诱导BLAP75蛋白的磷酸化,ATM或者ATR负责磷酸化部分BLAP75蛋白,而且BLAP75很可能在细胞核聚焦体参与DNA损伤修复.     

γ射线照射后小鼠XRCC修复基因的mRNA表达

目的分析XRCC修复基因在IRM2近交系小鼠辐射抗性产生中的作用。方法用Northern杂交方法,比较IRM2小鼠及其亲本ICRJCL及615小鼠不同剂量γ射线照射后不同时间XRCC1及XRCC5修复基因mRNA表达水平。结果对照组IRM2小鼠XRCC1及XRCC5基因mRNA水平明显高于其亲本对照组小鼠(P<0.01及P<0.05)。当接受1,2及4Gy照射后,亲本小鼠XRCC1及XRCC5基因mRNA水平均有不同程度升高,但显著变化出现在照射后2h(P<0.05)。IRM2小鼠在较低剂量1,2Gy时变化不明显,只在相对较高的4Gy剂量组照射后1h,XRCC1及XRCC5基因mRNA水平显著升高(P<0.05及P<0.01)。结论IRM2小鼠的这两种修复基因基础表达处于高水平,当受到较大剂量照射后,XRCC5基因高表达参与DNA双链断裂修复,这可能是其辐射抗性的主要原因之一。     

大蒜油软胶囊抗辐射作用的研究

目的 探讨大蒜油抗辐射引起的小鼠外周血白细胞和骨髓细胞DNA减少的作用。方法 将小鼠随机分为辐射对照组、大蒜油低、中、高剂量组,观察辐射前后小鼠外周白细胞数量和骨髓细胞DNA数量的改变。结果 照射前三天,各剂量组小鼠外周血白细胞数与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。照射后第三天,对照组白细胞数前后自身比较,差异有显著性(P<0.05),说明辐射损伤模型成立。照射后第14天小鼠外周血白细胞计数,受试样品中、高剂量组与辐射模型对照组比较白细胞总数增多,有显著性差异(P<0.05)。结论 大蒜油具有对抗辐射引起的小鼠外周血白细胞和骨髓细胞DNA减少的作用。     

麦胚提取物对辐射损伤修复的实验研究

目的 研究麦胚提取物对小鼠辐射损伤修复的调节和保护作用。方法 采用辐射前或辐射同时饲喂一定量的麦胚提取物，观察小鼠经X射线一次性全身照射后的临床症状、30d存活率、骨髓微核率、外周血白细胞总数在不同时间的变化。结果 与对照组(单纯照射)比较，饲喂麦胚提取物可使小鼠的头面部皮肤、小肠黏膜、肾脏损伤症状得到明显改善；30d存活率为86．17％(P＜0．01)，提高存活率41．79％，保护系数为1．72；骨髓微核率4．62‰；比对照组(12．14‰)降低(P＜0．01)；外周血白细胞总数在7，13，20，30d均显回升(P＜0.05，P＜0．01，P＜0．01，P＜0．01)。结论 麦胚提取物对小鼠辐射损伤修复有一定程度的调节和保护作用，对于辅助肿瘤放射治疗具有重要意义。     

线粒体DNA缺失作为辐射生物分子剂量计的研究现状

辐射生物剂量计,在估算个体受照剂量中起着十分重要的作用.近年来,线粒体DNA片段缺失作为一种新的辐射生物分子剂量计的可行性研究,受到越来越多的关注.本文对线粒体DNA片段缺失尤其是线粒体4977bp缺失的研究现状作一简要概述.     

用cDNA微列阵技术探讨苯中毒相关的DNA复制及损伤修复基因表达谱的改变

目的筛选与苯中毒有关的DNA复制及损伤修复基因。方法选取慢性苯中毒患者和无苯接触的健康人各7例配对，提取外周血白细胞总RNA。在反转录cDNA时，用Cy3，Cy5两种激发波长荧光分别标记两组样本cDNA探针。将各对探针混合后与含141条DNA复制及损伤修复的人类基因表达谱芯片杂交、扫描，分析杂交结果。结果共筛选出差异表达的基因25条，其中16条基因表达上调：9条基因表达下调，主要包括有DNA复制基因如PRIM2A，ORCIL等；DNA合成、重组及修复基因如POLK；DNA损伤信号基因／修复蛋白和DNA连接酶如RECQL，PRKDC，G22P1，ERCC3，ERCC1，CRY1。CHES1，BRCA2．APEX等；重组蛋白质如RECQL；其他DNA合成再重组和修复蛋白质如SKIV2L，RBMS1，SON．SET等。结论苯中毒患者外周血白细胞的DNA复制及损伤修复基因与正常人相比存在差异性表达，为进一步筛选苯中毒生物标志物提供了依据。     

放射卫生

全脑照射后海马组织内氨基酸类神经递质含量的变化；信号因子对辐射诱导胸腺淋巴细胞凋亡的影响；电子射线照射大鼠胶原及自由基改变的研究；海生多糖肽对亚急性辐射损伤小鼠的防护作用；川芎嗪促进急性放射损伤小鼠骨髓造血修复作用的研究。     

单细胞凝胶电泳检测人血淋巴细胞DNA辐射损伤的剂量效应关系

目的 采用单细胞凝胶电泳观察和分析不同剂量辐射照射后1d和22d血淋巴细胞DNA损伤的特征性变化。方法 C57BL/6j小鼠分为假照射组和辐射损伤模型组。采用⁶⁰COγ射线照射诱导辐射损伤模型。吸收剂量分别为1.0、2.0、4.0、和8.0Gy。应用单细胞凝胶电泳检测和分析照射损伤后1d和22d淋巴细胞DNA损伤变化。结果 ①通过单细胞凝胶电泳可观察辐到射损伤后1d和22d淋巴细胞DNA损伤的特征性改变。其中彗星头DNA,尾DNA,彗星长度,头长度,尾长度,尾/头长比值,彗星尾距,Oliv尾距等指标具有显著性统计学差异。在照射后22d所检测的上述特征性改变较照射后1d更为显著。结论 上述结果提示SCGE将有可能作为辐射损伤后DNA损伤的一种新的辐射生物剂量量计。     

放射卫生

微波辐射对小鼠免疫功能影响；微波辐射防护服对雷达作业人员精液质量影响；低剂量电离辐射全身照射人群的结核病危险及其免疫状态（综述）；哈尔滨辐射事故受照者生物剂量估计和远后效应评价；低剂量辐射对小鼠睾丸生精细胞中细胞色素c和caspase-3表达的影响；     

低剂量辐射诱导适应性反应机制的研究进展

此文对近几年低剂量辐射诱导适应性反应机制的研究文献进行了综述,从低剂量辐射诱导DNA损伤和修复酶类的激活、抗自由基和抗氧化、细胞信号传导、基因和蛋白质表达等方面分别进行总结和评述,揭示低剂量辐射诱导适应性反应机制的研究现状,为相关研究人员提供参考资料。     

大豆多肽对辐射的保护功能

目的　研究大豆多肽的辐射保护功能。方法　以每日 0 2 1,0 4 2 ,1 2 6 g/ (kg·bw)大豆多肽胶囊灌喂小鼠 6 0d ,在第 30d给予一次性全身γ射线照射 ,观察小鼠辐照后 30d存活率、平均存活时间、白细胞总数、骨髓细胞DNA含量及血清溶血素水平。结果　大豆多肽能使辐照后小鼠 30d存活率明显增高、平均存活时间延长、白细胞总数明显增加 ,能提高骨髓细胞DNA含量和血清溶血素水平。结论　大豆多肽具有辐射保护作用。