慢性应激对大鼠免疫功能损伤机制的实验研究

[目的]研究慢性应激对大鼠免疫功能的影响及其作用机制.[方法]通过建立慢性应激动物模型,免疫组织化学法检测脾脏T淋巴细胞亚群的阳性率,电镜观察脾脏超微结构的改变,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醇(MDA)含量,彗星实验评价大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤情况.[结果]与对照组相比,实验组大鼠脾脏超微结构异常明显,T淋巴细胞亚群比例异常,CD3 T细胞百分率、CD4 /CD8 值均下降(P＜0.05),CD8 T细胞百分率升高(P＜0.01),血清SOD活性(56.70±15.65)U/ml降低,MDA含量(9.21±2.75)nmol/ml升高(P＜0.05),彗星细胞发生率升高(P＜0.05).淋巴细胞DNA损伤与MDA含量呈正相关,SOD活性与CD3 T细胞、CD4 /CD8 比值呈正相关;MDA含量与细胞免疫功能下降水平呈正相关,淋巴细胞DNA损伤与细胞免疫功能下降水平呈正相关.[结论]慢性应激使大鼠血清MDA含量增加,SOD活性下降,脾脏超微结构改变,损伤外周血淋巴细胞DNA,从而影响机体的免疫功能.     

吸入纳米和微米二氧化钛颗粒对雄性大鼠精子及其功能的影响

[目的]比较雄性大鼠吸入纳米二氧化钛（nm-TiO2）与微米二氧化钛（nm-TiO2）对其生精功能的影响并探讨其作用机制。[方法]45只雄性Wistar大鼠随机分为5组,分别为nm-TiO2100 mg/m^3和300 mg/m^3组,μm-TiO2100 mg/m^3和300 mg/m^3组和对照组。动物隔天在装有风扇扬尘的静式染毒柜中吸入染毒2 h,对照组不扬尘,只吸入空气。65 d后,测定附睾尾精子数量、活动度和畸形率,睾丸组织中乳酸脱氢酶同工酶-C4（LDH-C4）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）含量和血清中MDA、SOD及8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平。[结果]nm-TiO2致大鼠精子数量下降、LDH-C4活力下降和8-OHdG水平增加程度显著高于同剂量μm-TiO2组（P〈0.05）;nm-TiO2可致大鼠精子活动度、睾丸组织SDH和SOD活力下降,精子畸形率和MDA生成量升高（P〈0.05）,但与同剂量μm-TiO2组比较无显著性差异（P〉0.05）。[结论]nm-TiO2和μm-TiO2对雄性大鼠生精功能影响存在差异,nm-TiO2致生殖损伤能力强于同剂量水平的μm-TiO2。     

饮水氯化消毒副产物MX诱导人胚肝细胞氧化应激及其与DNA损伤的关系

目的研究饮水氯化消毒副产物3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮(MX)对体外培养的人胚胎肝细胞(L-02细胞)氧化应激的诱导。方法MX设10、30、100和300μmol/L4个暴露浓度,二甲基亚砜(DMSO,10ml/L)为溶剂对照,将L-02细胞染毒24小时后,检测L-02细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量。结果与溶剂对照相比,30、100和300μmol/L的MX能明显增加L-02细胞MDA含量(P<0.05,P<0.001,P<0.001),100、300μmol/L的MX使L-02细胞GSH水平显著性降低(P<0.001,P<0.001)、8-OHdG含量显著性增加(P<0.05,P<0.01)。在MX0~300μmol/L浓度范围内,L-02细胞的MDA含量与8-OHdG含量呈正相关(r=0.767,P<0.01);GSH水平与8-OHdG含量呈负相关(r=0.761,P<0.01)。结论MX可诱导L-02细胞氧化应激,使其脂质过氧化反应增强、抗氧化作用降低、DNA氧化损伤增加。MX引发的脂质过氧化反应和抗氧化力下降是DNA氧化损伤的影响因素之一。     

北京市交警多环芳烃暴露及DNA氧化损伤水平研究

目的 了解北京市交警多环芳烃(PAHs)暴露对体内DNA氧化损伤水平的影响.方法 于2007年6-8月,以某城区41名男性外勤交警和34名男性郊区对照人群作为研究对象,进行问卷调查及环境空气PAHs浓度、内暴露指标尿中1-羟基芘(1-OHP)和DNA氧化损伤标志物尿中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的检测,通过单因素及多元回归分析PAHs内外暴露水平对8-OHdG的影响.结果 交警组工作环境空气中细颗粒物(PM2.5)、苯并(a)芘[B(a)P]、PAHs浓度分别为0.096 mg/m3、3.20 ng/m3、38.32 ng/m3,高于郊区居民组相应值0.045 mg/m3、1.54 ng/m3、25.43ng/m3;交警组和郊区居民组人群尿中1-OHP浓度分别为(0.50±0.38)和(0.34±0.28)μmol/mol Cr(P＜0.05),尿中8-OHdG浓度分别为(13.74±6.30)和(11.61±6.02)ng/mg Cr(P＞0.05).多因素分析发现尿中1-OHP和吸烟是影响8-OHdG水平的重要因素,没有发现年龄、饮酒、锻炼习惯等调查因素对尿8-OHdG浓度的影响.结论 北京市交通污染对交警这一职业人群已产生一定的健康影响,环境空气PAHs暴露和吸烟是影响研究人群DNA氧化损伤水平的重要因素.     

纳米二氧化钛致小鼠肝组织DNA氧化损伤的研究

[目的]探讨纳米二氧化钛对小鼠DNA的氧化损伤作用. [方法]将20只雌性小鼠随机分成对照组和低、中、高3个染毒组,每组5只动物,采用尾静脉注射染毒;各组纳米二氧化钛染毒剂量分别为0、100、200、400mg/kg体重;动物染毒后24h处死,碘化钠法提取小鼠肝、肺、肾、骨髓、大脑组织中的DNA,采用高效液相色谱-ECD(HPLC-ECD)法测定各组织中的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG),观察纳米二氧化钛对不同组织DNA的氧化损伤情况. [结果]低、中、高3个染毒组的肝脏DNA水平分别是每106个脱氧鸟苷(dG)中含8-OHdG个数(1.07±0.11)、(1.49±0.13)、(1.39±0.18),高于对照组(0.82±0.06),差异有统计学意义(P＜0.01);各染毒组其他脏器组织中8-OHdG水平与对照组比较,差异无统计学意义(P＞ 0.05). [结论]纳米二氧化钛可导致小鼠肝脏DNA氧化损伤增加,对肺、肾、骨髓、大脑中的DNA氧化损伤未见影响.     

苯并[a]芘对小鼠肝脏的氧化损伤作用研究

[目的]探讨不同剂量苯并[a]芘对小鼠肝脏的氧化损伤作用. [方法]用不同剂量(1 mg/kg,2.5mg/kg,6.25 mg/kg体重)苯并[a]芘对小鼠急性染毒,植物油为对照,2周后测定肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的含量,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠肝脏细胞DNA损伤情况. [结果]与对照组比较,各染毒组SOD活性均显著性下降(P＜0.05),MDA含量显著升高(P＜0.05),肝脏细胞彗星率随苯并[a]芘剂量增加而增加.彗星尾长随剂量增加而延长(P＜0.01). [结论]苯并[a]芘对小鼠肝脏有明显的氧化损伤作用.     

原花青素对氟致雄性小鼠生殖系统氧化损伤的拮抗作用

为研究原花青素(GSP)对氟致雄性小鼠的生殖系统氧化损伤的拮抗效应,将40只健康性成熟SPF级昆明雄性小鼠随机分为对照(生理盐水)组、NaF(20 mg/kg)组、GSP(200 mg/kg)组及NaF(20mg/kg)+GSP(200mg/kg)组,每组10只.采用灌胃方式进行染毒,连续染毒35 d.检测睾丸组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)含量及总抗氧化能力(T-AOC)水平.结果显示,与对照组相比,NaF组小鼠睾丸组织匀浆中MDA和8-OHdG含量均增高,GSH含量、T-AOC水平和SOD活力均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而GSP组小鼠睾丸组织匀浆中SOD活力和T-AOC水平均增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与NaF组相比,GSP+NaF组小鼠睾丸组织匀浆中MDA和8-OHdG含量均降低,GSH含量、T-AOC水平和SOD活力均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).经析因分析,NaF与GSP两种因素同时作用时对小鼠睾丸组织匀浆中MDA和GSH含量存在交互作用(P＜0.05),表现为拮抗作用;而对小鼠睾丸组织中T-AOC水平、SOD活力及8-OHdG含量无交互作用(P＞0.05).提示GSP对氟化钠导致的雄性小鼠生殖系统氧化损伤具有一定的拮抗作用.     

钇对大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤作用

目的 研究长期摄入稀土Y3 对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用,为明确稀土的遗传毒性提供数据.方法 刚断乳大鼠分别饮用含稀土Y3 为0,53.4,5 340mg/L的饮用水,子代饮水同亲代.子代喂饮6个月后采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术观察大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤状况.结果 53.4和5 340 mg/L组大鼠淋巴细胞DNA形成的彗星尾部DNA含量、尾长、彗星长、Olive尾矩等指标均高于对照组.其中,低剂量组的彗星长(28.80±5.01)、高剂量组尾长(3.04±0.20)和彗星长(28.52±5.18)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 稀土 Y3 可造成大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤,有一定的遗传毒性.     

长期铅暴露雄性大鼠脑组织铁过载及DNA氧化损伤

目的 研究铅暴露对不同生长阶段SD雄性大鼠脑组织铅、铁水平及DNA氧化损伤的影响.方法 将12只SPF级SD雌性大鼠随机分为3组,分别为空白对照(去离子水)组和低(0.8 g/L)、高(1.5 g/L)剂量乙酸铅染毒组,每组4只.采用自由饮水方式进行染毒,自妊娠前10d至仔鼠断乳(出生后21d).待断乳后,每组选取21只雄性仔鼠,相应各组分别自由饮用去离子水和0.3、0.9 g/L乙酸铅溶液.仔鼠分别饲养至断乳(21d)、中年(12个月)、老年(18个月)时,检测脑组织中铅、铁和8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)的水平.结果 在同一生长阶段,随着铅染毒剂量的升高,大鼠脑铅、脑铁及脑组织8-OHdG水平均增加.线性回归分析结果显示,在断乳期和老年期,大鼠脑铁、脑8-OHdG水平随着脑铅水平的升高而上升(P＜0.05);同时,脑铅、脑铁联合作用使大鼠脑8-OHdG水平升高(P＜0.05).而中年期无明显改变.在空白对照组和各剂量铅染毒组中,随着铅染毒时间的延长,大鼠脑铅、脑铁水平均增高(P＜0.05).空白对照组中,脑8-OHdG水平在中年、老年期增高(P＜0.05);低剂量组改变不明显;高剂量组在老年期明显升高(P＜0.05),中年期改变不明显.结论 铅暴露可致SD大鼠脑组织铁过载及DNA氧化损伤.     

氯氰菊酯对小鼠肝细胞的氧化损伤和维生素E的抗氧化作用

目的研究氯氰菊酯对小鼠肝组织的氧化损伤。方法昆明小鼠随机分为5组,包括1个阴性对照组(花生油)、3个氯氰菊酯染毒组(10、20和40 mg/kg)和1个高剂量氯氰菊酯(40 mg/kg)+维生素E(100 mg/kg)组,灌胃7 d,测定肝组织匀浆活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量和肝组织细胞DNA-蛋白质交联(DPC)系数;并观察病理损伤。结果随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,肝组织ROS、MDA、8-OHdG含量和DPC系数逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标呈一定的剂量-效应关系,40 mg/kg组的上述指标与对照组差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。病理学观察可见40 mg/kg组肝细胞水肿严重,体积明显增大,胞浆疏松化甚至气球样变,肝索排列较紊乱。与单独氯氰菊酯染毒组相比较,40 mg/kg+VE组肝组织的ROS、MDA、8-OHdG含量和DPC系数均有下降,GSH含量上升(P0.05,P0.01)。结论 40mg/kg的氯氰菊酯能造成小鼠肝组织的氧化损伤和病理损伤,并可被维生素E所拮抗。