再生障碍性贫血TNF-α基因多态性和蛋白表达水平的相关研究

目的探讨北方地区汉族人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因型别的多态性和TNF-α蛋白表达与再生障碍性贫血(AA)的相关性。方法对36例AA患者采用酶联免疫分析法(ELISA)测定TNF-α含量,应用顺序特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法检测TNF-α基因型别的多态性变化,并与31名健康献血者对照。结果AA组血中TNF-α蛋白含量(1.960±0.103)显著高于对照组(1.17±0.075),P<0.01;AA组TNF-α(308A)等位基因频率(40.12%)显著高于对照组(9.68%),P<0.01,提示该等位基因频率和血中TNF-α蛋白表达增高与AA相关。结论中国北方地区汉族人TNF-α基因308位点的多易感态性和TNF-α蛋白表达与AA的易感性相关联,TNF-α(308A)等位基因可能是AA的易感基因之一。     

肿瘤坏死因子-α脑脊液水平及其多态性与多发性硬化的相关性

目的研究中国南方汉族人群中脑脊液肿瘤坏死因子-α水平及其G-308A位点基因多态性与多发性硬化之间的相关性。方法采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定68名无亲缘关系的急性发作期MS病人和55例非免疫系统疾病人的CSF(对照)TNF-α,同时应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测上述68例MS病人和106名无血缘关系的广东籍健康汉族人的TNF-α基因型。结果发作期MS患者CSF中TNF-α水平与正常对照组,无显著差异(P>0.05),分别是265±78pg/m l和245±83pg/m l;TNF-α各等位基因型频率在MS组和正常人组比较无显著差异(P均>0.05),病例组TNF-α基因A纯合基因型和A等位基因频率(分别为4.4%和13.9%),正常对照组(分别为0%和8.5%)。结论1.CSF中TNF-α水平与发作期MS患者无相关。2.中国南方汉族人群存在TNF-α基因G-308A位点突变。3.从目前调查的例数中,中国南方汉族人群TNF-α基因G-308A多态性与广东人群中MS及CSF中TNF-α水平无关。     

内蒙古包头地区汉族人群TNF-α-308位点基因多态性与IgA肾病的相关性研究

目的：了解内蒙古包头地区汉族人群IgA肾病患者肿瘤坏死因子α（TNF-α）-308位点基因型的分布特点。方法：应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测97例IgA肾病患者和73例正常人的TNF-α基因型。结果：IgA肾病患者组中TNF-α基因G/A多态GG、GA、AA基因型频率分别为85.6%、11.3%和3.1%,其中G和A等位基因频率分别为91.2%和8.8%。正常对照组中,TNF-α基因G/A多态GG、GA、AA基因型频率分别为91.8%、5.5%和2.7%,其中G和A等位基因频率分别为94.5%和5.5%。IgA肾病患者组与正常对照组比较,基因型频率差异有显著性（χ^2=27.2,P〈0.05）,等位基因频率之间差异无显著性（χ^2=0.659,P〉0.05）。结论：TNF-α-308位点基因多态性与内蒙古包头地区汉族人群IgA肾病的发病有相关性,等位基因频率之间差异无显著性（χ^2=0.659,P〉0.05）。     

肿瘤坏死因子α-308基因多态性与牙周病相关性

目的探讨肿瘤坏死因子-α308位点基因多态性与牙周炎易感性的关系。方法采用序列特异引物PCR方法 （SSP-PCR）方法检测了78例重度慢性牙周炎（CP）患者和70例健康对照组的TNFα-308（G/A）位点基因多态性。结果 CP患者TNFα-308各基因型（GG,GA,AA）频率分别为70.5%、0%和29.5%,在对照者中分别为67%,3%和30%二组之间的基因型频率分布的比较,差异没有显著性（χ2=2.29,P〉0.05）;GG和AA的等位基因频率在CP中分别85.3%和14.7%,在对照者中分别为82%和18%,二者之间比较,差异没有显著性（χ2=0.526,P〉0.05）。结论 TNF-α-308基因多态性位点可能不是中国人患牙周病的主要易感位点基因。     

贵州三个主要民族人群TNF-α基因启动子区单核苷酸多态性分析

目的：了解贵州汉族、苗族、布依族人群肿瘤坏死因子α（Tumour necrosis factor alpha,TNF-α）基因启动子区的基因多态性。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP-PCR）方法,对贵州汉族、苗族、布依族人群中TNF-α基因启动子区已知的5个多态性位点进行基因分型检测,并用统计学方法分析各位点基因型、等位基因频率和单倍型及其组间差异。结果：贵州汉族人群中TNF-α基因启动子区5个位点的等位基因频率分别为-238（G,96%;A,4.0%）、-308（G,92%;A,8%）、-857（C,65.0%;T,35.0%）、-863（C,80.0%;A,20.0%）、-1031（T,48.0%;C,52.0%）,其单倍型以GG-GG-CC-CC-TC和GG-GG-TT-CC-TC为主,分别占32.0%和28.0%;苗族人群中TNF-α基因启动子区5个位点的等位基因频率分别为-238（G,85.0%;A,15.0%）、-308（G,94.0%;A,6.0%）、-857（C,74.0%;T,26.0%）、-863（C,96.0%;A,4.0%）、-1031（T,50.0%;C,50.0%）,其单倍型以GG-GG-CC-CC-TC和GG-GG-TT-CC-TC为主,分别占50.0%和24.0%;布依族人群中TNF-α基因启动子区5个位点的等位基因频率分别为-238（G,86.0%;A,14.0%）、-308（G,92.0%;A,8.0%）、-857（C,89.0%;T,11.0%）、-863（C,84.0%;A,16.0%）、-1031（T,50.0%;C,50.0%）,其单倍型以GG-GG-CC-CC-TC占54.0%,AA-GG-CC-CC-TC和GG-GG-CC-AA-TC各占12%。结论：贵州汉族、苗族、布依族人群中TNF-α基因启动子区单核苷酸多态性具有独特的特征,这为TNF-α基因多态性与疾病的相关性研究提供了基础资料。     

我国汉族人群α1基因数目可变串联重复序列分布特征的研究

目的：研究我国汉族人群免疫球蛋白α1基因中3个数目可变串联重复序列(VNTR)多态性分布特征，及其与已报道的高加索人群相比较的特点。 方法: 从现存数据库中寻找α1基因内的3个VNTR位点，即α1基因3’端的hs1,2增强子内的VNTR1、其上游6 Kb 的VNTR2和位于α1基因第5外显子的E5VNTR。 提取201例广东汉族人基因组DNA，PCR分别扩增含上述3个VNTR位点片段，2%－3％凝胶电泳分带鉴定基因型，并以测序证实。 结果: 与高加索人群比较我国汉族人群α1基因 VNTR1多态性分布特征表现为：C（3次重复）等位基因频率明显升高（10.0% vs 1.0%）， A（1次重复）等位基因频率偏低（30.3% vs 36.1%-39.4%）, 差异显著（χ2=72.85，P＜0.01）。 基因型BB占37.8％， AB占32.3％，AA占12％，BC占11.4％, AC占4.5％, CC占2.0％， BC、AC基因型分布频率显著高于高加索人群，而AB型分布频率显著低于高加索人群（χ2=73.77，P＜0.01）。另外两个数据库中报道的VNTR位点（VNTR 2及E5VNTR）在我们所测人群中呈均一分布,PCR产物长度分别为136 bp(VNTR 2)和535 bp(E5VNTR)。 结论: 我国汉族人群α1基因 VNTR多态性分布与基因组数据库中基于高加索人群的资料不尽相同，其中Iα1 hs1,2 VNTR1多态性不同于高加索人群，突出表现为C等位基因频率及BC、AC基因型频率显著高于高加索人群。而VNTR2和E5VNTR在被检人群中未见多态性。本研究弥补了现存数据库中缺乏我国汉族人群相应数据的不足, 同时为以α1基因为候选基因找寻疾病基因的研究提供了可靠的数据。     

中国汉族人群TNF-α基因启动子区的多态性研究

目的：研究中国汉族人群TNF-α基因启动子区的基因多态性。方法：采用PCR-SBT（PCR Sequencing Based Typing）方法进行TNF-α基因启动子区的多态检测。结果：采用PCR-SBT方法可以成功获得TNF-α基因启动子区的多态性结果并能够发现新的多态性位点；本次研究发现中国汉族人群TNF-α基因启动子区的多态性位点有：-1031、-863、-857、-572、-308、-238、-204和-163，其中-572和-204的多态性位点为首次报道；我国汉族人群该区域的核酸差异性为（11.00±0.46）×10-4，低于非洲人群；与Malawi人群相比，我国汉族人群-1031C、-308A、-238A出现频率较低，而-857T的频率却较高；与Gambian人群相比，-863A和-857T出现频率较高，-308A出现频率较低；我国汉族人群TNF-α基因启动子区的-1031C、-863A、-857T与-572C、-308A、-238、-204C、-163C有相关性。结论：采用PCR-SBT方法可以成功对TNF-α基因启动子区的基因多态性进行研究，我国汉族人群TNF-α基因启动子区的基因多态性可能存在独特的特点。     

动脉硬化性脑梗死与肿瘤坏死因子α-238及肿瘤坏死因子α-308基因多态性的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)α-238及TNFα-308基因多态性与动脉硬化性脑梗死的关系.方法 运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测97例动脉硬化性脑梗死(CI组)及141例正常人(对照组)的外周血TNFα-238、TNFα-308基因多态性AA、AG、GG的基因型.结果 CI组TNFα-238 GG、GA和AA基因型频率分别为88.66%、11.34%和0;对照组分别为95.74%、4.26%和0.CI组TNFα-238 G、TNFα-238 A基因频率分别为94.33%、5.67%;对照组分别为97.87%、2.13%.TNFα-238各种基因型频率在CI组与正常对照组之间的差异有统计学意义(均为P<0.05).CI组TNFα-308 GG、GA和AA基因型频率分别为77.32%、8.25%和14.43%;对照组分别为92.20%、5.67%和2.13%.CI组TNFα-308 G、TNFα-308 A基因频率分别为81.44%、18.56%;对照组分别为95.04%、4.96%.TNFα-308各种基因型频率在CI组与正常对照组之间的差异有统计学意义(均为P<0.05).结论 TNFα-238和TNFα-308基因多态性AA、AG、GG基因型与CI有关联.     

肿瘤坏死因子α基因多态性与系统性红斑狼疮的相关研究

目的 探讨肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）α的基因多态性与华东地区汉族人群系统红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE)易感性的关系及其在SLE家系中的传递规律。方法 应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性对99例SLE患者，116名正常人及12个SLE家系的48名成员进行了TNFα基因分型。结果 SLE患者的TNFα等位基因频率高于对照组（8.6%vs3.4%,OR=2.63,P=0.00232)，在SLE家系研究中未发现TNFα基因多态性与SLE存在关联以及传递－连锁不平衡的证据。结论 TNFα2等位基因可能是SLE的易感等位基因。     

生长转化因子(TGF)基因型多态性与多发性骨髓瘤的相关研究

目的探讨中国北方地区汉族人生长转化因子(TGF)基因型别的多态性与多发性骨髓瘤(MM)的相关性。方法对21例MM患者采用顺序特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法,检测TGF基因型别的多态性变化,并与35名健康献血者对照组进行对比分析。结果 MM组TGF(H)等位基因频率(38.09%)显著高于正常对照组(11.43%),P<0.05;提示该等位基因频率增高与MM的发病相关;而TGF其它等位基因频率在MM组和对照组中无明显差异。结论我国北方地区汉族人TGF(H)基因与MM的易感性相关联。     

急性早幼粒细胞白血病TNF-α基因多态性和蛋白表达水平的相关研究

目的 探讨北方地区汉族人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因型别的多态性和TNF-α蛋白表达与急性早幼粒细胞白血病(APL)的相关性.方法 对21例APL患者采用酶联免疫分析法(ELISA)测定TNF-α含量,应用顺序特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法检测TNF-α基因型别的多态性变化,并与31名健康献血者对照.结果 APL组血中TNF-α蛋白含量(1.810±0.116)显著高于对照组(1.107±0.095),P＜0.05;APL组和正常对照组TNF-α(308A)等位基因频率分别是(9.524%)和(9.68%)组间差异无统计学意义(P＞0.05),提示该等位基因频率与APL不相关,血中TNF-α蛋白表达增高与APL相关.结论 中国北方地区汉族人TNF-α基因308位点基因多态性与APL的易感性、临床以及预后可能不起重要作用;而TNF-α蛋白表达与APL的易感性相关联.     

子宫内膜异位症与肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性与子宫内膜异位症的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测100例子宫内膜异位症及100例正常人肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性。结果TNFα-308G/A和TNFβG252A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性与子宫内膜异位症无明显相关。     

贵州汉族TGF-β1基因多态性与系统性红斑狼疮相关性的研究

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群系统性红斑狼疮（SLE）的相关性。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术，分析80例SLE患者及95例正常对照组的TGF-β1基因启动子-509C/T多态性。结果：SLE组与正常对照组-507C/T基因型频率分布有差异（P〈0.05），-509CC基因型SLE组高于对照组（35% vs 21.1%），而-509TT型SLE组明显低于正常对照组（18.75% vs 36.8%）；SLE患者组-509位点的等位基因频率与正常对照组比较差异也有显著性（P〈0.005），SLE组C等位基因频率显著高于对照组（58.1% vs 42.1%），T等位基因频率低于对照组（41.9% vs 57.9%）。结论：贵州汉族人群TGF-β1基因启动子-509C/T多态性与SLE显著相关。     

不明原因习惯性流产与肿瘤坏死因子水平及肿瘤坏死因子α-308基因多态性的相关性初步研究

目的 研究肿瘤坏死因子（TNF）水平及肿瘤坏死因子α-308基因多态性与不明原因习惯性流产的关系。方法 用放免法测定50例不明原因习惯性流产患者及50例健康对照者血清TNF水平，用聚合酶链反应扩增TNF-α-308基因片段，NcoI内切酶进行限制性酶切反应。结果 50例妊娠高血压综合征患者及50例正常对照TNF-α-308基因型及等位基因频率均无显著性差异，而血浆中TNF水平，不明原因习惯性流产组明显高于对照组（P〈0．05）。结论 炎性反应在不明原因习惯性流产病程中有重要作用，TNFα-308基因多态性与不明原因习惯性流产无关联。     

HIF-1α基因C1772T、G1790A多态性与藏族人群高原低氧适应关系的研究

采集西藏登山队和西藏登山运动学校藏族登山队员（共86人）以及广东汉族健康个体（共90人）的外周静脉血样,提取白细胞基因组DNA,利用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应（PCR-RFLP）技术检测缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）基因（HIF-1α）外显子12的C1772T、G1790A的单核苷酸多态性等位基因频率及其组合基因型分布特征,以探讨其与高原低氧适应的相关性。结果显示,C1772T的CC、CT和TT基因型分布频率在藏族组与汉族对照组分别为13.95%和16.67%、38.37%和41.11%、47.68%和42.22%,各基因型频率在两组间比较无显著性差异;G1790A的GG、GA和AA基因型分布频率在藏族组与汉族对照组分别为60.47%和75.56%、36.05%和21.11%、3.48%和3.33%,藏族组的GG基因型频率较汉族对照组的低（P〈0.05）,而GA基因型频率较汉族对照组高（P〈0.05）。表明G1790A的GA基因型可能与藏族人群适应高原低氧有关,值得进一步深入探讨。     

肿瘤坏死因子α基因(TNFα)-G308A多态性与精神分裂症的关联

目的：探讨肿瘤坏死因子α基因(TNFα)—G308A多态性与精神分裂症的关系。方法：收集141个核心家系，每家有1名符合ICD-10精神分裂症诊断标准的患者，患者的生物学父母均健在；用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-based RFLP)分析方法检测所有研究对象的TNFα-G308A基因型。结果：传递不平衡检验(TDT)显示等位基因的传递具有统计学显著性差异(χ2TDT＝7．7044，P＝0.005)。结论：肿瘤坏死因子α基因(TNFα)-G308A多态性与精神分裂症相关联，支持肿瘤坏死因子。基因(TFNα)是精神分裂症的候选基因。     

肿瘤坏死因子α-863 C/A基因多态性与阿尔茨海默病的关系

为探讨TNFα-863 C/A基因多态性与阿尔茨海默病（AD）的关系,采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测66例AD患者（AD组）和119名正常人（对照组）的TNFα-863 C/A基因多态性。结果表明,AD组TNFα-863 C/C、C/A、A/A表型频率分别为：0.9242、0.0758、0,对照组为0.7563、0.2446、0;AD组TNFα-863 C、TNFα-863A基因频率分别为：0.9621、0.0379,对照组分别为：0.8782、0.1218;TNFα-863 C/A基因表型频率在AD组与对照组差异有统计学意义（P〈0.05）。因此TNFα-863 C/A基因多态性与AD有明显相关性。     

TNFα-308G/A和-850C/T基因多态性与葡萄膜炎相关性的初步探讨

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)α-308G/A和-850C/T基因多态性与葡萄膜炎的关系。方法收集2005-2010年在番禺区人民医院、番禺区石碁人民医院、广州市红十字会医院和广州医学院第二附属医院眼科就诊的葡萄膜炎患者51例,119名对照组均为广州医学院第二附属医院体检者,运用多聚酶链反应技术检测51例葡萄膜炎及119例正常人TN-Fα-850C/T基因多态性。结果葡萄膜炎组TNFα-308G/G、G/A、A/A表型频率分别为0.7647、0.1765、0.0588,对照组分别为0.7899、0.1681、0.0420;葡萄膜炎组TNFα-308G、TNFα-308A基因频率分别为0.8739、0.1261,对照组分别为0.8529、0.1471,葡萄膜炎组TNFα-850 C/C、T/C、T/T表型频率分别为0.7059、0.2745、0.0196,对照组分别为0.7899、0.1932、0.0168;葡萄膜炎组TNFα-850 C、TNFα-850 T基因频率分别为0.8431、0.1569,对照组分别为0.8866、0.1134;TNFα-850C/T各种基因型频率在葡萄膜炎组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论TNFα-308G/A和-850C/T基因多态性与葡萄膜炎无明显相关。     

不明原因习惯性流产与肿瘤坏死因子水平及肿瘤坏死因子α-308基因多态性的相关性初步研究

目的研究肿瘤坏死因子(TNF)水平及肿瘤坏死因子α-308 基因多态性与不明原因习惯性流产的关系.方法用放免法测定50例不明原因习惯性流产患者及50例健康对照者血清TNF水平, 用聚合酶链反应扩增TNF-α-308 基因片段,NcoI内切酶进行限制性酶切反应.结果 50例妊娠高血压综合征患者及50例正常对照TNF-α-308基因型及等位基因频率均无显著性差异, 而血浆中TNF水平,不明原因习惯性流产组明显高于对照组(p<0.05).结论炎性反应在不明原因习惯性流产病程中有重要作用,TNFα-308基因多态性与不明原因习惯性流产无关联.     

终末期肾病患者肿瘤坏死因子α基因多态性与微炎症状态的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)基因G-308A位点的遗传多态性和终末期肾病(ESRD)患者微炎症状态的相关关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测30例健康对照者、60例终末期肾病患者该位点的基因多态性;应用ELISA测定血清C反应蛋白(CRP)、TNF-α浓度。结果 TNF-α-308AG+AA基因型在ESRD组、健康对照组分布频率分别为12%、7%,两组在基因型分布频率、等位基因频率差异均无统计学意义。ESRD组的不同基因型血清CRP、TNF-α浓度未发现差异;ESRD患者血清CRP、TNF-α浓度与基因型之间的Spearman相关系数分别为0.101和0.09(P0.05)。结论 TNF-α基因G-308A位点的基因多态性与ESRD的发生无相关性。ESRD患者血清CRP、TNF-α浓度升高与TNF-α基因G-308A位点的基因多态性无关。