从自噬机制探讨加味黄芪赤风汤含药血清对阿霉素诱导的肾小球足细胞损伤的保护作用

目的研究加味黄芪赤风汤对肾小球足细胞自噬及足细胞损伤相关蛋白nephrin、podocin及desmin表达的影响。方法采用体外培养小鼠肾小球足细胞、以阿霉素(adriamycin,ADR)诱导的方法制作足细胞损伤模型。随机分为空白组、模型组、替米沙坦组及加味黄芪赤风汤高、中、低剂量组(简称中药高、中、低剂量组)。采用Western blot法检测各组足细胞相关蛋白nephrin、podocin、desmin和自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达水平,透射电镜下观察各组足细胞自噬超微结构变化。结果 (1)与空白组比较,模型组nephrin、podocin表达明显下降(P0.01),desmin表达明显升高(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组及替米沙坦组nephrin、podocin表达明显升高(P均0.01),desmin表达明显下降(P均0.01),中药低剂量组无明显改善(P0.05)。(2)模型组较空白组自噬小体数量明显增多,体积增大,细胞器减少;中药高、中剂量组及替米沙坦组较模型组自噬超微结构均有不同程度改善,而中药低剂量组无明显改变。(3)与空白组比较,模型组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显上升(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量及替米沙坦组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显下降(P0.01),中药低剂量组无明显下降(P0.05)。结论加味黄芪赤风汤对ADR诱导的足细胞损伤具有保护作用,调节足细胞自噬活性可能是其足细胞保护作用的内在机制之一。     

加味黄芪赤风汤含药血清对LPS诱导的小鼠肾小球系膜细胞ColⅣ、MMP-2 及TIMP-2表达的影响

目的探讨加味黄芪赤风汤对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMCs)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ,ColⅣ)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制酶2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)水平的影响。方法采用血清药理学方法制备正常血清及替米沙坦、加味黄芪赤风汤高、中、低剂量含药血清。体外培养GMCs,以LPS作为刺激因子,诱导系膜细胞增殖。将GMCs分为正常组、模型组、替米沙坦组及加味黄芪赤风汤高、中、低剂量组(简称中药高、中、低剂量组)。采用ELISA法检测各组GMCs上清液中ColⅣ含量,Western blot法检测GMCs中MMP-2及TIMP-2蛋白表达水平。结果与正常组比较,LPS刺激72 h后,模型组GMCs上清ColⅣ含量明显增多,系膜细胞MMP-2及TIMP-2蛋白表达均明显上调,MMP-2/TIMP-2比例下调(均P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组及替米沙坦组ColⅣ含量明显减少(P0.01);中药中、低剂量组MMP-2蛋白表达明显下调(P0.01,P0.05);替米沙坦组及中药高、中、低剂量组TIMP-2蛋白表达均下调(P0.01)。中药高剂量组TIMP-2蛋白表达水平明显低于中药低剂量组(P0.01);替米沙坦组、中药高、中剂量组MMP-2/TIMP-2比例明显上调(P0.01)。结论加味黄芪赤风汤可调节LPS诱导的GMSc ECM中MMP-2/TIMP-2比例失调,抑制ECM中ColⅣ的过度产生,促进ECM降解,减少ECM积聚,从而延缓肾小球硬化的进程。     

基于TGF-β1/Smad信号通路的加味黄芪赤风汤抗肾脏纤维化机制研究

目的观察加味黄芪赤风汤对TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其抗肾脏纤维化的机制。方法采用血清药理学方法,大鼠予加味黄芪赤风汤和替米沙坦灌胃,制备含药血清。体外培养小鼠系膜细胞,以脂多糖作为炎症刺激因子。实验分为6组:正常组、模型组、替米沙坦组、加味黄芪赤风汤(简称中药)高、中、低剂量组。含药血清干预72h后,采用酶联免疫法吸附试验测定各组细胞上清液中层粘连蛋白(laminin,LN)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的含量;采用Western blot法检测各组细胞中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达。结果(1)与正常组比较,模型组上清液中LN和FN含量增加(P0.01);与模型组比较,替米沙坦组与中药中剂量组LN及FN含量减少(P0.05,P0.01),中药低剂量组上清液中FN含量亦减少(P0.01)。(2)与正常组比较,模型组TGF-β1、p-Smad2/3、CTGF蛋白表达显著增加,Smad7蛋白表达减少,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,替米沙坦组、中药高、中、低剂量组TGF-β1、CTGF蛋白表达均降低(P0.01,P0.05),替米沙坦组、中药高、中剂量组p-Smad2/3蛋白表达降低(P0.01),中药高、中剂量组Smad7蛋白表达明显增加(P0.05)。结论加味黄芪赤风汤能够抑制致炎因子诱导的肾小球系膜细胞分泌细胞外基质增加和肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad信号通路的过度激活,这可能是加味黄芪赤风汤抗肾脏纤维化的机制之一。     

基于活性氧簇-自噬通路调控的加味黄芪赤风汤对肾小球足细胞的保护机制研究

目的观察加味黄芪赤风汤基于活性氧簇(ROS)-自噬通路对AngⅡ诱导肾小球足细胞损伤的保护机制。方法制备低、中、高剂量加味黄芪赤风汤(分别应用生药浓度为0.57、1.15、2.29 g/mL的加味黄芪赤风汤灌胃小鼠)含药血清及替米沙坦(0.83 mg/mL灌胃小鼠)含药血清,采用AngⅡ(1×10~(-7)mol/L)诱导足细胞损伤模型,分为空白组,模型组,加味黄芪赤风汤低、中、高剂量组以及替米沙坦组;为验证自噬与模型的关系,设置3MA与氯喹组。采用Western Blot检测足细胞损伤相关蛋白nephrin、podocin及自噬相关蛋白LC3、Beclin-1、P62表达,溶酶体荧光探针检测自噬流活性,透射电镜观察足细胞内自噬体的形成,流式细胞仪检测细胞内ROS平均荧光强度(MFI)。结果与空白组比较,模型组足细胞nephrin、podocin、P62表达下调(P0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1表达上调(P0.01),ROS的MFI增强(P0.01)。透射电镜及溶酶体荧光探针结果显示模型组自噬体数量增多,溶酶体表达增强。与模型组比较,加味黄芪赤风汤中、高剂量组及替米沙坦组nephrin、podocin、P62表达上调(P0.01,P0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1表达下调(P0.01,P0.05);3MA及氯喹组足细胞nephrin、podocin表达下调(P0.01,P0.05);加味黄芪赤风汤低剂量组Beclin-1表达下调(P0.05);各给药组ROS MFI减弱(P0.01,P0.05)。透射电镜及溶酶体荧光探针结果显示加味黄芪赤风汤组及替米沙坦组自噬体数量减少,溶酶体表达减弱。结论 AngⅡ通过下调nephrin、podocin表达损伤足细胞;加味黄芪赤风汤可上调AngⅡ诱导的nephrin、podocin表达,缓解足细胞损伤;加味黄芪赤风汤可能基于ROS-自噬通路,下调AngⅡ诱导的自噬流,拮抗肾小球足细胞损伤。     

加味黄芪赤风汤对阿霉素大鼠肾脏保护及自噬水平的调控作用

目的:观察加味黄芪赤风汤对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用及其对自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达的影响。方法:设立空白、模型、替米沙坦及加味黄芪赤风汤组,光镜下观察肾组织病理学变化,免疫组化法检测FN、LN、LC3和Beclin-1的表达及分布。结果:加味黄芪赤风汤可保护阿霉素肾病大鼠肾脏,显著抑制肾组织中的FN、LN,显著拮抗自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的过度表达。结论:加味黄芪赤风汤通过调控自噬水平对阿霉素肾病大鼠肾脏起到保护作用。     

加味黄芪赤风汤对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及肾脏皮质SOD和MDA的影响

目的:探讨加味黄芪赤风汤对阿霉素肾病大鼠蛋白尿治疗及抗自由基损伤的作用。方法:大鼠尾静脉注射阿霉素制作阿霉素肾病模型,于实验第2、4、6、8周末收集24h尿液并测24h尿蛋白定量,于实验第8周末取血和肾脏组织,进行血清ALB、TP、TCH以及肾脏皮质SOD、MDA的测定。结果:2倍剂量加味黄芪赤风汤组与同期模型组相比,实验第4、6、8周末24h尿蛋白定量均降低(P<0.05),肾脏皮质SOD显著升高(P<0.01)及MDA降低(P<0.05);正常剂量加味黄芪赤风汤组与同期模型组相比,实验第4周末24h尿蛋白定量减少(P<0.05),肾脏皮质SOD显著升高(P<0.01)。结论:加味黄芪赤风汤能够明显改善阿霉素肾病大鼠蛋白尿,提高抗自由基能力,改善肾脏自由基损伤。     

黄芪总苷对阿霉素诱导的足细胞损伤的保护作用

目的:探讨黄芪总苷对阿霉素(ADR)诱导损伤足细胞的结构和功能的影响。方法:采用0.5μmol/L的阿霉素处理MPC5条件永生型小鼠足细胞系24h,以建立足细胞的损伤模型;以50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml的3个浓度的黄芪总苷分别处理阿霉素损伤足细胞24h后,检测LDH、MDA及SOD生成水平或活力,以反映细胞损伤情况及氧化应激水平;MTT法检测足细胞的存活率;transwell法检测MPC5足细胞迁移能力,同时采用荧光染色法观察细胞骨架排布。结果:与空白对照组相比,足细胞损伤模型组足细胞存活率较对照组显著下降,与模型组比较,各浓度黄芪总苷均能上调阿霉素导致的损伤足细胞的存活率;同时,阿霉素可显著促进MPC5足细胞内LDH及MDA的生成量并且降低SOD活性,各浓度黄芪总苷均能抑制由阿霉素导致的MPC5足细胞内LDH及MDA的生成并增加SOD活性;细胞迁移实验结果显示,阿霉素可显著抑制MPC5足细胞的迁移能力,各浓度黄芪总苷均能改善由阿霉素导致的迁移能力下降;激光共聚焦显微镜观察结果显示,阿霉素破坏了细胞骨架完整性,50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml黄芪总苷干预均可抑制由阿霉素导致的足细胞骨架重排及破坏,100μg/ml、200μg/ml黄芪总苷干预的足细胞保持了较好的细胞骨架完整性。结论:黄芪总苷可维持处于阿霉素培养环境内足细胞内氧化应激环境的平衡、改善迁移能力、抑制细胞骨架重排与破坏及抑制细胞凋亡。因此,黄芪总苷对阿霉素损伤的MPC5足细胞具有保护作用。     

防己黄芪汤对阿霉素肾病大鼠肾组织乙酰肝素酶表达的影响

目的观察防己黄芪汤对阿霉素肾病大鼠肾小球滤过功能的作用,探讨该方减少蛋白尿,治疗肾小球疾病的可能机制。方法尾静脉注射阿霉素法建立阿霉素肾病大鼠模型,成模后,根据24 h尿蛋白定量随机分为模型组、防己黄芪汤高、低剂量治疗组,连续给药5周,分别测定各组大鼠24 h尿蛋白定量及肾组织乙酰肝素酶(HPA)表达。结果模型组大鼠24 h尿蛋白定量和肾组织HPA表达升高明显高于正常组(P0.05);与模型组比较,防己黄芪汤高、低剂量治疗组24 h尿蛋白定量和肾组织HPA表达均明显改善(P0.05)。结论防己黄芪汤减少模型大鼠尿蛋白的作用可能与调节肾组织HPA表达,保护足细胞受损有关。     

加味黄芪赤风汤治疗IgA肾病蛋白尿临床研究

目的:探讨加味黄芪赤风汤治疗IgA肾病蛋白尿的临床疗效及药理机制.方法:选取IgA肾病蛋白尿患者32例,采用随机数字表法分为对照组和观察组各16例.对照组给予替米沙坦治疗,观察组给予加味黄芪赤风汤治疗.结果:治疗3个月后,两组血肌酐水平比较无统计学意义(P＞0.05);观察组24h尿蛋白水平、中医证候积分均优于对照组(P均＜0.05).结论:加味黄芪赤风汤可有效降低IgA肾病尿蛋白水平和中医证候积分,对血肌酐水平无明显影响.     

基于SIRT1/FOXO3A/BNIP3通路探讨益气化瘀清热方对小鼠足细胞损伤的影响

目的：探讨益气化瘀清热方对阿霉素（ADR）诱导损伤小鼠足细胞沉默调节蛋白1(SIRT1)、FOXO3A、BNIP3相关蛋白表达的影响。方法：取分化成熟足细胞,采用ADR诱导造模,并采用siRNA和过表达质粒构建足细胞SIRT1沉默和SIRT1过表达模型,实验分为空白组、模型组（ADR组）、空白血清组（ADR+K组）、含药血清组（ADR+Z组）、SIRT1沉默组和SIRT1过表达组。采用RT-qPCR和Western Blot检测SIRT1、FOXO3A、BNIP3 mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测足细胞凋亡水平。结果：与空白组比较,ADR组与SIRT1沉默组SIRT1、FOXO3A、BNIP3 mRNA及蛋白表达均显著降低（P<0.05,P<0.01）,SIRT1过表达组上述指标显著升高（P<0.05,P<0.01）,ADR组、SIRT1沉默组和SIRT1过表达组足细胞凋亡率均显著升高（P<0.01）;与ADR组比较,ADR+Z组SIRT1、FOXO3A、BNIP3 mRNA及蛋白表达显著升高（P<0.05,P<0.01）,ADR+Z组足细胞...     

黄芪汤对高糖诱导足细胞损伤的保护作用及机制研究

目的观察黄芪汤对高糖诱导足细胞损伤的影响及作用机制。方法实验分为5组:对照组足细胞采用5.5 mmol/L葡萄糖培养液培养,模型组足细胞采用30 mmol/L葡萄糖培养液培养,黄芪汤30μg/mL组、黄芪汤100μg/mL组、黄芪汤300μg/mL组分别采用30 mmol/L葡萄糖培养液和相应浓度黄芪汤进行培养。细胞培养48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞存活率,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,采用免疫荧光法检测各组细胞标记蛋白podocin表达情况,采用Western blot检测各组细胞内质网应激通路蛋白[葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核起始因子2α(p-eIF2α)、真核起始因子2α(eIF2α)]及其介导的凋亡相关蛋白[增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)]表达情况。结果模型组细胞存活率明显低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率明显高于对照组(P均<0.05);黄芪汤各组细胞存活率均明显高于模型组(P均<0.05),细胞凋亡率均明显低于模型组(P均<0.05),且呈浓度依赖性。模型组podocin表达荧光强度明显弱于对照组,黄芪汤各组随着药物浓度升高podocin表达荧光强度明显增强。模型组GRP78、p-PERK、p-eIF2α、CHOP表达水平均明显高于对照组(P均<0.05);黄芪汤各组GRP78、p-PERK、p-eIF2α、CHOP表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),且黄芪汤各组随药物浓度的升高GRP78、p-PERK、p-eIF2α表达水平均逐渐降低(P均<0.05)。模型组Bcl-2表达水平明显低于对照组(P<0.05);黄芪汤100μg/mL组、黄芪汤300μg/mL组Bcl-2表达水平均明显高于模型组(P均<0.05);黄芪汤100μg/mL组与黄芪汤300μg/mL组Bcl-2和CHOP表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论黄芪汤可呈浓度依赖性的抑制高糖诱导的足细胞损伤,其作用可能与抑制PERK介导的内质网应激途径有关。     

防己黄芪汤对阿霉素肾病大鼠蛋白尿和肾组织Nephrin的作用

目的 观察经方防己黄芪汤对阿霉素肾病大鼠蛋白尿和肾组织Nephrin的作用.方法 采用阿霉索两次注射法建立阿霉素肾病大鼠模型,按24h尿蛋白定量水平将造模大鼠分为模型组、防己黄芪汤高、中、低剂量治疗组,观察给药6周后各组大鼠24 h尿蛋白定量、血浆蛋白、血脂和肾组织Nephrin变化情况.结果 模型组大鼠24 h尿蛋白定量明显升高,血浆蛋白水平降低,伴有脂质代谢紊乱和肾组织Nephrin表达降低.防己黄芪汤高、中、低剂量治疗组的上述指标均有不同程度改善.结论 防己黄芪汤能减少阿霉素肾病大鼠的24 h尿蛋白定量,升高血浆蛋白水平,改善其脂质代谢紊乱,保护足细胞受损.     

黄芪总苷对阿霉素诱导损伤足细胞的保护作用

目的:探讨黄芪总苷保护阿霉素(ADR)诱导损伤足细胞的分子作用机制。方法:采用0.5μmol/L的ADR处理小鼠足细胞系(MPC5)条件永生型小鼠足细胞系24小时,建立足细胞损伤模型;以50、100、200μg/mL3个浓度的黄芪总苷分别处理ADR损伤足细胞24小时后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测MMP2及MMP9表达水平;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测各组凋亡相关蛋白表达水平及MT1、Nephrin蛋白质表达水平。结果:ELISA结果显示,基质金属蛋白酶(MMPs)表达水平受ADR抑制,各浓度黄芪总苷可改善该异常表达;蛋白质印迹实验结果显示,ADR可上调促凋亡相关蛋白表达水平,下调MT1、Nephrin及凋亡抑制相关蛋白的表达水平,各浓度黄芪总苷可显著改善各蛋白质的异常表达。结论:黄芪总苷对ADR损伤的MPC5足细胞具有保护作用,这可能与黄芪总苷可以下调ADR损伤足细胞Bax、P53蛋白表达水平并上调MMP-2、MMP-9、MT1及Nephr i n等蛋白表达水平有关。     

加味滋生青阳片对自发性高血压大鼠肾脏的保护作用及机制研究

目的观察加味滋生青阳片对自发性高血压大鼠(SHR)血压、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肾动脉病理学的影响,探讨其对SHR肾脏保护作用及机制。方法将36只12周龄雄性SHR按照完全随机原则分为SHR模型组、中药组、替米沙坦组,同时设置12只WKY大鼠为空白对照组。其中中药组予加味滋生青阳片灌胃,替米沙坦组予替米沙坦灌胃,模型组及空白对照组予相同体积的无菌用水灌胃,连续干预8周。监测各组大鼠血压;用ELISA法测定血清hsCRP、IL-1β、IL-10、TNF-α的水平;HE染色进行肾动脉病理学观察。结果中药组、替米沙坦组给药4、6、8周后血压明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),中药组血压与替米沙坦组比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗8周后中药组较模型组血浆hs-CRP、IL-1β、TNF-α均降低,IL-10升高,中药组IL-1β、TNF-α低于替米沙坦组,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);替米沙坦组和中药组的肾动脉壁炎症浸润细胞明显减少,弹性纤维排列基本正常,情况明显优于模型组。结论加味滋生青阳片对SHR肾脏具有显著的保护作用,具体机制可能与其降低血压及血浆hs-CRP、IL-1β、TNF-α,升高IL-10相关。     

三黄茵赤汤对D-氨基半乳糖诱导人胚胎肝细胞系LO2坏死的影响

目的探讨三黄茵赤汤治疗急性肝损伤的可能作用机制。方法将人胚胎肝细胞系LO2分为正常组、模型组、对照组及三黄茵赤汤高、中、低剂量组,通过D-氨基半乳糖(D-Gal N)诱导LO2细胞坏死,三黄茵赤汤高、中、低剂量组分别给予三黄茵赤汤3、2、1 mg/ml,对照组给予受体相互作用蛋白1抑制剂(Nec-1)60 mmol/L,采用MTT法测定各组细胞存活率,Hoechst、PI染色分析细胞是否发生凋亡、坏死,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测各组细胞Casepase-3、受体相互作用蛋白1(RIP1)、受体相互作用蛋白3(RIP3)表达情况。结果与模型组比较,三黄茵赤汤中、低剂量组均能提高细胞生存率和ROS的清除率,三黄茵赤汤中剂量组能降低Hoechst、PI染色荧光强度,三黄茵赤汤高剂量组亦能提高ROS的清除率(P0.05)。三黄茵赤汤中剂量组降低细胞晚期凋亡率、提高生存率的效果最好。三黄茵赤汤各剂量组均能减少RIP1及RIP3表达(P0.05);与三黄茵赤汤各剂量组相比,对照组效果更加明显(P0.01)。结论三黄茵赤汤通过抑制RIP1及RIP3的表达而对D-Gal N诱导LO2细胞坏死产生保护作用。     

黄芪桂枝五物汤对H_2O_2诱导人脐静脉细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨黄芪桂枝五物汤对H_2O_2诱导人脐静脉细胞(HUVECs)损伤的保护作用及机制。方法 HUVECs分为正常组,模型组,阳性药组(卡维地洛),黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组,各组水提醇沉液培养24 h后加入H_2O_2溶液使终浓度达到400μmol/L)。MTT法检测细胞存活率;检测细胞上清LDH(乳酸脱氢酶)活性,细胞内T-SOD(总超氧化物歧化酶)、NO、GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)、ET-1(内皮素-1)水平;Real-time PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA表达;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组细胞存活率减低(P0.01);与模型组比较,黄芪桂枝五物汤各组存活率升高(P0.01);LDH活性降低、NO水平升高、T-SOD活力增强、GSH-Px水平升高、ET-1水平降低(P0.05)。Bax mRNA表达降低,Bcl-2 mRNA表达增加(P0.05);Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达增加(P0.05)。结论黄芪桂枝五物汤对H_2O_2损伤HUVECs有保护作用,其机制可能与提高内皮细胞T-SOD活性、促进细胞NO分泌、提高细胞内GSH-Px水平,降低细胞内ET-1水平以拮抗氧化应激造成的细胞损伤,调控凋亡相关基因及蛋白Bax、Bcl-2,抑制线粒体凋亡途径有关。     

黄芪注射液拮抗阿霉素诱导小鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的 黄芪注射液拮抗阿霉素诱导心肌细胞凋亡的作用.方法 取昆明小鼠60只,体质量为18～22g,将小鼠随机分为5组,每组12只,建立小鼠阿霉素(ADR)中毒性心肌损伤模型,实验结束24 h后处死小鼠,测定心肌组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)的含量;应用流式细胞仪分析技术(floweytometry,FCM)检测心肌细胞凋亡.结果 黄芪注射液对阿霉素诱导小鼠导心肌细胞凋亡具有拮抗作用,可降低阿霉素所致的心肌细胞凋亡百分率,其途径可能是通过增加心肌组织中GSH、NO的含量,抑制细胞凋亡,保护心脏.结论 黄芪注射液对阿霉素诱导小鼠心肌细胞凋亡有较好的抑制作用,保护心肌细胞损伤,为临床应用黄芪注射液作为抗肿瘤辅助药物提供了实验依据.     

加味当归补血汤通过调控TGF-β_1/Smad/ILK的表达对阿霉素肾病大鼠足细胞的保护作用

目的探讨应用加味当归补血汤对阿霉素肾病模型大鼠足细胞功能保护作用的机制。方法根据随机数字表法将32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、洛汀新组、加味当归补血汤组。分别于造模前和造模后第1、3、5、7周检测24 h尿蛋白定量,实验结束时取肾组织进行光镜、免疫组化检测,用RT-PCR、Wetern blot方法对TGF-β1、ILK等蛋白表达的情况进行分析。结果加味当归补血汤可以明显减少尿蛋白的漏出,而病理学和分子生物学结果均提示加味当归补血汤组、洛汀新组对TGF-β1、ILK的表达具有调控作用,并与肾病蛋白nephrin表达密切相关。组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论加味当归补血汤通过抑制TGF-β1/Smad/ILK信号通路对阿霉素肾病模型大鼠的足细胞有较好的保护作用。     

甜茶素对棕榈酸诱导INS-1细胞超微结构及CytC易位表达的保护作用

目的:探索甜茶素对棕榈酸诱导INS-1细胞损伤的保护机制。方法:MTT法检测正常对照组、棕榈酸模型组、不同浓度甜茶素组细胞存活率,透射电镜观察各组细胞超微结构,免疫电镜观察各组细胞色素C的易位表达。结果:不同浓度甜茶素对棕榈酸诱导的INS-1细胞具有保护作用,超微结构保存较好;模型组细胞凋亡增多且超微结构损伤严重,Cyt C蛋白从线粒体释放入细胞质。结论:甜茶素可以提高棕榈酸诱导INS-1损伤的细胞存活率,抑制细胞凋亡的发生,其机制可能与抑制棕榈酸引起的氧化应激和阻碍Cyt C从线粒体转位入细胞质,激活细胞凋亡蛋白酶级联反应有关。     

黄芪多糖对Tg诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护机制研究

目的 探讨黄芪多糖对毒胡萝卜素内酯(Tg)诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护作用.方法 将细胞分为空白组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组.除空白组外,其余组给予1 μmol/LTg诱导24h后进行PERK及p-eIF2α蛋白表达的检测.结果 用Tg诱导HT29细胞,PERK及p-eIF2...