Ento-Ia涂膜剂经皮给药对小鼠急性不完全性脑缺血的保护作用

【摘 要】目的：通过复制小鼠急性不完全性脑缺血模型,研究Ｅｎｔｏ－Ⅰａ涂膜剂对脑缺血的保护作用。方法：１４０只小鼠分为２批进行实验,每批７０只。将７０只小鼠随机分为７组,每组１０只,分别为假手术组、Ｅｎｔｏ－Ⅰａ涂膜剂组（３７.５０ｍｇ·ｋｇ－１、１８.７５ｍｇ·ｋｇ－１、９.３８ｍｇ·ｋｇ－１）、生理盐水模型组、基质模型组、尼莫地平组（１８ｍｇ·ｋｇ－１,ｉｇ）。Ｅｎｔｏ－Ⅰａ涂膜剂预防给药７ｄ后,测定小鼠结扎双侧颈总动脉带迷走神经后的存活时间及其脑组织ＳＯＤ活性、ＭＤＡ含量、ＥＢ含量。结果：Ｅｎｔｏ－Ⅰａ涂膜剂在剂量为１８.７５ｍｇ·ｋｇ－１时,可以明显延长小鼠结扎双侧颈总动脉带迷走神经后的存活时间（Ｐ＜０.０５）,延长率为３９.５５％;在剂量为３７.５０ｍｇ·ｋｇ－１时效果最佳（Ｐ＜０.０１）,小鼠存活时间的延长率为４５.１５％,与阳性药尼莫地平（１８ｍｇ·ｋｇ－１,延长率４３.９６％）相当。与基质模型组比较,Ｅｎｔｏ－Ｉａ涂膜剂１８.７５、３７.５０ｍｇ·ｋｇ－１剂量组均可提高脑组织内ＳＯＤ活性并能减少ＭＤＡ含量（中剂量组,Ｐ＜０.０５;高剂量组Ｐ＜０.０１）;同时,Ｅｎｔｏ－Ｉａ涂膜剂能显著降低小鼠急性不全性脑缺血小鼠脑组织ＥＢ含量（Ｐ＜０.０５）。结论：Ｅｎｔｏ－Ｉａ涂膜剂经皮给药可对小鼠急性不完全性脑缺血诱发的脑损伤有明显的保护作用,其机制可能通过干预脑缺血后脑组织的氧化应激及其保护血脑屏障有关。     

雏菊叶龙胆酮对脑缺血损伤的保护作用及机制研究

目的:探究雏菊叶龙胆酮用于脑缺血损伤治疗的保护作用及其作用机制。方法:采用不同的方法制备两种动物全脑缺血损伤模型,并观察不同剂量(50mg·kg~(-1)、75mg·kg~(-1)、100mg·kg~(-1))雏菊叶龙胆酮对断头后小鼠张口喘息时间以及对大鼠脑缺血后脑指数、脑SOD活力、脑MDA含量、脑兴奋性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA含量的影响,同时比较雏菊叶龙胆酮与尼莫地平的作用效果差异。结果:与模型组比较,雏菊叶龙胆酮50mg·kg~(-1)、75mg·kg~(-1)、100mg·kg~(-1)组可显著延长小鼠断头后张口喘息时间(P0.05);雏菊叶龙胆酮组脑SOD活力、脑MDA含量、脑兴奋性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA浓度均改善,且75mg·kg-1浓度组改善效果最佳(P0.05)。结论:雏菊叶龙胆酮能明显延长小鼠断头后张口喘息时间,并且对于脑SOD活力、脑MDA含量、脑兴奋性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA含量改善效果显著,其对于临床脑缺血损伤治疗药物的开发具有重要的参考价值。     

膜翅目昆虫提取物Ento-Ⅱ涂膜剂的镇痛及活血化瘀作用研究

目的研究膜翅目昆虫提取物Ento-Ⅱ涂膜剂的镇痛及活血化瘀作用,为相关药物的开发提供科学依据。方法采用经典热板法和扭体法作为镇痛实验模型,观察Ento-Ⅱ涂膜剂对小鼠的镇痛作用;大鼠sc大剂量盐酸肾上腺素后,施以冰水浸泡制备急性血瘀模型,采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,测定血液流变学相关指标。结果在镇痛实验中,与对照组比较,Ento-Ⅱ涂膜剂20、10、5 mg/kg能显著延长小鼠给药后30、60、90 min的痛阈值,明显减少小鼠15 min内的扭体次数,显著延长小鼠扭体的潜伏期(P0.01)。在血瘀合并脑缺血实验中,与模型组比较,Ento-Ⅱ涂膜剂6.67、3.33、1.67 mg/kg组24 h时大鼠神经功能评分和全血黏度显著降低(P0.01);3.33 mg/kg组大鼠血浆黏度和红细胞聚集指数显著降低(P0.05);6.67、3.33 mg/kg组大鼠卡松黏度显著降低(P0.01)。结论 Ento-Ⅱ涂膜剂具有明显的镇痛作用和活血化瘀作用。     

精芪双参胶囊对脑缺血再灌注损伤及其作用机制的探讨

目的:观察精芪双参胶囊对大鼠大脑的保护作用,为精芪双参胶囊的开发和应用提供药效学依据。方法:(1)ICR小鼠50只,随机分为空白组,盐酸氟桂利嗪组(3mg·kg~(-1)),精芪双参高、中、低剂量组,通过小鼠耳后断头法记录小鼠断头后的呼吸次数及呼吸维持时间。(2)SD大鼠90只,随机分为假手术组,模型对照组,盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1)),精芪双参高、中、低剂量组,通过线栓法大鼠脑缺血再灌注制造大鼠脑缺血模型,按z-Longa评分法和氯化三苯四氮唑(TTC)染色法评价大鼠行为学和梗死面积,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β,脑组织匀浆中SOD、MDA和LDH活性测定。结果:(1)盐酸氟桂利嗪组(3mg·kg~(-1))可以明显延长小鼠存活时间及断头后的喘息次数,并能降低脑指数及脑含水量的增加,与空白对照组有显著意义(p0.05);精芪双参胶囊中剂量组(1080mg·kg~(-1))可显著延长小鼠存活时间及断头后的喘息次数,与空白组比较有非常显著意义(p0.01);而精芪双参胶囊高剂量组(1800mg·kg~(-1))可延长小鼠存活时间及有效抑制脑指数的增长,与空白组比较有显著意义(p0.05)。(2)神经行为学评分:盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))、精芪双参胶囊高剂量组、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))与模型对照组比较有明显的差异(p0.05,p0.01);盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))、精芪双参胶囊高、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))可降低IL-1β、TNF-α在大鼠血清中含量,与模型对照组比较有显著意义(p0.05,p0.01,p0.001);盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))及精芪双参胶囊高、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))可明显抑制大鼠脑组织中LDH和MDA含量的释放,并提高SOD活力,与模型对照组比较显著差异(p0.05,p0.01);模型对照组脑缺血面积明显增加,盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))及精芪双参胶囊高、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))脑梗死面积缩小,具有显著性差异(p0.05,p0.001)。结论:精芪双参胶囊降低脑出血再灌注后的损伤,对脑部有很好的保护作用。     

不同剂量胡椒碱对C57BL6小鼠胆固醇结石作用的影响

目的:观察不同剂量的胡椒碱对C57BL/6小鼠胆固醇结石形成的影响。方法:将C57BL/6小鼠70只,随机分为空白对照组、模型组、胡椒碱20 mg·kg~(-1)剂量组、胡椒碱40 mg·kg~(-1)剂量组、胡椒碱60 mg·kg~(-1)剂量组、胡椒碱90 mg·kg~(-1)剂量组、胡椒碱120 mg·kg~(-1)剂量组7组。应用全自动生化分析仪测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量。结果:与空白对照组(2.4740±0.2884)比较,模型组(3.3420±0.2266)小鼠总胆固醇含量明显升高,与模型组(3.3420±0.2266)比较,胡椒碱20 mg·kg~(-1)剂量组(2.6509±0.4458)、胡椒碱40 mg·kg~(-1)剂量组(2.4090±0.5843)小鼠总胆固醇含量明显降低;与模型组(0.9010±0.1694)比较,胡椒碱20 mg·kg~(-1)剂量组(1.3358±0.5908)、胡椒碱40 mg·kg~(-1)剂量组(1.7409±0.5797)小鼠甘油三酯含量明显升高,胡椒碱120 mg·kg~(-1)剂量组(0.6530±0.1578)小鼠甘油三酯含量明显降低。结论:胡椒碱抑制C57BL/6小鼠胆固醇结石的形成与胡椒碱的剂量相关,胡椒碱剂量为40 mg·kg~(-1)时,抑制小鼠胆固醇结石的作用最强。但是胡椒碱剂量为120 mg·kg~(-1)可明显促进小鼠体内甘油三酯的代谢,并具有减轻体重的作用趋势。     

桃叶鸦葱黄酮对脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的:探讨桃叶鸦葱总黄酮对脑缺血-再灌注大鼠的保护作用。方法:72只清洁级雄性健康SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、模型+桃叶鸦葱总黄酮高剂量组(400 mg·kg~(-1)),模型+桃叶鸦葱总黄酮中剂量组(200 mg·kg~(-1)),模型+桃叶鸦葱总黄酮低剂量组(100 mg·kg~(-1)),模型+尼莫地平组(10.8 mg·kg~(-1)),每组12只。模型组和用药组采用大脑中动脉线栓法制备大鼠脑缺血-再灌注损伤模型,在缺血2 h后再灌注,连续给药20 d,对各组大鼠进行神经行为学评分、脑组织含水量测定、通过HE染色观察其脑组织病理形态学改变、通过免疫组织化学联合图像分析方法检测其海马区水通道蛋白4(AQP4)的表达。结果:模型组大鼠均表现出明显的神经功能缺损症状,神经行为学评分升高,而桃叶鸦葱高、中剂量组及尼莫地平组大鼠症状改善,神经行为学评分降低(P0.05)。大鼠脑含水量实验表明,模型组大鼠脑含水量显著高于假手术组(P0.01),桃叶鸦葱总黄酮高、中剂量组和尼莫地平组大鼠脑含水量显著低于模型组(P0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠海马区神经元细胞脱失明显,而高、中剂量桃叶鸦葱总黄酮及尼莫地平可减轻这种形态学改变;免疫组织化学分析结果提示,模型组中AQP4表达明显高于假手术组(P0.01)。结论:在脑缺血-再灌注损伤过程中,AQP4水平的增高可能引起细胞对水的通透性增加,从而造成细胞损伤,导致大鼠出现神经功能缺损症状,高、中剂量桃叶鸦葱总黄酮及尼莫地平可以通过降低海马区AQP4的表达,减轻脑水肿程度,保护神经元细胞,改善大鼠神经功能损害。     

五味子木脂素改善衰老小鼠学习记忆能力的机制

目的:研究五味子木脂素(Schisandrae Chinensis Fructus lignans,SCL)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)所致衰老模型小鼠学习记忆能力的改善作用。方法:ICR小鼠随机分为4组,即正常组(灌胃蒸馏水,皮下注射生理盐水),模型组(灌胃蒸馏水,皮下注射200 mg·kg~(-1)·d~(-1)D-gal),吡拉西坦组(灌胃吡拉西坦200 mg·kg~(-1)·d~(-1),皮下注射D-gal 200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),SCL低剂量组(灌胃SCL 50 mg·kg~(-1)·d~(-1),皮下注射D-gal 200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),SCL中剂量组(灌胃SCL 100 mg·kg~(-1)·d~(-1),皮下注射D-gal200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),SCL高剂量组(灌胃SCL 200 mg·kg~(-1)·d~(-1),皮下注射D-gal 200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续给药10周;通过避暗实验及Morris水迷宫实验观察SCL对D-gal致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响;通过化学比色法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测小鼠脑组织中过氧化物还原酶-6(peroxiredoxin-6,Prdx6),谷胱甘肽过氧化酶1(glutathione peroxidase 1,GSH-Px1)mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠组织中Prdx6,GSH-Px1蛋白表达情况。结果:行为学实验中,与正常组比较,模型组小鼠避暗错误次数明显增加(P0. 05),潜伏期显著减少(P0. 01),小鼠穿台次数和目标象限停留时间显著减少(P0. 01),可作为建模成功的指标。与模型组比较,吡拉西坦组,SCL中、高剂量组小鼠避暗错误次数明显减少(P0. 05,P0. 01),潜伏期明显延长(P0. 05,P0. 01),同时,SCL高剂量组小鼠水迷宫穿台次数和目标象限停留时间显著增加(P0. 01)。与正常组比较,模型组小鼠脑组织中的SOD活力显著降低(P0. 01),MDA含量增加(P0. 05),Prdx6,GSH-Px1mRNA及蛋白表达量明显下降(P0. 05,P0. 01)。与模型组比较,吡拉西坦组,SCL低、中、高剂量组小鼠脑组织中SOD活力增高(P0. 05),MDA水平降低(P0. 05),Prdx6,GSH-Px1 mRNA及蛋白的表达水平显著升高(P0. 05,P0. 01),说明SCL给药组具有剂量依赖性。结论:SCL能改善D-gal致衰老模型小鼠学习记忆能力,该作用可能与SCL提高小鼠抗氧化能力及上调小鼠脑组织中Prdx6,GSH-Px1的表达水平有关。     

原花青素对实验性脑出血大鼠的保护作用

目的:探讨原花青素对脑出血大鼠的脑保护作用及其可能机制.方法:采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,建立脑出血模型.54只健康SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、原花青素低剂量组(50 mg·kg~(-1))、中剂量组(100 mg·kg~(-1))、高剂量组(200 mg·kg~(-1))及尼莫地平组(10 mg·kg~(-1)).术后4,8,12,24 h观察神经缺损症状并根据Bederson方法评分;出血后24 h取血与脑组织,检测血清磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平,丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;干湿比重法测定脑组织含水量;HE染色观察脑组织病理学改变.结果:与模型组比较,原花青素低、中、高剂量组的神经行为学评分显著降低(P＜0.05或P＜0.01),血清CK,LDH的水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑组织SOD活性显著升高(P＜0.05),MDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑组织含水量显著下降(P＜0.05或P＜0.01).HE结果显示,与模型组相比,原花青素各个剂量组的组织与神经细胞损伤程度有所减轻,病理学变化有所改善.结论:原花青素能够保护脑出血大鼠,其机制可能与改善脂质过氧化、减少自由基生成有关.     

高良姜不同提取物对急性脑缺血小鼠脑血管通透性的影响

目的:研究高良姜不同提取物对急性脑缺血小鼠脑血管通透性的影响。方法:昆明种小鼠随机分为9组:空白对照组、模型对照组、尼莫地平组、高良姜水提取物(WEAH)6.66,3.33,1.67 mg·kg-1组、高良姜乙醇提取物(EEAH)6.66,3.33,1.67 mg·kg-1组。连续ig 10 d后,采用双侧颈总动脉结扎法制备小鼠急性脑缺血模型,干湿重法观察脑含水量变化,通过收集透出脑血管外的伊文思蓝(Evans blue,EB)含量考察脑血管通透性的变化。结果:急性脑缺血发生后3 h,模型组小鼠与空白对照组相比较,脑含水量及脑组织内EB含量显著增加(P<0.05)。与模型组比较,尼莫地平组小鼠脑含水量及脑组织内EB含量均显著降低(P<0.05);高良姜水提取物6.66 mg·kg-1、乙醇提取物3.33 mg·kg-1及1.67 mg·kg-1组小鼠脑含水量显著降低(P<0.05);高良姜水提取物3个剂量组小鼠脑组织内EB含量均显著降低(P<0.05),乙醇提取物组小鼠脑组织内EB含量有降低趋势,但无显著性差异。结论:高良姜水及乙醇提物可有效降低急性脑缺血后脑含水量和脑血管的通透性,对脑血管有一定的保护作用。     

败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响

目的观察败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响。方法将98只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1)),败酱总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg~(-1))。灌胃体积为20 mL·kg~(-1),每天给药1次,连续给药7 d。末次给药后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用ELISA法检测脑组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;免疫组织化学法检测脑组织中神经生长因子(NGF)、核因子(NF)-κBp65表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织脑梗死面积百分比、ICAM-1、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax、Bcl-2、Caspase-3水平以及NGF、NF-κBp65免疫阳性表达水平显著升高(P 0.01)。与模型组比较,败酱总黄酮各剂量组的大鼠脑组织ICAM-1、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量水平均显著降低(P 0.05,P 0.01),Bcl-2含量水平及NGF免疫阳性表达水平均显著升高(P 0.01);败酱总黄酮高、中剂量组的大鼠脑梗死面积百分比、TNF-α含量水平及NF-κBp65免疫阳性表达水平均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用,可以减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,减少脑缺血再灌注损伤。     

芒果苷对高尿酸血症小鼠血尿酸及嘌呤代谢相关酶表达的影响

目的:研究芒果苷对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸的影响以及对磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRPS),磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT) mRNA表达水平的影响。方法:雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常组、高尿酸血症模型组、芒果苷1. 5,3. 0,6. 0 mg·kg~(-1)组、别嘌醇组(1. 0 mg·kg~(-1)),每组10只。按10 m L·kg~(-1)每天灌胃给药2次,连续10次,给药后1 h再灌胃给予氧嗪酸钾(500. 0 mg·kg~(-1))诱导形成高尿酸血症小鼠。磷钨酸法测血清尿酸水平,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠肝脏PRPS,PRPPAT和脑组织中HGPRT mRNA的表达水平。结果:灌胃给予氧嗪酸钾后,与正常组比较,模型组小鼠血尿酸水平显著升高(P 0. 05);给予芒果苷和别嘌醇后,与模型组比较,芒果苷各剂量(1. 5,3. 0,6. 0 mg·kg~(-1))和别嘌醇(1. 0 mg·kg~(-1))均能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P 0. 05,P 0. 01);与正常组和模型组比较,芒果苷各剂量组小鼠肝脏PRPS和PRPPAT mRNA的表达没有显著性差异,小鼠脑组织中HGPRT mRNA表达水平也没有显著性差异。结论:在本实验条件下,芒果苷的降尿酸作用与嘌呤代谢相关酶PRPS,PRPPAT和HGPRT mRNA的表达无关。     

3′-甲氧基葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究

目的:观察3'-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑梗死体积、自由基变化的影响,探讨3'-甲氧基葛根素对脑缺血损伤的保护作用.方法:采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉栓塞建立局灶性脑缺血再灌注模型,分假手术组、模型组、3'-甲氧基葛根素2个剂量组(5,10 mg·kg~(-1)·d~(-1))和尼莫地平组(5 mg·kg~(-1)·d~(-1)).观察行为学的改变,脑梗死体积和测定超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.结果:3'-甲氧基葛根素具有显著减轻神经功能缺损症状,减少梗死体积,显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质SOD活力和降低MDA含量,其中10 mg·kg~(-1)的3'-甲氧基葛根素作用尤为显著.结论:3'-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

复方扶芳藤合剂对D-半乳糖联合AlCl_3所致痴呆小鼠学习记忆改善作用研究

目的:探讨复方扶芳藤合剂(FFH)对D-半乳糖和AlCl_3所致痴呆小鼠学习记忆的改善作用。方法:将昆明种60只小鼠分为正常对照组、模型对照组、石杉碱甲组和复方扶芳藤合剂高剂量组(9.00 g·kg~(-1))、中剂量组(4.50 g·kg~(-1))、低剂量组(2.25 g·kg~(-1)),每组10只。采用D-半乳糖和AlCl_3建立老年痴呆小鼠模型。给药后采用Morris水迷宫方法对小鼠学习及记忆行为进行检测;ELISA法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及脑组织内乙酰胆碱转移酶(ChAT);采用化学法测定丙二醛(MDA)含量、乙酰胆碱(Ach)及乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。结果:与模型对照组比较,FFH高剂量组(9 g·kg~(-1))及中剂量组(4.5 g·kg~(-1))的逃避潜伏期、寻求次数与平均停留时间明显缩短;FFH能显著升高SOD、GSH-PX、Ach及ChAT含量,降低MDA及AchE酶含量。结论:FFH具有改善老年痴呆小鼠学习记忆能力的作用,与其抗氧化作用及影响胆碱能神经递质传导有关。     

月季花总黄酮对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠的影响

目的:通过研究月季花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的影响,探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、月季花总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg~(-1))及阳性组[尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1))]。预先连续给药7 d,末次给药1 h后,复制大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型。造模2 h后再灌注22 h,对死亡率、神经功能缺失评分,检测血清中S-100β;脑组织中丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),三磷酸腺苷(ATP)酶;并观察脑组织形态学改变。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注模型复制成功。与模型组比较,月季花总黄酮高、中、低剂量组均可显著降低大鼠神经功能缺失的评分(P0.01),显著降低血清中的S-100β含量(P0.01),显著降低脑组织中MDA,NO,NOS活性(P0.01),显著升高脑组织中SOD活性(P0.01),显著升高脑组织中Na~+K~+-ATP酶,Mg~(2+)-ATP酶,Ca~(2+)-ATP酶活性(P0.01),显著降低脑组织中的TNF-α,IL-1β,ICAM-1含量(P0.01);显著改善脑组织的损伤(P0.01)。结论:月季花总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抗自由基,减轻脑组织的炎症反应及改善脑缺血再灌注损伤后脑组织的能量代谢有关。     

岭南地区子宫内膜异位症与体质相关性研究

目的观察败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响。方法将98只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1)),败酱总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg~(-1))。灌胃体积为20 mL·kg~(-1),每天给药1次,连续给药7 d。末次给药后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用ELISA法检测脑组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;免疫组织化学法检测脑组织中神经生长因子(NGF)、核因子(NF)-κBp65表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织脑梗死面积百分比、ICAM-1、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax、Bcl-2、Caspase-3水平以及NGF、NF-κBp65免疫阳性表达水平显著升高(P 0.01)。与模型组比较,败酱总黄酮各剂量组的大鼠脑组织ICAM-1、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量水平均显著降低(P 0.05,P 0.01),Bcl-2含量水平及NGF免疫阳性表达水平均显著升高(P 0.01);败酱总黄酮高、中剂量组的大鼠脑梗死面积百分比、TNF-α含量水平及NF-κBp65免疫阳性表达水平均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用,可以减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,减少脑缺血再灌注损伤。     

复方菖蒲益智汤对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织谷氨酸及血清CaN活性影响的研究

目的观察复方菖蒲益智汤对脑缺血再灌注损伤小鼠急性期脑组织谷氨酸及血清钙调神经磷酸酶(CaN)活性的影响。方法将实验小鼠随机分为假手术组、模型组、复方菖蒲益智汤高剂量组(高剂量组)、复方菖蒲益智汤低剂量组(低剂量组)、尼莫地平对照组(尼莫地平组),每组10只。采用双侧颈总动脉夹闭的方法制备脑缺血再灌注损伤小鼠模型,给药14天后,观察海马区脑组织的病理形态学变化,测定脑组织谷氨酸及血清CaN(钙调神经磷酸酶)活性。结果各用药组小鼠海马区锥体细胞病变较模型组均有所改善,高剂量组改善最为显著;高剂量组小鼠脑组织谷氨酸活性、血清CaN活性均低于模型组、低剂量组及尼莫地平组(P0.05)。结论复方菖蒲益智汤能够降低脑缺血再灌注小鼠脑组织谷氨酸、血清CaN活性,对于小鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

三化汤对脑缺血再灌注大鼠脑组织胞质附着蛋白表达的影响

目的:观察三化汤对脑缺血再灌注大鼠脑组织胞质附着蛋白(ZO-1)表达的影响.方法:将大鼠随机分为假手术、组、模型组、三化汤低、高剂量组(7.2,14.4g·kg-1)、尼莫地平组(8.1 mg·kg-1).大鼠常规饲养3d后灌胃给药,每日1次,连续7d后采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型.脑缺血2h再灌注24 h后,取脑组织采用免疫组织化学法检测各组大鼠ZO-1的表达.结果:与假手术组比,模型组脑组织ZO-1表达显著降低(P＜0.01);与模型组比,三化汤高剂量组脑组织ZO-1表达显著升高(P＜0.01),尼莫地平组脑组织ZO-1表达也明显升高(P＜0.05),三化汤低剂量组脑组织ZO-1表达升高不明显,无显著性差异;三化汤高剂量组升高脑组织ZO-1表达较尼莫地平组明显(P＜0.05).结论:三化汤对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用.     

山茱萸果核醇提物对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响

目的观察山茱萸果核醇提物对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响。方法将50只昆明雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、山茱萸果核醇提物高、中、低剂量组(12,6,3g·kg~(-1)·d~(-1))5组,每组10只。除正常对照组注射等量生理盐水外,其余各组均皮下注射D-半乳糖500mg·kg~(-1)·d~(-1),连续8周制备衰老模型。实验第8周采用Morris水迷宫、电跳台实验检测各组小鼠的学习记忆能力,并测定脑组织丙二醛(MDA)含量,超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)的活性。结果与模型组相比,山茱萸果核醇提物各剂量组能缩短水迷宫定位航行实验中D-半乳糖衰老小鼠的潜伏期,增加空间探索试验中跨越平台的次数,山茱萸果核醇提物高、中剂量组能延长小鼠跳台实验的跳台停留时间及降低错误次数。同时,山茱萸果核醇提物各剂量组能降低D-半乳糖模型小鼠脑组织MDA含量,提高SOD、T-AOC活性,高、中剂量组还能提高GSH-Px活性。结论山茱萸果核醇提物能改善D-半乳糖模型小鼠学习记忆能力,提高脑组织的抗氧化能力。     

血塞通分散片对慢性脑缺血大鼠的作用及相关机制

目的研究血塞通分散片对慢性脑缺血大鼠模型的治疗作用,并通过检测前列环素I_2(PGI_2)/血栓素A_2(TXA_2)及一氧化氮(NO)/血管内皮舒张因子(EDRF)信号通路的变化,探讨其作用机制。方法采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立慢性脑缺血大鼠模型。将SD大鼠随机分为模型组,假手术组,灯盏细辛颗粒组(1.5 g·kg~(-1)),血塞通分散片高、中、低剂量组(50,25,12.5 mg·kg~(-1)),每组10只,每天灌胃给药1次,连续8周。采用酶联免疫吸附实验检测血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、PGI_2、TXA_2、NO、EDRF含量;分别称定脑组织湿质量、干质量,计算脑组织含水量。结果与假手术组比较,模型组大鼠的脑组织含水量及血清炎症因子ICAM-1含量均明显增加(P 0.01),血清PGI_2、NO、EDRF含量明显降低(P 0.05,P 0.01),TXA_2含量明显增加(P 0.05)。与模型组比较,血塞通分散片高、中剂量组能明显降低慢性脑缺血大鼠脑组织的含水量和血清ICAM-1、TXA_2含量(P 0.05, P 0.01),明显增加血清PGI_2、NO、EDRF含量(P 0.05,P 0.01)。结论血塞通分散片可能通过降低炎症因子ICAM-1、调节PGI2/TXA2及NO/EDRF信号通路,发挥对慢性脑缺血的治疗作用。     

大蒜素对脑出血大鼠脑组织保护作用的研究

目的研究大蒜素对脑出血大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法将240只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、大蒜素5 mg/(kg·d)组、大蒜素10 mg/(kg·d)组、大蒜素20 mg/(kg·d)组、尼莫地平组2 mg/(kg·d)组,每组40只。除假手术组外,其余组大鼠采用自体血注射法复制脑出血模型。造模成功后,假手术组和脑出血组给予0.9%氯化钠溶液2 mL/kg腹腔注射,其余组给予相应剂量药物腹腔注射,均1次/d,连续7 d。采用mNSS评分法评估大鼠神经功能缺损程度,伊文思蓝渗透法测定血脑屏障通透性,干湿比重法测定脑组织含水量,通过HE染色法行脑组织病理学观察,TUNEL法检测细胞凋亡情况,黄嘌呤氧化酶法测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,高锰酸钾滴定法测定脑组织中过氧化氢酶(CAT)活性,硫代巴比妥酸法测定脑组织中丙二醛(MDA)含量,ELISA法测定脑组织中炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量,Western blot法检测脑组织中核因子-κB(NF-κB)蛋白表达情况。结果脑出血组大鼠mNSS评分、脑组织伊文思蓝含量、脑组织含水量、细胞凋亡指数均显著高于假手术组(P均<0.05);大蒜素10 mg/(kg·d)组、大蒜素20 mg/(kg·d)组和尼莫地平2 mg/(kg·d)组mNSS评分、脑组织伊文思蓝含量、脑组织含水量、细胞凋亡指数均显著低于脑出血组(P均<0.05),且大蒜素20 mg/(kg·d)组mNSS评分、脑组织伊文思蓝含量、细胞凋亡指数均显著低于尼莫地平2 mg/(kg·d)组(P均<0.05)。大蒜素各组和尼莫地平2 mg/(kg·d)组脑组织病理学明显轻于脑出血组,以大蒜素20 mg/(kg·d)组减轻最为显著。脑出血组SOD、CAT活性显著低于假手术组(P均<0.05),MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6含量及NF-κB蛋白表达水平均显著高于假手术组(P均<0.05);大蒜素10 mg/(kg·d)组、大蒜素20 mg/(kg·d)组和尼莫地平2 mg/(kg·d)组SOD、CAT活性显著高于脑出血组(P均<0.05),MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6含量及NF-κB蛋白表达水平均显著低于脑出血组(P均<0.05);且大蒜素20 mg/(kg·d)组SOD活性显著高于尼莫地平2 mg/(kg·d)组(P均<0.05),MDA、TNF-α含量及NF-κB蛋白表达水平均显著低于尼莫地平2 mg/(kg·d)组(P均<0.05)。结论大蒜素对脑出血大鼠脑组织损伤具有保护作用,其机制可能与减轻氧化应激和炎症反应,下调NF-κB蛋白表达,抑制细胞凋亡,降低血脑屏障通透性有关。