体外制备的牛胚胎移植后获得孪生犊牛

据Lu等(1987)报道,体外成熟和受精的牛卵泡卵母细胞在绵羊输卵管内培养一周后,多数胚胎发育到桑椹期和囊胚期。每头受体牛移植两枚这种胚胎,妊娠率达67％。本试验中—牛细胞胚培养到桑椹胚和囊胚的体外培养方法,使体外受精胚胎制造适于移植的牛胚的系统更方便了。在此之前,尽管用过各种培养基和培养方法作体外培养,但成绩不好。显然,胚胎在8细胞期时发育受     

乙醇对绵羊卵母细胞孤雌激活的研究

试验采用乙醇法孤雌激活绵羊体外成熟卵母细胞,研究了卵母细胞体外成熟时间、6-DMAP处理时间、乙醇浓度以及激活时间,对绵羊卵母细胞孤雌激活效果的影响。结果表明:(1)卵母细胞成熟22h、24h和26h卵裂率分别为60.7%、75.2%和74.5%,卵母细胞成熟24h的卵裂率较22h卵裂率,具有明显差异(P<0.05),与26h卵裂率差异不显著(P>0.05);其桑椹胚率38.6%,明显高于26h的桑椹胚率27.3%(P<0.05)。(2)6-DMAP6h的处理组,卵裂率83.4%,较2h卵裂率70.3%,有明显差异(P<0.05),也高于4h卵裂率79.4%,但差异不显著(P>0.05)。(3)乙醇浓度7%,激活3min、5min、7min卵裂率分别为76.7%、81.4%和70.4%,差异均不显著(P>0.05);激活3min囊胚率13.3%,显著高于激活7min囊胚率9.3%(P<0.05)。(4)乙醇浓度7%,激活绵羊卵母细胞5min,卵裂率85.5%,与乙醇浓度为5%的卵裂率72.2%,有显著差异(P<0.05),桑椹胚率和囊胚率,差异分别不显著(P>0.05)。     

模拟微重力条件下昆明小鼠早期胚胎体外发育及其G6PD基因表达

目的 研究模拟微重力条件下培养的小鼠早期胚胎体外发育与1g重力条件下体外发育的差异。方法 检测葡萄糖代谢关键酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PD）在昆明小鼠早期胚胎体外不同重力条件下培养各个时期基因的转录与表达。结果 模拟微重力培养条件下,胚胎体外发育受到明显的抑制,模拟微重力不利于小鼠胚胎的体外发育。用CZB＋10％FCS进行培养,2-细胞期培养的囊胚率为零,显著低于常规培养的23．92％;4-细胞期培养的囊胚率为18．44％,显著低于常规培养的80．12％。利用G6PD的内、外两对引物,检测昆明小鼠早期胚胎体外发育各个阶段的G6PD基因的转录与表达。从2-细胞期开始体外常规培养的胚胎,发育至4-、8-细胞胚胎、桑椹胚、囊胚及退化囊胚都有G6PD基因的转录与表达。在模拟微重力条件下,从2-细胞期开始培养的胚胎,发育至4-细胞期、桑椹期、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的转录和表达,而退化的2-细胞胚胎没有检测到G6PD基因的转录与表达。结论 两种培养方式之间,G6PD基因的转录与表达不存在差异,说明早期胚胎都存在磷酸戊糖途径。     

家畜早期胚胎的体外发育

本文概述了近年来家畜早期胚胎体外发育方面的研究进展,着重探讨了早期胚胎体外发育阻断期与胚胎基因组的激活、细胞周期对早期胚胎发育的调节、能量代谢机理与培养基的改进,不同家畜早期胚胎的体外共同培养系统以及输卵管与其它生长因子的作用。 随着胚胎工程的深入研究和商业性胚胎移植的迅猛发展,对胚胎尤其是牛胚胎需求量日益增加。目前除了超数排卵以外,体外受精技术是又一条获得胚胎的主要途径。但后者需要适宜的培养系统,使受精卵体外发育到囊胚(或桑椹胚)期,以便进行非手术移植;而判断培养方法本身的成功与否通常也是以能否发育到囊胚期来衡量的。因此,建立适宜的体外培养系统,无论是在生产上还是在科研领域都具有十分重要的意义。 早期胚胎的体外培养系统比较复杂,其中对胚胎存活起关键作用的成分有温度、湿度、光、pH值、渗透压、离子浓度、能量来源、血清成分(大分子和未确定的生长因子)、气象水质及培养器皿等。由于早期胚胎体外发育时存在着“发育阻断”现象,因此仅采用无血清的特定培养基很难有效地促进早期胚胎的发育。目前,在哺乳动物尤其牛上进行了大量的研究,一般都是采用与其他细胞共同培养的方法来促进早期胚胎的体外发育,但仍存在着下列问题:(1)囊胚发育率低,在牛上仅能达到授精卵     

绵羊体细胞核移植实验研究

用成年绵羊耳部皮肤细胞进行培养传代。将培养出的成纤维细胞经血清饱法处理后,作为核供体移植到MⅡ期去核卵母细胞中,重构胚细电融合与化学激活后,在38.6℃、5％CO2、最大相对湿度条件下进行体外培养（IVC）。用细胞松驰素B法与离子霉素＋6－DMAP法在电融合后进行化学激活,重构胚卵裂率分别为37.8%与43.8%（51／135与81／185）,囊／桑堪胚率分别为9.8%和12.3%(5/51和10/81）。在融合电压1.5Kv/cm、持续时间30us、脉冲次数为2次的条件下,弧雌激活胚胎的卵裂率和囊／桑堪胚率分别为81.0%和12.9%。     

牛、绵羊早期胚胎的体外分裂:利用滋养层囊泡混合细胞培养促进早期胚胎发育

虽然一些学者(Wright和Bondioli,1981)对不同类型的培养液和培养条件进行了研究,但大多数体外培养的早期胚胎(1—8细胞)发育至8—16细胞期即停止发育。对于绵羊,体外培养的单细胞期胚胎很少有发育到囊胚期的。而其他动物胚胎的体外培养都不能产生正常的卵裂,仓鼠卵在2—细胞时发育受阻,采自远系杂交的小鼠卵也     

牛核供体胚龄对核移植卵体外发育率的影响

本研究主要检测核共体胚龄对牛核移植卵体外发育率的影响，用体外受精后培养３．５－６．５日的胚胎卵裂球或培养７．５日的囊胚内细胞（ＩＣＭ）细胞与去核，并经电激活处理成熟的卵母细胞进行融合，融合卵与卵丘细胞体外共培养１０日，来自３．５－６．５日龄胚胎的卵裂球与去核卵母细胞的融合率（７８％－８８％）以及核移植卵发育至囊胚胎的体外发育率（６％－１０％）不受核供体胚龄的影响，然而，内细胞群细胞的融合率明显降低     

绵羊胚胎体外非协同培养成就和前景

几种家畜的合子(1细胞胚胎)常能在相对简单的培养液中培养发育至胚泡期这一事实,对于早期胚胎在输卵管环境发育的属性提出了质疑。本文综述了绵羊胚胎不用协同培养,在简单培养液中发育的一些最新成果。证据表明,胚胎对于培养液中的成分变化相对来说不甚敏感,而且合子发育至胚泡期的发育率与体内培养所获得的发育率相同甚至更高。然而体外培养也带来了一些发育异常现象,包括细胞质破碎,囊胚腔提早形成,及每个胚泡中核数目减少。体外培养5天的胚胎,移植后妊娠50天时的活力比体内培养胚胎的活力降低(分别为48.2％和59.4％,P<0.1)。同样在类似的体外培养时期,经显微操作(原核基因注射)的胚胎活力也显著地降低,初步观察还表明,体外培养与平均妊娠期延长,羔羊出生时平均体重增加。及死亡数增多间有一定关系。这些异常现象有可能是植入前胚胎体外培养导致发育缺陷所致。本文对于这些结果的意义及培养系统中加入体细胞支持培养的潜在益处也作了讨论。     

牛胚胎的多代克隆

牛胚胎多代克隆的目的是通过重复细胞核移植产生大量的胚胎和牛犊。现已建立了一些重要的方法 ,例如 :采用体外成熟的卵母细胞为胞质受体 ;第二次减数分裂末期去核的先进技术 ;采用体外成熟、体外受精和体外培养形成的胚胎以及经冷冻保存的胚胎为核供体 ;核移植胚体外培养可发育至囊胚期 ;克隆胚可冷冻长期保存等。迄今已连续克隆 6代获得囊胚期胚胎 ,移入受体母牛产生了第 1至 3代的克隆牛。从 1枚牛胚胎通过 3代克隆获 43枚胚胎 ,通过 4代克隆获 54枚胚胎。由此可见 ,在不久的将来通过多代细胞核移植将实现牛胚胎克隆的商业性生产     

小鼠体外受精、胚胎培养及胚胎快速冷冻的研究

本文系统研究了小鼠受精卵的体内发育与运行规律 ,卵母细胞的体外成熟与受精、单细胞胚胎培养及胚胎快速冷冻 ,结果如下 :①注射hCG后 1 2～ 2 0h受精卵发育至原核期 ,42～ 48h为 2 -细胞期 ,48～ 6 0h为 4-细胞期 ,6 0～ 6 8h为 8-细胞期 ,以上各期受精卵均处于输卵管中 ;75～ 78h为桑椹胚 ,78～ 80h为致密桑椹胚 ,90～92h为早期囊胚 ,92～ 96h为囊胚 ,以上各期均处于子宫角中 ;②培养液中添加激素 ,能显著提高卵母细胞的体外受精率 ,添加FCS和激素组的体外受精率又显著高于单独添加激素组 ,FCS还能显著提高胚胎发育率 ;③在培养液中添加EDTA ,能有效克服小鼠胚胎的 2 -细胞阻断 ,其 2 -细胞胚的发育率达 1 0 0 % ,8-细胞胚的发育率达55%以上 ;牛、羊上皮细胞培养上清也能有效克服 2 -细胞阻断。添加乳酸钠和丙酮酸钠可使 2细胞与 8细胞的发育率显著提高 ;④以D -PBS +甘油 +蔗糖为冷冻液 ,以D -PBS +蔗糖为稀释液 ,对小鼠胚胎进行快速冷冻 ,桑椹胚的存活率为 6 9.3% ,早期囊胚的存活率为 6 0 .4%。以上研究为建立小鼠胚胎库提供了基础     

子宫内膜浆液性乳头状癌的MRI表现

目的:探讨子宫内膜浆液性乳头状癌(UPSC)的MRI表现.方法:回顾性对比分析我院经手术病理证实的19例UPSC及38例子宫内膜样腺癌(EAC)患者的MRI表现.结果:UPSC患者的平均发病年龄(59.0岁)大于EAC患者(51.8岁);在T2 WI上,UPSC信号较EAC更不均匀(发生率分别为84.21％和44.74...     

The effect of mechanical deformation on magnetic properties and MRI artifacts of type 304 and type 316L stainless steel

The purpose of this study was to evaluate the influence of composition and deformation of biomedical stainless steels on mechanical properties, magnetic properties, and MRI artifacts. Type 304 and Type 316L samples were prepared using standard wire-drawing techniques. Mechanical properties were determined using standard test methods. The amount of ferromagnetic phase present was estimated using a Severn Gage and x-ray diffraction. Magnetic field attraction and artifacts were determined using previously described techniques. The strength of both steels increased significantly with increasing deformation. None of the type 316L wires transformed to the magnetic phase. The amount of magnetic phase in the type 304 wires increased with increasing deformation. There was no magnetic field attraction, and artifacts were minimal for all of type 316L wires and the undeformed type 304 wire. Deflection and artifacts were significant for the deformed type 304 stainless steel. These results provide guidance regarding the use of type 304 and type 316L stainless steels for bioimplants. In this regard, type 316L stainless steel seems to be a more acceptable material with respect to MR compatibility.     

施源器材料对192Ir后装源水中吸收剂量的影响

目的 应用3D打印支架联合人造金刚石探头测量施源器材料对高剂量率后装¹⁹²Ir源水中吸收剂量的影响。方法 将金刚石探头与塑料插植针分别固定在3D打印支架上,金刚石探头的中心轴与塑料插植针的中心轴在一个平面内相互垂直。采用模拟源尺测量实测驻留位置为248 mm,该驻留位置与逐点测量的最大响应位置吻合。测量材料有304不锈钢、聚亚苯基砜树脂（PPSU）材料、有机玻璃（PMMA）材料和3D打印聚乳酸（PLA）材质。测量水中不同厚度或不同填充率的材料对吸收剂量的衰减。结果 304不锈钢和PPSU材料厚度与相对剂量的线性拟合公式分别为y=-0.029 7x+1.000 3,y=-0.002 3x+1.010 2;拟合优度R²分别为0.925 3和0.722 2。10 mm以内PMMA材料对剂量的影响均<1.5%。3D打印材料填充率（%）与相对剂量的线性拟合公式为y=-0.000 4x+1.024 6,拟合优度R²为0.854 5。结论 施源器材料,尤其是高密度材料（如304不锈钢）和新型技术材料（如3D打印PLA）,对¹⁹²Ir后装源的吸收剂量影响需引起施源器开发人员和临床应用者的足够重视。     

人参皂甙Rd对脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤的作用观察

目的 探讨人参皂甙Rd对体外培养的脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤的作用.方法 分离胎龄15d的SD大鼠的脊髓运动神经元,培养6d后分为4组:对照组,培养基中不加药液;谷氨酸(Glu)组,培养基中加入300μmol/L谷氨酸;人参皂甙Rd+谷氨酸(GSRd+Glu)组,培养基中预先加入10μmol/L人参皂甙Rd孵育30min,再加入300μmol/L谷氨酸;丙二醇+谷氨酸(Vehicle+Glu)组,培养基中预先加入等容量丙二醇孵育30min,再加入300μmol/L谷氨酸.继续培养24h,相差显微镜下观察神经元形态及生长状况,进行细胞计数,测定神经元存活率及培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果 Glu组存活的脊髓运动神经元数目少,偶有突起形成,细胞受损严重;GSRd+Glu组脊髓运动神经元数目明显增多(P＜0.05),突起较多,只少数死亡细胞;Vehicle+Glu组神经元形态与Glu组相似.Glu组及Vehicle+Glu 组脊髓运动神经元存活率分别为22.7％±2.3％、23.6％±2.1％,明显低于对照组(l00％±0％,P＜0.05)及GSRd+Glu组(58.6％±2.3％,P＜0.05),而Glu组与Vehicle+Glu组比较、对照组与GSRd+Glu组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).Glu组及Vehicle+Glu组培养上清中LDH活性分别为142.50±3.55、139.20±2.75U/L,明显高于对照组(42.3±3.6U/L)及GSRd+Glu组(84.2±2.5U/L,P＜0.05),而Glu组与Vehicle+Glu组比较、对照组与GSRd+Glu组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 人参皂甙Rd对脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤具有保护作用.     

水牛体外受精胚胎的玻璃化冷冻

本文以ES35为玻璃化冷冻液 ,ES2 0和 30 %乙二醇为前处理液 ,进行不同时间的前处理 ,初步探讨了水牛体外受精胚胎的玻璃化冷冻保存方法。结果 4个处理组中以ES2 0前处理 2min组冷冻效果最好 ,其冻胚解冻后孵化率达 6 4 .4 1% ,30 %乙二醇前处理 5min组孵化率为 5 7.4 1% ,两组与对照组差异不显著 ,其余两组与对照组差异极显著 ;ES2 0前处理中 2min组与 5min组差异极显著 (6 4 .4 1%vs2 1.15 % ,P <0 .0 1) ;30 %乙二醇前处理中 5min组极显著高于 2min组 (5 7.4 1%vs2 3.6 4 % ,P <0 .0 1) ;取ES2 0前处理 2min组的冻胚移植了 5头本地母水牛 ,结果有一头妊娠。于 2 0 0 2年 12月 6日产下全国首例冻胚移植的试管水牛     

Stability of coil emboli: An in vitro study

Gianturco stainless steel coils were discharged into clear plastic tubes of varying sizes and subjected to pulsatile flow in order to study their behavior in a controlled, in vitro environment. When coils are too small for a given vessel, they tend to migrate distally or even proximally. Coils that are too large tend not to reform completely, limiting their cross-sectional area and potentially affecting their occlusive potential. Thus, each coil was tested in tubes of varying sizes and evaluated with regard to positional stability and extent of reformation.     

自动乳腺容积成像与手持超声对触诊阴性乳腺的诊断价值比较

目的 比较自动乳腺容积成像(ABUS)与手持超声(HHUS)对触诊阴性乳腺患者诊断价值的差异.资料与方法 纳入228例触诊阴性、术后经病理确诊乳腺患者的428枚手术切除乳腺病灶,比较ABUS与HHUS对病变检出率和诊断准确率的差异.结果 ABUS对触诊阴性乳腺患者病灶的检出率(97.2％)显著高于HHUS(87.6％)...     

Development of gold stents for the treatment of intracranial aneurysms: an experimental study in a canine model

BACKGROUND AND PURPOSE: Gold has often been used in medicine because of its radiopacity and flexibility. To perform stent-supported coil embolization of intracranial aneurysms, we prepared a gold stent and examined its flexibility, radiopacity, and thrombogenic properties in comparison with a stainless steel device implanted in vitro and in vivo. METHODS: Gold stents were prepared by plating gold on stainless steel stents as a template. Their mechanical properties and trackability in vitro were determined and compared with those of stainless steel stents of the same design. Twenty gold stents and two stainless steel stents were implanted in canine external carotid, vertebral, and renal arteries, as a muscle branch of the maxillary arteries, to examine their performance in vivo. RESULTS: The gold stent exhibited much less radial force and greater flexibility than the stainless steel stent. It also demonstrated superior trackability and radiopacity in the experimental endovascular procedures in canines. Histologic examination showed good patency of the stented artery with slight endothelial hypertrophy. CONCLUSION: Although there is still room for more radial strength, less influence on intimal hypertrophy, a more suitable flexibility, and a smoother surface, the superior trackability and radiopacity of gold stents seem to support use of this device for the endovascular treatment of intracranial aneurysms.     

Transmission diffraction-tomography system using a high-energy X-ray tube

A high-energy bench-top energy dispersive X-ray diffraction (EDXRD) system for 3-dimensional mapping of the crystalline structure and phase transformations in steel is described, for which preliminary data and system development are presented here. The use of precision tungsten slit screens with up to 225 keV X-rays allows for diffraction through samples of 304 L austenitic stainless steel of thickness 3–10 mm, while sample positioning is carried out with a precision goniometer and translation stage system.     

伊曲康唑对皮肤鳞状细胞癌A431细胞抑制作用的初步研究

目的研究伊曲康唑(itraconazole,ITZ)对皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)A431细胞的生物学效应,探讨其对皮肤鳞状细胞癌的抑制机制。方法取对数生长期A431细胞随机分为2、5、10、15、20、25及30μg/mL浓度组与对照组,依据分组分别采用等体积2、5、10、15、20、25及30μg/mL浓度ITZ溶液及DMEM培养基对细胞进行处理,并分别采用MTT法、流式细胞仪检测法、RT-PCR法和Western blotting法检测各组A431细胞的增殖情况、细胞周期和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白的表达水平。结果随着ITZ浓度的增加及作用时间的增长,ITZ对A431细胞的抑制作用逐渐增强,且除培养24 h时2μg/mL组细胞生长抑制率与对照组无明显差异(P>0.05)外,培养24 h时5、10、15、20、25、30μg/mL组细胞生长抑制率及培养48、72 h时2、5、10、15、20、25、30μg/mL组细胞生长抑制率分别与对照组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;与对照组相比,经浓度分别为2、5、10、15、20、25及30μg/mL的ITZ处理后,A431细胞的G0/G1期均出现延长,且除15μg/mL组与对照组无明显差异(P>0.05)外,其余各组与对照组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;与对照组相比,除ITZ浓度为10μg/mL时,VEGF mRNA及蛋白的表达水平明显降低(P均<0.05)外,ITZ浓度为2、5、15、20、25及30μg/mL时,VEGF mRNA及蛋白的表达水平均明显升高(P均<0.05)。结论ITZ能够抑制CSCC A431细胞的增殖并延长细胞周期,然而其对VEGF的影响却没有规律性,故其抑制细胞增殖的具体机制仍需进一步深入研究。