HPLC-荧光法测定人血清中顺式阿曲库铵的浓度

目的:建立测定人血清中顺式阿曲库铵浓度的方法。方法:血清酸化后采用二氯甲烷液-液萃取法处理,以高效液相色谱(HPLC)-荧光法进样测定,色谱柱为Kromasil100-5C18,流动相为1.0%三氟乙酸-乙腈(58∶42),流速为0.8ml/min,柱温为常温,荧光检测波长分别为280 nm(E x)、320 nm(E m)。结果:顺式阿曲库铵血药浓度在15.625² 000ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均提取回收率为78.78%2 000ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均提取回收率为78.78%⁸3.59%,平均方法回收率为98.58%83.59%,平均方法回收率为98.58%¹01.23%,日内、日间RSD均小于10%。结论:本方法操作简便、灵敏度高、重现性好、结果可靠,可满足临床上血清中顺式阿曲库铵血药浓度检测和药动学研究的需要。     

LC-MS/MS法测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物的浓度

目的:建立测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物浓度的方法。方法:血样以叔丁基醚提取后,采用液-质联用(LC-MS/MS)法进样测定。色谱柱为Waters C18,流动相为5 mmol/L醋酸铵-甲酸-甲醇(70∶0.1∶30),流速为0.3 ml/min,柱温为30℃,内标为氨溴索;采用电喷雾离子化(ESI)离子源,以多反应监测(MRM)模式检测,伊伐布雷定、去甲伊伐布雷离子对的m/z分别为469.2/177.1、455.2/177.1。结果:伊伐布雷定、去甲伊伐布雷定血药浓度分别在0.48¹20、0.16120、0.16⁴0 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.999 8和0.999 7);方法回收率分别为96.35%40 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.999 8和0.999 7);方法回收率分别为96.35%⁹8.33%、96.20%98.33%、96.20%¹02.50%;日内、日间RSD均<7%;血浆样品长期冻存(-20℃冷冻1个月)稳定性良好,反复冻融3次及室温放置4 h条件下,样品浓度均无显著变化。结论:本方法快速、简便、灵敏、准确,可用于伊伐布雷定的药动学研究。     

HPLC法同时测定人血浆中拉米夫定、齐多夫定和奈韦拉平的浓度

目的:建立能同时测定人血浆中拉米夫定(3TC)、齐多夫定(AZT)和奈韦拉平(NVP)浓度的方法。方法:血浆用乙腈沉淀处理后,以乙酸乙酯提取后进行高效液相色谱法测定。色谱柱为Agilent XDB-C18,流动相为乙腈-水溶液(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为268 nm,柱温为30℃,内标为甲硝唑。结果:3TC、AZT、NVP血药浓度分别在0.05¹0μg/ml(r=0.9981)、0.0510μg/ml(r=0.9981)、0.05¹0μg/ml(r=0.999 0)、0.110μg/ml(r=0.999 0)、0.1²0μg/ml(r=0.999 3)范围内线性关系良好,定量限分别为0.05、0.05、0.1μg/ml;平均方法回收率分别为96.36%20μg/ml(r=0.999 3)范围内线性关系良好,定量限分别为0.05、0.05、0.1μg/ml;平均方法回收率分别为96.36%¹05.84%、98.73%105.84%、98.73%¹01.93%、98.78%101.93%、98.78%¹08.07%,日内、日间RSD<8%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏,可用于同时使用3TC、AZT和NVP的艾滋病患者的临床治疗药物监测及药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中阿奇霉素浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中阿奇霉素浓度的方法并研究其药动学行为。方法:血样采用二氯甲烷处理后以高效液相色谱法进样测定。色谱柱为Kromasil C18,流动相为甲醇-乙腈-水-0.1 mol/L乙酸(39∶15∶46∶0.2),检测波长为210 nm,内标为罗红霉素。结果:阿奇霉素血药浓度在0.40¹8.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6);回收率>80%,日内和日间RSD均<10%。结论:本方法简便、快速、准确,适用于阿奇霉素药动学研究及血药浓度监测。     

RP-HPLC法测定人血浆中莫西沙星的浓度

目的:建立测定人血浆中莫西沙星浓度的方法。方法 :血浆样品采用萃取法处理后进行反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分析,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为乙腈-水(含0.05%三氟醋酸,22∶78),流速为1.0ml/min,紫外检测波长为296nm(0².5min)、256nm(2.52.5min)、256nm(2.5⁴.5min)、296nm(4.54.5min)、296nm(4.5⁸.0min),柱温为25℃,进样量为20μl。结果:莫西沙星与内标的保留时间分别为6.2min和3.4min。莫西沙星血药浓度在0.058.0min),柱温为25℃,进样量为20μl。结果:莫西沙星与内标的保留时间分别为6.2min和3.4min。莫西沙星血药浓度在0.05¹0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6),定量下限为0.05μg/ml,日内、日间RSD分别低于3.96%、4.72%,低、中、高3个质量浓度及内标的提取回收率分别为72.13%、84.12%、85.85%和97.31%。结论:该检测方法简便、准确、专属性强,适用于临床莫西沙星的血药浓度检测及Ⅰ期临床试验。     

HPLC法测定患者血浆中氯吡格雷的羧酸代谢产物浓度

目的:建立一种简易快速的方法测定人血浆中氯吡格雷代谢产物羧酸氯吡格雷(CCA)的浓度。方法:血浆样品经6%高氯酸液-液萃取后采用高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)法进样测定,内标为苯妥英钠,色谱柱为Hypersil ODS C18,流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾(三乙胺调pH至5.7)-乙腈(78∶22),紫外检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为50℃。结果:CCA血药浓度在0.10⁸.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5),分析方法最低检测限为0.05μg/ml;方法回收率为99.7%8.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5),分析方法最低检测限为0.05μg/ml;方法回收率为99.7%¹00.2%,提取回收率>75%;日内、日间RSD均小于3%,冻融稳定性RSD均小于10%(n=5)。结论:本方法简便、准确、灵敏度高,专属性和稳定性较好,适用于氯吡格雷的临床研究和药动学研究。     

罗格列酮在Beagle犬体内血药浓度测定方法研究

目的建立高效液相色谱法测定Beagle犬体内罗格列酮血药浓度的方法。方法以十八烷基键合硅胶柱为固定相,以0.01mol/L的磷酸二氢钾水溶液-乙腈(50∶50),以三乙胺调节pH6.0为流动相,检测波长247nm。4-硝基-2-苯氧基甲烷磺酰苯胺为内标,样品用乙醚提取,按内标法定量。结果标准曲线50~5000ng/ml范围内有良好线性关系(r=0.9996),最低检测浓度为30ng/ml,平均方法回收率为97.34%(RSD为2.15%)。结论本文建立的方法能够准确测定罗格列酮的血药浓度,线性关系好,回收率高,稳定耐用。     

LC-MS/MS法测定人血浆中盐酸右美托咪定的浓度

目的:建立测定人血浆中盐酸右美托咪定浓度的方法。方法:血浆样品用乙酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)萃取浓缩后进样。采用液-质联用(LC-MS/MS)法进样测定,以替米沙坦为内标,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18,流动相为甲醇-1%甲酸水(75∶25,V/V);采用电喷雾离子源(ESI),以多反应离子检测(MRM)方式进行检测。右美托咪定和内标检测离子对的m/z分别为201.1/95.1、512.2/276.1。结果:右美托咪定血药浓度在20⁶ 000 ng/L范围内线性关系良好(r=0.995 1),最低定量限为20 ng/L,提取回收率为82.20%6 000 ng/L范围内线性关系良好(r=0.995 1),最低定量限为20 ng/L,提取回收率为82.20%⁹6.37%,日内、日间RSD均在11%之内。结论:本方法具有快速、灵敏、重现性好等特点,可用于临床上盐酸右美托咪定血药浓度监测及药动学研究。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血清中利培酮与帕利哌酮及奥氮平和喹硫平的浓度

目的建立同时测定人血清中利培酮、帕利哌酮、奥氮平和喹硫平质量浓度的方法。方法临床血清样本经蛋白沉淀法处理。用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测,色谱柱为Eclipse XDB C₁₈(4.6 mm×50 mm,1.8μm),流动相为甲醇-水-乙腈(含2.5 mmol·L^-1甲酸铵)=37.5∶12.5∶50,流速为0.5 mL·min^-1,柱温35℃,进样量2μL。用电喷雾离子源,多反应监测(MRM)模式,用于定量分析的离子对分别为m/z 427.3→m/z 207.2(帕利哌酮),m/z431.3→m/z 211.2(帕利哌酮-D4),m/z 411→m/z 191(利培酮),m/z 415.4→m/z 195.2(利培酮-D4),m/z 384.3→m/z 253.1(喹硫平),m/z 392.3→m/z 258(喹硫平-D8),m/z 313→m/z 256(奥氮平),m/z 316→m/z 256(奥氮平-D3)。结果利培酮标准曲线方程为y=0.67x+4.94×10^-4(R^2=0.999 4),线性范围为1~100 ng·mL^-1;帕利哌酮标准曲线方程为y=0.68x+0.14×10^-2(R^2=0.999 6),线性范围为1~100 ng·mL^-1;奥氮平标准曲线方程为y=1.33x-0.65×10^-2(R^2=0.998 6),线性范围为2~200 ng·mL^-1;喹硫平标准曲线方程为y=1.80x-2.08×10^-2(R^2=0.999 4),线性范围为8~800 ng·mL^-1,4个目标物线性良好,批内及批间精密度均小于15%,提取回收率均大于90%。血清混合质控品在室温放置24 h、-70℃冻存34 d、冻融3次准确度均在85%~115%。结论本方法能同时测定血清中利培酮、帕利哌酮、奥氮平和喹硫平的浓度,方法简便、快速、灵敏,简化处理流程,缩短检测时间,适用于服用或合用以上药物患者的治疗药物监测,方便给药方案调整。混合质控品稳定性可靠,可用于治疗药物监测。     

气相色谱法测定左西孟旦原料药中6种有机溶剂残留量

目的:建立测定左西孟旦原料药中6种有机溶剂即甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、异丙醇与二氧六环残留量的方法。方法:采用气相色谱法。Agilent HP-5毛细管柱,(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷为固定液;柱温采取程序升温;氢火焰离子化检测器温度为250℃;载气为高纯N2;进样口温度为200℃,分流比为10∶1;采用顶空进样法测定,顶空加热温度为100℃,加热时间为40min。结果:甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、异丙醇与二氧六环的检测质量浓度线性范围分别为150.1⁴49.5μg/ml(r=0.999 8)、250.6449.5μg/ml(r=0.999 8)、250.6⁷51.2μg/ml(r=0.999 6)、249.8751.2μg/ml(r=0.999 6)、249.8⁷49.9μg/ml(r=0.999 7)、29.09749.9μg/ml(r=0.999 7)、29.09⁸9.68μg/ml(r=0.999 8)、250.289.68μg/ml(r=0.999 8)、250.2⁷50.9μg/ml(r=0.999 6)、18.91750.9μg/ml(r=0.999 6)、18.91⁵7.92μg/ml(r=0.999 7);平均回收率为99.9%57.92μg/ml(r=0.999 7);平均回收率为99.9%¹00.0%(RSD=0.88%100.0%(RSD=0.88%¹.11%,n=3);定量限分别为0.12、0.18、0.33、0.21、0.45、0.99 ng。样品中只检出异丙醇。结论:建立的方法快速简便,结果准确可靠。     

LC-MS/MS法测定人血浆中表柔比星浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中表柔比星浓度的方法并研究其药动学行为。方法:以液-液萃取法进行样品前处理,采用液-质联用法进样测定。色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸)(55∶45),流速为0.3 ml/min。电喷雾离子化电离源(ESI),正离子方式检测,扫描方式为多反应监测(MRM),用于定量的离子分别为表柔比星m/z 544.2→397.1和柔红霉素(内标)m/z 528→321。结果:表柔比星血药浓度在0.506²02.4 ng/ml范围内线性关系良好,最低定量限(LLOQ)为0.506 ng/ml;提取回收率均>80%,方法回收率为95.09%202.4 ng/ml范围内线性关系良好,最低定量限(LLOQ)为0.506 ng/ml;提取回收率均>80%,方法回收率为95.09%¹12.93%,日内、日间精密度良好(RSD<4%)。4名患者应用表柔比星治疗后,药动学参数cmax、t1/2、tmax、AUC0-144 h分别为(37.54±21.13)μg/L、(38.02±7.63)h、(47.00±8.25)h、(1 132.81±414.92)μg·h/L。结论:本方法经考察符合生物样品的分析要求,可以应用于临床上血浆中表柔比星浓度的测定和药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中奥沙普秦浓度

目的:建立固相萃取高效液相色法测定人血浆中奥沙普秦浓度的方法,并应用于人体血浆药物浓度测定。方法:固相萃取净化和富集血浆样品。色谱柱为Kromasil C18柱,流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-甲醇(85∶15),流速为1.0 ml/min,紫外检测波长285 nm。血浆中内源性物质对样品测定无干扰。结果:本方法奥沙普秦线性范围为0.1～100μg/ml(r=0.999 2),最低定量浓度为0.1μg/ml,回收率为99.39%,日内、日间RSD均小于2%。结论:本法简便、准确,适用于奥沙普秦临床药物浓度测定。     

RP—HPLC法测定大鼠血浆中洛铂的浓度

目的：建立测定大鼠血浆中洛铂血药浓度的方法。方法：取10只大鼠尾静脉注射洛铂10．64mg／kg后即刻取血分离血浆,采用反相高效液相色谱法测定血药浓度。色谱柱为Diamonsil流动相为乙腈．水（13．5：86．5）,流速为1．0ml／min,检测波长为210NM,柱温为35℃,进样量为20肛l。结果：洛铂的保留时间为5．13rain;其检测质量浓度的线性范围为O．5～80．0μg／ml（R=O．9999）,定量限为0．5μg／ml,方法回收率为（96．61±4．04）％～（107．9±6．76）％,日内KSD为2．43％～5．43％（n=5）,日间RSD为2．39％～8．93％（n=5）;平均血药浓度为（67．43±10．45）肛g／m1。结论：本方法操作简便、准确、灵敏度高,可用于大鼠血浆中洛铂的血药浓度测定。     

在线固相萃取-HPLC法测定比格尔犬血浆中丹参素的含量

目的:建立测定比格尔犬血浆中丹参素含量的在线固相萃取-HPLC法。方法:血浆样品经蛋白质沉淀,采用Lichrospher C18为富集柱,以乙腈-10 mmol/L NaH2 PO4(5∶95)为富集流动相,流速2 ml/min;选择Ultimate XB-C18(50 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以乙腈-10 mmol/L NaH2 PO4(11∶89)为分析流动相,流速为0.8 ml/min,检测波长285 nm。结果:丹参素在20~2 000 ng/ml浓度范围内线性关系良好,最低定量限为20.0 ng/ml,日内和日间RSD均<10%,平均绝对回收率>80%。结论:本方法简便、快速、灵敏、可靠,适用于比格尔犬血浆中丹参素含量的测定。     

HPLC法测定人血浆中恩他卡朋的浓度

目的:建立测定人血浆中恩他卡朋浓度的方法。方法:血样采用正己烷处理后,以高效液相色谱法测定。色谱柱为Thermo C18,流动相为20 mmol/L磷酸二氢钠(pH 2.9)-乙腈(66∶34),流速为1 ml/min;柱温为30℃。结果:恩他卡朋血药浓度在19.60¹ 960 ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 3)。低、中、高3种浓度相对回收率分别为98.50%、98.23%、100.71%,日内、日间RSD<10%。结论:本方法快速、简便、灵敏准确,可用于恩他卡朋血浆中浓度的测定以及药动学研究。     

外标一点法在人体甲氨蝶呤血浆浓度测定中的应用

目的：建立甲氨蝶呤（ MTX）血浆浓度的高效液相色谱测定方法。方法：利用外标一点法检测甲氨蝶呤血浆浓度,并与标准曲线法进行对比。结果：使用高效液相色谱法测定甲氨蝶呤血浆浓度时,标准曲线法在0.05～5.00μg／ml范围内药物浓度与峰面积呈现良好的线性关系,回收率、相对标准偏差符合测定要求;外标一点法在0.36～0.65μg／ml范围内药物浓度与峰面积呈现良好的线性关系,回收率、相对标准偏差符合要求。2种方法对患者服药44 h后甲氨蝶呤血浆浓度测定结果一致,差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论：外标一点法简单、快速,精密度和重复性较好,适用于临床甲氨蝶呤血浆浓度测定。     

RP-HPLC法测定帕潘立酮原料药在大鼠体内的血药浓度及其药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中帕潘立酮浓度的方法并研究其药动学。方法:6只大鼠单剂量灌胃给予帕潘立酮2.5mg。以利培酮为内标,采用反相-高效液相色谱法测定给药前及给药后0.25、0.5、1、1.5、2、4、8、12、24、36、48h的血药浓度。采用DAS软件计算药动学参数。色谱柱为Scienhome KromasilC18,流动相为乙腈-0.1mol/L Na2HPO4(pH6.0)(62∶38),流速为1.0ml/min,检测波长为237nm,柱温为35℃,进样量为20μl。结果:帕潘立酮检测质量浓度的线性范围为0.01～0.40μg/m(lr=0.9995),方法回收率为98.7%～102.2%,萃取回收率为82.8%～85.8%,日内和日间RSD均<9%。帕潘立酮在大鼠体内吸收符合二室模型,主要药动学参数cmax为(102.3±21.56)μg/L、tmax为(1.5±0.22)h、t1/2β为(14.969±5.651)h、Vd为(17.568±9.688)L、AUC0-48h为(1799.721±329.573)μg·h/L。结论:本方法适用于帕潘立酮的血药浓度测定;帕潘立酮在大鼠体内消除较慢,分布较广。     

用RP-HPLC法测定靶控输注下血浆中的丙泊酚浓度

目的：建立测定靶控输注下血浆中丙泊酚浓度的方法。方法：采用RP-HPLC法,色谱柱：Shim-pack CLCODS-C18柱;流动相：乙腈∶水=65∶35,流速：1.5ml/min;检测波长：220nm;柱温：25℃。结果：丙泊酚在0.05～5.0μg/ml范围内线性关系良好（r=0.999 8）,精密度和稳定性良好,低、中、高浓度（0.5、2.0、5.0μg/ml）丙泊酚的回收率分别为（103.0±2.5）%、（98.0±1.4）%和（102.5±3.1）%（n=3）。结论：该方法准确、灵敏、快捷,可用于测定靶控输注下血浆中的丙泊酚浓度。