心肌缺血日负荷对冠状动脉侧支血流量的影响

目的:探讨心肌缺血日负荷对新西兰兔冠状动脉侧支血流量(CCBF)的影响。方法:健康成年新西兰兔34只,体重2.4±0.2kg。随机分为缺血组和假手术组,缺血组根据日缺血负荷分为2、4、6次/日亚组。将气囊梗阻器安装在冠状动脉左室支上,以建立间断性心肌缺血模型。气囊充气造成心肌缺血(2min/次,间隔1h),以各日缺血负荷持续4周。取缺血区心肌观察形态学改变;微球技术检测缺血区CCBF;取兔术前和首次缺血刺激前、后24h血清检测肌钙蛋白(cTn-I)。结果:4周间断性缺血刺激后,缺血组与假手术组相比,CCBF明显增加(P<0.05);各缺血亚组间CCBF差异无显著性意义(P>0.05)。各组缺血区心肌未见变性坏死灶,兔首次缺血刺激后24h血清肌钙蛋白无明显升高。结论:4周间断性心肌缺血对心肌无损伤,可促进缺血区CCBF增加;不同日缺血负荷对CCBF无明显影响。     

心肌缺血周负荷对兔心肌血管内皮生长因子表达的影响

目的：研究不同心肌缺血周负荷对兔心肌血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：健康成年新西兰兔35只，体重2．2—2．5kg。根据不同的周缺血天数随机分为对照组、假手术组、3天，周组、5天，周组和7天，周组。将气囊梗阻器安装在冠状动脉左室支处，建立可控性心肌缺血模型。日缺血负荷为2min／h，2次，天，持续缺血刺激4周。取缺血区心肌观察形态学改变，并采用Western Blot方法检测缺血区和非缺血区心肌VEGF的表达水平。结果：①气囊充气后可以安全、有效地诱发心肌缺血。②与对照组和假手术组相比，缺血组左室支支配区心肌VEGF表达显著增高（P〈0．05）；各缺血亚组间VEGF表达差异无显著性意义（P〉0．05）。③假手术组心肌VEGF表达与对照组相比无明显变化（P〉0．05）。④左室支支配区心肌VEGF表达和冠状动脉侧支血流量（CCBn呈正相关（r=-0．775，P〈0．01）。结论：持续4周间断性心肌缺血可显著提高缺血区心肌VEGF表达，不同周缺血负荷对其表达无明显影响：缺血区心肌VEGF表达水平和CCBF相关。     

家兔短暂心肌缺血后VEGF蛋白表达的空间规律

目的:研究短暂心肌缺血后血管内皮生长因子(VEGF)的空间表达规律。方法:建立新西兰兔心肌缺血模型。根据再灌注时间分为3h、4h、6h、7h以及假手术组(n=6)。Westernblotting检测VEGF在缺血区心肌、非缺血区心肌、肾、骨骼肌、血浆、肝、肺以及脑组织的表达。结果:与假手术组相比,心肌、肾、骨骼肌、血液、肝和肺的VEGF表达升高(P<0.05)。血液的VEGF和缺血区心肌中VEGF相关(P<0.05)。结论:心肌缺血刺激使心肌VEGF表达增高,也使邻近组织和远隔组织的表达增加;血液与心肌VEGF具有相关性。     

心肌周缺血频率对兔冠状动脉侧支循环生成的影响

目的观察不同的心肌周缺血频率对新两兰兔冠状动脉侧支生成影响。方法健康成年新西兰兔32只，体重2．0～2．5kg。于兔冠状动脉左室吏安装气囊梗阻器，制作间断性心肌缺血模型，缺血负荷为2min／h，2次／d，每次缺血2min后恢复血供，隔58min后行第二次缺血刺激，共4周。根据不同周缺血天数将实验动物随机分为假手1术组和3d／周、5d／周及7d／周缺血组。采用微球技术检测各组缺血和非缺血区心肌冠状动脉侧支循环血流（CCBF）变化，采州苏木素一伊红染色观察各组缺血区侧支循环的形态学改变，于术前和缺血刺激前、后24h进行血清肌钙蛋白的检测。结果3d／周、5d／周及7d／周的缺血刺激均可引起缺血区CCBF和毛细血管密度显著增加，组间比较，差异无统计学意义。缺血刺激后24h，血清肌钙蛋白无明显升高。结论每周3d、5d或7d，共4周的心肌缺血刺激均可显著促进心肌缺血区侧支生成，且不损伤心肌；高于每周3d的缺血频率不一定能进-步促进侧支的生成。     

生理性缺血训练促进心肌缺血模型VEGF表达的时间规律

目的：研究等长收缩运动诱导的生理性缺血训练促进心肌缺血模型外周血VEGF表达的时间规律。方法：健康成年新西兰兔23只，体重2.5±0.5kg。于坐骨神经外膜纵行植入电极，施加高强度脉冲电刺激（40Hz、1ms、2.5mA），诱发靶肌肉（腓肠肌）等长收缩运动，作为生理性缺血训练的模型；在冠状动脉左室支安装气囊梗阻器，制作可控性心肌缺血模型。造模成功后随机分为假手术组（SO）、单纯心肌缺血组（MI）和生理性缺血训练组（PI）。缺血负荷为2min/h、2次/d，共4周；PI组为每次训练5min，休息5min，重复8次/d，共4周。各组分别于实验前和实验后第1、2、3和4周耳中动脉取血，采用ELISA技术检测血液中VEGF浓度。结果：SO外周血VEGF各时间点差异无显著性意义（P>0.05）；MI和PI实验后各时间点均较实验前表达升高（P<0.05），第2周外周血VEGF的表达达到高峰，之后进入平台期。第1、2、3、4周各组两两比较差异均有显著性（P<0.05）。结论：骨骼肌生理性缺血训练可以提高外周血VEGF的含量，在第2周达高峰，之后进入平台期，其VEGF升高超过单纯心肌缺血训练。     

超声造影剂介导血管内皮生长因子基因治疗心肌缺血的实验研究

目的探讨超声破坏造影剂微泡介导血管内皮生长因子(VEGF)基因转染兔缺血心肌的有效性。方法新西兰白兔48只，结扎兔冠状动脉左旋支，建立急性心肌梗死模型。术后3d，经胸超声检查左室壁运动情况，明确心肌缺血区域，然后将VEGF真核表达质粒与新型超声造影剂JD-95混合后，经耳缘静脉输入兔体内，同时进行超声实时造影成像，照射心脏缺血区。其他对照组包括超声和造影剂组、单独基因组、基因和超声组、基因和造影剂组以及空白对照组。术后17d处死动物，取动物缺血心肌、肝、肾及下肢骨骼肌组织，用免疫组化方法检测VEGF蛋白表达。结果在超声破坏造影剂微泡介导基因转染的实验组中5只兔的缺血心肌中VEGF蛋白的表达，2只兔肾有VEGF表达。而其他对照组中无VEGF蛋白表达。结论超声破坏造影剂微气泡的方法是将体外生物活性物质传递至心肌中的一种有效途径。     

心肌短暂缺血后血管内皮生长因子表达的时间规律

目的观察心肌短暂缺血后血管内皮生长因子(VEGF)表达的时间规律。方法阻断50只新西兰兔冠状动脉制作心肌缺血模型，分为对照组(S)、缺血组(0h)及再灌注组(亚组：1h，2h，3h，4h，5h，6h，7h)。采用Western Blotting法检测缺血和非缺血区心肌VEGF，酶联吸附试验检测外周血心肌肌钙蛋白(CTn-1)。结果(1)再灌注5hCTn-1无显著增高(P=0．863)。(2)缺血区心肌VEGF表达在缺血组与对照组差异无显著性意义；再灌注1h显著升高，3h达到高峰，4～7h逐渐降低；非缺血区表现类似趋势，但时间滞后2～3h。(3)再灌注各组缺血区VEGF表达均显著高于非缺血区，相关性良好。结论VEGF表达在心肌缺血后3h达到高峰，然后逐渐降低。非缺血区的改变与缺血区相关，但增加程度较低，时间相对滞后。     

血管内皮生长因子和一氧化氮对兔生理性缺血冠状动脉侧支血流量的影响

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）和一氧化氮（NO）对兔生理性缺血训练(PIT)中侧支血流量的影响,为研究生理性缺血的侧支循环形成机制奠定基础。 方法健康成年新西兰白兔55只,体重(2.0±0.5)kg。将水囊梗阻器安装在冠状动脉左室支,建立可控性心肌缺血模型,术中及术后实验兔死亡6只,另有2只因ECG无缺血改变未满足本实验的入选标准而剔除,余47只造模成功兔纳入实验。将47只兔按随机数字法分为假手术组（7只）、单纯心肌缺血组（7只）、单纯PIT组（11只）、VEGF抑制的PIT组（7只）、NO抑制的PIT组（9只）和VEGF-NO双抑制的PIT组（6只）。各组分别在造模时进行缺血刺激,并在刺激前后分别注射微球。处死前开胸时同样进行缺血刺激,且在刺激前后分别注射微球。实验终止时取左室前壁缺血心肌组织,采用微球技术检测缺血区相对侧支血流量。 结果训练前造模时,各组缺血区心肌的相对侧支血流量基础值比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。训练4周后,各组缺血心肌的相对侧支血流量较组内训练前均有明显增加（P<0.01）,且以单纯PIT组的侧支血流增加最多,由训练前的（39.23±9.39）%增加到（85.31±12.07）%;单纯心肌缺血组、单纯PIT组和NO抑制的PIT组心肌缺血区域心肌相对血流量分别与假手术组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;VEGF抑制的PIT组、NO抑制的PIT组及VEGF-NO双抑制的PIT组的心肌相对血流量均明显低于单纯PIT组（P<0.05）;VEGF-NO双抑制的PIT组与NO抑制的PIT组的缺血心肌相对血流量组间比较,差异有统计学意义（P<0.05）,但与VEGF抑制的PIT组的组间差异无统计学意义（P&rt;0.05）,且NO抑制的PIT组与VEGF抑制的PIT组的组间差异亦无统计学意义（P&rt;0.05）。单纯心肌缺血组和单纯PIT组分别与VEGF-NO双抑制的PIT组比较,组间差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论PIT可以通过VEGF和NO增加远隔缺血心肌的侧支血流量,抑制VEGF和NO减弱缺血训练对侧支循环的促进作用;VEGF与NO均参与侧支循环的形成,且VEGF起主要作用。     

心肌缺血和有氧运动训练诱导VEGF表达时间规律的实验研究

摘要 目的：研究心肌缺血和有氧运动训练诱导血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的时间规律。方法：成功建模的健康成年巴马小型猪24只，体重23.7±4.0kg，随机分为对照组、缺血组和运动组。将可控性水囊梗阻器安装在猪冠状动脉钝缘支处，建立可控性猪心肌缺血模型。对照组不进行缺血刺激和有氧运动训练；缺血组进行单纯缺血刺激，2min/次，2次/d，持续缺血刺激8周；运动组除进行缺血刺激外，每天进行一次平板有氧运动训练，每次30min。每两周取动脉血，采用ELISA法检测血液VEGF。实验终点时采用Western Blot检测缺血区心肌VEGF。结果：缺血组第2周血液中VEGF的表达量明显高于实验前（P<0.05），随后进入平台期（P>0.05）。运动组中第2-4周血液中VEGF的表达量持续增高（P<0.05），随后达到平台期(P>0.05)。缺血区心肌VEGF表达和血液VEGF表达呈正相关（r=0.826，P<0.01）。结论：心肌缺血和有氧运动训练诱导的血液VEGF增高分别在第2周和第4周达到高峰，然后进入平台期。 关键词 心肌缺血;有氧运动;血管内皮细胞生长因子 中图分类号：R493,R541.4 文献标识码：A 文章编号：1001-1242(2008)-03-0193-05     

短暂缺血阈强度运动促进心肌侧支循环生成的机制

目的 在小型猪可控性心肌缺血动物模型上,观察短暂缺血阈强度运动促进缺血区冠状动脉侧支循环生成的机制.方法 选择健康广西巴马小型猪32头,钝缘支装上水囊缩窄器制作可控性心肌缺血动物模型,4周后行冠状动脉造影证实模型建立成功.实验动物随机分为假手术组、单纯缺血组和运动组.单纯缺血组通过缩窄器注水加压制造心肌缺血,每日2次,每次2 min,每周5 d,共8周;运动组除制造静息状态心肌缺血外,每天还进行平板训练30 min,其中包括2次缺血阈强度运动,每次2 min,每周训练5 d,共8周.假手术组不作任何干预.采用微球测定训练前、后缺血区相对心肌血流量(RMBF);采用Western-blot及Real-time RT-PCR法测定缺血心肌局部血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体胎肝激酶-1(Flk-1)的蛋白及mRNA表达量;采用ELISA法测定血清肌钙蛋白含量以确定训练的安全性;应用电镜观察心肌细胞损伤情况.结果 运动组RMBF显著高于单纯缺血组及假手术组(均P＜0.01);单纯缺血组RMBF亦显著高于假手术组(P＜0.01).运动组VEGF及Flk-1的蛋白及mRNA表达量均显著高于单纯缺血组及假手术组(P＜0.05,P＜0.01).单纯缺血组的VEGF及Flk-1的蛋白及mRNA表达量均显著高于假手术组(P＜0.05).单纯缺血组及运动组训练后,血清肌钙蛋白与训练前相比无显著增加(均P＞0.05).光镜及电镜检查无明显异常.结论 小型猪可控性心肌缺血动物模型给予适宜短暂缺血阈强度运动,可通过缺血心肌局部VEGF及其受体Flk-1的上调安全有效地促进冠状动脉侧支循环生成.     

兔可控性心肌缺血模型的建立

目的：建立兔可控性心肌缺血模型。方法：新西兰兔32只，开胸后将气囊梗阻器固定在冠状动脉左室支上，制作兔可控性心肌缺血模型；四肢安装肢体导联。术后7-10天监测兔心肌缺血前后心电图改变。结果：造模成功24只．气囊充气后1．5—2min观察到Ⅱ导联ST段抬高。结论：采用气囊梗阻器可以成功的制作兔可控性心肌缺血模型。     

Cardiovascular effects of acute hypercholesterolemia in rabbits. Reversal with lovastatin treatment.

Hypercholesterolemia was induced in New Zealand white rabbits by feeding them a 0.5% cholesterol-enriched rabbit chow for 2 wk. Half of the cholesterol-fed rabbits were given lovastatin, a potent inhibitor of hydroxymethylglutaryl-coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase), the rate limiting enzyme in cholesterol biosynthesis, and the other half were given its vehicle (i.e., DMSO). At the end of 2 wk, the rabbits underwent experimental myocardial ischemia or a sham ischemia procedure. Ischemic animals fed the cholesterol-enriched diet for 2 wk experienced much greater cardiac damage than ischemic rabbits fed the control diet, despite the absence of any atherosclerosis. Lovastatin was shown to protect the ischemic rabbit myocardium by three different indices of ischemic damage: (a) maintenance of creatine kinase (CK) activity in the ischemic myocardium; (b) reduced loss of free amino-nitrogen containing compounds from the ischemic myocardium; and (c) blunting the rise of plasma CK activity. These effects were not due to differences in myocardial oxygen demand between the groups. Arteries isolated from animals fed the cholesterol-enriched diet developed defects in endothelium-dependent relaxation in both large vessels as well as coronary resistance vessels. Acute hypercholesterolemia increases the severity of myocardial ischemia while at the same time impairing endothelium-dependent relaxation. These deleterious changes can be significantly attenuated by treatment with lovastatin.     

速度向量成像技术评价兔急性心肌缺血局部心肌功能的研究

目的建立新西兰大白兔急性心肌缺血的动物模型,应用速度向量成像(VVI)技术分析急性心肌缺血状态下左心室长轴和短轴方向上各节段局部心肌收缩功能的变化特点。方法新西兰大白兔30只,随机分为冠状动脉结扎组和假手术组,于术前和术后30min内行超声心动图检查并采集动态图像,脱机行VVI分析,测量左心室心肌各节段长轴和短轴方向上的VVI参数:收缩期峰值运动速度(Vs)、收缩期峰值应变(Ss)、收缩期峰值应变率(SRs),行统计学分析。结果心肌缺血后,分别与术前及与假手术组比较,长轴方向上,前间隔心尖段与后壁心尖段的Vs明显减低;前间隔中间段、心尖段与后壁心尖段Ss、SRs明显减低,差异均有统计学意义(P<0.05);短轴方向上,前壁、侧壁的基底段,前间隔、前壁、侧壁的中间段和心尖水平的各节段的Vs明显减低;前间隔、前壁、侧壁的基底段,前间隔、前壁、侧壁、后壁的中间段以及心尖水平各节段的Ss、SRs明显减低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论急性心肌缺血后左心室支供血节段及部分相邻节段的长轴及短轴局部心肌收缩功能减低。VVI技术能够客观、准确的检测实验兔心肌长轴和短轴方向上局部运动功能的微小变化,为急性心肌缺血的早期诊断提供了一种新的无创的、可靠的定量工具。     

结扎大鼠冠状动脉诱发心肌及背根神经节内P物质变化的研究

目的 观察结扎冠状动脉（冠脉）左前降支大鼠不同时间整体心肌（包括缺血区和非缺血区）及背根神经节（DRG）内P物质蛋白及其基因水平的变化，探讨神经源性机制在局部急性心肌缺血诱发整体心肌损伤中的作用及其机制。方法 健康成年雄性SD大鼠24只，采用随机数字表法分为4组（n=6）：假手术组（S组）以及扎闭冠脉（CAO）1、3和6h组。采用结扎左冠脉前降支的方法制备急性心肌缺血动物模型。各组在规定的时间点开胸快速取缺血区和非缺血区（缺血区对侧半球）心肌及DRG T1～5制作标本。采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术观察各组动物缺血区和非缺血区心肌及DRG内P物质的蛋白和基因水平变化。结果 ①CAO后1、3和6h点大鼠缺血区和非缺血区心肌P物质蛋白及其mRNA水平均较S组显著升高（P均〈0．05），CAO 3h达峰值（P均〈0．05）；非缺血区CAO各组P物质蛋白及其mRNA水平低于相应组的缺血区心肌（P均〈0．05）。②CAO后1、3和6h点大鼠DRG内P物质mRNA的表达水平均较S组显著升高（P均〈0．05），在CAO 3h达高峰（P均〈0．05）。结论 结扎冠脉可诱发大鼠整体心肌组织（包括缺血区和非缺血区）P物质水平的增高，同时DRG内P物质mRNA的表达也显著增加，提示神经源性机制可能参与心肌缺血的病理学过程。     

灯盏花素对家兔缺血预适应心肌保护作用的影响

目的探讨灯盏花素（Bre）对家兔缺血预适应（IP）心肌保护作用的影响.方法 32只新西兰大耳白兔通过左冠状动脉左室支穿以丝线造成心肌缺血再灌注（R）,随机分为心肌缺血再灌注（I/R）组、Bre＋I/R组、IP组和Bre＋IP组,测定各组动物的心肌梗死面积及心肌酶、血浆内皮素（ET）和一氧化氮（NO）含量变化.结果 Bre和IP可减少心肌梗死范围,降低肌酸激酶、乳酸脱氢酶和ET含量,增加NO含量,联合应用Bre＋IP可进一步加强心肌保护作用.结论 Bre可以对缺血心肌产生保护作用,联合应用Bre可以加强IP对心肌的保护作用.     

促红细胞生成素对兔心肌缺血/再灌注损伤保护作用的研究

目的 建立兔心肌缺血/再灌注损伤(I/R)模型,观察促红细胞生成素(EPO)对兔血清CK-MB 浓度及心肌细胞凋亡的影响,探讨EPO 对兔心肌I/R 的保护作用及机制.方法 新西兰大白兔16 只,随机分为I/R 组和EPO 组.结扎兔左冠状动脉前降支制备兔I/R 模型.EPO 组于结扎左冠状动脉前降支的同时经耳缘静脉注入重组EPO,I/R 组注入等量的生理盐水.检测指标:(1)分别于缺血前5 min、缺血60 min、再灌注60 min 和再灌注180 min 检测血清CK-MB 浓度.(2)再灌注180 min 时取缺血区心肌组织,检测凋亡指数.(3)制作心肌组织标本,观察心肌组织的病理变化.结果 血清CK-MB 浓度随缺血及再灌注时间的延长而增加(与前一时间点比较,P <0.01);缺血前EPO 组与I/R 组血清CK-MB 浓度无统计学差异(P >0.05);缺血60 min、再灌注60 min、再灌注180 min 时,EPO 组血清CK-MB 浓度均显著低于I/R 组(均P <0.01).与I/R 组相比,EPO 组的缺血区心肌细胞的凋亡指数显著下降(P <0.01).结论 EPO 对兔心肌I/R 具有明显的保护作用,其机制可能与稳定心肌细胞膜结构,减少心肌酶的释放和抑制心肌细胞凋亡有关.