超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经细胞

背景:一些研究者利用超顺磁性氧化铁对骨髓间充质干细胞进行标记,并利用MRI技术对标记细胞肝内、肾内移植后进行初步的活体示踪,但是,对于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后,对其存活、增殖以及分化是否有影响研究较少.目的:观察超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后,对其存活、增殖以及向神经细胞的分化是否有影响.方法:使用超顺磁性氧化铁标记大鼠骨髓间充质干细胞,采用普鲁上蓝染色法鉴定其标记率、锥虫蓝染色法检测细胞活力、MTT法检测标记干细胞的细胞增殖活力,以1 mmol/Lβ-巯基乙醇及无血清DMEM培养液体外诱导标记细胞向神经细胞分化并用免疫组织化学奠定诱导后细胞、再次使用普鲁上蓝染色法鉴定神经细胞内的铁颗粒.结果与结论:普鲁士蓝染色对干细胞的标记率接近100%,锥虫蓝染色显示标记细胞的存活率为97%:MTT法检测发现标记干细胞的增殖活力与未标记干细胞相比差异无显著性意义(P>0.05):以β巯基乙醇诱导后大部分骨髓问充质干细胞分化为神经元样细胞、免疫组织化学阳性,再次普鲁士蓝染色显示铁颗粒位于神经细胞的细胞浆内.提示超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后,对于干细胞的存活、增殖以及向神经细胞的分化无影响.     

神经干细胞脑内移植后的增殖、迁移与分化

成年哺乳动物中枢神经系统缺乏针对创伤反应产生新的细胞的能力 ,因此在受到各种损伤时 ,中枢神经的再生能力是非常有限的[1 ] 。神经干细胞能够自我更新 ,具有分化为中枢神经系统各种细胞包括神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞的能力[2 ] 。移植后的神经干细胞可以在受体脑内增殖、迁移和分化 ,与宿主的神经细胞形成新的神经环路 ,分泌特殊的递质和营养因子 ,在结构和功能上替代受损的神经元。因此 ,研究神经干细胞脑内移植后的增殖、迁移和分化对中枢神经系统疾病的细胞移植治疗具有重要的意义。本文就此研究进展综述如下。1　影响神经…     

神经干细胞移植研究概况

神经干细胞 (neuralstemcells,NSCs)在神经系统损伤后具有巨大的再生潜能。NSCs可在多种哺乳动物的胎脑或成年动物和成人的脑组织中分离获得 ,也可从小鼠或人的胚胎干细胞中获得 ,甚至可由骨髓细胞等非神经系统细胞诱导产生。NSCs可在体外长期分化、增殖 ,并保持多向分化潜能。NSCs被移植入成年动物神经系统后 ,在神经损伤处可分化成神经细胞并恢复其功能 ,而在无神经细胞区域则分化成胶质细胞。目前NSCs移植已在临床研究治疗帕金森病、脑卒中和脊髓损伤的病例中获得成功。NSCs的研究进展 ,为治疗神经系统疾病 ,展示出光明的前景     

用于胚胎干细胞培养的饲养层细胞

胚胎干细胞体外培养条件要求非常严格,在体外极易分化、死亡,保持其未分化状态生长是充分利用胚胎干细胞资源的前提。目前,要保持其未分化状态生长,必须在培养基中加入分化抑制因子-白血病抑制因子或将其培养在能分泌分化抑制因子且无增殖能力的饲养层细胞上,其中饲养层细胞已常规用于各种胚胎干细胞培养过程。     

肠道干细胞分化调控与黏膜损伤修复

肠黏膜上皮细胞终身不断自我更新 ,其作用靠陷窝干细胞持续增殖、分化以取代外层终末分化细胞来完成 ,而外层细胞的死亡脱落与干细胞的分裂之间又维持一定的平衡。目前创伤造成的黏膜损伤尚缺乏有效的治疗手段 ,在肠道损伤后干细胞的分裂开始加快 ,起到促进创伤修复的作用。因此了解肠道干细胞如何增殖、分化及其调控机制对于肠道损伤后促进其功能与结构的完全修复意义重大。1　肠道干细胞概念、位置、数量及周期干细胞具有终身自我更新能力 ,它是能产生多种高度分化子代的细胞 ,可根据内环境变化作出不同反应。形态学上在陷窝纵向切片时以…     

体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化(英文)

背景:研究表明,移植后的骨髓间充质干细胞在新的环境中能够被诱导分化为神经元样细胞,从而替代损伤细胞重建神经环路。目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞和神经细胞的体外共培养系统,观察共培养条件下神经细胞对骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响。方法:体外培养Wistar大鼠脑组织神经细胞和股骨骨髓间充质干细胞,采用Transwell小室共培养分化诱导,观察骨髓间充质干细胞的组织形态变化,在共培养第5天免疫荧光染色检测骨髓间充质干细胞中神经细胞的特异标志物;与对照组单纯骨髓间充质干细胞培养结果相比较。结果与结论:神经细胞共培养系统中的骨髓间充质干细胞生长伸展,呈放射状,互相形成连接,特异性烯醇化酶显示阳性结果,具有神经元样细胞的特性,表达特异性烯醇化酶阳性的神经元比例可达(33.0±10.5)%。而对照组骨髓间充质干细胞未形成神经元样细胞的形态结构,免疫荧光显示特异性烯醇化酶阴性。提示神经细胞提供的微环境对骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞具有诱导分化作用。     

大鼠骨髓基质干细胞诱导分化神经细胞的实验研究

目的探讨骨髓源性神经干细胞分化为神经细胞的可行性，为中枢神经组织损伤修复寻找种子细胞的理想来源。方法无菌取成熟大鼠长骨骨髓，密度梯度离心分离后获得骨髓基质细胞，在神经干细胞培养液及细胞因子等条件下诱导其分化为神经元样细胞，通过免疫细胞化学方法对诱导后细胞进行鉴定。结果骨髓基质细胞能在神经干细胞条件培养基中增殖、分化，表达巢蛋白抗体抗原，在适宜诱导分化因子及条件下进一步分化为神经元样细胞，免疫细胞化学检测可见有神经细胞特异性核蛋白抗体抗原表达阳性。结论在适宜培养条件及诱导因子联合作用下，骨髓基质细胞可成功诱导出神经元样细胞。     

成体神经干细胞及其在神经修复中的应用

神经干细胞是一类具有多分化潜能的未分化细胞。在适宜的环境下可分化为神经元、神经胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞的无限增殖性和多分化性使其成为细胞移植的良好供体。近年来,成年脑组织内也发现了具有多分化潜能的神经干细胞,成体神经干细胞的发现改变了以往中枢神经系统不可再生的理论,随着对成体神经干细胞研究的深入,通过诱导自体神经干细胞的体内增殖修复损伤的神经元,通过分离自体神经干细胞体外扩增后移植治疗等实验的探索为神经源性疾病的替代性治疗提供了新的思路。     

人胚胎干细胞HuES17向造血干细胞的分化

背景:人类胚胎干细胞是来源于着床前囊胚的内细胞团,能在长期培养中无限增殖并保持未分化状态,且具有分化成人体组织各种细胞类型能力的细胞。目的:进一步验证人胚胎干细胞HuES17细胞株向造血干细胞分化的能力。方法:人胚胎干细胞HuES17采用与人包皮成纤维细胞二维共培养的方式培养,采用人胚胎干细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP9)二维共培养的方法诱导胚胎干细胞向造血干细胞分化。结果与结论:人胚胎干细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP9)二维共培养诱导造血分化的第四五天即开始出现OP9细胞逐渐老化,很快死亡;可以观察到人胚胎干细胞分化,然而,随着OP9细胞死亡,分化的人胚胎干细胞亦死亡,不能诱导人胚胎干细胞向造血干细胞分化。提示人胚胎干细胞HuES17细胞株可能不能向造血干细胞分化,或向造血干细胞分化的能力较低。     

神经干细胞在中枢神经系统损伤修复中的应用前景

神经干细胞是中枢神经系统中保持分裂和分化潜能的细胞。目前从神经干细胞的生物学特性、常规体外培养方法的建立 ,到神经干细胞的分化鉴定、电生理检测及定向诱导方法等方面的基础研究都取得了可喜成绩 ,这些成绩的取得为神经干细胞的临床应用奠定了坚实的实验基础。可以肯定 ,今后神经干细胞移植可以作为治疗神经系统损伤及疾病的一种方法。神经干细胞具有增殖和多向分化的潜能 ,在移植部位分裂增殖 ,并在局部微环境的作用下分化成相应的细胞来补充替代受损的细胞 ,恢复中枢神经系统的正常结构和功能。移植后产生的细胞也可以自主释放神经…     

成体神经干细胞及其在神经修复中的应用

神经干细胞是一类具有多分化潜能的未分化细胞。在适宜的环境下可分化为神经元、神经胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞的无限增殖性和多分化性使其成为细胞移植的良好供体。近年来，成年脑组织内也发现了具有多分化潜能的神经干细胞。成体神经干细胞的发现改变了以往中枢神经系统不可再生的理论，随着对成体神经干细胞研究的深入，通过诱导自体神经干细胞的体内增殖修复损伤的神经元，通过分离自体神经干细胞体外扩增后移植治疗等实验的探索为神经源性疾病的替代性治疗提供了新的思路。     

体外培养大鼠脂肪干细胞诱导分化为神经细胞

背景:脂肪间充质干细胞是一组具有多向分化潜能的干细胞,在不同诱导条件下可以向软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞分化,在一定条件下也可分化为神经干细胞。目的:研究大鼠脂肪间充质干细胞的体外培养及细胞表型,探讨其向神经细胞方向分化的能力。方法:取 SD 大鼠的腹股沟、附睾垫和腹膜后脂肪,分离培养脂肪间充质干细胞,形态观察并进行传代。流式细胞仪检测第三四代细胞表型 CD29、CD44、CD45。利用碱性成纤维细胞生长因子,表皮生长因子模拟神经细胞生长环境,使脂肪间充质干细胞向神经细胞方向分化,免疫荧光法检测诱导分化后神经细胞 nestin、NF-200、GFAP 的表达情况。结果与结论:从大鼠的脂肪组织中成功提取脂肪间充质干细胞,并能连续传代,稳定增殖,高表达 CD29(99.00±0.12)%,CD44(95.62±0.68)%,低表达 CD45(0.13±0.12)%。经无血清的神经因子诱导后,脂肪间充质干细胞可表达 nestin,加入血清后可表达 NF-200、GFAP。提示脂肪间充质干细胞具有强大的体外扩增能力,体外建立神经诱导环境后可定向分化为神经细胞的生物学特性,可为神经系统损伤、退行性疾病提供种子细胞。     

人骨髓间充质干细胞移植老年性痴呆大鼠认知能力和海马超微结构的变化

背景: 因发病机制不明,目前尚无治愈老年性痴呆的有效方法.现临床上主要是采用药物治疗,而骨髓间充质干细胞的替代治疗尚处于基础研究阶段,其海马移植后对老年性痴呆认知能力的影响未见报道.目的: 探讨人骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠认知能力和海马超微结构的影响.方法: 老年雄性Wistar大鼠30只,制各自然衰老痴呆模型,造模后随机分为3组,选取双侧海马为移植区,分化细胞移植组注射定向神经细胞诱导分化的人骨髓间充质干细胞悬液4 μL(2×105个细胞),干细胞移植组注射等量常规培养的人骨髓间充质干细胞,模型组注射等量生理盐水.通过Y迷宫试验测定大鼠的学习、记忆能力,透射电镜观察海马区超微结构.结果与结论: 与移植前大鼠学习、记忆分数比较,移植后12周模型组均显著下降(P<0.01),干细胞移植组均有所提高(P>0.05),分化细胞移植组均显著提高(P<0.01).移植后12周与模型组比较,干细胞移植组、分化细胞移植组大鼠学习、记忆分数均显著提高(P<0.01).电镜观察模型组大鼠海马区神经细胞可见明显损伤,干细胞移植组损伤减轻,分化细胞移植组多数神经细胞结构正常.证实骨髓间充质干细胞移植可以提高老年性痴呆大鼠的认知能力,且定向神经诱导分化的骨髓间充质干细胞移植治疗效果优于未分化的骨髓间充质干细胞,提示骨髓间充质干细胞减少海马组织神经细胞变性坏死可能是其改善老年性痴呆大鼠认知功能障碍的作用机制之一.     

骨髓基质细胞与中药合用治疗缺血性脑损伤的相关问题

骨髓基质细胞具有高度的增殖能力和神经分化潜能，是修复中枢系统神经损伤的理想细胞，其作用途径可能是通过增殖、分化替代受损神经细胞并整合到原有的神经网络当中，并分泌细胞因子促进内源性神经干细胞的增殖与分化，以促进神经功能恢复，减少损伤区细胞凋亡等。中药治疗缺血性脑损伤疗效显著，而且可以促进骨髓基质细胞的增殖与神经分化，将中药与骨髓基质细胞联合治疗缺血性脑损伤具有很好的应用前景。目前亟需解决的是骨髓基质细胞的输入量、途径以及生物安全性，中药与骨髓基质细胞合用的时间窗、中药的剂型和浓度等问题。     

神经干细胞治疗阿尔茨海默病研究进展

阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease，AD）是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病，是老年前期和老年期痴呆的主要原因。近年来，神经干细胞的发现及体外培养的成功为AD的治疗提供了一个崭新的视野。神经干细胞治疗AD的目的是修复和替代受损神经细胞，重建细胞环路和功能，主要有两种途径，即内源性途径（诱导内源性神经干细胞增殖与分化，使损伤的中枢神经系统进行自我修复）和外源性途径（直接替代缺损组织或植人能分泌促进干细胞增殖与存活的因子的基因工程细胞。一旦神经干细胞的基础研究在细胞增殖、迁移、分化及与宿主融合的机制等制约临床应用的问题方面取得突破，利用神经干细胞治疗AD等引起的脑损伤将会成为现实。     

干细胞移植治疗脊髓损伤的进展

目前发现，除了神经干细胞、骨髓或其他来源的间充质干细胞、嗅神经鞘细胞以及胚胎干细胞和脐血干细胞以外，皮肤来源、脂肪组织来源的干细胞、许旺细胞、胶质细胞和成纤维细胞等均可用于脊髓损伤的细胞移植治疗。体内标记示踪以及超微结构、免疫组织化学和影像学等检查显示，移植后的干细胞在神经系统内可以迁移，在病变部位聚集、存活、分化成为神经前体细胞或神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞，分别表达其特征性标志物，并与周围组织整合，轴索再生并有新的髓鞘覆盖，使病变的囊腔缩小，宿主的感觉／运动功能改善。神经营养因子在干细胞的培养、增殖、分化以及轴索的再生和再髓鞘化等过程中发挥着重要作用。     

干细胞在组织工程及其相关领域的研究进展

干细胞是机体内存在的一类特殊细胞，它们显的生物学特性是既有自我更新的能力又具有多向分化的潜能。干细胞可分为胚胎干细胞(ESC)和成体干细胞如造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肌肉干细胞、成骨干细胞、内胚层干细胞和视网膜干细胞等。干细胞在组织工程及相关领域应用较广，如最近发现老鼠胚胎干细胞可以向神经细胞分化，可以用来治疗帕金森等神经系统的疾病，并且利用这一分化特性可以作为治疗视网膜退化性疾病的无限的细胞资源。近年来的研究成果给人们显示出干细胞的美好应用前景，关健在于如何确定干细胞是否存在于所有的组织中，如何改进干细胞的分离和培养技术并掌握干细胞向特定谱系定向分化所需的标志物等。尽管如此，使用干细胞的危害性也需提出，尤其是人类的ESC细胞显示出其具有致瘤性，说明未分化的ESC细胞在进行移植前必须完全清除掉。介绍干细胞的概念，就其分类和在组织工程及其相关领域的研究进展。     

维甲酸与白血病治疗

白血病的发生是由于造血干细胞增殖与分化平衡失调所致,即造血干细胞保持其增殖能力但失去分化成熟能力。具有细胞毒性的各种化学药物由于对上常细胞和白血病细胞敏感性不同而达治疗作用。多种细胞分化诱导剂可诱导幼稚细胞成熟达治疗效果。维甲酸是维生素A的衍生物,体外试验及临床应用均表明维甲酸是一种有效的细胞分化诱导剂。 一、维甲酸的体外实验研究 1980年Britman首先在体外实验中证实维甲酸能诱导人类早幼粒细胞株HL60分化成熟。此后,这一发现在急性早幼粒细胞白血病的白血病细胞原代     

干细胞的可塑性及其在神经系统疾病细胞治疗中的应用

干细胞是一种未分化细胞 ,具有自我更新和多向分化的能力。根据其分化潜能 ,可分为 3类 :①全能干细胞 :即受精卵 ,在受精后的头几个小时内 ,受精卵可以分裂为功能一致的全能细胞 ,将其中的任一细胞置于女性的子宫内均可发育为胎儿 ;②胚胎干细胞 :来源于囊胚期的内细胞团或原肠胚的生殖嵴细胞 ,它具有广泛的分化潜能 ,可生成除胎盘外的所有组织细胞 ;③多能干细胞 :它局限于器官的某些特定部位 ,可分化为所在组织的各种细胞 (如造血干细胞可分化为髓系和淋巴系细胞 )。在胚胎发育中 ,它的增殖和分化是器官、系统发生的基础 ;存在于成年组织…     

体外培养大鼠脂肪干细胞诱导分化为神经细胞

背景：脂肪间充质干细胞是一组具有多向分化潜能的干细胞,在不同诱导条件下可以向软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞分化,在一定条件下也可分化为神经干细胞。目的：研究大鼠脂肪间充质干细胞的体外培养及细胞表型,探讨其向神经细胞方向分化的能力。方法：取 SD 大鼠的腹股沟、附睾垫和腹膜后脂肪,分离培养脂肪间充质干细胞,形态观察并进行传代。流式细胞仪检测第三四代细胞表型 CD29、CD44、CD45。利用碱性成纤维细胞生长因子,表皮生长因子模拟神经细胞生长环境,使脂肪间充质干细胞向神经细胞方向分化,免疫荧光法检测诱导分化后神经细胞 nestin、NF-200、GFAP 的表达情况。结果与结论：从大鼠的脂肪组织中成功提取脂肪间充质干细胞,并能连续传代,稳定增殖,高表达 CD29（99.00±0.12）%,CD44（95.62±0.68）%,低表达 CD45（0.13±0.12）%。经无血清的神经因子诱导后,脂肪间充质干细胞可表达 nestin,加入血清后可表达 NF-200、GFAP。提示脂肪间充质干细胞具有强大的体外扩增能力,体外建立神经诱导环境后可定向分化为神经细胞的生物学特性,可为神经系统损伤、退行性疾病提供种子细胞。