大鼠急性胰腺炎脾脏T淋巴细胞亚群的改变

目的:检测大鼠急性胰腺炎外周血及脾脏T淋巴细胞亚群,探讨急性胰腺炎病情发展过程中脾脏免疫功能状态的改变.方法:雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组各36只,胰管内逆行注射4%牛磺胆酸钠建立实验组胰腺炎模型,两组分别在3、6、12h分3批处死,每批12只.每只大鼠取胰腺组织观察病理改变,取股殂脉血2ml及脾脏2g制成单细胞悬液,用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8及CD4/CD8.结果:在胰腺组织炎性水肿阶段T淋巴细胞亚群无明显改变,在出血坏死阶段外周血CD3、CD4降低、CD8轻度升高、CD4/CD8明显降低;脾脏细胞与外周血相比,CD3、CD4及CD4/CD8明显降低,脾脏呈负性免疫状态,且随着炎症的加重变化更加明显.结论:脾脏在重症急性胰腺炎中可能起负性免疫作用,加重SAP病情发展.     

早期大剂量甲强龙冲击治疗对大鼠重症急性胰腺炎的影响

目的 观察早期大剂量甲强龙冲击治疗对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)炎症变化以及胰腺组织内T淋巴细胞浸润情况的影响.方法 通过腹腔内注射L-精氨酸(320 mg/100 g)制作大鼠重症胰腺炎模型,96只雄性SD大鼠随机分成正常对照组(NS组,n=32),重症急性胰腺炎组(SAP组,n=32),重症胰腺炎甲基强地松龙治疗组(MES组,n=32),观察SAP模型后6 h、12 h、24 h、72 h胰腺湿干比重、血清淀粉酶以及胰腺CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞及CD4~+/CD8~+比值变化水平.另外3组各取15只SD大鼠观察72h病死率.结果 SAP组较NS组各时段72 h病死率、血清淀粉酶、胰腺湿干比,而胰腺CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞百分数及CD4/CD8比值明显降低,MES组较SAP组各时段胰腺湿干比、血清淀粉酶明显降低,CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞百分数及CD4/CD8比值有所降低,但差异无统计学意义.结论 早期大剂量甲强龙冲击治疗重症急性胰腺炎对降低病死率,改善胰腺炎炎性介质反应具有明显作用,对内毒素水平、胰腺免疫功能影响无统计学意义.     

重症急性胰腺炎血清IL—6、IL—8和T细胞亚群的变化及临床意义

目的 探讨细胞因子和T细胞亚群在重症急性胰腺炎（sever acute pancreatitis,SAP)中的变化及临床意义。方法 应用双抗体夹心ELISA法检测重症急性胰腺炎和轻型胰腺炎（mild acute pancreatitis,MAP)及对照组的血清IL－6、IL－8的含量;应用碱性磷酸酶桥联法（APAAP）检测T细胞亚群。结果 重症急性胰腺炎发病初期IL－6、IL－8已升高,明显高于轻型急性胰腺炎和对照组（P＜0．001）;轻型急性胰岛素炎明显高于对照组（P＜0．01）。重症急性胰腺炎的CD4^ ,CD8^ 均明显低于轻型急性胰腺炎和对照组（P＜0．01）,尤以发病第3－7天明显,但CD3^ 和CD4^ /CD8^ 比值无显著性差异（P＞0．05）,轻型包性胰腺炎的T细胞亚群与对照组间无显著性差异（P＞0．05）。重症急性胰腺炎治疗好转期IL－6、IL－8与治疗前比有非常显著性差异（P＜0．001）,加重或恶化者IL－6、IL－8持续上升;好转患者CD4^ ,CD8^ 恢复正常,恶化者保持下降。结论 IL－6、IL－8和T细胞亚群的变化,对重症急性胰腺炎的早期诊断、病情判断和预后评估具有重要的应用价值。     

早期肠内营养对重症急性胰腺炎患者血清CRP及T淋巴细胞亚群的影响

目的研究早期肠内营养(EEN)对重症急性胰腺炎(SAP)患者血清C反应蛋白(CRP)及T淋巴细胞亚群的影响。方法将45例SAP患者随机分为实验组(22例)和对照组(23例)。实验组给予EEN,对照组给予肠外营养(PN),待患者排气排便后给予EN(通常于入院后5～7 d)。于入院后第1、5、7、11天,检测两组患者血清CRP及T淋巴细胞亚群(CD3、CD4+、CD4+/CD8+值)。结果除3例排除实验,余42例SAP患者治愈。平均住院日及住院费用,实验组低于对照组(P<0.05)。两组间比较,血清CRP、T淋巴细胞亚群,在第1天的差异无统计学意义(P>0.05);第5、7、11天血清CRP水平,实验组低于对照组(P<0.05),T淋巴细胞亚群(CD3、CD4+、CD4+/CD8+值)水平实验组高于对照组(P<0.05)。结论给予EEN能更好地降低SAP患者急性反应期炎症反应,提高免疫功能。     

外周血T淋巴细胞亚群变化能预测肝移植急性排斥反应吗?

目的探讨同种异体原位肝移植术后T淋巴细胞亚群变化在急性排斥反应诊断中的价值。方法总结分析了我中心2005年9月至2007年9月的肝移植病例资料,常规于肝移植术前1天、移植术后第7天、第14天、第21天和第28天各采集静脉全血,分别测定CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞,并计算CD3+CD4+细胞与CD3+CD8+细胞的比值。在符合入选标准的74例肝移植病人中,术后一月内发生排斥反应8例(排斥组),一月内未发生排斥反应63例(对照组),对两组病人的外周血T淋巴细胞亚群变化进行统计学分析比较。结果排斥组和对照组术后第14天、第21天和第28天CD3+CD4+细胞和CD3+CD8+细胞的测定值缺乏组间统计学差异,但排斥组CD3+CD4+细胞/CD3+CD8+细胞比值明显高于对照组(P0.05)。结论监测外周血T淋巴细胞亚群的变化,用CD3+CD4+细胞/CD3+CD8+细胞比值评估机体免疫抑制的水平,可能是预测排斥反应更为敏感的指标,并且能为寻求理想的免疫抑制状态提供重要的参考依据。     

大鼠急性胰腺炎细胞凋亡与Notch-1表达关系的研究

目的探讨大鼠急性胰腺炎时Notch-1的表达及其与胰腺细胞凋亡的关系。方法用不同浓度的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射分别建立急性轻型胰腺炎（MAP）及急性重型胰腺炎模型（SAP），采用TUNEL、Westernblot以及实时定量PCR的方法分别检测不同类型急性胰腺炎在不同时相的细胞凋亡指数、Notch-1蛋白以及Notch-lmRNA的表达水平变化。结果MAP组在建模后4～24h内细胞凋亡指数均明显升高，但各时点之间细胞凋亡指数相差不大；SAP组在建模4h后细胞凋亡指数最高，其后逐渐下降，两组之间细胞凋亡指数有显著性差异。建模后4h开始，各时点SAP组和MAP组的Notch1表达均有上升，但在SAP组的Notch-l表达明显高于MAP组，两组之间相比有显著差异；MAP组Notch-l表达的峰值时问是建模后12h，而SAP组Notch-1表达的峰值时间是建模后8h。结论不同类型急性胰腺炎细胞凋亡指数及Notch1的表达均有明显差异，Notch-1的过度表达可能通过抑制细胞凋亡而加重急性胰腺炎的病情。     

急性高容量性血液稀释对妇科肿瘤患者围术期T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨急性高容量性血液稀释(AHH)对妇科肿瘤患者围手术期T淋巴细胞亚群的影响.方法40例ASAⅠ～Ⅱ级的妇科肿瘤手术病人随机分成两组:高容量性血液稀释组(A组)在切皮前30分钟内输入6%羟乙基淀粉液1000ml;对照组(C组)常规输液,不实施血液稀释.分别与麻醉诱导前、手术结束后、术后24小时抽取静脉血,用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3 、CD4 、CD8 及CD4 /CD8 细胞百分率.结果两组病人手术结束后(T1)、手术后第1天(T2)与麻醉诱导前(T0)比较:T淋巴细胞亚群CD3 、CD4 及CD4 CD8 均明显降低(P＜0.01或P＜0.05),CD8 无显著性变化;但A组手术结束后和手术后第1天CD3 、CD4 及CD4 /CD8 明显高于C组(P＜0.05).结论术前采用急性高容量性血液稀释(AHH),可显著改善妇科肿瘤患者T淋巴细胞的免疫功能.     

甲型H1N1流感患者T淋巴细胞亚群动态变化分析

目的 探讨甲型H1N1流感不同临床类型及不同阶段T淋巴细胞亚群变化特征.方法 回顾性分析2009年本院确诊的271例甲型H1N1流感患者的临床类型、疾病不同阶段T淋巴细胞亚群变化情况.结果 甲型H1N1流感患者CD3+ T、CD4+ T和CD8+ T淋巴细胞计数在发病期均明显下降,且其下降程度随疾病严重程度增加而增加;CD4+%及CD4+/CD8+亦随疾病严重程度加重有降低趋势,CD8+%随疾病严重程度加重有增加趋势;甲型H1N1流感轻症患者CD3+ T、CD4+ T和CD8+ T淋巴细胞计数在确诊后第3天恢复正常,甲型H1N1流感重症、危重症患者CD3+ T、CD4+ T和CD8+ T淋巴细胞计数在确诊后第3天开始有下降趋势,在病毒转阴时恢复至基础水平,但未恢复至正常;CD4+%、CD8+%和CD4+/CD8+无明显动态变化.结论 甲型H1N1流感患者T淋巴细胞计数在疾病不同时期呈现动态变化,且其变化因疾病严重程度不同而不同.     

人CD8+CD28-抑制性T淋巴细胞的体外扩增及其抗原特异性调节作用

目的 探讨在体外大量扩增CD8+CD28-抑制性T淋巴细胞(Ts细胞)的方法,并检验其免疫调节作用.方法 分离健康志愿者全血中CD8+T淋巴细胞,在含不同细胞因子和异体抗原提呈细胞(APC)的培养条件下进行体外扩增.应用流式细胞术对扩增过程中CD28 -细胞亚群的比例进行监测.分为3组进行混合淋巴细胞培养,反应细胞均为CD4+T淋巴细胞:B-APc组以来源于原致敏供者的APC作为刺激细胞,I-APC组以HLA-A、B、DR全错配的无关供者的APC作为刺激细胞,Dynabeads组以包被有抗CD3和CD28单克隆抗体的免疫微球Dynabeads作为刺激细胞;扩增后的Ts细胞作为第三方调节细胞加入混合淋巴细胞培养中,测定其对CD4+T淋巴细胞增殖的抑制作用.结果 在含白细胞介素2(IL-2)+ IL-7+ IL-15的培养条件下,CD8+T淋巴细胞培养后CD8+CD28-T淋巴细胞亚群的比例最高(P＜0.05).B-APC组不加入Ts细胞时,增殖的CD4+T淋巴细胞比例为66.7％,当加入的Ts细胞与反应细胞的比例分别为0.5∶1、0.1∶1和0.02∶1时,增殖的CD4+T淋巴细胞比例分别为16.5％、34.1％和62.6％.Ts细胞对CD4+T淋巴细胞的增殖有明显抑制作用,而在I-APC组和Dynabeads组中,此抑制作用不明显.结论 应用含IL-2+ IL-7+ IL-15的培养条件联合异体APC刺激可以在体外大量扩增Ts细胞,扩增所得Ts细胞在体外对供者CD4+T淋巴细胞的增殖有明显抗原特异性抑制作用.     

手术联合树突状细胞治疗肾透明细胞癌的效果

目的 观察手术联合树突状细胞治疗肾透明细胞癌的临床效果,为肾癌治疗提供依据.方法 入组患者分为A、B两组,A组(n=33)为术后接受细胞治疗组,B组(n=37)为单纯手术治疗组.所有入组患者分别于手术治疗前8周及治疗后8周采外周血行流式细胞术检测T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4 +/CD8+比值),了解治疗前后机体免疫水平.结果 Ⅰ、Ⅱ期患者A、B组治疗前后T淋巴细胞亚群差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅲ期患者A组治疗前后T淋巴细胞亚群差异有统计学意义(P＜0.05),B组治疗前后T淋巴细胞亚群差异无统计学意义(P＞0.05).A组治疗前后T淋巴细胞亚群差异有统计学意义(P＜0.05),B组差异无统计学意义.结论 手术联合树突状细胞治疗可明显提高Ⅲ期肾透明细胞癌患者术后免疫功能,对肾癌治疗具有积极意义.     

大鼠重症急性胰腺炎MODS免疫改变及药物影响

目的:观察不同药物对重症急性胰腺炎(SAP)免疫功能的影响。方法:建立大鼠SAP-MODS模型,分别予地塞米松、乌司他丁、善宁、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)及中药莱菔承气汤治疗。观察各组一般情况及死亡率,术后24h血清淀粉酶、TNF-α、IL-6、IL-10及血浆内毒素水平,流式细胞仪对脾脏T淋巴细胞亚群比例及凋亡情况进行三色荧光分析,并取胰腺、肺、肾、肝脏组织行病理学检查。结果:地塞米松可明显降低促炎细胞因子TNF-α和IL-6水平,但同时也使SAP大鼠CD4T细胞的异常凋亡进一步增加,加剧免疫功能障碍。善宁及PDTC可降低TNF-α和IL-6水平,对T细胞功能无明显影响。乌司他丁和莱菔承气汤则可同时降低促炎细胞因子TNF-α、IL-6及抗炎细胞因子IL-10水平,减少CD4+T细胞异常凋亡、改善细胞免疫功能,明显降低死亡率、减轻脏器损伤;只有莱菔承气汤可显著降低血浆内毒素水平。结论:乌司他丁和莱菔承气汤有助于调节促炎/抗炎反应机制平衡、改善机体免疫功能,地塞米松可加剧SAP免疫损伤。     

A study of the relationship between type of lumbar disc herniation,straight leg raising test and peripheral T lymphocytes

Objective: To observe changes in peripheral T lymphocytes of patients with lumbar disc herniation, and investigate the relationship between the type of herniation, signs and T lymphocyte subsets. Methods: Blood samples from 20 healthy blood donors (control group), and 49 patients (27 male and 22 female) with single‐level lumbar intervertebral disc herniation were collected, the latter preoperatively. T lymphocytes subsets were detected by flow cytometer. According to the position of the intervertebral disc observed during surgery, the patients were divided into ruptured disc herniation (RDH) and degenerative disc herniation (DDH) groups. Straight leg raising (SLR) was assessed preoperatively. Results: Percentages of CD3+, CD4+, and ratio of CD4+/CD8+ in the RDH group were significantly higher, and of percentage of CD8+ significantly lower, than were those in the control group. Percentages of CD4+ and ratio of CD4+/CD8+ were significantly higher, and percentage of CD8+ significantly lower, in the positive SLR test group than were those in the negative SLR test group. The positive rate of SLR testing was significantly higher in the RDH than in the DDH group. Conclusion: Our results suggest that changes in T lymphocyte subsets in peripheral blood take place after herniation of the lumbar intervertebral disc. T lymphocyte mediated immune responses may play an important role in the occurrence and development of signs in patients with herniated lumbar intervertebral discs. The SLR test may help to confirm that disc herniation has caused nerve root impairment by mechanical loading or inflammatory stimulus and provide guidance on the choice of treatment.     

系统性红斑狼疮患者不同巨细胞病毒感染状态淋巴细胞亚群分析

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者不同巨细胞病毒（CMV）感染状态淋巴细胞亚群的特征，为临床诊断系统性红斑狼疮提供依据。 方法选取2016年6月至2019年6月于南京中医药大学附属张家港医院的SLE住院患者共96例，其中合并巨细胞病毒血症患者18例（巨细胞病毒血症组）、巨细胞病毒病患者50例（巨细胞病毒病组）和无CMV感染者28例（对照组）。获取3组患者的一般资料、常规实验室指标、CMV DNA拷贝数和外周血淋巴细胞亚群计数；并比较CMV感染者的上述指标，分析不同CMV感染状态下淋巴细胞亚群的特征。 结果巨细胞病毒血症组患者和巨细胞病毒病组患者的红细胞沉降率（t =-0.141、P = 0.025，t =-0.194、P = 0.003）CRP水平显著高于对照组（t =-0.563、P = 0.010），巨细胞病毒病组患者CRP（t =-0.854、P = 0.006）、环磷酰胺治疗例数（χ² =-6.139、P = 0.013）、血CMV DNA拷贝数（t =-0.355、P = 0.041）均显著高于巨细胞病毒血症组。巨细胞病毒血症组患者与对照组患者总淋巴细胞计数、CD3⁺ T细胞、CD3⁺CD4⁺ T细胞、CD3⁺CD8⁺ T细胞、CD19⁺ B细胞和CD56⁺CD16⁺ NK细胞计数差异均无统计学意义（P均> 0.05）。巨细胞病毒病患者总淋巴细胞计数（t = 0.933、P < 0.001）、CD3⁺ T细胞（t = 0.177、P = 0.018）、CD3⁺CD4⁺ T细胞（t = 0.207、P < 0.001）、CD3⁺CD8⁺ T细胞（t = 0.169、P < 0.001）和CD19⁺ B细胞（t = 0.320、P = 0.023）显著低于对照组患者。 结论淋巴细胞计数减低（尤其是CD4⁺ T细胞计数减低）常见于SLE患者伴发CMV感染中常见，是系统性红斑狼疮患者CMV感染诊断的潜在生物标记物。     

胸腺五肽对重度创伤失血性休克大鼠复苏中外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的观察早期加用胸腺五肽（TP-5）对重度创伤失血性休克复苏大鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法 72只健康雄性SD大鼠随机均分为两组,股骨干骨折合并股动脉放血使MAP控制在（35±5）mm Hg 90 min建立重度创伤失血性休克大鼠模型,Ⅰ组选用复方乳酸钠复苏,Ⅱ组采用复方乳酸钠加用TP-5。两组在休克前（T₁）、复苏前（T₂）、休克复苏后12 h（T₃）、24 h（T₄）、48 h（T₅）、72 h（T₆）时各取6只大鼠静脉血以流式细胞仪测量T淋巴细胞亚群含量。结果与T₁时相比,T₂、T₃时两组CD4+含量和CD4+/CD8+比值均有明显降低（P<0.01）,CD8+含量明显升高（P<0.01）,于T₃时达峰值。T₃～T₆时Ⅱ组CD4+含量、CD4+/CD8+比值明显高于Ⅰ组,CD8+含量明显低于Ⅰ组（P<0.05和P<0.01）。结论重度创伤失血性休克大鼠复苏联合应用胸腺五肽较单纯复苏治疗可促进CD4+含量的增加和CD4+/CD8+平衡,从而可能提高机体细胞免疫能力。     

儿童肾病综合征T细胞亚群检测的临床意义

目的：探讨儿童原发性肾病综合征（NS）T细胞亚群检测的临床意义。方法：对25例NS活动期和缓解期患儿应用流式细胞仪检测T2细胞亚群的变化。结果：NS活动期组CD3^ ,CD4^ ,CD4^ /CD8^ 比值，NK[CD(16 56)]^ 细胞均明显低于缓解期组（P＜0．01）和对照组（P＜0．01）。结论：说明NS细胞免疫功能减低，T细胞亚群检测可作为肾病综合征活动指标之一。     

异体手移植术后淋巴细胞亚群的早期监测

目的异体手移植术后患者外周血淋巴细胞亚群的变化和通过CD+3细胞数量的监测指导抗胸腺细胞球蛋白（antithymocyteglobulin,ATG）的用量。方法提取患者的外周血细胞，加入三荧光和双荧光标记的鼠抗人单克隆抗体CD     

膀胱肿瘤患者红细胞免疫功能的变化

目的 探讨膀胱肿瘤患者的红细胞免疫功能状态及与Ｔ淋巴细胞亚群改变的关系。方法 测定３４例膀胱移行细胞癌患者的红细胞Ⅰ型补体受体花环率（Ｃ３ｂＲＲ）、免疫复合物花环率（ＩＣＲ）及４项肿瘤红细胞花环率［直向肿瘤红细胞花环试验（ＤＴＥＲ）、促肿瘤红细胞花环试验（ＥＴＥＲ）、协同肿瘤红细胞花环试验（ＡＴＥＲ）及自然肿瘤红细胞花环试验（ＮＴＥＲ）］,同时用流式细胞仪（ＥＴＥＲ）检测Ｔ细胞亚群,与年龄相近的３     

Variation of bronchoalveolar lymphocyte phenotypes with age in the physiologically normal human lung

BACKGROUND: Changes in T lymphocyte subsets have been observed in various forms of pulmonary disease. However, bronchoalveolar lymphocyte subsets have not been well characterised for healthy individuals differing in age. A study was undertaken to investigate the bronchoalveolar lavage (BAL) and peripheral blood lymphocyte subsets in clinically normal volunteers of two different age groups (19-36 and 64-83 years). METHODS: Bronchoalveolar lavage was performed on all individuals in both age groups and peripheral venous blood was drawn just prior to BAL. Bronchoalveolar cell profiles were characterised by morphological criteria, and cell surface antigen expression of lymphocytes was determined by flow cytometry. RESULTS: A significant increase in total BAL lymphocytes was observed for the oldest group compared with the youngest age group. Mean lymphocyte subset (CD4+/CD8+) ratios were significantly increased in BAL fluid from the older group compared with the younger group (mean (SE) 7.6 (1.5) vs 1.9 (0.2); p<0.0001). The increase in the BAL CD4+/CD8+ T cell ratio was mostly due to an increase in relative numbers of CD4+ lymphocytes, and the BAL CD4/CD8 ratio was disproportionately increased compared with peripheral blood in the older group. Increased expression of HLA-DR and CD69 on CD4+ T lymphocytes was observed in the oldest age group. Relative numbers of natural killer (NK) cells did not vary with age, and gammadelta T cells and CD5+ B cells were present in very low numbers in both age groups. CONCLUSIONS: CD4+ T cells accumulate in air spaces of the lower respiratory tract with age in healthy adults and express increased amounts of HLA-DR and CD69 on their surfaces, suggesting a relative degree of CD4+ T lymphocyte activation for healthy older individuals who have normal lung function.     

Changes in T Cells After ABO-Incompatible Liver Transplantation

Purpose: T lymphocytes are an essential component of allograft rejection and tolerance. The aims of the present study are to analyze the characteristics of T-cell subsets between ABO-incompatible living donor liver transplantation (ABO-I LDLT) and ABO-compatible LDLT (ABO-C LDLT). Materials and Methods: Between April 2013 and June 2014, 61 patients underwent adult LDLT. ABO-I LDLT patients received rituximab and all patients received basiliximab as induction therapy and tacrolimus as maintenance therapy. The distribution of peripheral blood T lymphocyte subsets pretransplant and 4, 8, 12, and 24 weeks post-transplant were serially monitored. Results: Eight patients underwent ABO-I LDLT. Patient characteristics did not vary between the ABO-I and ABO-C groups. Absolute lymphocyte counts and CD4+ T cells in the ABO-I group were lower than those in ABO-C group after LDLT (p =.034 and p =.039, respectively). However, the comparison between the ABO-I and ABO-C groups revealed that the CD8+ T cells, CD4/CD8 ratio, Vδ1 cells, Vδ2 cells, γδ T cells, Vδ1/Vδ2 ratio, CD3-CD56+ cells, and CD4+Foxp3+ T cells did not change significantly over time. Conclusions: Absolute lymphocyte counts and CD4+ T cell levels are different between ABO-I and ABO-C groups after LDLT. The present study suggests that T-cell lymphocyte changes in peripheral blood in ABO-I LDLT patients were similar to those in ABO-C LDLT patients.