菟丝子总黄酮对大鼠睾丸曲细精管无血清培养所致细胞凋亡的保护作用

目的观察中药菟丝子总黄酮对大鼠睾丸细胞氧化损伤和凋亡的保护作用。方法测定丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAOC)、活性氧(ROS)等氧化损伤指标,原位末端标记(TdTmediateddUDPXnickendlabeling,TUNEL)法检测睾丸细胞凋亡。结果不同剂量的菟丝子总黄酮可抑制无血清培养所诱导的大鼠睾丸细胞氧化损伤和凋亡,且其作用具有剂量依赖性,以500mg·L-1最明显。结论菟丝子总黄酮是一种有效的抗氧化剂,具有抗氧化、抗凋亡的作用。     

川芎嗪对隐睾固定术大鼠生精细胞影响的实验研究

目的：观察睾丸固定术前使用盐酸川芎嗪（Ligustrazine Hydrochloride）是否对大鼠隐睾所致的生精细胞凋亡有协同保护作用。方法：22日龄雄性SD大鼠40只，随机分成4组，假手术组（A组）、隐睾组（B组）、睾丸固定术组（C组）、固定术＋川芎嗪组（D组），制作大鼠隐睾模型，D组注射盐酸川芎嗪。14d后，C组和D组行睾丸下降固定术。28d后测定睾丸组织中超氧化物歧化酶（sod）、丙二醛（MDA）的含量，TUNEL法测定生精细胞的凋亡指数。结果：固定术＋川芎嗪组隐睾睾丸内SOD活性增强，MDA含量明显下降，生精细胞凋亡指数进一步减低。结论：睾丸下降固定术能够减轻大鼠睾丸生精细胞的凋亡，而固定术前使用川芎嗪对隐睾所致的睾丸生精细胞凋亡有协同保护作用。     

复方总黄酮对小鼠慢性酒精性睾丸损伤的作用研究

目的探讨复方总黄酮对慢性酒精睾丸损伤小鼠的保护作用。方法 100只SPF级C57BL/6小鼠随机分为5组:正常对照组、慢性酒精组、酒精+低剂量药物组、酒精+高剂量药物组、药物对照组,每组20只。采用酒精浓度递增梯度法建立小鼠慢性酒精睾丸损伤模型,同时用复方总黄酮进行干预治疗,连续6个月,测定睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及睾酮含量。HE染色观察组织形态学变化,电镜观察其超微结构改变。结果慢性酒精组小鼠睾丸组织中MDA含量明显升高,SOD活力以及睾酮含量下降,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05);此外,睾丸生精上皮结构破坏,支持细胞和各级生精细胞均有退化变性,复方总黄酮可呈剂量依赖性地逆转上述改变。结论复方总黄酮对慢性酒精睾丸损伤小鼠的保护作用可能与其抑制脂质过氧化和提高睾酮活性密切相关。     

菟丝子黄酮对去势雌性大鼠血清雌激素水平和血管平滑肌细胞的影响

目的：观察补肾中药菟丝子的有效成分菟丝子黄酮对老年血管的保护作用，并探讨其作用机制。方法：菟丝子经溶剂提取、聚酰胺柱分离得黄酮提取物。SD雌性大鼠随机分成正常对照组，模型对照组，菟丝子黄酮高、低剂量组及阳性对照组。实验动物按分组造模、给药42d后，观察血清中的雌激素水平和主动脉平滑肌细胞凋亡率的变化。结果：菟丝子黄酮能上调去势雌性大鼠血清雌激素水平（P〈0．01），提高其主动脉平滑肌细胞早期凋亡率（P〈0．01）。结论：菟丝子黄酮通过升高雌激素水平和促进主动脉平滑肌细胞凋亡发挥其对老年血管的保护作用。     

地锦草总黄酮对衰老小鼠组织端粒酶表达的影响

目的 观察地锦草总黄酮对衰老小鼠睾丸生精细胞端粒酶表达的影响.方法 用D-半乳糖连续ip建立衰老小鼠模型,并ig给予地锦草总黄酮(TFEH);分别采用定量ELISA法、硫代巴比妥酸法及黄嘌呤氧化酶法检测睾丸和脑组织中的端粒酶、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果 TFEH可明显提高衰老小鼠睾丸、...     

蒲公英总黄酮抑制Aβ25-35诱导的海马神经元细胞凋亡的研究

目的：研究蒲公英总黄酮用于防治阿尔兹海默症（AD）的机制,探讨蒲公英总黄酮对Aβ25-35诱导海马神经元细胞凋亡的影响,并进一步探究其潜在机制。方法：对海马神经元胞进行原代培养,经20 μmol·L-1 Aβ25-35诱导,细胞逐渐出现凋亡,用MTT法结合流式细胞仪,观察不同浓度的蒲公英总黄酮的细胞活力和细胞凋亡情况。用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法来检测各组细胞中丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性。Western blot检测各组细胞凋亡相关的基因Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。结果：20 μmol·L-1 Aβ25-35组细胞比对照组活力下降,凋亡增加,MDA 含量上升,SOD 活性降低。与20 μmol·L-1 Aβ25-35组相比,各浓度下的蒲公英总黄酮均能够提高细胞活力,升高细胞内SOD活性,抑制细胞凋亡,降低MDA含量,同时上调Bcl-2表达,降低Bax和活化状态下的Caspase-3蛋白的表达,并呈浓度依赖性相关。结论：蒲公英总黄酮能够减少Aβ25-35诱导神经元细胞的细胞凋亡,这可能与拮抗其氧化损伤有关。     

知母总黄酮对溴酸钾诱导小鼠肾损伤的保护作用

目的探讨知母总黄酮对溴酸钾诱导小鼠肾损伤的保护作用。方法200mg.kg-1溴酸钾腹腔注射诱导小鼠肾损伤模型,采用高效液相色谱仪测定小鼠血清中肌酐含量及肾组织中谷胱甘肽、半胱氨酸和维生素C含量,TBARS法测定小鼠肾组织中丙二醛含量,荧光酶标仪测定知母总黄酮的体外抗氧化活性及小鼠肾组织的抗氧化能力指数。结果与肾损伤模型组相比,知母总黄酮可以有效降低血清肌酐水平和肾组织中丙二醛含量,提高肾损伤小鼠肾组织的抗氧化能力指数、谷胱甘肽、半胱氨酸及维生素C水平,并在体外显示出较强的抗氧化能力。结论知母总黄酮对溴酸钾诱导的小鼠肾损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与知母总黄酮通过消除自由基缓解溴酸钾诱发的肾组织过氧化状态有关。     

不同炮制方法对菟丝子总黄酮含量的影响

目的 研究不同炮制方法对菟丝子总黄酮含量的影响.方法 菟丝子洗净干燥,采用紫外分光光度法测定生品、酒炙、盐炙、清炒菟丝子总黄酮的含量.结果 炮制后总黄酮的含量发生变化,总黄酮含量清炒品1.59%,生品2.15%,酒炙品2.19%,盐炙品2.22%.结论 炮制影响菟丝子总黄酮含量,其中以盐炙品总黄酮含量最高.     

桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤的影响

目的观察桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤的影响及作用机制。方法给大鼠腹腔注射30 mg·kg-1链脲佐菌素,建立2型糖尿病动物模型。造模后随机分成模型组,桑叶总黄酮低、中、高剂量组(50,100,150 mg·kg-1)和罗格列酮组(1.8 mg·kg-1),另取正常大鼠作为对照组,每组均为10只。灌胃给药,每日1次,连续5周后测定大鼠血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平和胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,末端脱氧核糖核酸缺口标记法(TUNEL)加免疫组化法测定胰岛β细胞凋亡率。结果桑叶总黄酮能显著降低胰腺组织MDA水平,提高SOD和GSH-Px水平(P<0.05或P<0.01),显著上调抗凋亡基因Bcl-2表达,下调促凋亡基因Bax表达(P<0.05或P<0.01),使胰岛细胞凋亡率显著降低(P<0.05或P<0.01),并能显著降低FBG水平,升高FINS含量(P<0.05或P<0.01),其中以150 mg·kg-1桑叶总黄酮最为明显。结论桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠具有较好的抗氧化作用,可以缓解胰岛β细胞凋亡的发生。     

蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤诱导细胞凋亡的影响

目的研究蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤诱导细胞凋亡的影响。方法用TUNEL、流式细胞技术及电镜观察细胞超微结构研究细胞凋亡。结果TUNEL结果表明:蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤诱导细胞凋亡有改善作用。流式细胞仪检测:根据PI法流式细胞技术检测二倍体亚峰分析,蜂胶总黄酮对细胞凋亡亦有明显改善。电镜观察:假手术组心肌细胞超微结构未见明显异常;模型组心肌细胞可见线粒体肿胀,线粒体嵴不同程度溶解破坏,遗留较多空泡,核染色质边集,核皱缩,核膜表面凹凸不平等形态学改变,但未见到典型的凋亡小体,蜂胶总黄酮组心肌线粒体排列尚规整,线粒体嵴无明显破坏,肌丝排列整齐,无明显破坏。结论蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤诱导细胞凋亡具有改善作用。     

菟丝子对D-半乳糖所致衰老模型小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 :观察菟丝子对 D-半乳糖所致衰老模型小鼠红细胞免疫功能的影响。方法 :采用 D-半乳糖所致衰老模型小鼠 ,灌服菟丝子水煎剂 30 d,测定红细胞 C3b受体花环率 (RBC- C3b RR)及免疫复合物花环率 (RBC- ICR)。结果 :菟丝子水煎剂能提高小鼠 RBC- C3b RR(P <0 .0 5 ) ,使小鼠 RBC- ICR降低 (P <0 .0 5 )。结论 :中药菟丝子明显增强衰老模型小鼠的红细胞免疫功能 ,具有延缓衰老作用     

Determination of flavonoids in Semen Cuscutae by RP-HPLC

Flavonoids contents in 40 samples of Semen Cuscutae collected from areas all around China were investigated. Five principal flavonoids, quercetin 3-O-beta-D-galactoside-7-O-beta-D-glucoside, quercetin 3-O-beta-D-apiofuranosyl-(1-->2)-beta-D-galactoside, hyperoside, quercetin and kaempferol were analyzed simultaneously by using a reversed phase liquid chromatograph system with 0.025 M phosphoric acid-methanol as mobile phase. The recovery of the method was 97.0-102.9%, and all the flavonoids showed good linearity (r > or = 0.9990) in a relatively wide concentration range. The results indicated that contents of flavonoids in S. Cuscutae varied significantly from species to species, locality to locality, and parasiting host to host. Cuscuta australis contained a much higher content of kaempferol than C. chinensis, and few flavonoids were detected in C. japonica. The quality of S. Cuscutae can be evaluated according to the contents of flavonoids.     

中药材菟丝子的质量情况分析

目的：通过对菟丝子常见伪品逐一梳理介绍鉴别要点,探讨分析菟丝子的质量情况。方法：通过菟丝子的日常验收检验,利用性状、水煮、压碎等简单的经验鉴定方法,区分出菟丝子不同的掺伪品。结果：菟丝子经验鉴别方法简单准确,62批市售菟丝子中只有8批样品为正品,其他54批样品存在掺杂、掺伪情况。结论：应加强对菟丝子掺伪品的鉴别,对菟丝子的质量情况进行系统分析研究,控制菟丝子的药材质量。     

荔枝核的抑瘤作用及对肝癌组织端粒酶活性的影响

目的:建立肝癌荷瘤小鼠模型,研究荔枝核水提物对小鼠模型实体瘤生长的影响。方法:小鼠S180肿瘤细胞与肝癌细胞混悬液用生理盐水按1∶1进行稀释,制成含瘤腹水混悬液;在给药前24h每只小鼠腋窝皮下接种0.2mL,整个操作在无菌条件下60min内完成。对小鼠S180肿瘤细胞、肝癌细胞连续10d给予荔枝核水提物,观察S180肿瘤细胞和肝癌细胞的生长情况、肝癌荷瘤小鼠体内Bcl -2的水平及肝癌细胞的凋亡情况。结果:荔枝核水提物能显著抑制S180肿瘤细胞和肝癌细胞的生长(P<0.01) ;荔枝核能显著升高肝癌荷瘤小鼠体内Bcl -2的水平(P<0.05或P<0.01) ;荔枝核能够显著促进肝癌细胞的凋亡。结论:荔枝核的抑瘤作用可能与升高动物体内的Bcl -2水平及促进癌细胞的凋亡有关。     

种子类药材菟丝子提取工艺研究

目的 针对菟丝子种皮致密,提取溶剂不易渗透进入种子内部,有效成分难以提取出来的问题,本实验拟研究该药材的提取方法,优化提取工艺参数。 方法 以菟丝子中主要活性成分金丝桃苷含量为评价指标,采用单因素平行比较法确定菟丝子提取前处理方法(捣碎与否)、提取方式(包煎与否)和溶剂类型(水或乙醇),采用L₉(3⁴)正交试验法进一步优化提取工艺参数。 结果 包煎不利于有效成分的溶出,种子捣碎有利于有效成分的溶出,菟丝子最适宜的提取工艺为首先将其捣碎破裂开,然后采用不包煎的方式,用10倍量55%乙醇提取2次,每次1 h,验证实验菟丝子中金丝桃苷的提取量为2.04%,RSD(相对标准差)为1.7%。 结论 优选的菟丝子提取工艺稳定可行,可用于该药材的提取,为同类性质的种子类药材的提取提供参考。     

正交设计优选菟丝子中总黄酮的提取工艺

目的:确定菟丝子总黄酮的最佳回流提取工艺。方法:采取正交优化实验,以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法对提取物中的总黄酮含量进行测定。结果:检测波长为510nm,芦丁对照品在0.095~0.475mg/mL内线性良好(r=0.9992),最佳提取工艺条件为提取时间150分钟,提取次数3次,醇浓度为50%,料液比为1:8。结论:该方法稳定,经济,工艺合理。     

中药材菟丝子中金丝桃苷含量测定的影响因素研究

目的 研究菟丝子中金丝桃苷含量测定结果的影响因素。方法 分别对供试品溶液制备的影响因素进行初步考察,发现粉碎是影响含量高低的关键因素。采用不同效能的粉碎机、不同的粉碎时间、粉碎次数等,对菟丝子药材进行粉碎,通过测定过筛后粉末中金丝桃苷的含量,以重点考察粉碎对测定结果的影响。结果 粉碎是影响菟丝子金丝桃苷含量高低的关键因素,而金丝桃苷在菟丝子种子不同部位的分布存在较大差异,其中以胚中含量较高。结论 由于菟丝子较难粉碎,而金丝桃苷含量在种子各部位的分布不均,含量测定中的粉碎是关键操作步骤。本研究为进一步完善粉碎的要求提供了一定的实验依据。     

Di‐2‐ethylhexyl phthalate (DEHP) induces apoptosis and autophagy of mouse GC‐1 spg cells

As a widely used plasticizer in industry, di‐2‐ethylhexylphthalate (DEHP) can cause testicular toxicity, yet little is known about the potential mechanism. In this study, DEHP exposure dramatically inhibited cellviability and induced apoptosis of mouse GC‐1 spg cells. Furthermore, DEHP significantly increased the levels of autophagy proteins LC3‐II, Beclin1 and Atg5, as well as the ratio ofLC3‐II/LC3‐I. Transmission electron microscopy (TEM) further confirmed that DEHP induced autophagy of mouse GC‐1 spg cells. DEHP was also shown to induceoxidative stress; while inhibition of oxidative stress with NAC could increase cell viability and inhibit DEHP‐induced apoptosis and autophagy. These results suggested that DEHP induced apoptosis and autophagy of mouse GC‐1 spg cells via oxidative stress. 3‐MA, an inhibitor of autophagy, could rescue DEHP‐induced apoptosis. In summary, DEHP induced apoptosis and autophagy of mouse GC‐1 spg cells via oxidative stress, and autophagy might exert a cytotoxic effect on DEHP‐induced apoptosis.