小鼠下颌下腺中肥大细胞异质性研究

取小鼠下颌下腺，用甲苯胺蓝染色Ａｌｃｉａｎ蓝－藏红染色及免疫组织化学ＡＢＣ法显示大细胞的异质性。结果表明：肥大细胞主要分布于间的小血管，小叶间导管及神经节周围。此外否定还发现有些肥大细胞沿腺实质表面排列，有些肥大细胞突起与相邻的神经元或肥大细胞接触。     

人腭扁桃体肥大细胞的性质—免疫组化法研究

收集手术切除的人腭扁桃体标本６例，常规石蜡切片，分别以血管活性肠肽、阿尔新蓝－番红花红、长时间甲苯胺蓝和普通甲苯胺蓝染色观察肥大细胞。结果显示：肥大细胞呈血管活性肠肽免疫反应阳性，分布于淋巴小结中央及周围的弥散淋巴组织、被膜及小梁的结缔组织、固有层和小血管周围。阿尔新蓝－番红花红染色呈浅蓝色颗粒。长时间甲苯胺蓝染色显示的肥大细胞数目较多，颗粒为深蓝色。普通甲苯胺蓝染色未以显示肥大细胞。结果提示，人     

大鼠心壁内CGRP阳性肥大细胞定位及分布研究

本文用免疫细胞化学方法及甲苯胺蓝染色法,研究大鼠心壁内肥大细胞降钙素基因相关肽(CGRP)样免疫反应物质以及含这类物质的肥大细胞在心壁内的分布.发现部分肥大细胞含有降钙素基因相关肽样免疫反应物质.含这类物质的肥大细胞约占甲苯胺蓝染色肥大细胞数的13.5%,细胞直径多在8～15μm,心房后壁多于心室壁,t检验结果表明二者差异显著(P<0.001),这种分布特点与甲苯胺蓝染色的肥大细胞分布相一致.由于对照组均为阴性,排除了假阳性的可能.文中对心壁内这种细胞的有关问题进行了讨论.     

糖尿病大鼠颌下腺肥大细胞数量及转化生长因子β1的表达

背景：研究表明,持续高血糖可导致大鼠颌下腺的细胞出现退行性改变,表现为细胞因子表达增加,糖原代谢改变,分泌功能减弱。关于肥大细胞及转化生长因子β1与糖尿病颌下腺组织病变的关系研究较少。 目的：观察糖尿病状态下颌下腺组织中肥大细胞数量与形态变化和转化生长因子β1的表达。 方法：雄性SD大鼠32只,随机分为实验组和对照组,实验组注射四氧嘧啶成模后的4,8,12周测量体质量和血糖,并与对照组大鼠一同取下颌下腺组织做苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色观察并计数肥大细胞,SP 免疫组织化学染色方法检测转化生长因子β1棕黄色阳性细胞数量。 结果与结论：①肥大细胞在正常鼠及糖尿病鼠颌下腺组织中均有表达,实验组与对照组比较肥大细胞数随病程延长而增多,实验组不同时期明显多于对照组(P < 0.01)。②转化生长因子β1阳性细胞数在正常大鼠及糖尿病大鼠颌下腺的腺泡细胞、颗粒曲管及纹状管细胞中均有表达,阳性颗粒位于胞浆内,糖尿病时,随病程延长而增多,实验组不同时期明显多于对照组(P < 0.01)。结果可见糖尿病大鼠颌下腺中肥大细胞与转化生长因子β1表达增强与糖尿病病程呈正相关。     

P物质,血管活性肠肽和神经肽Y在大鼠舌肥大细胞内的定位研究

采用甲苯胺蓝染色和免疫组织化学ＡＢＣ方法，对大鼠舌组织中肥大细胞的分布，形态特点以及细胞内的Ｐ物质、血管活性肠肽和神经肽Ｙ的定位进行了研究。结果表明，大鼠舌组织内肥大细胞主要分布于固有层和肌层，多呈圆形，椭圆形或长梭形。经与甲苯胺蓝染色的相邻切片比较，几乎所有肥大细胞分别呈Ｐ物质、血管活性肠肽和神经肽Ｙ免疫反应阳性。提示：舌组织肥大细胞内Ｐ物质，血管活性肠肽和神经肽Ｙ等生物活性肽可能与其局部血液供     

糖尿病大鼠下颌下腺内肥大细胞的形态学观察

目的观察糖尿病大鼠下颌下腺内肥大细胞形态和数量变化。方法SD雄性大鼠30只,随机分为实验组12只(4周、12周各6只)、治疗组12只(4周、12周各6只)及对照组6只,用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,应用HE和甲苯胺蓝(Toluidineblue,TB)染色观察并记数肥大细胞。结果对照组大鼠下颌下腺内肥大细胞呈圆形。卵圆形及不规则形,细胞内颗粒密集,平均肥大细胞数为(6.55±4.02)个/HP。实验组大部分肥大细胞胞内颗粒稀疏,有脱颗粒现象。4周平均肥大细胞数为(15.44±5.92)个/HP,12周为(46.67±7.78)个/HP,差异有统计学意义(P<0.01),而治疗组肥大细胞形态结构与对照组比较无明显区别,4周平均肥大细胞数为(12.33±1.67)个/HP,12周为(21.71±6.25)个/HP。结论糖尿病可导致下颌下腺内肥大细胞脱颗粒活跃、数量增多,提示肥大细胞可能参与糖尿病发生与发展病理过程。     

硫酸-甲苯胺蓝-丽春红苦味酸染色法在显示组织肥大细胞中的应用

正肥大细胞含有丰富的酶系和多种生物活性物质,这些物质作为机体重要的细胞成分,广泛参与机体的免疫调节、过敏反应、肿瘤发生发展等,由此可见肥大细胞在机体病理、生理等过程中起至关重要的作用。常规HE染色不能直观地辨别肥大细胞,最常用的显示肥大细胞的特殊染色方法为甲苯胺蓝染色,但其相关试剂配制的方法有多种。为对比清晰地显示人体组织中的肥大细胞,作者选用硫酸-甲苯胺蓝-丽春红苦味酸染色法进行组合染色,效果佳,现介绍如下。     

大鼠舌组织中肥大细胞与肽能神经纤维的分布

目的探讨舌组织内肥大细胞与肽能神经的关系及其功能意义。方法采用甲苯胺蓝染色和免疫组织化学ABC染色法对10只Wistar大鼠舌组织进行SP、VIP和NPY染色。结果经与甲苯胺蓝邻片对比观察,舌组织内肥大细胞分别呈SP、VIP和NPY免疫反应性;在舌组织固有层及肌间结缔组织中还分布有丰富的SP、VIP和NPY免疫反应阳性纤维;在肽能神经纤维附近或周围可见有免疫反应阳性的肥大细胞,这些肥大细胞与神经纤维紧密相靠或接触。结论 大鼠舌组织内肥大细胞和神经纤维分别呈SP、VIP和NPY免疫反应性,提示肥大细胞与周围神经无论是在形态还是在功能上有着密切的联系。     

介绍一种显示肥大细胞快捷简便的染色方法

目前关于肥大细胞的染色方法很多，如经典的甲苯胺蓝染色、阿尔辛蓝-番红花红染色、硫堇染色、地衣红染色等，因种种原因目前尚无法广泛应用，本文现介绍一种显示肥大细胞的染色方法，该方法安全、简便、快捷，并且可用于新鲜或固定的组织标本。     

红鲫肥大细胞鉴别方法比较

目的探讨红鲫(Cyprinus carpio)肥大细胞(MC)的不同鉴别方法。方法取已被迟缓爱德华菌感染的红鲫鳃组织,用Bouin氏液固定3 h,苏木精-伊红(HE)法、甲苯胺蓝(TB)法、阿利新蓝(AB)法、中性红法、Masson三色法、May-Grünwald Giemsa(MGG)法与免疫组织化学SABC法观察MC。同时使用Wright-Giemsa染色的头肾涂片法作为补充。结果阿利新蓝和甲苯胺蓝法显示肥大细胞良好,MGG法次之。免疫组织化学法检测类胰蛋白酶阳性肥大细胞数量较少,阳性反应弱。涂片法可将细胞分散开,并显示出不同发育阶段肥大细胞的特性。结论组织化学染色结合涂片法和免疫组织化学染色,可以更好的识别鱼类肥大细胞。     

小鼠下颌下腺内ncNOS的表达

目的对小鼠下颌下腺内ncNOS进行定性和定位研究。方法取8只昆明种小鼠下颌下腺,进行HE染色和免疫组织化学染色。结果小鼠下颌下腺纹状管及小叶间导管上皮细胞呈ncNOS免疫反应阳性,而腺泡细胞则为阳性。结论小鼠下颌下腺导管上皮中有ncNOS的表达,提示下颌下腺具有复杂的分泌功能。     

The mechanism of histamine release induced by pilocarpine from different tissues: Studies on rat peritoneal mast cells

Pilocarpine releases histamine from mast cells of cat submandibular gland and rat liver. In the salivary gland, histamine is released into the saliva and venous outflow. Atropine blocks the salivation, but not histamine release from the submandibular gland into the blood. Histamine release from the gland could be due to a direct action of pilocarpine on tissue mast cells or to an indirect action of mediators (acetylcholine and peptides). These hypotheses were further investigated in our present studies on rat peritoneal mast cells. Our results show: (1) histamine release from rat peritoneal mast cells induced by pilocarpine (ED₅₀=1.7×10⁻² mol/l) occurs at 1000-fold higher concentrations than by substance P (ED₅₀=1.7×10⁻⁵ mol/l) and in 6.5-fold higher concentrations than by atropine (ED₅₀=2.6×10⁻³ mol/l), (2) pilocarpine injected directly into the rat peritoneal cavity causes histamine release from peritoneal mast cells in 1.8-fold higher concentrations than from isolated rat peritoneal mast cells. These results would support the hypothesis that histamine release from cat submandibular gland is caused by peptidergic co-transmission during the stimulation of the organ.

     

成人下颌下腺内NT-3的表达及意义

目的　对成人下颌下腺内NT 3进行定位研究。方法　对正常成人下颌下腺采用HE和免疫组织化学SABC染色方法。结果　成人下颌下腺导管上皮细胞呈NT 3免疫反应阳性 ,其中以纹状管最为明显。导管上皮细胞核和腺泡细胞则为阴性。结论　成人下颌下腺中有NT 3的表达 ,提示NT 3可能参与了下颌下腺复杂的分泌功能     

下颌下腺主导管结扎可激活损伤组织中的干/祖细胞

背景：成体干细胞的伦理学问题较少,而且某些操作技术比较成熟,利用成体干细胞进行组织工程化涎腺的构建具有十分诱人的吸引力和极其重要的应用前景。 目的：建立下颌下腺主导管结扎的涎腺组织损伤大鼠模型,探讨涎腺组织损伤模型中成体干/祖细胞存在的可能性及可能位置。 方法：SD大鼠统一行右侧下颌下腺主导管结扎,1周后处死大鼠取出两侧腺体,通过苏木精-伊红染色、PAS糖原染色及细胞角蛋白19、Bcl-2、Ki-67等指标的免疫组织化学测定,对正常涎腺组织与建立的损伤模型组织进行比较。 结果与结论：同一只大鼠,结扎侧与对照侧体积、质量有明显的差异。对照侧下颌下腺组织呈卵圆形,色泽红润,表面光滑,有完整包膜,质地柔软;结扎后腺体萎缩,组织形态欠规整,色泽暗红,包膜充血,质地变韧,周围组织血管代偿性扩张。主导管结扎的组织损伤模型可导致PAS阳性腺细胞的消失和细胞角蛋白19阳性的小导管上皮细胞增殖,并有在未结扎的腺体中很少见到的小丛层粘连蛋白阳性细胞出现在导管周围,而抑制细胞凋亡的Bcl-2和提示增殖活跃度的Ki-67的表达均有所增强。可见下颌下腺组织中可能存在着定位于涎腺周围导管区的下颌下腺干/祖细胞;下颌下腺主导管结扎导致的组织损伤模型是一种能有效激活下颌下腺组织中干/祖细胞的方法。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

海洛因依赖期间大鼠下颌下腺EGF及IL-2阳性细胞的免疫组织化学研究

目的 观察海洛因依赖对大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及白细胞介素2(IL-2)阳性细胞形态及功能的影响.方法 正常SD大鼠,随机分为空白对照组、盐水对照组及海洛因依赖组.皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38d取下颌下腺组织.用免疫组织化学SABC法、图像分析及细胞计数方法进行研究.结果 1.与空白对照组相比,盐水对照组大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及强度均无明显改变.2.海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的免疫反应增强,细胞数量明显增加(P<0.05).图像分析结果显示,在整个海洛因依赖期间,EGF、IL-2 阳性细胞的平均灰度值始终低于空白组及盐水对照组(P<0.05).3.EGF与IL-2在大鼠下颌下腺内分泌细胞中有共存现象.结论 在海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及反应强度均发生了规律性改变,提示大鼠下颌下腺分泌的EGF及IL-2参与了机体对海洛因依赖的调节过程.     

糖尿病大鼠下颌下腺内细胞间黏附分子-1及肿瘤坏死因子-α的表达

目的:观察糖尿病大鼠下颌下腺内细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达变化.方法:链脲佐菌素复制SD雄性大鼠糖尿病动物模型,分别于4周、12周后测体质量和血糖,H-E染色观察下颌下腺形态学变化,免疫组织化学SABC技术,检测ICAM-1及TNF-α蛋白表达变化.结果:糖尿病组大鼠下颌下腺组织萎缩,间质纤维增生.与对照组比较糖尿病组大鼠下颌下腺导管上皮细胞ICAM-1和TNF-α表达均显著增加.结论:ICAM-1及TNF-α参与了糖尿病病理变化过程.     

Three-dimensional observation of blood vessels supplying the gland proper and capsule of the mouse submandibular gland.

Previous studies have shown that submandibular glands suffering interruption of the blood circulation from the main supplying artery have more surviving parenchymal cells in their peripheral portion than in their central portion. Although the reason for this difference between the peripheral and central portions has not yet been clarified, the existence of collateral circulation has been suspected. The present study was designed to examine whether or not the vessels binding the gland proper to the capsule provide such collateral circulation. Silicone rubber or methacrylate was injected into the main artery supplying the mouse submandibular gland, in which the gland proper is wrapped by a capsule similar to that of the human submandibular gland, and then the gland was observed by both stereoscopic and scanning electron microscopy. Three-dimensional observations showed no communicating vessels between the gland proper and the capsule. Therefore, it is suggested that the parenchymal cells surviving in the ischemic peripheral portion of the submandibular gland are nourished by permeation of tissue fluid contained in the capsule.     

The expression and localization of osteopontin in the mouse major salivary glands

The present study investigated the expression and distribution of osteopontin in the mouse major salivary glands. The level of osteopontin expression in the mouse submandibular gland was higher (12.7-fold) than that in parotid and sublingual glands at the mRNA level. By Western blot analysis, intense positive bands were seen at the predicted molecular mass (about 55 kDa) in all the major salivary glands, while an approximately 30 kDa band of osteopontin was detected only in the submandibular gland. Indirect immunofluorescent and immuno-electron microscopy analyses demonstrated the localization of osteopontin in the luminal (apical) membranes of acinar cells in all the salivary glands. Osteopontin was also localized at the lumen of acini in the submandibular gland. These results suggest that the expression of osteopontin in the submandibular gland is different from that in the parotid and sublingual glands and that osteopontin may be degraded in the mouse submandibular gland.     

大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞属性的研究

用免疫组织化学ABC染色和镀银染色法研究大鼠下颌下腺颗粒曲管（GCT）细胞的属性,发现大鼠下颌下腺GCT细胞呈嗜铬粒素A和神经元特异性烯醇化酶免疫反应阳性,但镀银染色呈阴性,因此认为大鼠下颌下腺GCT细胞可归属于消化道弥散神经内分泌系统。