纤维型和原浆型星形胶质细胞的分离培养及睫状神经营养因子对其增殖的影响

目的和方法：建立纤维型及原浆型星形胶质细胞体外分离培养的方法,并观察在体外睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）对这两种细胞的增殖作用。结果和结论：经免疫组织化学鉴定,本方法分离培养的星形胶质细胞,纤维型纯度达９５％,原浆型纯度达９９％。ＣＮＴＦ可以促进纤维型星形胶质细胞的增殖,而对原浆型星形胶质细胞的促增殖作用不明显。     

脑胶质增生的CT表现(附2例报告)

脑胶质增生的ＣＴ表现（附２例报告）ＣＴＡｐｐｅａｒａｎｃｅｓｏｆＢｒａｉｎＧｌｉｏｓｉｓ（ＡＲｅｐｏｒｔｏｆｔｗｏＣａｓｅｓ）李建军王兆熊海南省人民医院放射科５７０３１１有关脑胶质增生的ＣＴ表现，国内仅有２例报道［１］。现将我院２例经手术病理证实的脑...     

小梁细胞体外培养技术的建立及细胞骨架的形态学观察

目的：建立体外培养牛眼小梁细胞（ｂｏｖｉｎｅ ｔｒａｂｅｃｕｌａｒ ｍｅｓｈｗｏｒｋ ｃｅｌｌ,ＴＭ ｃｅｌｌ）的方法并观察小梁细胞骨架（ｃｙｔｏｓｌｅｌｅｔｏｎ）的形态学特征,尤其是ａｃｔｉｎ和ｂｕｂｕｌｉｎ。方法：采用常规方法对牛眼小梁细胞进行体外,并且免疫组织化学的方法神经原烯醇化酶及Ⅷ因子相关抗原（ＮＳＥ,Ⅷｆａｃｔｏｒ ｒｅｌａｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ）,光学及电子透射显微镜对原代及传代培     

细菌脂多糖引发的B淋巴细胞蛋白质酪氨酸磷酸化研究

细菌脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）有较强的促Ｂ淋巴细胞有丝分裂功能，使培养小鼠脾细胞中多克隆Ｂ细胞活化〔１〕。某些特定的革兰阴性（Ｇ－）厌氧菌特别是牙龈卟啉菌（Ｐｇ）与牙周病发病有密切关系，ＰｇＬＰＳ与大肠杆菌（Ｅｃ）ＬＰＳ...     

大鼠星形胶质细胞和少突胶质细胞的纯化培养与鉴定

目的 纯化培养并鉴定大鼠脑组织星形胶质细胞和少突胶质细胞。方法 根据星形胶质细胞和少突胶质细胞的生长时间差异、细胞生长方式及细胞对培养层粘附等特性的不同,改进ＭｃＣａｒｔｈｙ方法纯化培养星形胶质细胞和少突胶质细胞,用免疫组化法对其鉴定。结果 （１）混合培养的星形胶质细胞和少突胶质细胞生长分化状况均优于纯化后的生长,以少突胶质细胞表现更为明显;（２）星形胶质细胞呈向心性生长,细胞相邻的接触面有较多的     

移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞对脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰雪旺氏细胞（ＳＣ）移植对脊髓损伤（ＳＣＩ）后细胞凋亡的作用。方法将实验动物分为ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ组（Ａ组），ＳＣ移植组（Ｂ组），损伤对照组（Ｃ组）。移植后１２周，对ＳＣＩ区的脊髓组织切片进行细胞凋亡的检测（甲基绿－派诺宁染色法和荧光原位标记法）以及Ｂｃ１～２和Ｆａｓ蛋白表达的测定（免疫组化法）。结果在Ａ、Ｂ、Ｃ组中，均发现凋亡细胞及Ｂｃ１～２和Ｆａｓ蛋白阳性表达。体视学计量发现，细胞凋亡率为Ｃ＞Ｂ＞Ａ；Ｂｃ１～２蛋白阳性表达顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｃ；Ｆａｓ蛋白阳性表达顺序为Ｃ＞Ｂ＞Ａ。结论ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ移植能抑制ＳＣＩ后的细胞凋亡，而创伤则可诱发细胞凋亡     

X射线诱发大鼠小肠隐窝细胞凋谢死亡

Ｘ射线诱发大鼠小肠隐窝细胞凋谢死亡张宇光Ｃ．Ｓ．Ｐｏｔｔｅｎ，Ｃ．Ｃｈａｄｗｉｃｋ细胞死亡可以分为两种类型，坏死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）和凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）［１］。细胞坏死是由于环境非生理因素的损伤，发生细胞肿胀，细胞膜破裂等一系列炎性反应；而细...     

造血生长因子在临床中的应用

造血生长因子（ＨＧＦ）是指参加调控或影响造血的细胞因子，早在十八世纪，一些学者就怀疑有刺激造血的细胞因子存在。自１９６６年Ｂｒａｄｌｅｙ等建立小鼠骨髓细胞体外琼脂培养技术以来，先后在来源不同的刺激因子作用下，培养出粒系、红系及巨核系造血祖细胞集落，因此这些生长因子又称为集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒＣＳＦ）［１］。经过近３０年的系统和深入研究，已将主要的ＣＳＦ克隆，并已大量生产重组因子，在临床上试用。尤其是粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和粒－巨噬细胞集落刺激因子（…     

慢性脑灌注不足脑内小胶质细胞的反应

目的 探讨小胶质细胞在慢性脑灌注不足脑损害中的作用。方法 ７０中老龄大鼠持久性双侧颈总动脉结扎（２ＶＯ），其中１２只接受环孢霉素Ａ（ＣａＡ）胃灌治疗。免疫组化法单抗ＯＸ１８、ＯＸ６标记小胶质细胞。实验研究为持久性２ＶＯ１－４月。结果 持久性２ＶＯ１月皮层、海马和白质处均有明显的小胶质细胞活动。１～４月，皮层和白质处小胶质细胞的活动增多，而海马处小胶质细胞的活动则减少，同时脑损害加重。ＣｓＡ治疗后小     

用噬菌体随机肽库探讨IGF受体及结合蛋白上的IGF—1结合位点

胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ＩＧＦｓ）是一类多功能细胞增殖调控因子，在胚胎和个体的发育过程中，ＩＧＦｓ有着极其重要而广泛的生物学作用，不仅有促有丝分裂作用，而且也能诱导分化或促进分化功能的表达，其精确的生物学效应取决于细胞发育的状态及其他激素或生长因子的存在。ＩＧＦｓ通过细胞表面的受体而发生作用。除了ＩＧＦ受体（ＩＧＦ－Ｒ）外，在体液中还存在一类ＩＧＦ结合蛋白（ＩＧＦｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＩＧＦＢＰｓ），它们以高亲和力结合ＩＧＦ，并对ＩＧＦ活性…     

细胞凋亡及其相关基因的作用

细胞凋亡及其相关基因的作用林海①⒇龚肖崎②关键词细胞凋亡基因基因调节中图法分类号Ｒ３２９．２细胞死亡是生命过程中的一个组成部分，它有两种不同的方式，即坏死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）和细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），但长期以来，有关细胞凋亡规律的研究一直未被...     

创伤后反抑制T细胞的变化及其对细胞免疫功能的影响

创伤后Ｔ细胞的辅助—抑制免疫调节网络失衡是导致机体细胞免疫功能异常的重要环节，作为执行机体反抑制功能的重要成员——反抑制Ｔ细胞（ｃｏｎｔｒａｓｕｐｐｒｅｓｏｒＴｃｅｌｓ，Ｔｃｓ）是否也参与了这一过程，则是尚须探讨的问题。本课题利用细胞培养及分离技术，...     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０－７－１０－４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０－５ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ基因表达。     

减压性损伤大鼠脑脊液对离体小胶质细胞肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察气压性中枢神经损伤动物脑脊液（cerebrospinal fluid，CSF）对离体小胶质细胞的刺激作用，探讨小胶质细胞激活参与气压性中枢神经损伤的机制。方法极快速减压制备气压性中枢神经损伤大鼠模型，收集致伤后或高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）处理后的动物CSF，分别以正常动物CSF、致伤动物CSF、HBO动物CSF和／或基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）阻断剂GM6001为条件介质刺激新生的SD大鼠大脑皮层原代培养小胶质细胞。用流式细胞分析术检测肿瘤坏死因子-α（mTNF—α）、肿瘤坏死因子-α转换酶（TNF—α convertingenzyme，TACE）含量的变化，L929细胞毒性实验测定上清内可溶性TNF—α（sTNF—α）的生物活性。结果致伤组和HBO组sTNF—α均较对照组显著增加（P〈0．01，P〈0．05），HBO组比致伤组显著减少（P〈0．01），增加GM6001处理后的结果与对照组间的差异均无统计学意义（P〉0．05）；致伤组小胶质细胞表面的mTNF—α蛋白比对照组增加了约2．35倍，HBO组与致伤组无明显差异，GM6001显著增加致伤组的mTNF-α，但对HBO组的作用不明显；致伤组小胶质细胞表面的TACE蛋白总量比对照组增加2.98倍，HBO组比致伤组降低1.97倍。结论极快速减压损伤动物CSF中存在大量刺激小胶质细胞反应的活性物质，刺激小胶质细胞TNF—α和TACE的合成，增加sTNF—α的分泌，可起到继发损伤作用。HBO治疗可以减少极快速减压致伤动物CSF中小胶质细胞刺激物的含量，起到神经元保护作用。TACE在小胶质细胞分泌TNF—α中起重要作用。GM6001可以通过减少小胶质细胞TNF—α的分泌，在改善小胶质细胞激活诱导的继发性损伤中与HBO起协同作用。     

星形细胞瘤影像学诊断及WHO新分类法的介绍

1993年ＷＨＯ公布了新的脑肿瘤组织学分类 ,即蓝皮书第二版 (ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｕｍｏｕｒｏｆｔｈｅｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍＥＤⅡ )。将星形细胞肿瘤 (ａｓｔｒｏｃｙｔｉｃｔｕｍｏｕｒｓ)分为局限性和弥漫性两类。弥漫性星形细胞肿瘤包括低度恶性星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤和多形性成胶质细胞瘤。它们呈弥漫性、浸润性生长 ,即Ⅱ～Ⅳ级星形细胞瘤。而局限性者包括局限性生长的毛细胞型星形细胞瘤、多形性黄色星形细胞瘤 (系旧分类中没有的 )、室管膜下巨细胞星形细胞瘤…     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和…

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒ ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０＾－８－１０＾０４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０＾－５     

IFN—α和TNF—α对培养的星形胶质细胞表达NGF的影响

目的研究星形胶质细胞对神经生长因子（NGF）的表达及干扰素－α（IFN－α）与肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对星形胶质细胞表达NGF的影响。方法用间接酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定传代培养的星形胶质细胞的NGF分泌量及经不同浓度IFN－α与TNF－α作用后的分泌量。结果传代培养的星形胶质细胞能够分泌NGF,不同浓度的IFN－α及TNF－α作用不同时间后均不同程度地促进星形胶质细胞分泌NGF。结论星影胶质细胞能够表达NGF,而IFN－α及TNF－α可不同程度地促进星形胶质细胞对NGF的表达。     

乳癌病人单次卡铂和阿霉素化疗诱发的染色体损伤和细胞生物学毒性

应用常规染色体畸变分析和胞浆分裂阻滞微核（ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｉｓｂｌｏｃｋｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ，ＣＢＭＮ）法对１０例接受单次卡铂（平均剂量为４６２．９ｍｇ／ｍ２）和单次阿霉素（平均剂量为４８．１ｍｇ／ｍ２）化疗的乳癌病人血样进行了淋巴细胞染色体畸变（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅａｂｅｒａｔｉｏｎ，ＣＡ）和微核（ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ，ＭＮ）的观察分析，并通过有丝分裂指数（ｍｉｔｏｔｉｃｉｎｄｅｘ，ＭＩ）及核分裂指数（ｎｕｃｌｅａｒｄｉｖｉｓｉｏｎｉｎｄｅｘ，ＮＤＩ）观测了细胞毒性。结果表明，单次卡铂和阿霉素化疗均引起了ＣＡ和ＭＮ显著性增加，所观察到的ＣＡ主要为单体畸变，其中单体间隙（ｃｈｒｏｍａｔｉｄｇａｐ，ｃｔｇ）的增加最为显著，染色体型畸变未见显著性变化；卡铂引起ＭＩ明显减低，阿霉素对ＭＩ的影响不显著；两种化疗药物均未对ＮＤＩ产生显著性影响；通过ＭＩ及ＮＤＩ测量的细胞毒性之间显著性相关，但ＣＡ分析和ＣＢＭＮ法测得的染色体损伤之间缺乏相关性。     

胶质细胞源性神经营养因子基因的克隆及其在大肠杆菌中 …

目的;分离胶质细胞源性神经营养因子（ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）基因,并在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得表达。方法：从人多形性成胶质细胞瘤细胞株ＢＴ３２５中提取总ＲＮＡ,利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分离ＧＤＮＦ基因,构建表达载体ｐＢＶ－ＧＤＮＦ,转化大肠杆菌,温控诱导ＧＤＮＦ的表达。结果与结论;分离得到的人ＧＤＮＦ基因,在大肠杆菌中得到高效表达,表     

人β－干扰素在杆状病毒载体与Sf细胞体系中的表达

采用苜蓿尺蠖核多角休病毒（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，ＡｃＮＰＶ）ＤＮＡ中多角体蛋白基因启动子及其前后序列作为转移载体，将人β－干扰素（ＨｕＩＦＮ－β基因插入转移载体ｐＵＡｃ－５，构建成ｐＡｃ－ＩＦＮ－β载体。该质粒ＤＮＡ与野生型ＡｃＮＰＶＤＮＡ经ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ共转染秋粘虫（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）传代细胞（Ｓｆ９细胞），利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征，进行病毒空斑筛选。用核酸杂交方法鉴定出携带ＨｕＩＦＮ－β基因的主组病毒。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞，可表达ｒＨｕＩＦＮ－β。在１．０×１０￣６细胞／ｍｌ感染上清中测定ｒＨｕＩＦＮ－β最高活性为３．０×１０￣６ＩＵ／ｍｌ，抗天然ＨｕＩＦＮ－β抗体能完全中和ｒＨｕＩＦＮ－β的抗病毒活性。