腹泻型肠易激综合征患者外周血Th1/Th2细胞因子失衡表达的分析

目的:分析腹泻型肠易激综合征(IBS)患者外周血Th1/Th2细胞因子失衡表达。方法:连续选择近期就诊的腹泻型IBS患者27例,对照组为31例同龄、同性别的同期健康体检者。两组对象接受了外周血Th相关细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)检测,并计算IFN-γ/IL-4比值。结果:腹泻型IBS组外周血IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显高于对照组,而血清IL-4浓度则显著低于后者(P均<0.05～0.01)。结论:腹泻型IBS患者存在明确Th1优势失衡表达。     

类风湿关节炎患者嗜碱性粒细胞与疾病活动度和Th1应答失衡的关系

目的:探讨RA患者外周嗜碱性粒细胞的活化情况和活化机制,以及与疾病活动度和Th1/Th2应答失衡的关系。方法:本研究运用流式细胞术检测类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th1/Th2细胞的比值和嗜碱性粒细胞数量及活化水平,用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4水平,用Western blot法检测血清中循环的Ig E型免疫复合物(Ig E-CIC)的水平。结果:Th1/Th2细胞比值与DAS28评分呈低度线性正相关关系;RA患者血清IFN-γ水平较对照组显著升高,且和疾病活动度相关,但IL-4的水平则无差异;RA患者嗜碱性粒细胞数量较对照组显著降低,且高度活化(高表达CD203c和CD62L);RA患者外周血存在高水平的Ig E-CIC,而对照组则无。结论:RA患者外周血嗜碱性粒细胞高度活化、数量显著减少,可能会迁徙至次级淋巴组织和炎症部位,对抗外周Th1应答失衡,有望为RA的防治提供新的线索。     

不同级别胶质瘤患者术前外周血Th1/Th2细胞因子的表达

目的:分析不同级别脑胶质瘤患者手术前外周血Th1/Th2细胞因子表达变化。方法:选择近期住院的脑胶质瘤患者63例,在治疗前采用ELISA方法进行外周血IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10浓度检测。结果:胶质瘤组外周血IL-4和IL-10浓度均明显高于对照组,而前者外周血IFN-γ、IL-2浓度及IFN-γ/IL-4比值则显著低于后者(P<0.05或P<0.01)。高级别组(Ⅲ~Ⅳ级)外周血IL-4和IL-10浓度均明显高于低级别组(Ⅰ~Ⅱ级),而前者外周血IFN-γ、IL-2浓度及IFN-γ/IL-4比值则显著低于后者(P<0.05或P<0.01)。结论:脑胶质瘤患者可能有Th2优势表达,与恶性程度有一定关系。     

新生儿巨细胞病毒肺炎Th1/Th2细胞因子测定及意义

目的探讨新生儿巨细胞病毒肺炎血清细胞因子IL4、IFN-7、TNF—α水平及意义。方法选取25例确诊为新生儿巨细胞病毒肺炎．并将其分为丙种球蛋白治疗组和更昔洛韦治疗组，应用ELISA法检测治疗前和疗程结束后血清细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度，另选取本院产科同期出生的足月正常新生儿15例为正常对照组，用相同的方法检测其血清中细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度。结果相对于健康新生儿．CMV—IgM阳性患儿血清IFN-γ及TNF—α水平升高．差异有统计学意义（t值分别为2．65及3．16．P〈0．05）；而IL-4水平降低，差异有统计学意义（t=2．49．P〈0．05）。丙种球蛋白治疗组（IVIG）和更昔洛韦治疗组治疗前IFN-γ、IL-4、TNF—α水平比较，差异无显著性（t值分别为1．85、1．71及1．76．P〈0．05）；IVIG治疗组中．治疗前后比较．IFN-γ及TNF—α水平降低，差异有统计学意义（t值分别为3．98及5．16，P〈0．01）；而IL-4水平升高，差异有统计学意义（t=2．55，P〈0．05）。更昔洛韦治疗组中．治疗前后比较，IFN-γ及TNF—α水平变化不明显．差异无统计学意义（t值分别为1．75及1．16．P〉0．05）；而IL-4水平无明显降低．差异无统计学意义（t=1．89，P〉0．05）。结论巨细胞病毒肺炎新生儿Th1／Th2存在平衡失调，代表Thl细胞功能水平的细胞因子IFN-γ水平明显增高，呈现低水平的Th1相对优势，表明感染后．免疫平衡遭到破坏．细胞因子分泌失衡，造成机体的免疫炎症损伤，IVIG治疗可以纠正这-平衡失调，提示在新生儿巨细胞病毒肺炎除单-抗病原治疗外，应重视免疫调节治疗。     

类风湿关节炎患者Th17和CD161+Th17细胞水平的变化

目的 观察类风湿关节炎(RA)患者和健康对照组外周血中CD4+ IL-17+T细胞(Th17)和CD4+ CD161+ IL-17+T细胞(CD161+Th17)的水平,探讨其在RA发病过程中的意义.方法 采用流式细胞术测定36例RA患者和11例健康对照组外周血中Th17细胞及CD161+ Th17的细胞百分率.结果 RA患者外周血Th17及CD161+ Th17细胞水平明显高于健康对照组(P＜0.01)且与疾病活动指数(DAS28)、血沉和C-反应蛋白水平呈显著正相关(P ＜0.05);RA患者和健康对照组外周血中CD161+ Th17细胞百分率明显高于Th17细胞百分率(P＜0.01);Th17细胞百分率与CD161+ Th17细胞百分率显著正相关(P＜0.01).结论 Th17及CD161+ Th17细胞在RA患者外周血中均增高且与疾病活动度正相关.     

心肌梗死患者急性期外周血Th1/Th2和自然杀伤细胞表达变化观察

目的:观察心肌梗死患者急性期外周血Th1/Th2和自然杀伤细胞表达变化。方法:连续选择近期住院的急性心肌梗死患者(AMI组,21例),入选对象均接受了外周血白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、自然杀伤细胞(NK)浓度及IFN-γ/IL-4比值检测,并与同期住院稳定心绞痛患者(SAP组,25例)以及健康体检者(对照组,20例)比较。结果:AMI组血清IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显高于AP组和对照组,而血清IL-4和NK细胞浓度则显著低于后两者(P<0.01)。结论:AMI患者存在明确的外周血辅助性T细胞异常表达,且以Th1优势状态为主。     

慢性乙肝患者树突状细胞对Th1/Th2分化的影响

探讨慢性乙肝患者树突状细胞(dendritic cells,DC)对CD4+Th细胞亚群分化的影响。分离慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC),以rhIL-4(50 ng/ml)、rhGM-CSF(10 ng/ml)和rhTNF-α(100 u/ml)诱导培养DC。以流式细胞仪检测DC表面CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子表达情况。MTT法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群,PMA+Ionomycin刺激后胞内荧光染色,流式细胞仪检测辅助性T细胞(helper T cell,Th)内特征性细胞因子IFN-γ/IL-4以判断Th1/Th2分化。ELISA法检测DC或Th细胞培养上清中IL-6、IL-12、IFN-γ和IL-4的含量。结果:慢性乙肝患者的DC表达CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子水平明显低于正常人(P<0.01);培养至第7天,慢性乙肝患者DC分泌的IL-12水平低于正常人(P<0.01),而分泌的IL-6水平增高(P<0.05)。与正常人相比,慢性乙肝患者外周血中Th1细胞占CD4+T细胞的百分比较低(P<0.01),其Th细胞培养上清中IFN-γ的量也较低(P<0.01)。患者DC与同种异体的健康人Th细胞共培养,刺激Th1型细胞因子IFN-γ产生的能力低于正常人(P<0.01)。慢性乙肝患者体内DC功能的异常可能导致了外周血Th1细胞分化不足。     

以Th17细胞为靶点治疗类风湿性关节炎研究进展

类风湿性关节炎是一种以慢性、进行性、侵袭性关节炎为主要表现的全身性自身免疫病,如果不经过正规治疗,病情会逐渐发展,最终导致关节畸形、功能丧失。Th17细胞是最近发现的不同于Th1和Th2的CD4+T细胞的新亚群,它可以分泌IL-17,IL-6,TNF-α等促炎因子。最近的研究发现Th17与RA的发生有密切关系,针对Th17来治疗RA是一种新的手段。本文就最近针对Th17细胞治疗RA所取得的成果做一综述。     

类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg细胞比率失衡的研究

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者外周血Th17细胞与Foxp3+CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的平衡状态与疾病状态的关系,初步阐明Th17/Treg细胞比率失衡在RA发病机制中的作用和意义。方法:流式细胞术(FCM)检测RA患者和健康人外周血中Th17细胞和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞的比率。结果:活动期RA患者外周血CD3+CD4+T细胞和Th17细胞的比率均明显高于健康对照组(P均0.05);而Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞的比率明显低于健康对照组(P0.05)。随疾病活动性的增加,Th17细胞表达增高(P0.05);而Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞表达降低,但无统计学意义(P0.05)。结论:RA患者外周血T细胞紊乱以CD4+T细胞的增加为主,Th17细胞比率的增加和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞比率的降低所致的Th17/Treg细胞比率失衡,可能在RA的发生发展中起重要作用。     

三种类型肺癌患者外周血Th1/Th2相关细胞因子的临床分析

目的：了解不同病理类型肺癌患者辅助性T细胞亚群（Th1/Th2）的反应状态,探讨肺癌发生发展的免疫机制。方法：收集三种不同病理类型肺癌患者47例（鳞癌23例,腺癌15例,小细胞肺癌9例）、健康志愿者31例的血清,分成肺癌组、正常对照组,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组外周血中Th1型细胞因子、白细胞介素2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的浓度。结果：三种不同病理类型肺癌患者外周血中IL-2、IFN-γ浓度均显著低于正常人组,IL-4、IL-10浓度显著高于正常人组（P〈0.05）。结论：腺癌、鳞癌、小细胞非分化癌三种不同病理类型的肺癌患者外周血中的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应优势状态,呈现Th1/Th2的漂移状态。     

急性MCMV感染对小鼠脾Th1/Th2/Th17细胞亚群分化的影响

目的:在整体水平观察小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠脾Th1/Th2/Th17细胞亚群分化及其主要的效应性细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17A)表达的影响.方法:建立MCMV感染模型,8只BALB/c小鼠分别于接种MCMV Smith株后3天和14天各处死4只;另设8只接种唾液腺匀浆的模拟感染小鼠作为对照.用空斑形成试验测定肝、脾和唾液腺组织病毒滴度;流式细胞术检测脾T淋巴细胞中Th1(CD4+ IFN-γ+)、Th2(CD4+ IL-4+)、Th17(CD4+IL-17A+)细胞比例,双抗体夹心ELISA法检测脾细胞培养上清中病毒特异性IFN-γ、IL-4、IL-17A水平.结果:MCMV感染早期肝、脾和唾液腺组织中病毒呈低水平复制,而感染后14天仅在唾液腺组织呈高水平复制;Th1细胞比例及病毒特异性IFN-γ主要在MCMV感染早期呈显著升高(P ＜0.01);Th2细胞及IL-4均无明显表达及改变;Th17细胞及病毒特异性IL-17A则主要在感染后14天升高(P＜0.05).结论:MCMV感染早期,机体通过上调Th1细胞分化比例及IFN-γ的表达发挥抗病毒效应,而MCMV诱导Th17细胞分化及IL-17A的高表达可能是MCMV感染致宿主特异性细胞免疫功能失调并逃避机体特异性细胞免疫攻击的原因之一.     

Toll样受体与Th1和Th2型免疫应答

Toll样受体是广泛表达在哺乳动物细胞表面的跨膜信号传导受体,其通过识别多种类型的病原体相关分子模式及一些内源性配体,激活天然免疫系统,同时通过诱导树突状细胞分化成熟,调控获得性免疫反应的建立。大多数TLRs的配体可诱导机体产生Th1型免疫应答,然而在某些条件下也可导致Th2型免疫应答的发生。弄清TLRs参与调节Th0分化的机制,可为今后在感染免疫、自身免疫、超敏反应等方面进行深入研究及相关疾病的治疗提供新的切入点。     

不明原因习惯性流产患者Th1/Th2型细胞因子的检测

目的 :了解不明原因习惯性流产 (UHA)患者对滋养细胞抗原刺激产生Th1、Th2型细胞因子的水平 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取 5 4例UHA患者 ,35例为未妊娠者 ,为UHA未孕组 ,19例为有UHA病史 ,现在确定妊娠并难免流产者 ,为UHA难免流产组。分别选取 15例正常未孕妇女及正常妊娠者作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测未孕各组经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC)及妊娠各组PBMC与蜕膜单个核细胞 (DMC)培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果 :①在最佳诱导时间下 ,UHA未孕组PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常未孕组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平明显低于正常未孕组 (P均 <0 0 5 )。②UHA难免流产组PBMC及DMC产生的IL 2、IFN γ水平均明显高于正常妊娠组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平则明显低于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。两组PBMC产生的各细胞因子水平均低于同组DMC ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,导致妊娠丢失。     

Pregnancy-specific glycoprotein 1a activates dendritic cells to provide signals for Th17-, Th2-, and Treg-cell polarization

Because of their plasticity and central role in orchestrating immunity and tolerance, DCs can respond to pregnancy-specific signals, thus promoting the appropriate immune response in order to support pregnancy. Here, we show that pregnancy-specific glycoprotein (PSG1a), the major variant of PSG released into the circulation during pregnancy, targets DCs to differentiate into a subset with a unique phenotype and function. This semi-mature phenotype is able to secrete IL-6 and TGF-β. PSG1a also affected the maturation of DCs, preventing the up-regulation of some costimulatory molecules, and inducing the secretion of TGF-β or IL-10 and the expression of programmed death ligand 1 (PD-L1) in response to TLR-9 or CD40 ligation. In addition, PSG1a-treated DCs promoted the enrichment of Th2-type cytokines, IL-17-producing cells, and Treg cells from CD4(+) T cells from DO11.10 Tg mice. Moreover, in vivo expression of PSG1a promoted the expansion of Ag-specific CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) Treg cells and IL-17-, IL-4-, IL-5-, and IL-10-secreting cells able to protect against Listeria monocytogenes infection. Taken together, our data indicate that DCs can be targeted by PSG1a to generate the signals necessary to mount an appropriate, well-balanced, and effective immune response able to protect against invading pathogens while at the same time being compatible with a successful pregnancy.     

The Th17 family: flexibility follows function

Discovery of the T-helper 17 (Th17) subset heralded a major shift in T-cell biology and immune regulation. In addition to defining a new arm of the adaptive immune response, studies of the Th17 pathway have led to a greater appreciation of the developmental flexibility, or plasticity, that is a feature of T-cell developmental programs. Since the initial finding that differentiation of Th17 cells is promoted by transforming growth factor-β (TGFβ), it became clear that Th17 cell development overlapped that of induced regulatory T (iTreg) cells. Subsequent findings established that Th17 cells are also unusually flexible in their late developmental programming, demonstrating substantial overlap with conventional Th1 cells through mechanisms that are just beginning to be understood but would appear to have important implications for immunoregulation at homeostasis and in immune-mediated diseases. Herein we examine the developmental and functional features of Th17 cells in relation to iTreg cells, Th1 cells, and Th22 cells, as a basis for understanding the contributions of this pathway to host defense, immune homeostasis, and immune-mediated disease.     

过敏性哮喘患者调节性T细胞对Th17细胞和Th9细胞的影响

目的:深入研究过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期的调节性T细胞对Th17和Th9细胞功能影响的异常。方法:招募30例过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期和30例健康者,采集外周静脉血30 ml,分离PBMC,然后应用磁珠法体外分离CD4+CD25+CD127-/low调节性T细胞(Tregs)和CD4+CD25-效应T细胞(选取分离纯度90%以上的标本继续下一步试验)。在PHA刺激下体外培养,检测效应T细胞增殖情况和Th17细胞、Th9细胞特异性基因(RORC和PU.1)表达及特异性细胞因子(IL-17和IL-9)分泌情况,检测哮喘病人Th17细胞和Th9细胞的异常情况;并给予Tregs干预,检测Tregs对Th17细胞和Th9细胞分化的影响。结果:哮喘组和健康对照组的Tregs均可以抑制CD4+CD25-效应细胞增殖反应,但哮喘组Tregs的抑制功能较健康对照组明显下降(P=0.03)。哮喘病人RORC表达和IL-17分泌均高于对照组(P0.05),Tregs对RORC表达的抑制能力在哮喘组有所下降(P0.05),但对IL-17分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别(P0.05);哮喘病人IL-9分泌无论是否加入Tregs干预均高于对照组(P0.05),但PU.1表达只有在加入Tregs干预后才高于对照组(P=0.04);Tregs对PU.1表达和IL-9分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别(P0.05)。结论:过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期Tregs数量和功能下降,而Th17细胞和Th9细胞的特异性基因表达和特异性细胞因子生成增加,哮喘病人的Tregs在体外对Th17细胞的抑制功能有所下降,但尚未发现Tregs对Th9细胞的抑制功能明显降低。     

Anti-idiotype immunomodulation of experimental anti-phospholipid syndrome via effect on Th1/Th2 expression.

Mice with experimental anti-phospholipid syndrome (APS), induced by active immunization with a human anti-cardiolipin MoAb (H-3), were treated with mouse anti-idiotypic MoAb (anti-H3, named S2.9) and with an irrelevant anti-idiotype. The immunized mice produced high titres of mouse anti-cardiolipin antibodies along with clinical manifestations of experimental APS: prolonged activated partial thromboplastin time (aPTT), thrombocytopenia and high rate of fetal loss. Treatment with the specific anti-Id (S2.9) as a whole molecule or F(ab)2 fraction, resulted in a decrease in serum levels of the anti-cardiolipin antibodies, rise in platelet count, shortened aPTT and reduced rate of fetal loss. The anti-Id effect was associated with a rise in the number of IL-2 and interferon-gamma (IFN-gamma)-secreting cells (Th1) and reduction in IL-4- and IL-6-secreting cells (Th2). The beneficial effect of the anti-Id treatment in mice with experimental APS induced by active immunization with an idiotype further supports the idiotypic aetiology of experimental APS and points to the role of Th1 cytokines in suppression of its manifestations.     

树突细胞与哮喘Th1/Th2失衡

特应性哮喘患者以Th2免疫反应为主,导致气道炎症,Th1／Th2失衡是特庆性哮喘重要的免疫病理机制,树突细胞（DCs）中肺部主要抗原递呈细胞,不但可以介志对吸入抗原初始的免疫反应,活化辅助性T细胞,而且在可以决定T细胞的分化方向,维持哮喘Th2免疫反应和Th1／Th2失衡机制中发挥重要作用而日益受到重视。本文就近年来对特应性哮喘免疫病理机制中DCs对Th1／Th2失衡影响认识作一综述。