大鼠分级坐骨神经缩窄致神经病理性疼痛模型的行为学及病理学评估

目的:建立不同程度的大鼠神经病理性疼痛模型,评价其行为学和病理学变化的关系.方法:30只雄性SD大鼠随机均分为C,N0,N1,N2,N4组(n=6),用分级坐骨神经缩窄法建立动物模型.在术前和术后3、7、10、14天测定大鼠右后爪50％缩爪阈值.术后第15天取右侧坐骨神经横断面切片行Luxol fast blue染色,计算坐骨神经环扎远端髓鞘计数占近端髓鞘计数百分比(the ratios of the myelin sheath counts in the distal sections to those in the proximal sections of the sciatic nerve,DPR).用SPSS 13.0进行数据分析.结果:大鼠右后爪50％缩爪阈值在C组和N0组无明显改变,在N1、N2和N4组大鼠术后较术前明显下降,至术后14天N0＞N1＞N2＞N4 (P＜0.05).C组和N0组大鼠右侧坐骨神经无明显病理学改变,N1、N2和N4组环扎远端神经纤维出现不同程度的脱髓鞘改变.术后14天大鼠50％缩爪阈值与其DPR值间Spearman相关系数rp=0.901 (P＜ 0.001).结论:大鼠分级坐骨神经缩窄模型可导致手术侧坐骨神经不同程度的脱髓鞘病变,引起不同程度的神经病理性疼痛,其病理学变化与行为学有显著相关性.     

恩再适治疗三叉神经痛的实验研究

目的:观察恩再适对三叉神经痛(TN)的镇痛效果。方法:将30只大鼠制成单侧缩窄环三叉神经痛模型(ION-CCI)大鼠,在痛觉超敏期随机分为三组,恩再适组、卡马西平组、生理盐水组。观察用药后大鼠行为反应及机械刺激疼痛阈值(PT)变化。结果:术后2周,在ION支配区域内,大鼠出现痛觉超敏现象,疼痛阈值明显下降(P<0.01)。恩再适组用药后动物的疼痛阈值逐渐升高,痛觉超敏现象消失,与治疗前及生理盐水组相比存在显著差异性(P<0.01),用药2周后与卡马西平组的最大镇痛阈值相比无显著差异性(P>0.05)。结论:恩再适对三叉神经痛有明显的缓解疼痛效果,且安全。     

三叉神经痛琼脂压迫模型优化及相关解剖结构学研究

目的：通过3D定位建立琼脂压迫动物模型模拟三叉神经痛(trigeminal neuralgia, TN)，利用影像学扫描进行模型验证，并通过采集不同模型的行为学、影像学及病理学等相关数据，对模型进行分析，以便于进一步探索TN的发病机制。方法：用von Frey测痛纤维丝筛选出痛阈值在8～15 g的雄性SD (Sprague Dawley, SD)大鼠32只，采用随机数字法分为实验组（16只）和对照组（16只），建立三叉神经根部琼脂压迫模型，术后1～7周通过von Frey测痛纤维丝测定大鼠机械疼痛阈值，术后4周、8周、12周进行灰质体积的基于体素形态学分析(voxel based management, VBM)，采集术后8周和12周的三叉神经颅内段(intracranial segment, ICS)和眶下段神经(infraorbital nerve, ION)利用透射电镜(transmission electron microscope, TEM)进行超微结构分析。结果：机械疼痛阈值测定结果显示琼脂实验组术后机械刺激阈值出现降低，可持续至术后42天，对照组在术后14天内有轻度机械刺...     

实验性三叉神经痛慢性缩窄环术动物模型建立

目的 :为探讨三叉神经痛的发病机制及治疗等提供实验基础 ,建立一种可靠的三叉神经痛模型。方法 :将大鼠随机分为手术组及假手术组 ,手术组用两根铬线疏松环扎大鼠的眶下神经造成慢性缩窄损伤 ,而假手术组只暴露神经 ,但不结扎 ,观察术后不同时段大鼠对机械刺激的反应阈值及相关的痛觉行为变化。结果 :手术组术后 9～ 6 0天左右 ,在眶下神经支配区域内 ,大鼠出现痛觉超敏现象 ,与手术对侧、术前及对照组比较存在显著差异 (P <0 .0 1) ,极低的外在刺激即可激发强烈的疼痛行为反应 ,持续至术后 30天 ,然后逐渐恢复 ,术后 80天左右恢复术前水平。结论 :大鼠眶下神经的慢性环扎损伤可导致三叉神经痛出现 ,压迫解除后疼痛可缓解。该模型成功地模拟了临床因压迫导致三叉神经痛的情况 ,简单易行 ,成功率高。     

牛嗜铬细胞蛛网膜下腔移植治疗三叉神经痛研究

目的 :观察牛嗜铬细胞移植对三叉神经痛的镇痛效果及耐受性 ,以评估该方法的临床应用价值。方法 :将 30只制成单侧缩窄性三叉神经痛模型大鼠 ,在痛觉超敏期 ,随机分为三组。嗜铬细胞组 :蛛网膜下腔移植 10 μl牛肾上腺嗜铬细胞悬液 ;卡马西平组 :腹腔内注入卡马西平 (5 0mg/kg) ;对照组 :不用药。观察用药后动物行为反应及机械刺激疼痛阈值变化。结果 :三叉神经缩窄环术后 2周大鼠出现痛觉超敏现象 ,疼痛阈值明显下降 (P <0 .0 1)。细胞移植后 2周 ,镇痛效果最明显 ,痛觉超敏现象消失 ,疼痛阈值明显增高 ,与移植前及对照组相比存在显著差异性 (P <0 .0 1) ,持续至移植后第 7周 ,第 8周两组痛阈均恢复至术前水平。而卡马西平组在用药后 1小时镇痛作用即达高峰 ,与嗜铬细胞最大镇痛阈值相比无显著差异性 (P >0 .0 5 ) ,但作用很快下降 ,3小时后消失。结论 :动物实验表明 ,嗜铬细胞蛛网膜下腔移植对三叉神经痛具有肯定的镇痛作用且无耐受现象     

胆囊收缩素促大鼠坐骨神经再生的初步研究

目的观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)是否能够促进周围神经损伤后的修复与再生,期待为周围神经损伤药物治疗提供一个新思路。方法健康SD大鼠随机分成2组:每组16只,其中实验组为CCK-8治疗组、对照组为生理盐水治疗组,采用右侧坐骨神经离断后缝合外膜的损伤模型。CCK-8组大鼠腹腔注射CCK-8(8nmol/kg),每天1次,连续7d,对照组则用生理盐水代替CCK-8。在术后第4周、12周观察大鼠失神经改变情况及再生神经的大体形态;步态分析测定坐骨神经功能指数恢复率(SFI%);神经电生理测定运动神经传导速度恢复率(MNCV%)和小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率(CMAP%);切取损伤远端神经,半薄切片行HE及固绿髓鞘染色,观察再生神经的组织学变化;再生有髓神经纤维计数恢复率测定以检测神经再生情况;腓肠肌湿重恢复率测定CCK-8防止骨骼肌萎缩的作用。结果 (1)大体形态:术后第12周,CCK-8组再生坐骨神经粗细基本正常,对照组则较细;神经吻合口与周围组织黏连明显减轻,优于生理盐水对照组。(2)术后第4周、第12周,分别测定SFI%、MNCV%、CMAP%、再生有髓纤维计数恢复率、腓肠肌湿重恢复率,CCK-8组与对照组差异均有统计学意义。(3)组织学光镜观察:术后第4周,CCK-8组较对照组再生纤维排列规则、密集;术后第12周,CCK-8组较对照组再生纤维排列规则、均匀、髓鞘厚。结论应用CCK-8能有效地促进周围神经再生,有利于再生神经纤维传导功能及肢体运动功能的恢复,且再生纤维数量及质量优于对照组,能有效防止神经损伤后骨骼肌萎缩。     

牛痘疫苗致炎兔皮提取物治疗三叉神经痛的作用机制研究

目的:观察牛痘疫苗致炎兔皮提取物(analgecine)对于三叉神经痛的效果及镇痛机制.方法:将大鼠制成单侧缩窄性三叉神经痛模型,在痛觉超敏期随机分为两组.牛痘疫苗致炎兔皮提取物组:腹腔内注入牛痘疫苗致炎兔皮提取物100u/kg;生理盐水组:腹腔内注入生理盐水10ml/kg.2周后,观察大鼠疼痛阚值(PT)变化及缩窄环区域神经组织的改变.结果:(1)术后2周,动物出现痛觉过敏,PT明显减低;牛痘疫苗致炎兔皮提取物组PT逐渐升高,与治疗前及生理盐水组相比存在显著差异性(P<0.01).(2)痛觉超敏期大量神经纤维肿胀变性、髓鞘脱失.2周后,生理盐水组髓鞘脱失明显,无髓纤维数目增多;牛痘疫苗致炎兔皮提取物组神经纤维肿胀消失,髓鞘板层结构致密,与正常结构类似.结论:动物实验表明,牛痘疫苗致炎兔皮提取物对于三叉神经痛的镇痛效果肯定,其作用机制部分是通过促进受损变性的神经纤维修复实现.     

复方倍他米松治疗三叉神经痛的实验研究

三叉神经痛病理研究发现,在半月神经节及感觉根内有明显的病理性变化,电镜下可观察到神经节细胞消失、周围炎细胞浸润、髓鞘退变等病理改变.复方倍他米松有强大的抗炎、抗风湿和抗过敏作用.我们运用大鼠三叉神经分支眶下神经慢性缩窄环术模型,进一步探讨复方倍他米松对实验性三叉神经痛的疗效.     

脉冲射频对坐骨神经慢性缩窄大鼠坐骨神经超微结构的影响

目的:应用透射电镜观察脉冲射频(pulsed radiofrequency,PRF)对坐骨神经慢性缩窄模型(chronic constriction injury,CCI)大鼠超微结构的影响。方法:15只雄性大鼠,随机分为三组(每组5只):正常对照组(control组),模型组(CCI组)和治疗组(CCI+PRF组)。透射电镜观察坐骨神经超微结构改变。结果:模型组可见髓鞘被严重损伤,轴索溶解或偶见残存的线粒体,雪旺氏细胞形成异染色质,同时可见大量新生的有髓神经纤维。治疗组,可见部分髓鞘外形不规则,板层结构节段性模糊、松散,并有髓鞘球形成。与模型组相比,治疗组神经纤维有明显的修复。结论:脉冲射频改善坐骨神经慢性缩窄大鼠坐骨神经的超微结构。     

坐骨神经慢性挤压伤模型大鼠行为学及形态学变化

目的:观察大鼠坐骨神经慢性挤压伤模型所引起的行为学及病理形态学变化。方法:实验于2006-02/05在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。①SD大鼠24只,随机分为3组,坐骨神经结扎组12只制备右侧坐骨神经慢性挤压伤模型,正常对照组6只不干预,假手术组6只手术但不结扎,观察处理后42d内自发痛、触诱发痛、热刺激及冷刺激痛觉过敏等行为学变化。②SD大鼠54只,随机分为正常对照组、假手术组及坐骨神经结扎后3,7,14,21,28,35,42d组9组,处理同前,相应时间点处死大鼠观察坐骨神经和脊髓组织大体形态、苏木精-伊红染色和轴突髓鞘染色观察脊髓组织病理变化,电镜观察超微结构变化。结果:78只大鼠进入结果分析。①行为学变化:坐骨神经结扎组大鼠术后3d即出现明显的自发性疼痛,机械刺激痛阈值从术前的(17.33±5.42)g降至(3.28±1.37)g;热刺激爪退缩阈值从(12.13±2.37)s缩短至(10.43±1.65)s;冷刺激抬足次数从(3.50±1.09)次增加至(14.75±2.34)次。术后7￣14d这些阈值的变化逐渐达高峰,并持续至观察期结束(42d)。②坐骨神经结扎大鼠坐骨神经结扎部位及其远端轴突水肿,部分脱髓鞘。结论:大鼠坐骨神经慢性挤压伤模型可以产生明显的、稳定的自发性疼痛和诱发性疼痛等类似临床神经痛的症状和体征;其局部病理变化与症状相符。     

磁刺激运动诱发电位变化与慢性神经根受损程度的对应特征

背景对于慢性神经根损伤程度的评估,主要依赖影像学资料进行间接判断.目的研究慢性嵌压性神经根损伤后,不同神经功能损伤程度改变与运动诱发电位表现形式之间的对应关系.设计以实验动物为研究对象,自身对照的重复测量观察.单位一所大学医学院附属医院脊柱外科.对象实验于2001-10/2003-05由暨南大学医学院第二临床学院脊柱外科完成.健康家猫30只,体质量3～5kg,雌雄不限.干预将右侧C7,C8和T1椎间孔内嵌压"V"形骨块行造模术.左侧做正常对照.术后2,4,8,12周CT显示神经根管均较对侧狭窄.术后第2,4,8,12,24周,行磁刺激运动诱发电位检测,每次随机选6只.以周围神经损伤病理分类标准确定神经根损伤程度,并与运动诱发电位波形改变相对应.主要观察指标神经病理损伤程度分类与运动诱发电位检查结果的对应性.结果30只家猫均进入结果分析.神经根Ⅰ度损伤时各点运动诱发电位指标均未表现出异常.Ⅱ度损伤运动诱发电位改变形式有①潜伏期延长,达(3.9±0.21)ms.②F波可延长至1.3～1.9 ms.③各点的波幅正常.Ⅲ度损伤运动诱发电位表现为①潜伏期延长达4.3～5.1 ms.②波幅下降和波形分化不清.Ⅳ度损伤运动诱发电位特征为①Erb's点延长范围3.0～3.8 ms;Cs,T1点延长达5.0～5.3 mss.②C8,T1刺激点的波幅下降到0.2～0.5 mV.③F波的潜伏期延长达9.6～10.2 ms.Ⅴ度损伤时各刺激点诱发电位引出十分困难.结论当运动诱发电位表现正常时,若受损神经出现某种感觉障碍和异常,可提示Ⅰ度病理损伤的存在.单纯的潜伏期延长,包括F波的延长,表明神经的损伤程度为Ⅱ度.在此基础上出现波幅下降,尤其是出现波距加宽,波形分化不清时,神经损伤已达Ⅲ度.Ⅳ度损伤的突出特征是波幅低平,同时潜伏期进一步延长.Ⅴ度损伤时多有运动诱发电位消失或部分电位成分消失.     

超短波对大鼠坐骨神经损伤后神经传导速度及其损伤运动神经元内VEGF表达的影响

目的研究超短波治疗对大鼠坐骨神经钳夹伤后神经传导速度(MCV)及其相应水平脊髓运动神经元内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法选取60只SD大鼠,钳夹其坐骨神经制作周围神经损伤模型,然后随机分为实验组、对照组各24只和假手术组12只。实验组术后对其坐骨神经钳夹伤处进行超短波辐射。对照组术后进行无效辐射。假手术组仅暴露单侧坐骨神经。三组大鼠分别于术后1、2、4和6周末采用电生理及免疫组织化学染色方法观察超短波治疗对大鼠坐骨神经MCV及其L_4～5脊髓运动神经元VEGF阳性染色颗粒及吸光度水平的变化。结果术后1周,实验组和对照组大鼠损伤侧坐骨神经MCV值均未测出,术后2周起实验组和对照组大鼠损伤侧坐骨神经MCV值可测出,且超短波治疗组大鼠术后2、4、6周其损伤侧坐骨神经MCV值均明显高于对照组(P<0.05)。超短波治疗组大鼠L_4～5脊髓运动神经元VEGF阳性染色颗粒平均积分吸光度值(IOD)在术后各同一时间点均高于对照组(P<0.05)。结论超短波能促进大鼠周围神经损伤后MCV的恢复,增加其损伤脊髓运动神经元中VEGF的表达,改善组织缺血缺氧,对大鼠坐骨神经钳夹伤后神经的修复起保护作用。     

Neuropeptide Y in trigeminal ganglion following chronic constriction injury of the rat infraorbital nerve: is there correlation to somatosensory parameters?

The aim of this study was to investigate neuropeptide Y (NPY) levels in trigeminal ganglia following infraorbital nerve injury. Two experimental procedures were performed in three groups of rats: a unilateral chronic constriction injury (CCI) to the infraorbital nerve (n=13), nerve manipulation without CCI (n=13) and unoperated controls (n=8). All rats underwent baseline and regular assessment of mechanical withdrawal threshold (Von Frey) and reaction to pin prick as well as free behavior evaluations. CCI to the infraorbital nerve induced significant hyperalgesia and allodynia within 9-12 days. At 6 days seven rats were euthanized and trigeminal ganglia harvested for immunocytochemical (ICC) studies. The study was ended at 14 days when all rats were euthanized and their ganglia harvested for ICC and radioimmunoassay (RIA) studies. An increase in NPY levels was seen in the ipsilateral ganglia of manipulated and CCI rats at 6 days, when rats displayed no pain-related behavior. At 14 days, ICC and RIA both detected significant increases in NPY levels in the ipsilateral ganglia of CCI and manipulated rats but not in unoperated controls. The possible roles of NPY in pain modulation and nerve injury are discussed in light of these findings.     

N‐methyl‐d‐aspartate receptor‐mediated modulations of the anti‐allodynic effects of 5‐HT1B/1D receptor stimulation in a rat model of trigeminal neuropathic pain

Previous studies showed that triptans and other 5‐HT_1B/1D‐receptor agonists attenuate hyper‐responsiveness to mechanical stimulation of the face in a rat model of trigeminal neuropathic pain, probably by activating 5‐HT_1B/1D‐receptors on primary afferent nociceptive fibers. We now tested whether blockade of post‐synaptic receptors for the excitatory amino acid glutamate released by these fibers would increase this action. We thus evaluated whether (±)1‐hydroxy‐3‐aminopyrrolidine‐2‐one (HA‐966), an antagonist at the glycine/d ‐serine site of N‐methyl‐d ‐aspartate (NMDA)‐receptors, would potentiate the anti‐allodynic action of dihydroergotamine and zolmitriptan in rats with chronic constriction injury to the infraorbital nerve (CCI‐ION). Complementary studies were performed with other NMDA‐receptor ligands and in rats with chronic constriction injury to the sciatic nerve (CCI‐SN) for comparison. Injury was produced by loose ligatures of the nerves. Responsiveness to mechanical stimulation (vibrissae or hindpaw territories) with von Frey filaments was used to evaluate allodynia 2 weeks after nerve ligature. Rats received NMDA‐receptor ligands or saline 20 min before dihydroergotamine (25–100μg/kg, i.v.) or zolmitriptan (25–100μg/kg, s.c.). HA‐966 (2.5 mg/kg, s.c.), inactive on its own, enhanced the anti‐allodynic effects of dihydroergotamine (eightfold increase) and zolmitriptan (threefold increase) in CCI‐ION rats, but these drugs exerted no effects in allodynic CCI‐SN rats. NMDA‐receptor blockade by memantine (5 mg/kg, i.p.) also enhanced, whereas activation at glycine/NMDA site by d ‐cycloserine (3 mg/kg, i.p.) reduced the anti‐allodynic properties of zolmitriptan in CCI‐ION rats. Combined administration of NMDA‐receptor antagonist and 5‐HT_1B/1D‐receptor agonist may be a promising approach for alleviating trigeminal neuropathic pain.     

超短波治疗对大鼠坐骨神经钳夹伤后运动功能、MCV及血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究超短波治疗对大鼠坐骨神经钳夹伤后运动功能、神经传导速度(MCV)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:72只SD大鼠,随机选取60只,钳夹其坐骨神经制作周围神经损伤模型,随机分为实验组、对照组各30只,另12只仅暴露单侧坐骨神经,不钳夹为假手术组。术后实验组对其坐骨神经钳夹伤处行超短波辐射,每天7 min;对照组行无效辐射;假手术组不作处理。3组大鼠分别于术后12、、4和6周末时检测坐骨神经运动功能、MCV及损伤神经中VEGF的表达。结果:实验组大鼠运动功能评分(MFS)达2分和1分所需要的时间均显著短于对照组;术后2、4、6周,实验组大鼠损伤侧坐骨神经MCV均显著高于对照组;术后1、2、4、6周,实验组大鼠损伤侧坐骨神经中VEGF表达均明显高于对照组(均P0.05,P0.01)。结论:超短波能缩短神经修复的时程,增加其损伤神经中VEGF的表达,改善组织缺血缺氧,对大鼠周围神经损伤有保护作用。     

5‐HT2C receptor agonists attenuate pain‐related behaviour in a rat model of trigeminal neuropathic pain

Peripheral branches of the trigeminal nerve may be damaged during maxillofacial injury or surgical procedures and trigeminal trauma may induce severe pain that is very challenging to treat. Chronic constriction injury to the infraorbital nerve (ION‐CCI) by loose ligatures has proven a useful model for some types of trigeminal neuropathic pain disorder. Using ION‐CCI rats, we examined the antiallodynic effects of intrathecally administered agents which are selective for 5‐HT2C receptors. Allodynia was evaluated by applying von Frey filaments to skin innervated by the injured ION. Dose‐dependent antiallodynic effects followed administration of three 5‐HT2C receptor agonists, 6‐chloro‐2‐(1‐piperazinyl)‐pyrazine (MK212: 10, 30, and 100 μg); (S)‐2‐(chloro‐5‐fluoro‐indol‐l‐yl)‐1‐methyamine fumarate (RO 60‐0175: 10, 30, and 100 μg); (AaR)‐8,9‐dichloro‐2,3,4,4a‐tetrahydro‐1H‐pyrazino[1,2‐a]quinoxalin‐5(6H)‐one (WAY‐161503: 10, 30, and 100 μg). ED50 values for antiallodynic effects of MK212, RO 60‐0175, and WAY‐161503 were 39.62, 46.67, and 51.22 μg, respectively. Intrathecal administration of the 5‐HT2C receptor antagonist, 8‐[5‐2,4‐dimethoxy‐5‐(4‐trifluoromethylphenylsulphonamido)phenyl‐5‐oxopentyl]‐1,3,8‐triazaspiro[4,5]decane‐2,4‐dione (RS‐102221: 30 μg) did not alter the mechanical threshold. Intrathecal pretreatment with RS‐102221 (10 and 30 μg) reduced the antiallodynic effects of the highest dose of 5‐HT2C agonists. These results indicated that, in this rat model, the 5‐HT2C receptor plays a role in spinal inhibition of trigeminal neuropathic pain.     

术前给予巴氯酚延迟坐骨神经松结扎神经病理痛的形成

目的研究术前鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚(Bac)对慢性神经病理痛大鼠痛阈的影响,探讨脊髓GABA能系统在神经病理痛调节中的作用。方法建立慢性坐骨神经结扎损伤模型(CCI),SD大鼠32只随机分成4组:假手术组,大鼠左侧坐骨神经分离,但不结扎,术前鞘内注射生理盐水10μL;神经结扎组,大鼠左侧坐骨神经松结扎,术前鞘内注射生理盐水10μL;Bac 1组,大鼠左侧坐骨神经松结扎前10 min,鞘内注射Bac 0.03μg;Bac 2组,大鼠左侧坐骨神经松结扎前10min,鞘内注射Bac 0.3μg。术后第1、3、5、7、10、14天测大鼠机械刺激缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL)以及运动功能。结果术后第1~14天神经结扎组大鼠MWT和TWL较假手术组大鼠明显降低(P<0.05);术前给Bac 0.3μg的坐骨神经结扎大鼠与术前给生理盐水的坐骨神经结扎大鼠比较,术后第1~5天MWT和TWL明显升高(P<0.05)。结论坐骨神经结扎前鞘内注射Bac 0.3μg可延缓大鼠神经病理性疼痛的形成。     

坐骨神经损伤后脊髓肝细胞生长因子mRNA及蛋白的表达

目的 研究坐骨神经损伤后再生过程中脊髓肝细胞生长因子（HGF）mRNA和蛋白的表达及经时变化规律，探讨周围神经损伤的机制。方法 采用原位杂交及免疫组化技术检测坐骨神经损伤后再生过程中脊髓HGF的mRNA及蛋白的表达。结果 大鼠坐骨神经损伤模型损伤侧的神经细胞胞质颗粒阳性染色强于未损伤侧；神经损伤后第3，7和14天，感觉。运动和副交感神经元内杂交信号明显增强，以第7天的变化最为显著。HGF蛋白的表达均于坐骨神经损伤后第1周开始增强，第2周时达峰值，然后下降。结论 周围神经损伤后，内源性HGF mRNA和蛋白表达增强，对神经元具有保护作用。