替米沙坦对5/6肾切除肾衰竭大鼠的肾脏保护作用及其机制研究

目的 探讨血管紧张素AT1受体拮抗剂替米沙坦对5/6肾切除肾衰大鼠的肾脏保护作用及可能作用机制.方法 选用180 ～ 200 g雄性SD大鼠30只建立5/6肾切除肾衰模型,分为假手术组、模型组和替米沙坦组,各10只.第12周时采用断头法处死大鼠,并检测各组大鼠血清尿素氮、肌酐及24h尿蛋白水平;取残余肾组织行病理检查,判断肾小球硬化、肾小管间质损伤程度;利用反转录聚合酶链反应( RT-PCR)和Western Blot检测过氧化物酶增殖体活化受体γ(PPARγ)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白和mRNA的表达水平.结果 3组肌酐、血清尿素氮及24 h尿蛋白情况:假手术组:(35±4)μmol/L,(6.6±1.0) mmol/L,(30 ±4) mg/d;模型组:(91±10) μmol/L,(23.0±3.4)mmol/L,(96±21) mg/d;替米沙坦组(62±10) μmol/L,( 15.3 - 1.3) mmol/L,(45±17) mg/d;与假手术组相比,模型组和替米沙坦组大鼠上述指标均明显升高(P＜0.01);但与模型组相比,替米沙坦组各指标则明显降低(P＜0.05).病理学检查示模型组大鼠肾组织有明显的肾小球硬化及肾小管间质损伤,肾小球硬化指数及肾小管间质损伤指数均较假手术组明显增高(P＜0.01);而替米沙坦组上述指标则较模型组明显降低(P＜0.05).Western Blot和RT-PCR显示模型组PPARγ、nNOS蛋白和mRNA的表达较假手术组明显下降(P＜0.05),而替米沙坦组PPARγ和nNOS的表达则较模型组明显升高(P＜0.05).结论 大鼠5/6肾切除后,给予替米沙坦可以明显减轻肾小球硬化和肾间质纤维化的程度,其作用机制可能与其上调PPARγ和nNOS基因的表达有关,且二者有明显的相关性.     

罗格列酮对肾硬化大鼠模型整合素连接激酶表达的影响

目的观察罗格列酮对肾硬化大鼠模型整合素连接激酶(ILK)表达的影响。方法 24只大鼠随机分为三组,每组8只。模型组和治疗组行大鼠左肾全切除术,并采用多柔比星诱导局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠模型。治疗组于手术当日开始给予罗格列酮3 mg·kg-1·d-1灌胃,每日1次;假手术组和模型组给予等体积生理盐水,均持续12周。采用HE、PAS染色观察肾小球硬化程度,计算肾小球硬化指数;Western blot及免疫组化法检测肾组织中ILK及纤维连接蛋白(FN)蛋白表达情况;RT-PCR检测肾组织中ILK mRNA及FN mRNA的表达水平。结果给药12周后,模型组大鼠肾小球硬化指数、肾小管间质损伤Paller氏评分均较高于假手术组(P<0.05),肾小球明显硬化;治疗组上述指标低于模型组(P<0.05),FSGS减轻。与假手术组相比,模型组大鼠肾组织中ILK及FN的mRNA和蛋白表达水平均明显增加(P<0.05)。治疗组大鼠肾组织中ILK及FN的mRNA和蛋白表达水平均低于模型组(P<0.05)。结论ILK可能参与肾小球硬化的发病,罗格列酮可能通过抑制肾组织ILK的表达来改善肾小球硬化。     

罗格列酮减轻阿霉素肾病大鼠肾小球硬化的实验观察

目的观察罗格列酮干预治疗对单侧肾切除加重复阿霉素注射诱导的肾小球硬化大鼠肾脏的保护作用。方法建立单侧肾切除加重复阿霉素注射的肾小球硬化大鼠模型,分为罗格列酮治疗组和肾病组,设假手术组为对照组。检测各组大鼠第0、4、8、12周尿蛋白,并观察第12周肾组织病理改变,计算肾小球硬化指数。结果罗格列酮治疗组比肾病组尿蛋白排泄量明显减少(P<0.01),肾小球硬化程度明显减轻。结论罗格列酮对阿霉素肾病大鼠肾脏病变具有保护作用。     

罗格列酮对大鼠TGF-β1及TIMP-1的干预作用

目的观察罗格列酮对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾皮质中转化生长因子-β1(TGF-β1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的干预作用。方法将大鼠随机分为假手术组(SHAM)、手术组(UUO)、治疗组(UUO RGZ)。术后14d处死,观察大鼠血肌酐,右侧肾脏病理学改变,并用免疫组化方法测肾皮质中TGF-β1、PPARγ、TIMP?1的表达。结果与手术组相比,治疗组大鼠肾脏病理改变明显减轻,肾小管间质中TGF-β1、PPARγ、TIMP?1表达有不同程度减少。结论罗格列酮可通过调节细胞外基质降解作用,减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质病变。     

γ-氨基丁酸对慢性肾衰竭大鼠 肾小管间质纤维化的抑制作用

［摘要］目的建立大鼠慢性肾衰竭模型,观察γ 氨基丁酸（GABA）对慢性肾衰竭大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用并对其机制进行研究。方法5/6肾切除法建立慢性肾衰竭大鼠模型,大鼠随机分为3组：对照组,慢性肾衰竭组（模型组）,慢性肾衰竭GABA给药组（治疗组）。手术后60 d处死各组大鼠,测定各组大鼠血清尿素氮和肌酐水平,观察第60天肾脏组织病理改变,免疫组化法检测肾组织转化生长因子 β1（TGF β1）、基质金属蛋白酶抑制物 1（TIMP 1）的表达,应用逆转录 聚合酶链反应（RT PCR）方法检测肾组织TIMP 1 mRNA的表达水平。结果与模型组比较,治疗组大鼠肾功能改善,残肾组织肾小管萎缩及肾小管间质纤维化减轻,而肾小球硬化改变不明显。 结论GABA可以通过抑制肾小管间质纤维化和肾小管萎缩,改善5/6肾切除肾衰竭大鼠的肾功能。     

吡格列酮对阿霉素致肾小球硬化大鼠肾脏氧化应激的影响

目的 观察吡格列酮(胰岛素增敏剂)对阿霉素致肾小球硬化大鼠肾脏氧化应激的影响.方法 经单侧肾切除加上重复注射阿霉素诱导,建立肾小球硬化大鼠模型,Wistar大鼠32只随机分为假手术对照组,阿霉素致肾小球硬化模型组和吡格列酮治疗组,治疗组大鼠,于第1次尾静脉注射阿霉素后给予吡格列酮10 mg·kg-1·d-1灌胃治疗,共12周.治疗12周末,测定各组大鼠24 h尿蛋白排泄量、尿肌酐、血清肌酐及尿素氮;进行肾脏病理学检查,计算肾小球硬化指数(GSI);检测肾组织和尿中丙二醛(MDA)的含量及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性.结果 吡格列酮治疗组,24h尿蛋白排泄量、血清肌酐及尿素氮等与模型组比较均有不同程度的改善(P＜0.05),肾小球硬化程度也明显减轻(P＜0.05),治疗组肾组织和尿中的MDA含量明显低于模型组,SOD与GSH-Px活性明显高于模型组(P＜0.05).结论 吡格列酮能抑制阿霉素致肾小球硬化大鼠肾脏氧化应激反应,对该模型大鼠具有肾脏保护作用.     

罗格列酮对阿霉素致肾小球硬化症大鼠的尿蛋白排泌量及肾小球蛋白(synaptopodin)表达的影响

目的 观察罗格列酮(胰岛素增敏药)对阿霉素致肾病大鼠的尿蛋白排泌量及肾小球蛋白表达的影响.方法 用罗格列酮治疗阿霉素诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠模型;用双缩脲法动态检测大鼠24 h尿蛋白量;分别用荧光实时定量PCR和免疫组织化学法检测大鼠肾组织synaptopodin mRNA和蛋白表达量.结果 罗格列酮能显著减缓FSGS大鼠尿蛋白排泄量的增加(P＜0.05);恢复大鼠肾组织蛋白表达量(P＜0.05),而不影响其mRNA表达量(P＞0.05);FSGS大鼠肾组织蛋白表达量与尿蛋白排泄量呈负相关(P＜0.01).结论 罗格列酮能减轻FSGS模型尿蛋白排泌量,其机制可能部分与维持足细胞足突肌动蛋白微丝骨架系统的稳定有关.     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏PPARγ、UCP2表达的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及解偶联蛋白2(UCP2)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病中的作用;观察罗格列酮对实验性NAFLD的治疗效果。方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组,罗格列酮低剂量及高剂量治疗组。RT-PCR检测肝脏组织PPARγ及UCP2表达情况。结果随着造模时间延长,高脂饮食使大鼠肝脏组织中PPARγm RNA、UCP2m RNA表达逐渐增强(P<0.05);罗格列酮治疗能够下调两者的表达(P<0.05)。结论高脂饮食可使模型大鼠肝脏组织中PPARγ及UCP2表达增强。罗格列酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠具有一定的治疗作用,并呈一定的时间-剂量依赖性,其作用可能通过下调肝脏组织中PPARγ及其下游靶基因UCP2的表达来实现。     

罗格列酮对急性坏死性胰腺炎的保护作用

目的探讨罗格列酮对急性坏死性胰腺炎(ANP)的保护作用。方法 72只健康SD大鼠随机均分为假手术组(SO组)、ANP组及罗格列酮处理(R)组。采用经十二指肠胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP模型,于模型制作前30min腹腔内注射罗格列酮(10mg/kg)进行预处理。各组于术后3、6、12h分批处死动物,分别观察各组大鼠血浆淀粉酶(AMY)、TNF-α、IL-6水平,胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平的变化以及胰腺组织病理改变。采用免疫组化法检测胰腺组织核因子κB(NF-κB)的表达,采用RT-PCR法检测胰腺组织过氧化物酶增殖物活化受体γ(PPARγ)mRNA、热休克蛋白-70(HSP-70)mRNA。结果 ANP组AMY、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO、胰腺组织病理学评分及胰腺组织NF-κB的表达较SO组明显升高(P<0.05或P<0.01),R组上述各检测指标均较ANP组显著降低(P<0.05或P<0.01)。R组各时点胰腺PPARγmRNA及HSP-70mRNA表达水平增加(P<0.05或P<0.01),胰腺组织损伤明显减轻。结论罗格列酮可能是激活PPARγ后通过诱导胰腺HSP-70的表达,抑制胰腺NF-κB的活化,减少细胞因子的产生,从而改善ANP病情。     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白(α-SM A)表达的影响。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组和罗格列酮处理组,每组10只,正常对照组给予普通营养饲料喂养,阳性对照组和罗格列酮处理组给予高脂饲料喂养,连续喂养12周后,阳性对照组和罗格列酮处理组大鼠腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素,正常对照组给予等量枸橼酸缓冲液。成功制备DKD模型后,罗格列酮处理组大鼠给予罗格列酮3 mg/kg灌胃,正常对照组和阳性对照组给予等量生理盐水灌胃。连续给药28周后,对各组大鼠进行称重,检测FBG、Hb A1c和24 h尿蛋白水平,实时荧光定量PCR检测右肾上极皮质组织中ILK和α-SMA表达。结果罗格列酮处理组和阳性对照组大鼠体重均低于正常处理组,而相对肾重均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),罗格列酮处理组大鼠体重均高于阳性对照组,而相对肾重低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);罗格列酮处理组大鼠FBG、Hb A1c和24 h尿蛋白水平均高于正常对照组,但均低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);罗格列酮处理组大鼠右肾上极皮质组织中ILK mRNA和α-SMA mRNA相对表达量均高于正常对照组,但均低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DKD大鼠肾组织中ILK和α-SMA呈高表达,罗格列酮可下调DKD大鼠肾组织中ILK和α-SMA表达,可能通过抑制肾小管上皮细胞转分化发生而延缓肾小管间质纤维化。     

贝那普利联合胰激肽原酶对肾间质纤维化的作用研究

目的研究贝那普利联合胰激肽原酶对实验性肾间质纤维化模型大鼠肾脏是否具有保护作用及其可能的机制。方法 60只SD大鼠分为假手术组(A组)、模型组(B组)、贝那普利治疗组(C组)和贝那普利联合胰激肽原酶治疗组(D组),观察肾组织病理变化,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血小板源性生长因子(PDGF-B)的表达情况。结果 D组治疗14d后较其余3组,可减少AngⅡ的含量(P<0.05),下调PDGF-B的表达(P<0.05),抑制细胞外基质增生、聚集,减轻肾间质纤维化,延缓肾脏损害,其作用优于单独应用血管紧张素转化酶抑制剂。结论 AngⅡ和PDGF-B参与肾小管间质纤维化改变。     

维生素E对大鼠残肾纤维化的抑制作用

观察维生素E对慢性肾衰残肾组织进行性纤维化的抑制作用。方法在5/6肾切除大鼠慢性肾衰模型上 ,以假手术大鼠为对照 ,采用形态计量和生化测定方法 ,对比分析术后30、60、90、120天给予或不给予维生素E治疗的慢性肾衰大鼠残肾纤维化程度。结果大鼠行5/6肾切除术后 ,在残存肾小球代偿性肥大、肾小球毛细血管代偿性增生的同时 ,肾小球显著硬化 ,滤过膜显著增厚 ,肾间质显著纤维化 ,肾组织羟脯氨酸含量显著增高 ;而用维生素E治疗的大鼠 ,肾小球硬化、滤过膜增厚、肾间质纤维化和肾组织羟脯氨酸含量增高的程度显著减轻 ,肾小球代偿性肥大和肾小球毛细血管代偿性增生的发生时间后移。结论维生素E能显著抑制5/6肾切除所致慢性肾衰残肾组织的纤维化 ,对其代偿性肾小球肥大和毛细血管增生无明显直接影响。     

中药肾复舒颗粒合用阿托品对肾衰大鼠残余肾VEGF和MVD的影响

目的观察中药肾复舒颗粒合用阿托品对肾衰大鼠残余肾组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)分布与肾损伤的影响。方法将5/6肾切除SD大鼠随机分为肾复舒治疗组、肾复舒+阿托品治疗组和模型组,并设假手术组为正常对照,术后1周开始给药,连续8周后处死动物。采血检测各组用药前后血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)和尿蛋白的浓度变化;并取大鼠残余肾组织切片用HE染色和免疫组化法检测肾组织VEGF表达水平及MVD、肾小球硬化指数(GSI)、肾小管间质损伤指数(TIS)。用MVD与BUN、Cr、GSI、TIS和尿蛋白作相关分析。结果两治疗组肾组织VEGF、MVD表达比对照组明显增强;VEGF与MVD成正相关;MVD与血尿素、肌酐、GSI、TIS和尿蛋白成负相关(P<0.05);且肾复舒+阿托品组改变更为明显(P<0.05)。结论肾复舒和阿托品能加强VEGF在残余肾组织的表达,增加微血管密度;降低肾小球硬化和肾小管间质损伤程度。2种药物合用作用更为明显。     

胱抑素C评估IgA肾病患者肾纤维化程度及早期肾损害的价值

目的探讨胱抑素C(Cys C)评估IgA肾病(IgAN)患者肾纤维化程度及早期肾损害的价值。方法收集IgAN患者共128例作为实验组,行肾小球硬化及肾小管纤维化积分与血和尿Cys C的相关性分析。至随访终点根据CRD分期将实验组分为三个亚组;对照组50例为健康人群。测定四组血尿素氮、肌酐、Cys C,估测肾小球滤过率的水平。结果实验组血清和尿Cys C水平明显高于对照组(P<0.05),与肾小球硬化和肾小管间质纤维化积分均呈显著正相关(P<0.01)。血Cys C、肌酐、尿素氮与肾小球滤过率均有相关性,但各组均以血Cys C与肾小球滤过率的相关系数最大。结论血和尿Cys C水平可能是反映IgAN患者肾小球和肾小管间质纤维化程度的可靠指标,在IgAN患者中定期检测血Cys C水平,有助于发现早期肾损害。     

Inhibition of inducible nitric oxide synthase improves graft function and reduces tubulointerstitial injury in renal allograft rejection

Increased levels of nitric oxide (NO) are found in rejecting renal allografts. Inducible NO synthase (iNOS) in infiltrating monocytes/macrophages could lead to NO bursts. NO may modulate the inflammatory response of early rejection due to its high reactivity with superoxide to yield peroxynitrite. To define the role of iNOS in acute renal allograft, rejection effects of the specific iNOS blockers iminoethyl-lysine and 7-butylhexahydro-1H-azepin-2-imine, monohydrochloride on renal function and morphology were investigated in renal allografts. Lewis rats received Brown Norway grafts with one kidney left in situ. All recipients were treated with low dose cyclosporine-A (2.5 mg/kg BW/day s.c.) to allow moderate rejection. In addition, one group received iminoethyl-lysine (10 mg/kg BW/day gavage) and one group received butylhexahydro-azepin-imine (3.4 mg/kg BW/day i.p.). Sham operated Brown Norway donor rats served as baseline controls. Compared to controls, low dose cyclosporine-A decreased glomerular filtration rate (P<0.05) and numerically increased renal vascular resistance. Adding iminoethyl-lysine to cyclosporine-A improved renal hemodynamics. Adding butylhexahydro-azepin-imine to cyclosporine-A practically restored glomerular filtration rate and renal vascular resistance (P<0.05) to control levels. Grafts treated with cyclosporine-A alone showed vascular, glomerular and tubulointerstitial lesions. Adding iminoethyl-lysine or butylhexahydro-azepin-imine to cyclosporine-A did not significantly reduce vascular and glomerular injury, but diminished tubulointerstitial injury as well as nitrotyrosine staining in tubular epithelium (P<0.05). Thus, adding the iNOS blockers iminoethyl-lysine or butylhexahydro-azepin-imine to cyclosporine-A improved graft function and reduced tubulointerstitial lesions.     

西洛他唑对糖尿病大鼠肾脏过氧化物酶体增生物激活受体γ表达的影响

目的探讨西洛他唑对高糖大鼠肾脏过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ-)表达的影响。方法雄性SD大鼠,链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病模型。设正常对照组、糖尿病对照组及高[25 mg/(kg.d)]、低[18 mg/(kg.d)]剂量西洛他唑组,12周后处死动物,测血糖、糖化血红蛋白,肾重/体重,检测肾组织PPARγ-mRNA及蛋白质表达。结果与糖尿病组相比,西洛他唑无明显降低血糖作用;糖尿病对照组肾重/体重明显增加(P<0.01),西洛他唑有减轻肾肥大趋势;RT-PCR、Western blot结果显示西洛他唑能明显增强PPARγ-mRNA和蛋白质水平表达(P<0.05),高剂量组效果优于低剂量组,但无统计学差异。结论西洛他唑可能通过上调PPARγ-,对糖尿病肾脏具有保护作用。     

罗格列酮对类胰蛋白酶诱导的大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原及过氧化物酶体增殖物活化受体γ表达的影响

目的观察罗格列酮对类胰蛋白酶诱导的大鼠肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原及过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨罗格列酮抑制肝纤维化的作用机制。方法将大鼠HSC-T6进行体外培养,取对数生长期细胞分为空白对照组,1、10、100 ng/ml类胰蛋白酶组,10 ng/ml类胰蛋白酶+(5、10、20μmol/L)罗格列酮组。用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HSCⅠ型胶原及PPARγ的表达。结果类胰蛋白酶可以诱导大鼠HSCⅠ型胶原表达并使HSC PPARγ表达减少(P<0.05),罗格列酮可以不同程度抑制类胰蛋白酶的上述效应,且各组Ⅰ型胶原的表达水平均低于10 ng/ml类胰蛋白酶组(P<0.05),各组PPARγ的表达水平均高于10 ng/ml类胰蛋白酶组(P<0.05),并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论罗格列酮能够上调PPARγ表达并抑制类胰蛋白酶诱导的HSCⅠ型胶原的表达,抑制肝纤维化的发生。