Nijmegen测定法的简化及其在凝血因子抑制物检测中的应用

目的:探讨简化的Nijmegen法在诊断获得性凝血因子抑制物中的临床价值。方法:通过APTT测定、APTT交叉试验、APTT孵育交叉试验以及FVⅢ:C活性、FIX:C活性测定对可疑患者进行初步诊断;采用简化的Nijmegen法对4例初步诊断存在凝血因子抑制物的患者进行抑制物的定量测定。结果:4例患者APTT均延长;APTT交叉试验和APTT孵育交叉试验结果:加1/10正常血浆及等量正常血浆均不能使延长的APTT恢复正常,而且加入等量正常血浆的APTT随着孵育时间的延长而逐渐延长;4例患者中有1例为甲型血友病并发FVⅢ抑制物,其血浆FVⅢ:C活性及FVⅢ抑制物的测定结果分别为1.0%和320BU/mL;2例为获得性甲型血友病患者,其血浆FVⅢ:C分别为0.6%和1.3%,其血浆FVⅢ抑制物分别为92BU/mL和192BU/mL;另外1例为乙型血友病并发FIX抑制物,其血浆FIX:C活性及FIX抑制物的测定结果分别为1.2%和100BU/mL。结论:简化的Nijmegen法适合于对血友病患者或者获得性血友病患者产生凝血因子抑制物的分析评价;对凝血因子抑制物的检测有利于患者的诊断、治疗及预后判断。     

血友病A患者脑外伤的诊治体会

血友病A (hemophilia,HA)是血浆中凝血因子VⅢ(抗血友病球蛋白AHG)的活性部分VⅢ:C减少或缺失所致,合并脑外伤者病情更危重.我院1995年来共收治9例HA合并脑外伤患者,现将其诊治体会总结如下. 1 临床资料 1.1 一般资料 9例患者为男性,年龄5～36岁,平均24岁,均有脑外伤病史,脑外伤轻重以格拉斯哥昏迷评分(GCS)评定.见表1. 1.2 治疗方法 入院后予以抗感染、止血、脱水等脑外伤常规治疗,血液内科、检验科、血库配合围手术期治疗,补充FVⅢ是HA最重要的止血措施,常用有新鲜冰冻血浆、血浆冷沉淀和凝血酶原复合物等.     

新鲜冰冻血浆中FⅧ∶C检测结果分析

目前,血浆冷沉淀仍是国内治疗甲型血友病出血的最佳制品之一,当缺乏该制品时,也可应用新鲜冰冻血浆(FFP).为了保证FFP的质量,使甲型血友病患者出血得到较满意的疗效,近几年来,笔者按照卫生部制定的<血站基本标准>,<中国输血技术操作规程>血站部分,随机对18批共72袋的FⅧ∶C进行了检测,现报告如下.     

新鲜冰冻血浆融化后4℃冰箱放置不同时间凝血因子、离子、PH值的变化观察

血浆是血液成分中的一种副产品，有新鲜和普通之分。新鲜冰冻血浆是血液采集后6小时内分离制备出来，迅速放置-56℃冰箱快速冰冻成块。其后放置-30℃冰箱保存，保存期为1年；有文献报道这样保存的血浆几乎含有全部的凝血因子，包括不稳定因子FV和FVⅢ，而普通血浆则不含其不稳定的凝血因子，可保存5年。新鲜冰冻血浆可应用于凝血因子缺乏，肝功能衰竭，大量输血，弥漫性血管凝血等疾病。     

新鲜冰冻血浆凝血因子Ⅷ监测结果分析

新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ是血友病患者缺乏的一种因子,对这种患者的止血,凝血因子Ⅷ具有不可替代的作用.凝血因子Ⅷ受冷冻时间和温度影响而使其活性改变[1],监测新鲜冰冻血浆中不稳定凝血因子Ⅷ的含量,提高本站新鲜冰冻血浆中不稳定凝血因子Ⅷ质量,使之符合国家要求.作者对本站133袋新鲜冰冻血浆凝血因子Ⅷ含量的监测情况报道如下.     

新鲜冰冻血浆FⅧ:C浓度的调查报告

<正> 甲型血友病(FⅧ缺乏)出血的防治,最适合用冷沉淀(冰冻或冰冻干燥制品)或浓缩 FⅧ(中纯、高纯)。当缺乏这些制品时,也可使用新鲜冰冻血浆(FFP)。为了使甲型血友病患者得到较为满意的疗效,FFP 中 FⅧ:C 浓度的监测十分重要。我院张莉尼等对 FFP 中 FⅧ:C 浓度曾进行了抽样调查,发现 FⅧ:C 浓度较低。但因例数太少,不能说明问题。为了进一步了解我院FFP 中 FⅧ:C浓度,我们又抽样测定了26份 FFP。     

输血疗法:自我测验 第四部份

70.新鲜冰冻血浆(FFP)最适合用于: A.补充创伤病人的血容量; B.治疗因大量输血引起的稀释性凝血障碍; C.补充重症甲型血友病患者的因子Ⅷ; D.补充大量输血病人的血小板; E.补充肝脏衰竭病人的白蛋白。71.FFP必需: A.6个月之内输用; B.在室温1小时内融化; C.采血后6小时内加工和冰冻; D.微波加热融化;     

问与答

<正> 问:什么是冷沉淀和凝血因子Ⅷ浓缩制剂?甲型血友病患者治疗时如何选择合适的制品和计算剂量? 答:冷沉淀是新鲜冰冻血浆在控制的温度下融化后收集的冷不溶成分,又分为冰冻冷沉淀和冻干冷沉淀.冰冻冷沉淀通常以单人份血浆制得,平均每袋(瓶)含80～100单位凝血因子Ⅷ促凝活性(FⅧ∶C),容积为10～20ml;冻干冷沉淀是将冷沉淀溶解后,经冰冻干燥制得,既可以是单人份的,也可以是4～10人份的,     

人凝血酶原复合物致血栓形成机制及其评价方法

人凝血酶原复合物(PCC),又称凝血因子Ⅸ(FⅨ)复合物,是由混合人血浆制成的冻干制剂,含有依赖维生素K合成的FⅡ、FⅦ、FⅨ和FⅩ.该制剂在临床上除了用于乙型血友病、肝病出血、维生素K依赖的凝血因子缺乏症、有抗-FVl的甲型血友病外,近年来更多的是用于替代传统的新鲜冰冻血浆逆转香豆素类抗凝剂过量而导致的各种出血性疾病的治疗[1-7];     

与输血史有关的荷兰血友病患者庚型肝炎病毒RNA和庚型肝炎病毒-E抗体

考虑到病人所用的凝血制品、病人年龄及共感染丙型肝炎方面的情况,作者在一组荷兰血友病患者中就庚型肝炎病毒(HGV)-RNA和HGV-E2抗体的流行率进行了研究。在1991年～1995年间,收集了患有甲型血友病、乙型血友病和vonWillebrand病的294名患者的血样。对每个患者的一份新鲜冰冻样品进行了HGV cDNA聚合酶链反应(PCR)和HCV cDNAPCR检测,并对所有患者的血浆样品进行了丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定,同时还对一组可代表所有年龄组的169名患者的血浆样品进行了HGV-E2抗体检测。根据所用凝血制品的来源     

两种方法制备冷沉淀凝血因子质量比较

冷沉淀凝血因子是将保存期内的新鲜冰冻血浆在1℃～6C融化后,分离出大部分的血浆,并将剩余的冷不溶解物质在1h内速冻呈固态的成分血,含有丰富的FⅧ、纤维蛋白原（Fib）、Vwf、Fn、X;冷沉淀中含有的FⅧ理论上是相当于新鲜冰冻血浆中FⅧ浓缩10倍[1],容量少,效果好,在临床应用越来越广泛,尤其在治疗甲型血友病、纤维蛋白原缺乏症、产妇大出血、弥漫性血管内凝血等方面获得明显疗效[2].     

冷沉淀在临床中的应用

冷沉淀是用新鲜冰冻血浆（FFP）在1～6℃无菌条件下分离出沉淀在血浆中的冷不溶解物质,并在1h内冻结而制成的成分血,富含纤维蛋白原（FIB）、纤维结合蛋白（Fn）、FⅧ因子、血管性血友病因子（vWF）、凝血因子XⅢ（FXⅢ）等,     

冷沉淀中Ⅷ因子和纤维蛋白原含量测定

冷沉淀由全血分离的新鲜冰冻血浆 (freshfrozenplasma,FFP)制备 ,通常 1单位容量为 2 0～ 30ml(2 0 0ml血浆中提取 ) ,主要含有凝血因子Ⅷ (FⅧ )、纤维蛋白原 (Fbg)、血管性血友病因子 (VonWillebrand因子 ,vWF)、XⅢ因子以及纤维结合蛋白等成分。目前仍是国内治疗甲型血友病、纤维蛋白原缺乏症等疾病的最佳制品之一 ,因此检测冷沉淀中的FⅧ和Fbg的含量是保证冷沉淀质量的必要手段。笔者随机抽检 8批共 32袋冷沉淀 ,对FⅧ、纤维蛋白原含量进行检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　标本来源　徐州市街头流动采血车无偿献血者 ,冷沉…     

血友病A患者产生抗体3例

1病例报告 例1：男，11岁。在本中心确诊为血友病A，FVⅢ：C2．7％，vWF132％。2002—01反复出现自发性血尿，在当地医院输注冷沉淀治疗8d，效果不佳，怀疑产生FVⅢ抗体，来我中心进行FVⅢ抗体检测，抗体筛选实验显示：时间依赖性抗体阳性，即刻反应性抗体阴性；FVⅢ抗体定营实验为4BU／ml血浆。给予冷沉淀800～1000IU／次，每12h一次，连续输注2d后，     

不同疾病RhD阴性患者成分输血策略探讨

目的 探索适合不同疾病的RhD阴性患者成分输血的保障策略及节约RhD阴性血液的方法.方法 对解放军总医院输血前检空中检出的RhD阴性患者根据病情及输血概率的大小分为4组从而采取不同的备血策略.所有手术患者只要没有禁忌症均采用术中回收式自身输血.结果 共检出95例RhD阴性患者.I组9例患者均输血,共输注RhD阴性红细胞39U,新鲜冰冻血浆1 200 ml;I组30例患者中有6例患者输血,仅榆注RhD阴性红细胞9U.新鲜冰冻血浆3 700 ml;Ⅲ组45例患者中有12例患者仅输注自体血,其他33例患者共输注RhD阴性红细胞35U,新鲜冰冻血浆8 000 ml;N组11例患者共输注RhD阴性红细胞44U,新鲜冰冻血浆6 500 ml.结论 根据RhD阴性患者的病情及手术中出血量不同采取不同的备血策略,可以保证患者手术及治疗的顺利进行并节约RhD阴性血液.     

冷沉淀中血管性血友病因子含量测定及意义

目的通过检测冷沉淀中血管性血友病因子(vWF),并与新鲜冰冻血浆和冷上清比较,为评价冷沉淀质量和临床应用提供依据。方法应用酶联免疫吸附法检测无偿献血者新鲜冰冻血浆、冷沉淀和冷上清中vWF含量。结果新鲜冰冻血浆、冷沉淀和冷上清中vWF表达水平分别为(126.47±7.80)%、(268.50±19.51)%和(19.92±2.34)%。其中冷沉淀组明显高于新鲜冰冻血浆和冷上清。结论在严格控制制备条件下,冷沉淀中富含vWF,冷上清中残留的vWF很低,临床应用时,应该予以区别后选择使用。     

人凝血因子V的纯化

目的 分离纯化人血浆中凝血因子V(FV),为研制FV单克隆抗体提供抗原.方法 在1 L新鲜冰冻血浆中加入酶抑制剂Benzamidine hydrochloride、二异丙基氟磷酸(DFP)和胰蛋白酶抑制剂,使其终浓度分别达到2mmol/L、1 mmol/L和50 mg/L;采用柠檬酸钡吸附、聚乙二醇6000分级沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析和Sephacryl-S300凝胶过滤层析,对血浆中FV进行分离纯化;采用凝血测定一期法检测FV活性;采用紫外分光光度法测定纯化FV的蛋白含量;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察FV的纯化情况.结果 经过对血浆前处理和两步层析后,FV活性回收率为(11.21±3.54)%,比活性为(30.46±0.31)U/mg,浓缩倍数为(2 538.33±25.83)倍(n=3);SDS-PAGE图谱显示:原料血浆添加DFP的离子交换层析样品较之未加DFP的样品在330 kD处有更粗更清晰的蛋白条带,最终纯化的FV样品仅在330 kD附近有1条较深的蛋白条带.结论 本FV纯化方法能够较有效地浓缩血浆中的FV.     

血浆速冻冰箱在血站的应用探讨

新鲜冰冻血浆是采集全血后6h内分离出血浆并迅速在-30℃以下冰冻保存的血液制品,可保存一年,其几乎含有全部的凝血因子,包括不稳定因子FV和FⅧ,可应用于凝血因子缺乏、肝功能衰竭、大量输血、弥散性血管内凝血（dissemina—ted intravascular coagulation,DIC）等疾病。     

冷沉淀制备过程中的关键因素探讨

冷沉淀是临床上较常用的一种血液成分,含有凝血因子FⅧ、Fib、纤维结合蛋白等5种成分,临床上主要用于治疗手术、创伤引起的凝血机制障碍[1],以及先天性或继发性甲型血友病、低纤维蛋白原血症患者在缺乏相应纯制剂凝血因子时,用于补充相应的凝血因子。冷沉淀是采用特定的方法,将保存期内的新鲜冰冻血浆在1℃~6℃融化,经离心移除大部分血浆后,剩余的冷不溶解物质于1h内速冻呈固态而制备的成分制剂[2]。为保证冷沉淀产品质量,     

病毒灭活血浆质量及应用调查

目的：探讨亚甲蓝光化学法灭活血浆前后质量变化及临床应用。方法：在灭活前后抽检30份新鲜血浆,检测凝血因子FVⅢ的活性（VⅢ：C）、纤维蛋白质原活性（Fbg：C）、总蛋白含量及血浆电解质水平。结果：FVⅢ的活性及纤维蛋白活性下降（P〈0.01）,回收率分别为80.8%和84.2%;总蛋白及血浆电解质没有显著差别（P〉0.05）。结论：亚甲蓝光化学法灭活血浆前后质量发生变化较小,有效活性保持在80%以上,可替代普通血浆应用于临床。