Apelin-13对高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用北大核心CSCD

目的探讨Apelin-13对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护机制是否与沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)相关。方法实验分组分为4部分。实验Ⅰ,将HUVECs分为6组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、各实验组(分别用1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。实验Ⅱ,将HUVECs分为4组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、对照组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)糖)。实验Ⅲ,将HUVECs分为2组,分别为空载质粒组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)和APJ低表达组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。以上3个实验均用Western blot法检测高糖环境下SIRT1蛋白的表达水平。实验Ⅳ,将HUVECs分为5组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1))、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)、抑制剂组(33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)、干预组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)。用流式细胞术检测HUVECs的凋亡率。结果实验Ⅰ,空白组、模型组和1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.51±0.06,0.30±0.05,1.02±0.07,1.12±0.10,1.14±0.10和1.05±0.10,模型组的SIRT1蛋白相对表达量与4个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅱ,空白组、模型组、对照组和实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.82±0.09,0.59±0.05,0.77±0.05和0.72±0.06;模型组的SIRT1蛋白相对表达量与实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅲ,空载质粒组和APJ低表达组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.94±0.13和0.71±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅳ,空白组、模型组、实验组、抑制剂组和干预组的细胞凋亡率分别为(13.60±0.92)%,(24.63±1.25)%,(12.73±1.00)%,(25.68±1.42)%和(10.25±2.30)%。模型组的细胞凋亡率与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组的细胞凋亡率与干预组相比,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的细胞凋亡率与实验组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin-13减轻高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的机制与SIRT1信号通路无关。     

汉黄芩素增强乙酰胆碱对大鼠胸主动脉血管的舒张作用研究

目的探讨汉黄芩素增强乙酰胆碱对大鼠胸主动脉血管的舒张作用及其作用机制。方法实验分为对照组和加药组,加药组使用含有不同浓度汉黄芩素的DMEM/F12培养基作用;对照组使用含有与加药组相同体积二甲基亚砜(DMSO)的DMEM/F12培养基作用。汉黄芩素孵育大鼠心脏微血管内皮细胞24 h,MTT法检测细胞活力;硝酸还原酶法检测细胞上清NO含量;ELISA法检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达。汉黄芩素孵育大鼠胸主动脉环24h,去甲肾上腺素(1×10~(-6) mol/L)收缩血管后应用乙酰胆碱(1×10~(-8)、1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L)舒张血管,检测血管张力变化。结果与对照组比较,汉黄芩素处理细胞后,各组细胞活力没有显著变化。与对照组比较,汉黄芩素(5、20μmol/L)显著促进NO的产生(P0.01),但亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)可以抑制汉黄芩素的这种作用(P0.01)。汉黄芩素(0.5、5、20μmol/L)可以浓度相关性地促进心脏微血管内皮细胞eNOS蛋白表达,与对照组比较,汉黄芩素产生的eNOS蛋白水平差异非常显著(P0.01)。乙酰胆碱(1×10~(-8)、1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L)能够浓度相关性地舒张离体大鼠胸主动脉环。与对照组比较,汉黄芩素(20μmol/L)孵育血管24h,能显著增加乙酰胆碱对大鼠胸主动脉血管环的舒张程度,降低胸主动脉血管环的收缩率(P0.01、0.05)。结论汉黄芩素可能通过促进血管内皮细胞eNOS蛋白表达和NO产生这一途径增强乙酰胆碱对血管的舒张作用。     

地西泮减弱5-羟色胺收缩老年大鼠离体胸主动脉的作用及其机制

目的观察地西泮(DZP)对5-羟色胺(5-HT)诱导收缩的老年大鼠离体胸主动脉环的作用,并探讨其可能的机制。方法采用离体血管张力记录法,观察5-HT对老年大鼠离体胸主动脉环的作用及DZP的影响。结果①5-HT[(0.01～3)×10-5mol/L]对老年大鼠离体胸主动脉环具有浓度依赖性的收缩作用,血管环收缩达最大收缩50%时的药物浓度(EC50)值约为3×10-6mol/L。②在内皮完整的血管环,DZP3×10-6mol/L使5-HT诱导收缩的浓度-效应曲线的最大收缩幅度(Emax)显著降低(与溶剂对照组相比,P<0.01),但去内皮后,DZP对5-HT的缩血管作用无明显影响(P>0.05)。③一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)能减低DZP对5-HT诱导的缩血管作用的减弱作用(P<0.01),但环氧合酶抑制剂吲哚美辛、外周型苯二氮受体(PBR)特异性阻断剂PK11195对DZP的作用无显著影响(P>0.05)。结论 5-HT对老年大鼠离体胸主动脉环具有浓度依赖性的收缩作用。DZP能显著减弱5-HT的缩血管作用,该作用具有内皮依赖性,与内皮产生的一氧化氮有关,但与前列环素无关。DZP的作用不依赖于PBR。     

1例苯巴比妥致癫痫患儿白细胞减少的病例分析

目的:为使用抗癫痫药物导致白细胞减少的患儿提供用药参考。方法:回顾性分析1例患儿的临床病例资料,根据不良反应关联性评价Naranjo的APS评分法分析引起不良反应的药物。结果:Naranjo评分为6分,该患儿出现白细胞减少很可能与苯巴比妥相关。停用苯巴比妥第2天WBC 3.83×10~9·L^(-1),RBC 4.24×10^(12)·L^(-1),Hb 130g·L^(-1),PLT202×10~9·L^(-1);停药第8天WBC 4.53×10~9·L^(-1),RBC 4.16×10^(12)·L^(-1),Hb 126g·L^(-1),PLT 199×10~9·L^(-1),白细胞数量恢复正常。结论:临床药师将药学理论知识和临床实践相结合,根据多种抗癫痫药物同时使用时的调整原则以及发生不良反应时的处理方法,给出合理的建议。     

高血压对大鼠脑基底动脉收缩和钠泵活性的影响

目的探讨高血压对大鼠脑血管收缩性的影响及其与钠泵活性的关系。方法取♂Wistar大鼠(WR)和自发性高血压大鼠(SHR)基底动脉环,通过Multi Myograph张力换能系统记录血管张力变化,比较两种大鼠离体脑动脉对KCl和5-羟色胺(5-HT)的收缩反应,分析高血压病变对脑血管收缩性和钠泵活性的影响。结果与WR基底动脉相比,SHR基底动脉的KCl和5-HT量效曲线明显右移,再复K+所致血管舒张作用减弱,提示高血压病变可明显降低脑血管钠泵活性及KCl和5-HT的收缩反应;哇巴因(Ouabain,OUA)浓度依赖性收缩SHR脑血管,其量效关系曲线可经两点结合模型进行最佳拟合,Kd分别为:1.7×10~(-8)mol·L~(-1)和1.6×10~(-5)mol·L~(-1),表明SHR脑基底动脉上存在高、低亲和力两种不同功能的钠泵。用5×10~(-7)mol·L~(-1)和10~(-4)mol·L~(-1)的OUA分别抑制高、低亲和力钠泵,仅能在SHR而非WR脑血管明显左移KCl和5-HT量效曲线,表明OUA可明显增强KCl和5-HT对脑血管的收缩作用,且OUA增强5-HT收缩SHR脑血管的作用呈明显的浓度依赖性(r=0.9393,P<0.05);在SHR脑血管,这两个浓度OUA对KCl量效曲线的左移幅度无明显差别,而对5-HT收缩量效曲线的左移幅度却有明显不同,提示仅高亲和力钠泵介导了SHR脑血管对KCl的收缩反应,而SHR脑血管对5-HT的收缩反应则由高、低亲和力两种钠泵共同参与。结论高血压病变可明显降低脑血管对血管收缩剂的反应性,其机制可能与高血压所致钠泵活性降低或钠泵对OUA敏感性增加有关。     

鸡豆黄素A对狗体外冠状动脉血管的舒张作用及其机制

目的 以血管张力变化为指标,对鸡豆黄素A的心血管保护作用及相关机制进行探讨.方法 制备狗的冠状动脉血管环,固定于恒温浴槽内,待平衡后,加入各种药物观察血管张力的变化.结果 (1)5-羟色胺(5-HT)(10-7～10-5 mol· L-1)使冠状动脉血管环产生明显的剂量依赖性收缩,分别用40 nmol· L-1、1 μmol· L-1鸡豆黄素A温育预处理后,5-HT量效收缩明显被抑制,量效收缩曲线明显右移.(2)鸡豆黄素A可使60 mmol· L-1 KCl预收缩冠状动脉血管环产生明显剂量依赖的舒张作用,缺失内皮细胞或分别加入一氧化氮合酶抑制剂Nω-L-硝基精氨酸1×10-4 mol· L-1,吲哚美辛1×10-5 mol· L-1,甲烯蓝1×10-5mol·L-1温育预处理,鸡豆黄素A对60 mmol· L-1 KCl预收缩冠状动脉血管环产生的量效舒张作用无明显改变(P＞0.05).结论 (1)鸡豆黄素A使血管环对5-HT的敏感性和最大收缩明显降低.(2)鸡豆黄素A对冠状动脉血管的舒张作用与内皮细胞及其释放的一氧化氮无关,与前列腺素类物质亦无关.     

银杏内酯B对离体大鼠胸主动脉收缩活动的影响

目的:研究银杏内酯B对大鼠离体胸主动脉血管环收缩活动的影响.方法:采用离体血管灌流的方法,观察银杏内酯B对不同浓度氯化钾、去甲肾上腺素引起的大鼠胸主动脉收缩反应的影响,以收缩率为指标.结果:银杏内酯B高浓度(0.1 g·L-1)和中浓度(0.03 g·L-1)对KCl(60 mmol·L-1)引起的胸主动脉收缩具有拮抗作用(P<0.05,P<0.01),并能使20 mmol·L-1～60 mmol·L-1氯化钾对胸主动脉的收缩作用减弱或明显减弱(P<0.05,P<0.01);银杏内酯B高浓度(0.1 g·L-1)和中浓度(0.03 g·L-1)对去甲肾上腺素(10-5 mol·L-1)引起的大鼠胸主动脉收缩具有拮抗作用(P<0.05,P<0.01),并能使0.1～10 μmol·L-1 NE对胸主动脉的收缩作用减弱或明显减弱(P<0.05,P<0.01).结论:银杏内酯B对氯化钾、去甲肾上腺素引起的大鼠离体胸主动脉血管环收缩活动有明显拮抗作用.     

pH值为6.9时比索洛尔对老年大鼠胸主动脉张力的作用机制研究

目的观察比索洛尔在pH值为7.4和6.9的情况下,对去甲肾上腺素预收缩的离体老年大鼠胸主动脉环的作用及机制。方法采用离体血管张力实验方法,观察比索洛尔对老年大鼠离体胸主动脉环张力的影响以及在pH改变后的变化。结果 (1)pH值为6.9和7.4时,累积浓度的比索洛尔对去甲肾上腺素预收缩的血管环有浓度依赖性的舒张作用。(2)比索洛尔在pH值为6.9时对去甲肾上腺素预收缩血管的最大舒张百分比大于其在pH值为7.4时的舒血管作用。(3)KATP通道阻断剂格列苯脲(1×10-5mol/L)在pH值为6.9的情况下抑制了比索洛尔的舒张作用。结论 (1)比索洛尔在pH值为6.9时对去甲肾上腺素预收缩的老年大鼠离体胸主动脉环有浓度依赖性的舒张作用,且其舒张作用强于在pH值为7.4时。(2)比索洛尔对老年大鼠胸主动脉的舒张作用在pH值为6.9时可能与KATP通道有关。     

布比卡因增强α_1受体介导大鼠胸主动脉收缩反应中血管内皮的作用

目的分析血管内皮在布比卡因(bupivacaine,BUP)增强苯肾上腺素(phenylephrine,Phe)诱发血管收缩反应中的作用。方法制备大鼠离体胸主动脉血管环,采用机械损伤或工具药干扰血管内皮的舒张功能。记录Phe作为α1受体激动剂诱发的动脉收缩反应。结果 BUP(30μmol·L~(-1))与内皮完整血管标本孵育20 min后,Phe诱发的血管收缩Emax值为(2.50±0.05)g,明显高于对照组标本的Emax值[(2.22±0.07)g,P<0.01]。孵育时间缩短至5、10或15min时,BUP无此增强效应。在内皮损伤动脉标本,同浓度BUP孵育20 min时,轻度但明显抑制低浓度Phe诱发的血管收缩反应(P<0.05)。在吲哚美辛、Ch TX、apamin和LNAME预处理的内皮完整血管标本上,ACh诱发的血管舒张反应消失;此时BUP(30μmol·L~(-1)孵育20 min)对Phe诱发的血管收缩反应无明显影响(P>0.05)。结论在大鼠离体胸主动脉,BUP对α1受体介导收缩的增强作用与其抑制血管内皮的舒张功能密切相关,这种抑制作用间接导致Phe诱发的血管收缩反应明显增强。     

蜂胶总黄酮的舒血管效应及其机制探讨

目的:探讨蜂胶总黄酮(total flavonoids of propoli,TFP)对大鼠的胸主动脉舒张作用及其可能作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为4组(n=6):即对照组(CG),TFP低、中、高剂量(50、100、200mg/kg)组(即LG、MG和HG组),各组大鼠按TFP低、中、高剂量等容积灌胃(1次/d),CG大鼠等容积生理盐水灌胃(1次/d),连续4周。主动脉取血3~5mL测量血小板聚集率,制备离体胸主动脉环,经生物信号采集分析系统记录主动脉环张力变化,观察各组大鼠血管环对去氧肾上腺注射液(PE)和KCl刺激的收缩反应,同时检测各组大鼠胸主动脉环匀浆一氧化氮(NO)含量及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。结果:与CG组相比,TFP呈剂量依赖性抑制大鼠血小板聚集率;对内皮完整的主动脉环,在KCl(12~60mmol/L)预收缩的基础上,TFP呈剂量依赖性舒张作用;在PE(1×10-6 mol/L)预收缩的基础上,TFP也呈剂量依赖性改善乙酰胆碱(ACh)(1×10-8~1×10-5 mol/L)的舒张效应;非选择性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)(10-4 mol/L)或环氧合酶抑制剂吲哚美辛(Indo,10-5 mol/L)预孵育后,TFP对PE(10-8~10-5 mol/L)诱导下的各组血管环的收缩反应均增强。生化检查结果显示,与CG组相比,TFP呈剂量依赖性提高胸主动脉环iNOS活性和NO含量。结论:TFP呈剂量依赖性抑制大鼠血小板聚集率;TFP剂量依赖性改善大鼠血管的舒张功能,提示其舒张效应是通过改善血管内皮细胞功能及阻滞电压门控Ca2+通道有关,改善血管内皮细胞功能可能是使其增加释放NO和前列环素(PGI2)实现的,至于其阻滞Ca2+通道机制有待进一步探讨。     

根皮素的心血管保护作用研究

目的 研究根皮素对狗冠状动脉舒张特征的影响及其机制.方法 制备狗冠状动脉血管环,固定于盛有K-H液的恒温肌槽内,并观察等长时血管张力的变化.结果 10 μmol·L-1或30 μmol· L-1 L根皮素使KCl及无钙K-H液中CaCl2量效曲线明显右移,使血管环敏感性和最大收缩反应明显降低.30 μmol· L-1根皮素在50 mmol· L-1 KCl预收缩的离体冠脉血管环产生一个明显的急性舒张,加入Nω-L-硝基精氨酸1×10-4mol·L-1、普蔡洛尔1×10-5 mol· L-1、亚甲蓝1×10-5 mol·L-1、二硝酸异山梨醇酯(吲哚美辛)1×10-5 mol·L-1及去内皮细胞后,根皮素的急性舒张血管作用不受影响.结论 根皮素在离体冠脉血管环的舒张效应主要是通过抑制电压依赖性钙通道实现的.根皮素的这种舒张效应与NO、内皮、β肾上腺素受体和前列腺素类皆无关.     

导电聚合物膜修饰电极用于对乙酰氨基酚和抗坏血酸的同时测定

目的:研究对乙酰氨基酚和抗坏血酸在4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)导电聚合膜修饰电极上的电化学行为,建立同时测定对乙酰氮基酚和抗坏血酸含量的电化学分析新方法。方法:采用循环伏安法研究对乙酰氨基酚和抗坏血酸在膜修饰电极上的电化学行为,以差示脉冲伏安对二者含量进行测定。结果:聚 PAR 膜修饰电极对对乙酰氨基酚和抗坏血酸有很强电催化作用,明显增强了电极反应的可逆性。在 pH 6.0磷酸盐缓冲液中,对乙酰氨基酚氧化峰电流与其浓度在1.0×10~(-8)～1.5×10~(-5),5×10~(-5)～4×10~(-4)mol·L~(-1)范围内呈良好的线性关系,抗坏血酸氧化峰电流与其浓度在1.0×10~(-6)～3.0×10~(-4)mol·L~(-1)范围内呈良好的线性关系,检出限分别为5.0×10~(-9)mol·L~(-1)和5.0×10~(-7)mol·L~(-1)。结论:该修饰电极可以对对乙酰氨基酚和抗坏血酸进行单独或同时的测定,并用于实际样品维 C 银翘片中对乙酰氨基酚和抗坏血酸的含量检测,结果令人满意。     

酸性染料比色法测定阿昔洛韦

目的:建立比色法测定阿昔洛韦浓度的方法,并用于实际药品、血浆及尿液中阿昔洛韦的测定。方法:在 NaH_2PO_4-Na_2HPP_4缓冲介质中,阿昔洛韦(ACV)与酚红(PR)、氯酚红(CPR)反应,形成离子缔合物,溶液颜色发生明显改变,最大吸收波长分别为558 nm(PR—ACV 体系)、574 nm(CPR—ACV 体系),在此波长处阿昔洛韦的浓度与增色程度呈良好线性关系。结果:在 PR—ACV、CPR—ACV 体系的最大吸收波长处,ACV 的浓度分别在0～2.86×10~(-5)mol·L~(-1)、0～2.37×10~(-5)mol·L~(-1)范围内遵守比尔定律,表观摩尔吸光系数分别为1.77×10~4L·mol~(-1)·cm~(-1)、1.64×10~4L·mol~(-1)·cm~(-1),检出限分别为8.21×10~(-7)mol·L~(-1)、4.50×10~(-7)mol·L~(-1)。结论:方法具有较高的灵敏度和良好的选择性,用于实际药品、血浆及尿液中阿昔洛韦的测定,结果满意。     

邻苯二甲酸二丁酯的收缩血管作用及其机制

目的研究邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)对大鼠动脉血管的作用,并探讨其可能机制。方法采用离体大鼠胸主动脉环灌流模型,观察DBP对动脉血管的收缩效应及其内皮的参与性,并观察相关信号途径工具药的影响。结果 DBP(10-5¹0-3mol·L-1)浓度依赖性收缩血管环,且去内皮血管比内皮完整血管收缩更明显(P<0.05);无Ca2+液中,DBP(10-3mol·L-1)引起的去内皮血管收缩明显低于正常K-H液中的血管收缩(P<0.01),与对照组比较无差异;维拉帕米(10-7mol·L-1)预处理后,DBP(10-3mol·L-1)引起的血管环收缩幅度低于单用DBP组(P<0.01);一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(LNAME,10-4mol·L-1)预处理内皮完整主动脉环,引起的血管收缩幅度明显高于单用DBP组(P<0.01),而前列环素合成酶抑制剂吲哚美辛(Indo,10-5mol·L-1)预处理对血管收缩幅度无明显影响。结论 DBP具有引起血管收缩作用,初步机制可能涉及细胞膜电压门控性钙通道及钙离子内流,NO可能参与DBP的血管反应过程。     

多柔比星对大鼠离体胸主动脉和颈总动脉血管环的舒张作用及其机制

目的研究多柔比星(DOX)对大鼠离体胸主动脉和颈总动脉血管环的作用及其机制。方法采用离体血管环恒温灌流系统,通过累积加药法每10 min加入DOX依次使其终浓度递增为1,3,10,30和100μmol·L~(-1),观察其对基础状态、去氧肾上腺素(PE,1μmol·L~(-1))和氯化钾(KCl,60 mmol·L~(-1))预收缩的胸主动脉及颈总动脉血管环的作用,并采用左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、4-氨基吡啶(4-AP)、溴化四乙铵(TEA)、氯化钡(BaCl_2)、格列苯脲(Gli)、吲哚美辛(Indo)和普萘洛尔预处理探讨其对血管作用的可能机制。结果 DOX对基础状态下及KCl预收缩的胸主动脉和颈总动脉血管环张力无明显影响;DOX可浓度依赖性地舒张PE预收缩的内皮完整胸主动脉和颈总动脉环(P<0.05),且其对去内皮胸主动脉血管环也有舒张作用,但舒张程度弱于内皮完整组(P<0.05);一氧化氮合酶抑制剂L-NAME 0.1 mmol·L~(-1)、电压依赖性钾通道(K_V)抑制剂4-AP 1 mmol·L~(-1)、钙敏感性钾通道(K_(Ca))抑制剂TEA 1 mmol·L~(-1)和内向整流型钾通道(K_(IR))抑制剂BaCl_21 mmol·L~(-1)均可明显抑制DOX的舒血管作用(P<0.05),环氧化酶抑制剂Indo 0.01 mmol·L~(-1)、ATP敏感性钾通道抑制剂Gli 0.01 mmol·L~(-1)和β肾上腺素能受体阻滞剂普萘洛尔0.01 mmol·L~(-1)对DOX舒血管作用无明显影响;DOX 1,10和100μmol·L~(-1)可浓度依赖性减弱无钙液中PE诱发的血管收缩,并可使氯化钙量效曲线右移。结论 DOX对大鼠离体胸主动脉和颈总动脉血管环有浓度依赖性舒张作用,其舒血管机制可能与血管内皮细胞一氧化氮/cGMP途径、K_V、K_(Ca)、K_(IR)、血管平滑肌细胞内钙释放和外钙内流有关。     

RP-HPLC测定盐酸奈必洛尔含量和有关物质

目的建立反相高效液相色谱法测定盐酸奈必洛尔含量和有关物质。方法采用的色谱柱为ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇为溶剂,进样浓度:0.5 g.L-1,0.05 mol.L-1的磷酸盐缓冲液(2%三乙胺,pH=3.5)∶乙腈∶甲醇=200∶115∶40为流动相;检测波长为280 nm。结果盐酸奈必洛尔峰与杂质峰分离良好,盐酸奈必洛尔浓度在31.71～158.55 mg.L-1与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 7),最低检检测限为5 ng。方法精密度RSD为0.35%。结论采用反相高效液相色谱法测定盐酸奈必洛尔含量及其有关物质方法快速简便,结果准确。也可用于该品制剂中有关物质和含量的测定。     

铂纳米/碳纳米管电化学方法研究及血样中Sal和5-HT的测定北大核心CSCD

目的：建立测定四氢异喹啉（Sal）和五羟色胺（5-HT） 的电分析化学新方法。方法：首先通过电化学方法制备了铂纳米/碳纳米管复合材料（Pt NPs/MWCNTs） 修饰的玻碳电极,并通过扫描电镜研究了复合材料形貌,同时也研究了Sal和5-HT在Pt NPs/MWCNTs修饰电极上的电化学行为。结果：Sal和5-HT的电化学氧化信号有着明显的分离,对于Sal,峰电流与4.8×10-7~5.2×10-5 mol·L-1呈线性变化（r=0.9995）,检测限为1.6×10-7 mol·L-1 （S/N=3）;而对于5-HT,峰电流与5-HT在2.7×10-7~3.07×10-5 mol·L-1范围内呈线性增加（r=0.9993）,检测限为9.0×10-8 mol·L-1 （S/N=3）。结论：本方法可以应用于血样中Sal和5-HT的同时灵敏检测,结果令人满意。     

咪达唑仑舒张大鼠离体胸主动脉环的机制研究

目的观察咪达唑仑对大鼠离体胸主动脉环张力的影响,并探讨其作用机制。方法采用离体血管张力试验方法,观察咪达唑仑在3×10-6,1×10-5,3×10-5,1×10-4mol/L浓度时,对去甲肾上腺素(NE,1×10-6mol/L)诱发大鼠离体胸主动脉环收缩的影响。观察内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME,1×10-4mol/L)、一氧化氮供体L-精氨酸(L-Arg,1×10-5mol/L)、特异性钙非依赖可诱导型(iNOS)抑制剂N-3-氨甲基-苄基-乙酰氨(1400W,1×10-5mol/L)对咪达唑仑作用的影响,以及咪达唑仑对血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩的影响。结果以上浓度的咪达唑仑对NE预收缩的大鼠离体胸主动脉环有舒张作用。用L-NAME、L-NAME合用L-Arg预处理的血管环对咪达唑仑的舒张反应与未经处理时比较,差异有统计学意义(P<0.05),L-Arg和1400W对咪达唑仑的舒血管作用没有影响(P>0.05)。1×10-4mol/L的咪达唑仑可明显抑制血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩(P<0.05)。结论咪达唑仑对大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用,其舒张反应可能与内皮产生的一氧化氮有关,通过抑制外钙内流和内钙释放发挥舒张作用。     

羟基红花黄色素A促犬胸主动脉内皮细胞增殖及其机制初探

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响,且探讨其增殖作用是否与血管内皮生长因子(VEGF)有关。方法采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;分别在常氧(21%)低氧(10%)两种条件下,以噻唑蓝(MTT)法观察HSYA对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,VEGF作为阳性对照;并且观察VEGF抗体及其两种酪氨酸受体(Flt1和KDR)的抗体对HSYA促VEC增殖及分泌VEGF的影响,采用ELISA法检测VEGF水平。结果HSYA1×10-3mol·L-1、1×10-4mol·L-1在常氧条件下孵育72h、96h和120h或在低氧条件下孵育24h、48h、72h对VEC都有明显促增殖作用,并具有浓度和时间依赖性,HSYA1×10-3mol·L-1与VEGF2.6×10-7mol·L-1在同样条件下对VEC的促增殖作用强度相当;10μg·mL-1的VEGF、Flt1和KDR的抗体均能明显抑制1×10-3mol·L-1HSYA的促VEC增殖作用,尤其10μg·mL-1的VEGF抗体和Flt1抗体能明显抑制1×10-3mol·L-1HSYA的促VEC分泌VEGF作用。结论在常氧低氧两种条件下,HSYA均具有明显促VEC增殖作用,尤其在低氧条件下更为明显;而且HSYA的促VEC增殖作用可能与VEGF或VEGF受体有关。     

米非司酮对胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制

目的：考察米非司酮对单用或合并使用胰岛素和地塞米松诱导的胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法：1）将常规培养的人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,胰岛素（5×10^-6、5×10^-1和5×10^-8mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5和3×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6和1．5×10^-7mol·L^1）组。培养24或48h后,测定各组细胞葡萄糖消耗量,以考察人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗的形成情况,并通过胰岛素刺激和模型持续时间研究进一步验证造模效果。2）将人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6、1×10～×10^-7mol·L^1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-5mol·L^1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组。分别加入不同浓度的药物培养24或48h,然后对各组细胞葡萄糖消耗量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位进行测定,以考察细胞功能状态变化。结果：1）胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）作用24h可诱导人脐静脉内皮细胞发生胰岛素抵抗并可维持24h,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）作用48h可诱导细胞的胰岛索抵抗并可维持36h,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6molL^-1）共同作用48h可诱导细胞的胰岛素抵抗并可维持24h。2）地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组,以及胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组人脐静脉内皮细胞的葡萄糖摄取量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位分别显著高于地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组和胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）组;胰岛素（5×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^-1）组细胞的上述指标则与胰岛素（5××10^-7mol·L^-1）组无显著性差异。结论：胰岛素、地塞米松单独使用及合用均可诱导人脐静脉内皮细胞出现胰岛素抵抗并持续一定时间;米非司酮可改善地塞米松及地塞米松＋胰岛素诱导的胰岛素抵抗内皮细胞的功能紊乱,而对胰岛素诱导的胰岛素抵抗无改善作用。