骨灵汤对绝经期前后骨质疏松患者血清IGF-1、TGFβ1与OPG／RANKL水平的影响

目的观察绝经期前后骨质疏松（osteoporosis,OP）患者血清胰岛素样生长因子（IGF-1）、转化生长因子（TGFβ1）与OPG-RANKL系统的关系以及骨灵汤对IGF-1和TGFβ1表达的影响。方法将80例OP患者分为绝经前组和绝经后组,每组各40例,均给予抗OP中药骨灵汤（骨碎补、鹿角胶、菟丝子等）治疗。采用ELISA方法检测血清TGFβ1、OPG和RANKL。采用包被放免法（IRMA）检测血清IGF-1。结果绝经后组血清IGF和RANKL的水平显著低于绝经前组（P〈0．01）,绝经后组血清OPG水平显著高于绝经前组（P〈0．01）;血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清OPG浓度呈负相关,相关系数为r=0．003、P=-0．622和r=0．000、P=-0．713;血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清RANKL浓度呈正相关,相关系数为r=0．012、P=0．549和r=0．001、P=0．667;绝经前妇女骨灵汤治疗后,血清IGF和TGFβ1水平升高（P〈0．05）,OPG水平明显升高（P〈0．01）,RANKL浓度下降（P〈0．05）;绝经后妇女骨灵汤治疗后IGF、TGFβ和OPG水平升高（P〈0．05）,RANKL浓度下降（P〈0．05）。结论骨灵汤可以通过上调IGF-1和TGFβ1的表达,影响OPG-RANKL系统,从而调节骨代谢,达到防治OP的目的。     

高盐饮食通过激活破骨细胞促进小鼠骨质疏松发生

目的　明确高盐饮食对小鼠破骨细胞分化的影响及其促进骨质疏松的作用。 方法　获得C57小鼠骨髓单个核细胞,在体外定向诱导破骨分化体系中比较对照组（未加入氯化钠）、低剂量组（20 mmol/L氯化钠）及高剂量组（40 mmol/L氯化钠）破骨细胞生成数量;将24只C57小鼠随机平均分为正常组（普通饲料喂养）、卵巢切除组（切除卵巢,普通饲料喂养）、高盐饮食组（切除卵巢,8%高盐饲料+生理盐水喂养）,6周后分析3组左侧股骨破骨细胞生成数量并测定血清骨吸收及骨保护指标水平;选择右侧股骨进行显微CT扫描,比较3组骨组织形态计量学参数。 结果　体外高盐状态破骨细胞生成数量明显增加;体内高盐饮食组破骨细胞生成数量明显高于其它两组,I型胶原羧基端肽和核因子κ B受体活化因子配体不同程度增加,骨保护素水平显著降低,骨体积分数、骨皮质厚度、骨小梁数量和骨小梁厚度下降尤为明显,骨表面积/骨体积、骨小梁分离度和骨小梁模式因子不同程度增高。 结论　高盐饮食可通过激活小鼠破骨细胞分化及其功能活化增强骨吸收作用,进而诱导骨质疏松发生。     

仙珍骨宝干预泼尼松诱发大鼠的骨丢失

背景：仙珍骨宝胶囊由蛇床子、淫羊藿等制成,对糖皮质激素、维甲酸等诱发的骨质疏松有一定的预防作用。 目的：建立泼尼松诱发大鼠骨质疏松模型,通过骨形态计量学和骨生物力学等方法探讨仙珍骨宝对大鼠不同部位骨骼的影响。 方法：32只SD大鼠随机分成对照组、模型组和仙珍骨宝高、低剂量组。后3组给予泼尼松3.5 mg/(kg•d)灌胃建立骨质疏松模型。仙珍骨宝高、低剂量组大鼠在泼尼松灌胃1 h后给予仙珍骨宝胶囊0.95 g/(kg•d)、0.475 g/(kg•d)。 结果与结论：与对照组比较,模型组大鼠股骨骨密度、弹性载荷、最大载荷和断裂载荷均下降,胫骨上段动态参数标记周长百分数、骨表面形成率、骨转换率均降低,但静态参数骨小梁面积百分数、骨小梁数量、骨小梁厚度和骨小梁分离度无明显变化。胫骨中段皮质骨形态计量学参数均无明显变化。与模型组比较,仙珍骨宝高剂量组股骨密度、骨生物力学参数,胫骨上段标记周长百分数、骨表面形成率和骨转换率增加,但胫骨中段的骨形态计量学参数无明显变化。与模型组比较,仙珍骨宝低剂量组各项参数均无明显变化。提示高剂量仙珍骨宝促进骨形成,可预防泼尼松所致大鼠股骨骨密度及生物力学的降低,但对胫骨中段皮质骨无明显影响。     

贝加灵喷雾剂对大鼠全脑缺血的保护作用

目的研究贝加灵喷雾剂对大鼠全脑缺血的保护作用，并初步探讨其作用机制。方法SD大鼠随机分为两大组，即A组（给药7d）与B组（给药15d），每大组分为7小组，即假手术组、模型组、贝加灵高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组和空白乳剂组，每组12只。采用双侧动脉阻断法建立大鼠全脑缺血模型，观察大鼠脑组织病理形态学改变，测定大鼠脑指数，并利用分光光度法测定大鼠缺血脑组织均浆液中超氧化物歧化酶、丙二醛和ATP酶的含量。结果与模型组相比，贝加灵高、中、低剂量组脑指数显著降低（P〈0．05，P〈0．01）；给药组脑组织病理形态显著改善；脑组织SOD活力、ATP酶含量显著升高（P〈0．01），MDA含量显著降低（P〈0．01）；与治疗7d比较，治疗15d的脑指数与ATP酶含量显著降低（P〈0．05），MDA含量显著升高（P〈0．05），SOD水平则无明显差异。结论贝加灵喷雾剂对大鼠全脑缺血有一定修复保护作用，可能是通过抗自由基和改善能量代谢来发挥这一作用。     

酒精摄入对小鼠不同骨骼形态学参数的影响

目的：通过骨组织形态计量学方法探讨和比较酒精摄人对小鼠松质骨和皮质骨形态学参数的影响。方法：清洁级昆明种小鼠30只随机分成3组，基础对照组，正常对照组（蒸馏水灌胃），酒精组给予50％（体积分数）乙醇，按4g·kg^-1·d^-1剂量灌胃，共60d，实验结束后取小鼠胫骨上段、中段经不脱钙骨切片进行骨组织形态计量学参数测量。结果：与正常组比较，酒精组松质骨的形态学参数骨小梁面积百分数（％Tb．Ar）明显降低（-66％，P〈0．05），骨形成率（BFR／TV）降低（-35％，P〈0．05）；皮质骨面积百分率（％Ct．Ar）降低（-7％，P〈0．05）及髓腔面积百分率增加（％Ma．Ar＋32％，P〈0．05），骨内膜骨形成率E—BFR／BS降低（-41％，P〈0．05）。结论：长期摄入酒精使小鼠皮质骨和松质骨骨量均下降，微观结构改变，骨质量下降。     

强骨康疏胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨细微结构及骨代谢的影响

目的:观察强骨康疏胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度、OPG及RANKL蛋白表达、骨组织形态计量学参数及骨组织细微结构的影响。方法:制备去卵巢骨质疏松大鼠模型后,分组:正常对照组、模型空白组、中药低剂量预防组、中药高剂量预防组、雌激素预防组。给药1月后,检测各组股骨骨密度值,显微镜下观察股骨骨小梁的结构变化,并检测骨组织形态计量学参数。采用免疫组织化学染色法检测大鼠股骨OPG及RANKL蛋白表达。结果:模型空白组大鼠股骨骨密度减少,骨小梁厚度、面积、面积百分数均减少,骨小梁间距增大,股骨OPG蛋白平均光密度值显著降低,RANKL蛋白平均光密度值明显增高;雌激素预防组、中药低剂量组、中药高剂量组对上述指标均有明显改善。结论:强骨康疏胶囊能有效提高骨量,维持骨小梁立体空间结构,改善大鼠股骨远端松质骨的显微结构,能够提高骨OPG蛋白表达及抑制RANKL蛋白表达。     

应力缺失性骨质疏松模型大鼠p38信号通路以及通络生骨胶囊的干预

背景：应力缺失是导致运动不足人员骨质疏松发生的主要原因。通络生骨胶囊具有促进骨生成的作用,其对应力缺失模型大鼠p38通路的影响未见报道。 目的：观察应力缺失性骨质疏松大鼠p38的变化,以及通络生骨胶囊对其改善作用。 方法：将SD大鼠随机分为4组,除正常组外以鼠尾悬吊法制备动物应力缺失模型,药物低、高剂量组从造模次日起每日灌胃给予0.6,1.2 g/kg的通络生骨胶囊。造模21 d,取腿骨,进行形态学观察;分离成骨细胞,Western blot 法测定p38蛋白含量。 结果与结论：与正常组比较,模型组成骨细胞显著减少,骨小梁面积及其百分比、骨小梁厚度等显著降低,p38表达总量显著升高,但磷酸化p38与对照组无差异。高剂量的通络生骨胶囊可显著增加应力缺失大鼠成骨细胞个数,增大其骨小梁面积,促进磷酸化p38的表达;而低剂量的通络生骨胶囊则降低了磷酸化p38的表达。说明应力缺失可导致大鼠骨质疏松,高剂量的通络生骨胶囊可通过增强p38磷酸化水平预防应力缺失导致的骨质疏松。     

全身振动训练对骨质疏松大鼠股骨生物力学与Wnt3a蛋白表达的影响

目的 探讨全身振动训练对股骨组织生物力学与Wnt3a蛋白表达的影响。方法 取雌性SD大鼠48只，随机分为假手术组、骨质疏松组与全身振动组，每组16只。采用Micro-CT检测骨形态计量学参数，三点弯实验检测骨结构力学参数与材料力学参数，Western blotting检测Wnt3a、β-catenin蛋白表达量，qRT-PCR检测Wnt3a、β-catenin、cyclin D1、Tcf1基因表达量。结果 与假手术组相比较，骨质疏松组骨密度、骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度及皮质骨厚度均降低，骨小梁间隙升高；与骨质疏松组比较，全身振动组骨密度、骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度及皮质骨厚度均升高，骨小梁间隙降低。与假手术组比较，骨质疏松组最大载荷、弹性载荷、最大挠度降低；与骨质疏松组比较，全身振动组最大载荷、弹性载荷、最大挠度升高。与假手术组比较，骨质疏松组最大应力、弹性应力、最大应变和弹性模量降低；与骨质疏松组比较，全身振动组弹性应力、最大应变和弹性模量升高。与假手术组比较，骨质疏松组Wnt3a、β-catenin蛋白及基因表达降低，cyclin D1、Tcf1基因表达量降低；与骨质疏松组比较，全身振动组Wnt3a、β-catenin蛋白及基因表达升高，cyclin D1、Tcf1基因表达量升高。结论 全身振动训练可改善骨质疏松大鼠股骨生物力学性能，提高其Wnt3a蛋白表达。研究结果为全身振动训练防治骨质疏松提供了实验室参考数据。     

松质骨骨小梁的微观构筑对骨质力学强度影响的实验研究

目的　观察骨质疏松和非骨质疏松状态的松质骨的三维微观结构对其骨强度的影响。方法　16只雌性成年绵羊随机分为去势(OVX)组（8只）和假手术(Sham)组（8只）。OVX组行双侧卵巢切除术，假手术组仅显露双侧卵巢，术前测定腰椎竹密度(BMD)。术后12个月处死动物，测定腰椎的BMD，用环钻钻取椎体松质骨，并行MicroCT分析及生物力学测试。结果　去势12个月后，OVX组的BMD较Sham组显著降低。松质骨的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)较Sham组显著降低，表面积体积比(BS/BV)和骨小梁分离度(Tb.Sp)较对照显著增高。生物力学测试表明，去势12个月后，OVX组松质骨的力学强度显著下降。骨小梁的力学强度与骨小梁厚度(r=0.945，R^2=0.886)、骨体积分数(r=0.783，R^2=0.586)及面积体积比(r=0.643，R^2=0.372)呈线性相关。结论　骨小梁的三维微观结构改变可以影响松质骨的力学强度，两者之间具有一定的线性关系。     

去睾丸大鼠骨形态计量学的研究

目的：探讨4月龄雄性大鼠去睾丸后骨量的变化，重点比较松质骨和皮质骨骨代谢的变化。方法：20只4月龄SD雄性大鼠，随机分为假手术组（A组）和去睾丸组（B组），同等条件下饲养90d后，取腰椎和胫骨中段行不脱钙制片进行骨形态计量学观察。结果：去睾丸组与假手术组比较，前者腰椎松质骨吸收增加、骨形成下降（P〈0．05），出现明显骨质疏松；皮质骨外膜的骨形成动态参数如矿化沉积率、骨形成率下降（P〈0．05），内膜骨形成和吸收均有增加趋势。结论：去睾丸90d能使大鼠松质骨出现骨质疏松，皮质骨丢失不如松质骨显著。松质骨对去睾丸敏感性比皮质骨高。     

Effects of hPTH (1-34) and Gosha-jinki-gan on the trabecular bone microarchitecture in ovariectomized rat tibia

Although human parathyroid hormone (1-34) [hPTH (1-34)] was reported to improve osteoporotic bone loss, little is known about the anti-osteoporotic effect of the traditional Chinese medicine, Gosha-jinki-gan (GJG). The purpose of this present study was to clarify and compare the effects of hPTH (1-34) and GJG on trabecular bone microarchitecture in ovariectomized (OVX) rat tibia by using microcomputed tomography (micro-CT). Thirty 12-week-old Sprague-Dawley female rats were underwent ovariectomy (OVX) or sham operation. Four weeks later, the ovariectomized rats were further divided into OVX, OVX + PTH, and OVX + GJG groups. hPTH (1-34) was administered subcutaneously at a dose of 20 microg/kg, 3 times/week, and OVX + GJG group received 0.05% aqueous solution of GJG as the only drinking fluid for 8 weeks respectively. The three-dimensional (3D) trabecular microarchitecture of the bone in the proximal tibial metaphysis was evaluated by micro-CT. In the OVX + PTH group, trabecular bone volume (BV/ TV), number (Tb.N) and thickness (Tb.Th) were significantly increased, structure model index (SMI) and trabecular bone pattern factor (TBPf) decreased when compared with the OVX group. In comparison to the OVX group, BV/TV and Tb.N were significantly greater, while SMI and TBPf had no marked changes in the OVX + GJG group. These results suggest that the administration of hPTH (1-34) restore the trabecular bone volume and improve the microstuctural property as well, while GJG reduce the bone loss without affecting its microstructural property in ovariectomized rats.     

毛蕊异黄酮防治去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的复制去卵巢大鼠骨质疏松动物模型,观察不同剂量的毛蕊异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用。方法 50只SD雌性大鼠,随机分成五组：设一假手术组;腹腔手术切除大鼠双侧卵巢,分为阴性对照组、毛蕊异黄酮低、高剂量组和雌激素对照组,分别给予标准饲料和不同剂量受试物,12周后进行骨密度、骨组织形态计量、生物力学测定,与雌激素对照,观察给与毛蕊异黄酮对绝经后骨质疏松的防治作用。结果大鼠去卵巢后骨密度显著下降,股骨的力学性能有较大变化,弯曲强度和弯曲弹性模量明显降低。给予毛蕊异黄酮后,可使骨密度显著提高（P〈0.01）,存在一定的剂量-效应关系,同时弯曲强度和弯曲弹性模量明显增加,但均低于雌激素对照组。结论通过去卵巢手术,成功建立绝经后骨质疏松动物模型;毛蕊异黄酮对去卵巢大鼠具有显著的骨保护效应,并存在一定的剂量效应关系,其作用弱于雌激素。     

非诺贝特对高甘油三酯血症并骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的探讨非诺贝特对去卵巢骨质疏松并高甘油三酯（TG）血症大鼠股骨中细胞核因子κB受体活化因子配体/护骨素（RANKL/OPG）mRNA表达的影响。方法将40只3月龄雌性SD大鼠,用果糖饲养复制高TG模型,大鼠共分为去卵巢＋果糖组、去卵巢＋果糖＋非诺贝特（FF）组、去卵巢＋普食组、假手术＋果糖组。12周后取股骨检测细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL）mRNA、护骨素（OPG）mRNA表达水平。结果去卵巢＋果糖组的TG水平高于去卵巢＋普食组（P〈0.01）,也高于去卵巢＋果糖＋FF组（P﹤0.01）;去卵巢＋果糖组RANKL mRNA/OPG mRNA水平,均高于去卵巢＋果糖＋FF组、去卵巢＋普食组和假手术＋果糖组（P〈0.01或〈0.05）。结论非诺贝特可通过降低TG而保持RANKLmRNA/OPGmRNA的平衡。     

卵巢切除及雌二醇对大鼠腰椎松质骨微结构的作用及其生物力学性能的分析

应用micro-CT获得腰椎松质骨微结构的三维参数,分析卵巢切除术与雌二醇干预对大鼠松质骨微结构及整体骨生物力学性能的作用,初步讨论松质骨微结构的改变对生物力学性能的影响.6月龄未交配雌性SD大鼠30只,随机分成3组(每组10只):假手术对照组(Sham)、去卵巢组(OVX)和去卵巢 补充雌二醇组(EBT).术后相同条件饲养5个月,取第3腰椎进行生物力学压缩试验,第4腰椎行micro-CT扫描.结果表明,与相应的Sham组比较,OVX组的BV/TV、Tb.N均明显下降,Tb.Sp和SMI明显增高.EBT组的BV/TV、Tb.N和Tb.Th均大于OVX组,Tb.Th和SMI明显小于OVX组.骨力学性能检测显示OVX组腰椎松质骨E、Fmax和σmax均明显降低,而EBT组上述骨生物力学参数均明显改善.通过micro-CT获得的骨微结构参数并结合骨力学性能检测能为合理评价骨质疏松及抗骨质疏松药物药效研究提供较好的实验依据.     

Ovariectomy-associated changes in bone mineral density and bone marrow haematopoiesis in rats

The relationship between the bone mass loss and bone marrow haematopoiesis in osteoporosis remains obscure. We selected 3-month-old female Sprague–Dawley rats and randomly divided them into six groups. Three groups were ovariectomized (OVX), while the other three groups were sham operated (Sham). Four, 8 and 12 weeks after the surgical procedure, the rats were euthanized and sampled. The left femur was used for measurement of bone mineral density (BMD). The right femur distal metaphysic cancellous bone was processed for morphological evaluation. Our results showed that the femur BMD in the 4-week OVX group was not significantly decreased compared with that of the 4-week Sham group, but that the volume of adipose tissue in the bone marrow was markedly increased. The femur BMD in the 8-week OVX group was decreased significantly compared with that of the 8-week Sham group ( P   <   0.05). Meanwhile, the volume of haematopoietic tissue decreased and the volume of adipose tissue increased. The number of megakaryocytes was decreased ( P   <   0.05). Interestingly, the osteoclasts and mast cells were increased in number in the 8-week OVX group ( P   <   0.05). These changes became obvious in the 12-week OVX rats, in contrast to the Sham groups. The volume of trabecular bone and the number of osteoblasts in the 12-week OVX group decreased significantly. Increased reticulin fibres were observed only in the 12-week OVX group. Our studies demonstrated a reciprocal correlation between bone-forming osteoblasts and marrow adipose tissue and suggest that OVX rats may be valuable as an animal model to study hypohaemopoiesis.     

Comparative effects of milk and soymilk on bone loss in adult ovariectomized osteoporosis rat

The present study was designed to investigate the comparative effects of milk and soymilk on the bone morphology of ovariectomized rat model with postmenopausal osteoporosis. Fourty 12-week-old female Spraque-Dawley rats were randomly divided into the following 5 groups: intact control (control), sham-operated (sham), ovariectomized (OVX), ovariectomized and fed milk (milk), ovariectomized and fed soymilk (soymilk) groups. Rats of OVX, milk and soymilk groups were bilaterally ovariectomized. Milk or soymilk of 3 ml was administered by gavage via an intragastric tube per day for 6 weeks. The distal femoral metaphysis was studied morphologically, together with bone mineral density (BMD), serum parathyroid hormone (PTH) and estradiol levels. In the OVX group, the trabecular bone volume was significantly reduced. The percentage area of resorbing surface was high. In the soymilk group, the trabecular bone volume was 68% higher and the percentage area of resorbing surface was 18% lower as compared with the OVX group. The serum estradiol level rose 48% and the serum PTH level fell 26% in the soymilk group. In the milk group, the trabecular bone volume had the tendency to be high, but there was no significant change of the bone morphology. The present study provides certain evidence that the soymilk has beneficial effects in preventing bone loss in rats induced by ovarian hormone deficiency.     

运动联合福善美对去卵巢大鼠骨密度和神经传导的影响

目的: 观察运动是否可增强福善美对卵巢切除大鼠骨质疏松的治疗作用。方法: 将90只6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham,18只)和卵巢切除模型组(OVX,72只)。大鼠卵巢切除8周后,测定大鼠第4腰椎骨密度(BMD)和血清雌二醇含量。随后,存活的OVX大鼠分为模型组(OVX)、福善美治疗组(OVX+FOX)、运动治疗组(OVX+EX)和福善美与运动联合治疗组(OVX+FOX+EX),分别给予1 mg·kg^-1·d^-1福善美灌胃和(或)跑台运动干预治疗12周后,双能X线骨密度仪测定各组大鼠第4腰椎BMD;肌电图机检测大鼠左侧股神经传导速度(MCV)、运动末端潜伏期(ML)和复合肌肉动作电位(CMAP);ELISA法测定大鼠血清Ⅰ型前胶原羧基端前肽(PICP)及Ⅰ型胶原羧基端交联端肽(ICTP)含量。结果: 卵巢切除大鼠福善美和(或)运动干预治疗12周后,OVX组与sham组相比,BMD显著降低(P<0.05),血清PICP和ICTP明显增高(P<0.05),左侧股神经ML未见明显改变。福善美和运动均可显著提高骨质疏松大鼠BMD,降低ICTP;福善美可显著降低骨质疏松大鼠ICTP,而运动对ICTP无明显影响。运动可明显缩短模型组左侧ML(P<0.05),福善美对ML无显著改善作用。运动与福善美联合对BMD、PICP、ICTP及ML的改善作用较两者单用效果显著(P<0.05);福善美与运动两治疗组间未见明显差异。各组大鼠左侧股神经MCV和CMAP未见明显差异。2×2析因设计的方差分析显示,福善美与运动2种处理方式之间不存在交互作用(P>0.05)。结论: 福善美和运动可能通过抑制破骨细胞的骨吸收而抑制大鼠卵巢切除对骨密度的影响。     

17β-雌二醇对去势大鼠子宫内膜厚度的影响

目的:探索外源性使用雌激素对去势后大鼠子宫内膜厚度的影响。方法:96只雌性成年SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)治疗组,模型组和E2治疗组行去势手术,并且E2组给予不同剂量、不同时间的E2背部皮下注射后处死,假手术组于动情前期处死,取子宫标本,行HE染色,在200倍显微镜下随机选取六个位置拍照,测量子宫腔上皮厚度。结果:去势E2治疗组大鼠子宫的发育与替代雌激素的用量呈明显的量效关系及时效关系。E2浓度在6μg.只-1,连续使用2 d时,去势大鼠子宫内膜形态学检查与假手术组组基本相似,子宫腔上皮厚度比假手术组大鼠增加8%,可认为是合理的雌激素替代剂量与时间。