热疗对血管内皮细胞增殖和迁移的影响及其在肿瘤热疗中的意义

目的　研究热疗对血管内皮细胞(ECV- 30 4 )增殖和迁移的影响并探讨其对肿瘤热疗的效应。方法　(1)体内实验:Hep A肿瘤细胞接种于NIH小鼠足垫制备荷瘤动物模型;荷瘤鼠肿瘤局部4 3℃水浴加热2 5分钟,于治疗后7、14天观察小鼠肿瘤体积、肿瘤转移情况。(2 )体外实验:培养Hep A肿瘤细胞和内皮细胞用4 3℃水浴处理2 5分钟。于不同时间点,采用MTT法测定Hep A肿瘤细胞和内皮细胞增殖水平;应用体外划痕法检测内皮细胞迁移能力;用光镜和电镜观察内皮细胞形态变化。结果　体内实验:热疗后7、14天,热疗组肿瘤体积明显小于对照组(P<0 .0 1) ;热疗组肿瘤淋巴和腹腔转移率亦明显低于对照组(P<0 .0 5 )。体外实验:与对照组相比,血管内皮细胞和培养Hep A肿瘤细胞热疗后增殖均受到明显抑制(P<0 .0 1) ,但内皮细胞的受抑制程度强于肿瘤细胞;热疗组内皮细胞迁移能力明显低于对照组(P<0 .0 1) ;形态学观察可见热疗组血管内皮细胞密度降低,细胞表面微绒毛减少或消失,并可见染色质浓缩边聚、细胞出芽和凋亡小体形成等变化。结论　热疗对血管内皮细胞增殖和迁移的抑制可能是其发挥抗肿瘤作用的重要机制之一。     

热化疗对荷瘤鼠NO水平影响的研究

目的:观察热化疗对荷瘤鼠NO水平的影响。方法:80只荷瘤Balb/c小白鼠随机分为不治疗组(NT),化疗组(P),热疗组(H)和热化疗组(HP),每组20只(雌雄各半)。处理后观察其抑瘤情况及肿瘤组织形态学变化,并采用硝酸还原酶法检测瘤组织内NO的浓度。结果:热化疗组与热疗组,热化疗组与化疗组抑瘤结果有显著性差异(P<0.01)。除热疗组和化疗组之间差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组之间NO含量均有显著性差异(P<0.01)。结论:热化疗具有良好的抗肿瘤效应,可以显著提高荷瘤宿主NO水平,荷瘤宿主血清NO具有双重作用,低浓度时可促进肿瘤生长,高浓度时参与抗肿瘤免疫、抑制和杀伤肿瘤细胞。     

Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤的抑制作用.方法:将Ad5-CCL20转染CT-26细胞,采用ELSA法和趋化实验分别检测CT-26细胞中CCL20的表达及其对DC的趋化作用.Western blot-ting检测热激结肠癌CT-26细胞中HSP70、GP96的表达.用热激后细胞蛋白(Heat组)对DC进行诱导,并设对照组(Control组)和阴性对照组(Unheat组),流式细胞术检测DC的表型.建立CT-26细胞移植瘤模型,设Ad5-CCL20/Heat、Heat、Ad5-CCIL20、Ad5-GFP和Control组,观察各组荷瘤小鼠肿瘤生长和生存时间;采用ELISAPOT法和LDH法分别检测脾组织T淋巴细胞分泌IFN-y的能力和对CT-26细胞的CTL杀伤活性,免疫组化法检测肿瘤组织DC浸润情况.结果:Ad5-CCL20转染CT-26细胞后可高表达CCL20,且对iDC、mDC都具有趋化活性,对iDC更为明显(P＜0.05).CT-26细胞热激后可高表达诱导型HSPT0和GP96.与Control、Unheat组相比,Heat组细胞蛋白诱导后DC的CD80、CD86、CCR6和MHC-Ⅱ的表达率明显升高(均P＜0.01).与Control、Ad5-GFP、Ad5-CCL20组和Heat组相比,联合治疗组荷瘤小鼠的肿瘤抑制最为明显(均P＜0.01),生存时间明显延长(均P ＜0.05).联合治疗后的荷瘤小鼠脾组织T淋巴细胞的CTL活性要明显高于另外四组(均P＜0.05),其瘤组织中CD11c+ DC的阳性率也明显增高(均P＜0.05).结论:重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗可召募并促进DC成熟和抗原提呈,明显抑制肿瘤生长,并延长荷瘤小鼠的生存期,提示其对结肠癌有潜在的治疗作用.     

三氧化二砷联合热疗抑制大鼠肝癌的体内实验研究

目的:研究热疗联合三氧化二砷(As2O3)对大鼠肝癌多药耐药性的影响,探讨其作为肝癌辅助治疗的可行性。方法:采用含有walker-256肿瘤细胞的大鼠腹水稀释后接种于大鼠腹股沟皮下,7天后取下瘤块并切成(1.0-2.0)mm3大小的小块,然后将小瘤块接种于50只大鼠的左肝叶上,10天后将大鼠分成4组,分别为对照组,热疗组,As2O3组及(热疗+As2O3)组,同时给予治疗,治疗结束后第2天处死大鼠。测量瘤重分析As2O3联合热疗的体内抑瘤作用;用H-E染色法观察肿瘤细胞病理象变化;免疫组化S-P法检测肿瘤组织内Pgp(P-glycoprotein,P-糖蛋白)的表达情况。结果:热疗组,As2O3组及(热疗+As2O3)组的平均瘤重均低于对照组(P<0.05);同时(热疗+As2O3)组与As2O3组及热疗组相比较,前者抑瘤率高于后两者(P<0.05)。在实验过程中,对照组荷瘤鼠活动减少,毛发稀疏,进食水少,而热疗组大鼠活动稍差,其余两组基本正常,饮食状况无明显改变,体重未见明显减轻。各组细胞均有坏死,大部分为凝固性坏死。对照组肿瘤细胞生长比较旺盛,坏死面积较小。其他三组坏死都比较彻底,并且呈现大片状坏死,尤以(热疗+As2O3)组明显,镜下呈一片荒凉景象,肿瘤细胞溶解,破碎,多见细胞核碎裂及核固缩表象。免疫组化法观察到多药耐药细胞呈片状分布,Pgp主要分布于耐药细胞的胞膜面,少数分布于胞浆当中;Pgp显色指数在对照组与各处理组之间差异显著(P<0.05),且(热疗+As2O3)组较其他处理组差异显著(P<0.05)。结论:As2O3和热疗在体内对大鼠肝癌均有明显的抑制作用,两者联合应用有协同作用,其作用机制可能与抑制多药耐药基因(MDR1)的表达有关。     

香菇多糖与环磷酰胺联合治疗前列腺癌荷瘤小鼠的实验研究

目的 前列腺癌具有较高的死亡率,探求其有效治疗方式已成为学者的研究重点.本研究探讨香菇多糖联合环磷酰胺治疗前列腺癌荷瘤小鼠效果及联合治疗机制,为该联合治疗方案临床应用提供依据.方法 利用RM-1细胞建立前列腺癌皮下移植小鼠模型,将60只Balb/c荷瘤小鼠随机平分为4组,即对照组(Control组,生理盐水治疗)、LNT组(香菇多糖治疗)、CTX组(环磷酰胺治疗)和LNT+CTX组(香菇多糖和环磷酰胺治疗);观察治疗后荷瘤小鼠肿瘤体积比与平均存活时间,苏木精-伊红(HE)染色观察治疗后肿瘤组织病理学改变,检测荷瘤小鼠脾质量、脾指数和淋巴细胞水平确定荷瘤小鼠免疫功能情况.结果 联合治疗后LNT+CTX组荷瘤小鼠肿瘤体积比达到3.51±0.80,显著低于Control组(t=3.174)、LNT组(t=2.730)和CTX组(t=3.086),P<0.05;且治疗16 d后,LNT+CTX组肿瘤体积比出现下降趋势.HE染色结果进一步表明,LNT组、CTX组和LNT+CTX组肿瘤组织出现明显病理学改变,且LNT+CTX组病理学改变最明显.LNT+CTX组荷瘤小鼠平均存活时间达到60 d,显著长于Control组(χ2=7.747)、LNT组(χ2=3.653)和CTX组(χ2=2.784),差异有统计学意义,P<0.05.香菇多糖和环磷酰胺联合治疗后,LNT+CTX组荷瘤小鼠脾质量〔(0.28±0.08)g〕、脾指数〔(16.96±2.48)mg/g〕及淋巴细胞〔CD3+为40.67±3.13,CD4+为25.76±1.90,CD4+/CD8+为1.62±0.24〕显著低于LNT组,但高于CTX组和Control组,均P<0.05.治疗后各组荷瘤小鼠CD8+水平差异无统计学意义,P>0.05.结论 香菇多糖与环磷酰胺联合作用共同减缓了肿瘤生长,提高了荷瘤小鼠存活时间,其可能机制是香菇多糖提高了环磷酰胺治疗小鼠的免疫功能,促进了对肿瘤杀伤.     

局部热化疗对鼠胶质瘤肿瘤细胞凋亡及其耐药的研究

 目的　探讨局部热化疗对大鼠胶质瘤凋亡、耐药和肿瘤微血管的作用。方法　将C6 细胞接种于大鼠背部皮下 ,肿瘤生长至 1 .5～ 2cm直径时 ,分组进行局部热疗、化疗和热化疗。观察皮下肿瘤生长情况 ;用S P免疫组化法检测bax、bcl 2和 p gp蛋白表达 ;用HE染色法、电镜、TUNWL法观察凋亡 ;电镜观察肿瘤微血管的变化。结果　热疗、化疗、热化疗组较对照组瘤体缩小 ,瘤重减轻 (P <0 .0 0 1 ) ;bax蛋白表达增强 (P <0 .0 0 1 ) ,且热化疗组较单纯热疗和化疗组均增强 (P <0 .0 0 1 ) ;bcl 2蛋白表达改变不明显 (P >0 .0 5 ) ;化疗组 p gp表达增强 (P <0 .0 0 1 ) ,热疗和热化疗组 p gp表达减弱 (P <0 .0 0 1 ) ;细胞凋亡指数增大 (P<0 .0 0 1 ) ;热化疗组出现核染色质凝聚 ,凋亡小体 ;肿瘤微血管外径变小 ,管壁变厚 ,血管减少 ,有的血管甚至只能发现完整的基膜而缺乏内皮细胞。结论　 (1 )热疗化疗、热化疗能抑制肿瘤增殖 ,促进bax蛋白表达 ,使bcl 2 /bax减小 ,诱导细胞凋亡 ,且热...     

红细胞生成素对小鼠化疗所致贫血的预防作用

 目的　探讨红细胞生成素对小鼠化疗所致贫血的预防作用。方法　小鼠左侧腹股沟皮下接种S180 肉瘤细胞 ,接种肿瘤前 12天 ,给以rHuEPO皮下注射 ;接种前 4天 ,小鼠尾静脉注射卡铂诱导贫血 ;接种肿瘤后 5天 ,小鼠腹腔注射环磷酰胺化疗 ;动态观察小鼠血红蛋白变化。结果　环磷酰胺化疗时 ,EPO +卡铂组Hb为 16 2 .6 g/L ,卡铂组134.9g/L(P <0 .0 5 ) ;CTX治疗后 5天 ,EPO +卡铂组Hb为 137.5g/L ,卡铂组12 6 .7g/L(P <0 .0 5 )。结论　小鼠化疗前应用rHuEPO可以有效预防化疗所致贫血的发生或减轻化疗所致贫血的程度     

热疗合并羟基喜树碱对荷Lewis肺癌小鼠的作用

目的 :探讨热疗、羟基喜树碱 (HCPT)及热疗合并羟基喜树碱对荷Lewis肺癌C57BL小鼠的抗肿瘤作用。方法 :采用肿瘤生长延迟 (TGD)分析热疗、化疗对荷Lewis肺癌的C57BL小鼠的疗效。结果 :① 4 1℃、4 2℃、4 3℃热疗的TGD分别为 1 0 7d、1 4 0d、2 5 2d ,只有 4 3℃热疗组明显优于对照组 (P<0 0 0 2 )。②HCPT化疗剂量分别为 1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg的各组TGD分别为 1 87d、4 0 0d、4 5 7d ,均明显优于对照组 (P <0 0 5、P <0 0 0 1、P <0 0 0 1)。③ 4 1℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 2℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 3℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组的TGD分别为 4 86d、5 5 7d、7 14d ,4 2℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 3℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组明显优于单独HCPT (2mg/kg)化疗组 (P <0 0 5、P <0 0 0 2 ) ,4 3℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组明显优于 4 1℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 2℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组 (P <0 0 2、P <0 0 5 )。结论 :①HCPT对Lewis肺癌的抑制作用随剂量的增加而增高。②热疗对Lewis肺癌的抑制作用随温度的增加而增高。③热疗增加HCPT对Lewis肺癌的抑制作用 ,其作用随温度的增加而增高。热疗与HCPT之间并无温度阈值     

热疗与化疗联合作用Hep-A-22荷瘤小鼠的实验观察

目的观察NRL-001型内生场热疗系统与化疗联合应用对Hep-A-22荷瘤小鼠的治疗效果.方法用NRL-001热疗系统对实验组动物瘤体加热,肿瘤内部温度控制在43℃～44℃之间、并计算出加热前,处死时肿瘤体积.称肿瘤重量,计算出抑瘤率.结果热疗两次后肿瘤生长受到明显抑制,热疗组抑瘤率65.6%,热疗加化疗组抑瘤率89.1%,热疗组和热疗加化疗组瘤重与对照组瘤重比较均差异显著(P＜0.01).结论NRL-001型热疗系统可抑制肿瘤生长,化疗与热疗联合应用产生最佳的治疗效果.     

龙力胶囊对 S180 荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用

目的:观察龙力胶囊(Longli capsule,LLC)在荷瘤小鼠化疗中的增效减毒作用.方法:以S180荷瘤小鼠为模型.实体瘤和腹水型小鼠各分为荷瘤模型组、LLC组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组、5-FU+LLC组,另设正常对照组,连续给药10d.观察各组小鼠抑瘤率、生命延长率和不良反应;检测各组小鼠体重、肿瘤质量、外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、脾指数和胸腺指数;观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,分析LCC对5-FU的增效减不良反应.结果:5-FU+LLC组小鼠体重增加明显高于5-FU单药组.与5-FU组比较,5-FU+LLC组S180荷瘤小鼠生存时间明显延长(P<0.05).5-FU,LCC和5-FU+LLC均可抑制S180荷瘤小鼠移植瘤的生长,其抑瘤率分别为40.34%,36.25%和47.46%.LCC可明显增强5-FU抑制肿瘤生长的作用(P<0.05).与5-FU组比较,LCC组及LCC+5-FU组外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、脾指数、胸腺指数、以及腹腔巨噬细胞吞噬能力均明显增高.结论:LLC对5-FU具有一定的增效减不良反应.